该研究以5-氨基酮戊酸己酯(1)为模型药物,采用超声法制备用于光动力治疗的立方液晶(1-Cubs)纳米制剂.以粒径、PDI为评价指标,优化了超声功率、超声时间、单油酸甘油酯(GMO)与泊洛沙姆407(F127)的质量比、载体(GMO与F127总和)与药物的质量比、药物浓度.考察了优化所得的1-Cubs在635 nm激光辐照下对人表皮癌细胞(A431细胞)存活率和ROS含量的影响.然后,以SD大鼠为模型,累积渗透量和皮肤滞留量为评价指标,考察制品的皮肤渗透行为.结果表明,在超声功率400 W、超声时间15 min、GMO与F127质量比4∶1、载体与药物质量比5∶1、药物浓度1％时,所得的1-Cubs能在细胞水平上显著提高1的PDT疗效和ROS产量.基于HPMC制得的1-Cubs(粒径小于200 nm)纳米凝胶对SD大鼠也具有较优的皮肤渗透性,有望成为一种优良的光动力治疗外用制剂.

目的 研究中麻黄Ephedra intermedia的化学成分.方法 采用Toyopreal HW-40C、Sephadex LH-20、硅胶和半制备高效液相等多种色谱学技术分离得到单体化合物,并根据其理化性质和波谱学数据鉴定其结构,并通过建立C48/80诱导RBL-2H3细胞脱颗粒体外模型,对中麻黄中所得单体化合物进行体外抗哮喘活性筛选.结果 从中麻黄50％丙酮提取物中分离得到21个化合物,分别鉴定为3-羟基-5-(4'-羟基苯基)戊酸乙酯(1)、3-羟基-5-(4'-羟基苯基)戊酸甲酯(2)、儿茶酚(3)、苯甲酸(4)、5-(4-羟基苯基)-2-戊烯酸(5)、(+)-rhododendrol(6)、frambinone(7)、香草乙酮(8)、4-羟基-3-甲氧基苯甲酸甲酯(9)、3,4-二羟基苯乙醇(10)、姜酮(11)、原儿茶酸(12)、3,5-二羟基-4-甲氧基苯甲酸(13)、丁香酸(14)、3-hydroxy-4-methoxy-benzene carboxylic acid(15)、香草酸(16)、丁香酸甲酯(17)、4-羟基-3-甲氧基苯丙酮(18)、去甲丁香色原酮(19)、5-(3,4-dihydroxyphenyl)-γ-valerolactone(20)、2-guaiacylpropane-1,3-diol(21).对所得单体化合物进行体外抗哮喘活性筛选,结果显示,与模型组相比,在给药10μmol/L条件下,化合物5、18、19能够显著抑制β-氨基己糖苷酶的释放(P＜0.05、0.01),化合物4、6、8、11、20、21能够轻微抑制β-氨基己糖苷酶的释放.结论 化合物1和2为2个首次确定绝对构型的新天然产物,化合物3、5～15、17～21首次从该植物中分离得到,其体外抗哮喘活性筛选结果表明,在给药10 μmol/L条件下,化合物5、18、19能够显著改善RBL-2H3脱颗粒现象,化合物4、6、8、11、20、21能够轻微改善RBL-2H3脱颗粒现象.

目的 基于血清代谢组学研究分析冠心病稳定型心绞痛脾虚痰浊证的差异代谢物和相关代谢通路.方法 招募60例冠心病稳定型心绞痛脾虚痰浊证患者和60例同期健康志愿者,采用超高效液相色谱-质谱联用测定两组受试者的血清代谢组学,通过原始谱图和原始数据进行多元统计分析鉴定差异代谢物,进行KEGG代谢通路富集分析.结果 冠心病稳定型心绞痛脾虚痰浊组总计60例患者参与研究,对照组总计60例健康志愿者参与研究,两组受试者的一般资料、生化指标均无统计学差异(P>0.05);共鉴定得到18个差异代谢物,其中苯乙醛、正磷酸盐、鸟嘌呤核苷、磷酸二乙酯、2-脱氧-D-葡萄糖酸盐、鸟嘌呤、5-(2-羟乙基)-4-甲基噻唑表达下调,牛黄胆酸、2-丙基戊二酸、8-氨基-7-氧代壬酸、L-酪氨酸、S-磺基-L-半胱氨酸、环己甲酸、紫质胆素原、(R)-3-羟基-2-丁酮、辛酰基葡糖苷酸、褪黑素、A-茄碱表达上调;涉及苯丙氨酸代谢、硫胺素代谢以及嘌呤代谢等代谢通路.结论 差异代谢物在一定程度上从微观层面揭示了冠心病稳定型心绞痛脾虚痰浊证的代谢本质以及为冠心病稳定型心绞痛脾虚痰浊证患者临床早期预警提供线索.

