目的 观察何首乌提取物对注意缺陷多动障碍(attention deficit hyperactivity disorder,ADHD)模型大鼠的影响并探讨其作用机制.方法 选择自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat,SHR)为 ADHD 模型,随机分为模型组、托莫西汀组(4.5 mg/kg),何首乌低(0.54 g/kg)、中(1.08 g/kg)、高(2.16 g/kg)剂量组,另设Wistar京都大鼠为正常组,每组10 只.各组大鼠每日给予相应药物灌胃,4 周后观察各组大鼠行为学,ELISA法检测前额叶皮质中二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)含量,Western blot和RT-qPCR法检测前额叶皮质和海马组织中脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)/酪氨酸蛋白激酶受体B(tyrosine kinase receptor B,TrkB)及其下游信号通路中生长因子受体结合蛋白 2(growth factor receptor-bound protein 2,Grb2)、肌肉RAS癌基因(muscle RAS oncogene,Ras)3 的表达水平.结果 托莫西汀和何首乌均能有效控制SHR大鼠多动、冲动行为.与正常组比较,模型组大鼠前额叶皮质中DHA含量降低(P＜0.05),BDNF、TrkB、Grb2、Ras3 蛋白和mRNA表达明显降低(P＜0.01),海马中BDNF、TrkB、Grb2、Ras3 蛋白和BDNF、Ras3 mRNA表达明显下调(P＜0.05).给药 4 周后,在前额叶皮质中,何首乌低、中、高剂量组大鼠DHA含量均显著升高(P＜0.01),BDNF、TrkB、Grb2、Ras3 的mRNA表达水平均显著上升(P＜0.01),何首乌低、中剂量组大鼠BDNF、TrkB、Grb2 蛋白,高剂量组大鼠BDNF、Grb2、Ras3 蛋白表达水平均显著上升(P＜0.05);在海马中,何首乌高剂量组大鼠BDNF、TrkB、Grb2、Ras3 蛋白和mRNA表达均明显增加(P＜0.05).结论 何首乌提取物能够明显改善SHR多动、冲动行为,其机制可能与调节BDNF/TrkB及其下游信号通路有关.

目的:利用一种改进的三箱社交装置评价动物的社交偏好程度,并探索该方法的可行性.方法:采用注意力缺陷多动障碍(ADHD)大鼠作为社交障碍模型动物,以同源大鼠(WKY)大鼠和Wistar大鼠作为对照组,模型组采用治疗ADHD的临床常用中成药小儿黄龙颗粒(1.88 g/kg、3.75 g/kg)灌胃给药16 d.利用改进的三箱社交箱,以待测鼠在陌生鼠侧密切交流区的时间、频次、路程及相关比例作为行为学指标,检测该方法对社交行为评价的可行性.结果:与Wistar大鼠组比较,模型组大鼠与WKY组大鼠在密切交流区域及有陌生鼠侧区域的时间显著减少(P＜0.01),其他指标如频次、路程及比例也均有不同程度减少,小儿黄龙颗粒两剂量均能增加模型大鼠上述各指标数值.结论:该方法能准确捕捉动物的社交行为特征,实现对动物社交偏好程度的全面、客观评价.

目的 研究小儿黄龙颗粒对注意力缺陷多动障碍(ADHD)模型动物的干预作用及作用机制.方法 采用幼龄自发性高血压大鼠(SHR)作为ADHD模型大鼠,将 32 只健康SHR大鼠按体重随机分为 4 组,即SHR大鼠组,小儿黄龙颗粒 1.88、3.75 g·kg-1 组,哌甲酯组,另设WKY大鼠组、Wistar大鼠组,每组8只,连续灌胃给药21 d.以自主活动度、焦虑程度、社交偏好程度、易激惹程度、空间记忆能力、注意定势转移能力作为ADHD行为学指标;以超高效液相色谱-质谱(UPLC-MS/MS)方法检测大鼠大脑内前额叶中多巴胺(DA)、高香草酸(HVA)的含量;以PCR方法检测大鼠前额叶内酪氨酸羟化酶(TH)、多巴胺转运体(DAT)mRNA的表达量.结果 3.75 g·kg-1 小儿黄龙颗粒可改善ADHD模型大鼠的行为学异常,显著提高大鼠前额叶DA含量(P＜0.01)、降低HVA含量(P＜0.05),明显促进前额叶TH mRNA、DAT mRNA的表达(P＜0.01).结论 小儿黄龙颗粒能改善ADHD模型大鼠的行为学障碍,其作用机制与改善多巴胺能神经功能有关.

[目的]研究益智宁神颗粒对幼龄自发性高血压(SHR)大鼠前额叶-纹状体多巴胺含量、胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)mRNA及其蛋白表达的影响.[方法]以32只幼年SHR大鼠为研究对象,采用随机区组法分为模型对照组、益智宁神组、盐酸哌甲酯组、托莫西汀组,另设8只京都(WKY)大鼠为正常对照组.按各组设计剂量连续给药4周后,取前额叶、纹状体,采用高效液相法检测多巴胺(DA)含量、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测GDNF mRNA表达、蛋白免疫印迹(Western blot)法检测GDNF蛋白表达.[结果]1)SHR各组大鼠前额叶、纹状体DA的含量均有低于WKY组的趋势,其中,益智宁神组大鼠前额叶DA含量明显高于模型对照组(P<0.05);益智宁神组大鼠纹状体DA含量低于正常对照组、盐酸托莫西汀组(P<0.05).2)SHR各组前额叶、纹状体GDNF mRNA表达依次为盐酸托莫西汀组>盐酸哌甲酯组>益智宁神组>模型对照组(P<0.05).3)SHR大鼠各组间前额叶、纹状体GDNF蛋白表达均高于WKY组;其中,益智宁神组前额叶GDNF蛋白表达与其余SHR大鼠各组无统计学差异(P>0.05),其纹状体GDNF蛋白表达低于盐酸哌甲酯组(P<0.05).[结论]益智宁神颗粒能够提高SHR特定脑区DA含量、GDNF mRNA及其蛋白表达,对促进幼龄SHR大鼠特定脑区DA能神经网络成熟度具有一定的作用.

目的 探讨神经纤维素(neurofibromin 1,Nf1)对脑源性神经营养因子(BDNF)表达的调节在多动症(ADHD)发病机制中的作用.方法 选用SHR大鼠作为多动症动物模型,WKY大鼠作为对照.应用RT-PCR、蛋白印记法检测Nf1和BDNF的mRNA、蛋白质水平;将Nf1过表达质粒共转染至PC12H及7919细胞,检测Nf1过表达后BDNF水平以探索Nf1与BDNF作用关系;用Image-pro Plus软件进行定量分析.结果 与WKY大鼠相较,SHR动物模型脑前额叶皮质中Nf1、BDNF水平均偏低(P=0.000);过表达Nf1可使BDNF水平上调(PC12H细胞P=0.000,7919细胞P＜0.05).结论 SHR前额叶皮质中Nf1、BD-NF水平偏低,Nf1对BDNF有正性调控作用.前额叶皮质中Nf1对BDNF的调控作用可能参与多动症的发病机制.

目的 研究黄芩素对注意缺陷多动障碍(ADHD)模型SHR大鼠自发性活动、冲动、学习记忆等行为学影响及对前额叶皮质腺苷酸环化酶(AC)-环磷酸腺苷(cAMP)-蛋白激酶A(PKA)信号通路的调控作用.方法 将50只4周龄SHR大鼠随机分为模型组、哌醋甲酯组(2 mg/kg)、黄芩素低、中、高剂量组(100、200、400 mg/kg)另设WKY幼鼠为正常对照组,每组10只,在大鼠夜周期连续灌胃4周.采用开场实验、高架十字迷宫、新物体识别实验评估大鼠自发性行为、冲动行为及学习记忆功能,酶联免疫吸附法(ELISA)测定前额叶皮质中AC、cAMP、PKA含量.结果 黄芩素高、中剂量组可以减少SHR大鼠在开场实验中的总运动距离(P<0.05),而黄芩素3个剂量组均能减少大鼠直立次数(P<0.05).黄芩素中剂量组可明显降低大鼠进入高架十字迷宫开臂次数(P<0.05),而黄芩素3个剂量组均可不同程度地减少大鼠在开臂停留时间(P<0.05);黄芩素中剂量组可明显增高SHR大鼠在新物体识别实验测试期对新物体的偏好指数(P<0.05).黄芩素3个剂量组均可明显增加SHR大鼠前额叶皮质中AC及cAMP含量(P<0.05),而黄芩素中、高剂量组又可显著增加大鼠前额叶皮质中PKA含量(P<0.05).结论 黄芩素可以减少ADHD模型大鼠的自发性活动及冲动行为,改善其学习记忆能力,其机制可能与上调前额叶皮质中AC、cAMP、PKA的表达有关.

目的:研究安神定志灵对TH、VMAT2的影响,从多巴胺合成、转运途径探讨安神定志灵治疗ADHD的作用机制.方法:依据随机数字将SHR大鼠分为模型组,西药组,安神定志灵低、中、高剂量组,每组8只,另设WKY大鼠8只设为正常组,分别灌胃4周.Percoll密度梯度离心法制备脑突触体,运用Western blot法检测TH、VMAT2的表达;运用PCR技术检测TH、VMAT2 mRNA表达水平,运用免疫组织化学技术检测TH、VMAT2阳性细胞表达量.结果:与正常组相比,模型组大鼠突触体内TH、VMAT2表达量显著降低(P＜0.01);经灌胃给药后,与模型组比较,西药组及安神定志灵中剂量组突触体内TH、VMAT2蛋白表达量、TH、VMAT2 mRNA表达量及阳性细胞数均显著上调(P＜0.01),安神定志灵低、高剂量组疗效不稳定.结论:安神定志灵能够显著改善SHR大鼠脑内TH、VMAT2的表达,影响脑内多巴胺的合成和转运,达到提高脑内多巴胺含量,控制ADHD临床症状的目的.