目的 筛选睡眠障碍患者血液中的代谢标志物,并分析其异常代谢通路.方法 选取2021年1-12月上海健康医学院附属嘉定区中心医院睡眠障碍患者30例(睡眠障碍组)、健康体检者30名(正常对照组).收集所有研究对象的一般资料.采用超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)检测所有研究对象的血浆代谢物.依据VIP值、差异倍数(FC)和P值筛选出睡眠障碍组与正常对照组之间有显著意义的差异代谢物.对差异代谢物进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析.结果 共检出1 656个代谢物,筛选出睡眠障碍组与正常对照组之间有显著意义的差异代谢物181个.正离子模式筛选出115个(表达上调61个、表达下调54个),VIP值居前10位的代谢物分别为乙二胺四乙酸、肉碱、N-(1-氨基-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)-1-戊基-1h-吲哚-3-甲酰胺、[1-(环己基甲基)-1h-吲哚-3-羰基]-l-缬氨酸甲酯、二丁卡因、甘油磷酸胆碱、次黄嘌呤、棕榈酰血清素、去铁胺d2、亚麻酰肉碱.负离子模式筛选出66个(表达上调38个、表达下调28个),VIP值居前10位的代谢物分别为柠檬酸盐、牛磺酸、鼠李素、尿酸、丙酮酸盐、尿囊素、3',5'-环肌苷-磷酸、D-乳酸、(+)-6-氨基青霉烷酸、油酸.KEGG通路富集分析结果显示,差异代谢物涉及的通路为癌症的中枢碳代谢、腺苷三磷酸结合盒转运蛋白和蛋白质消化吸收等.结论 筛选出睡眠障碍患者具有代表性的代谢物和代谢通路,可为睡眠障碍的诊断和治疗提供潜在的靶点.

目的:通过对不同年龄段体外受精(IVF)患者的卵泡液进行代谢组学研究,鉴定出代谢差异物,探究其与卵母细胞的关系,从卵泡液代谢组层面阐述年龄影响生殖功能的机制.方法:对191例IVF患者卵泡液进行代谢组学分析,21～27岁47例,28～34岁74例,35～41岁41例,42～48岁29例.采用超高液相色谱-高分辨质谱联用技术将卵泡液样品分别在正离子、负离子模式下进行采集,通过主成分分析法(PCA)、偏最小二乘法-判别分析法(PLS-DA)得到四组间差异性物质质荷比.根据得到的质量数、同位素丰度比得到与其相匹配的分子式,鉴定出差异物,把这些差异物通过KEGG聚类分析,指向差异通路,鉴定这些差异物质涉及的代谢通路和所指向的化合物.结果:随着年龄增加,卵母细胞质量及数量呈下降趋势,期间伴随卵泡液代谢物变化,差异物主要涉及氨基酸、脂质、激素、维生素等.下调物15种:6-氧代己酸酯,L-苯丙氨酸,脯氨酸,十六烷酸/棕榈酸,亚油酸,花生四烯酸,油酸,硫酸脱氢表雄酮,溶血性磷脂酰胆碱(16:1),溶血性磷脂酰胆碱(20:4),溶血性磷脂酰胆碱(20:3),25-二羟维生素D3,5-去氢表甾醇,27-羟基胆固醇,5-胆甾烷-3α,7α,12α,23,25-戊醇;上调物3种:溶血性磷脂酰胆碱(18:3),溶血性磷脂酰胆碱(18:1),13,14-二氢视黄醇.结论:女性生殖能力随着年龄增加而减退,期间伴随卵泡液代谢物变化,从卵泡液代谢组学层面揭示了年龄影响生殖功能的机制.

本研究改进了洛匹那韦(1)的合成工艺.以[(1S,3S,4S)-4-氨基-3-羟基-5-苯基-1-(苯甲基)戊基]氨基甲酸叔丁酯(2)为起始原料,在苯并三唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(HBTU)和三乙胺作用下,与2,6-二甲基苯氧乙酸(3)反应制得(2S,3S,5S)-2-(2,6-二甲基苯氧乙酰基)氨基-3-羟基-5-(叔丁氧羰基)氨基-1,6-二苯基己烷(4),再经三氟乙酸脱除Boc保护基制得N-[(1S,2S,4S)-4-氨基-2-羟基-5-苯基-1-(苯甲基)戊基]-2-(2,6-二甲基苯氧基)乙酰胺(5),最后与(2S)-(1-四氢嘧啶-2-酮)-3-甲基丁酸(6)缩合、精制得1.优化后的工艺操作简便,产品质量稳定可控,总收率63％(以2计).同时还制备了价格昂贵且国内无商业供应的原料3和6,可为低成本制备1提供参考.

目的:用BALB/c小鼠建立基于掺入溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)和酶联免疫吸附测定(ELISA)的小鼠局部淋巴结试验(LLNA)改良方法(LLNA:BrdU-ELISA),并对该方法进行评价.方法:试验设溶剂对照组(丙酮/橄榄油、丙酮、二甲基亚砜或蒸馏水),阳性对照组(25％己基肉桂醛)和受试物组(选择22种化学物和5种化妆品,配成1～3个不同浓度),每组4只小鼠.每天上午9:00在小鼠双耳背部分别涂抹受试物25μL,连续染毒3 d,第4天不作处理,第5天腹腔注射BrdU标记液0.5 mL.第6天称量耳廓质量,分离颌下淋巴结称取质量并制成单细胞悬液,用ELISA试剂盒测定淋巴细胞增殖.结果:50％己基肉桂醛、5％二氯化钴、10％乳酸、25％乳酸、50％乳酸和2号染发剂引起耳廓质量显著增加(P<0.05或P<0.01),为刺激阳性,其他化学物和化妆品为刺激阴性;15种化学物(2,4-二硝基氯苯、丁子香酚、异丁子香酚、3-氨基苯酚、反式肉桂醛、己基肉桂醛、香叶醇、对苯二酚、水杨酸己酯、甲醛、戊二醛、六水硫酸镍、二氯化钴、重铬酸钾、乳酸)和2号染发剂为致敏阳性(SI>1.6),其他化学物或化妆品为致敏阴性.该方法阳性预测率为93.3％,阴性预测率为100％,假阳性率为14.3％,假阴性率为0,灵敏度为100％,特异性为85.7％、准确度为95.2％.结论:LLNA:BrdU-ELISA方法用BALB/c小鼠可较好地评价化学物/化妆品的刺激性和致敏性,可在化妆品安全性评价中发挥重要作用.