目的:研究黄芩苷对突触相关蛋白25(SNAP25)、突触结合蛋白1α(Synataxin 1α)及囊泡转运蛋白Ⅱ型(VMAT2)的调控作用及对脑内多巴胺含量的影响,从多巴胺释放途径探讨黄芩苷治疗注意缺陷多动障碍(ADHD)的作用机制.方法:依据随机数字将幼年自发性高血压大鼠(SHR)分为模型组,盐酸哌甲酯组,黄芩苷低、中、高剂量组,每组8只,另设WKY大鼠8只为正常组,分别灌胃4周,每日记录大鼠体质量及进食量的变化.Percoll密度梯度离心法制备脑突触体,运用Western blot法检测SNAP25、Synataxin 1α、VMAT2蛋白的表达;运用PCR技术检测SNAP25、VMAT2、Synataxin 1α mRNA表达水平;高效液相色谱法(HPLC)检测大鼠前额叶、纹状体多巴胺的含量.结果:黄芩苷不影响大鼠的体质量及进食量;盐酸哌甲酯及黄芩苷高剂量均能够显著上调SNAP25、Synataxin 1α及VMAT2蛋白的表达(P＜0.05,P＜0.01).黄芩苷中、高剂量及盐酸哌甲酯能够显著提高SHR大鼠突触体内SNAP25、Synataxin 1α及VMAT2 mRNA的表达量(P＜0.05,P＜0.01).前额叶多巴胺含量检测结果显示,与正常组比较,模型组DA含量升高(P＜0.05);与模型组比较,盐酸哌甲酯组前额叶多巴胺含量显著增高(P＜0.01),黄芩苷各剂量组无显著差异.纹状体多巴胺含量检测结果显示,与正常组比较,模型组DA含量升高(P＜0.05);与模型组比较,盐酸哌甲酯组及黄芩苷高、中剂量组含量显著增高(P＜0.01,P＜0.05).结论:黄芩苷不影响大鼠的正常生长,且黄芩苷能够上调SNAP25、Synataxin 1α 及VMAT2蛋白及mRNA的表达,影响纹状体多巴胺的含量,黄芩苷的这一作用可能存在剂量相关性.

目的 观察哌甲酯缓释片对注意缺陷多动障碍(ADHD)模型大鼠行为的干预作用并分析其作用机制.方法 采用自发性高血压大鼠(SHR)作为ADHD模型大鼠,采用哌甲酯缓释片(6.75、3.375 mg·kg-1)灌胃给药17 d.以敞箱实验、3-箱社交趋避测试作为行为学指标,以PCR和Western blot方法检测大鼠大脑前额叶和纹状体中多巴胺受体mRNA和受体蛋白含量为机制分析指标.结果 哌甲酯缓释片6.75 mg· kg-1可明显改善大鼠的行为异常(与模型组相比,P＜0.05),并显著提高大鼠纹状体和前额叶中多巴胺D1受体(DRD1)和多巴胺D2受体(DRD2)蛋白及相应mRNA的表达(与模型组相比,P＜o.o1);哌甲酯缓释片3.375 mg· kg-1能改善部分ADHD模型大鼠的异常行为,能够显著提高大鼠前额叶中DRD1和DRD2蛋白及相应mRNA的表达(与模型组相比,P＜0.01).结论 哌甲酯缓释片能够明显改善ADHD模型大鼠的ADHD症状,其作用机制与改善多巴胺神经功能有关.

目的:探讨安神定志灵方对自发性高血压大鼠(SHR)前额叶、纹状体及海马中Akt/GSK-3 β/β-catenin信号通路的影响.方法:将50只SHR大鼠随机分为模型组、利他林组(2mg/kg)、安神定志灵低、中、高剂量组(6.7、13.4、26.7g/kg),每组10只,另将10只Wistar京都大鼠设为正常组.每日灌胃2次,治疗4周后取大鼠脑组织.分别用蛋白质印迹法(Western Blot)、免疫组织化学法及实时定量荧光PCR检测各组大鼠前额叶、纹状体、海马组织中Akt、GSK-3β和β-catenin的表达水平.结果:与正常组比较,模型组大鼠前额叶、纹状体中β-catenin、Akt的蛋白及mRNA表达降低,GSK-3β相关表达增加;海马区β-catenin、Akt的OD值显著性降低(P＜0.05),GSK-3β的OD值显著性升高(P＜0.05).治疗后与模型组比较,利他林及安神定志灵组能够增加大鼠前额叶、纹状体中β-catenin、Akt的蛋白及mRNA表达,降低GSK-3 β的相关表达;增加大鼠海马区β-catenin、Akt的OD值,降低GSK-3β的OD值.结论:安神定志灵可以影响Akt、GSK-3 β、β-catenin表达水平,其药效可能与抑制细胞凋亡、保护神经元存在关联.