1 案例1.1 案例资料张某一家三口,父(被检父)、母(被检母)和孩子(男,21 岁)来所办理亲子鉴定委托,在询问了无输血史,不怀疑孩子为自己的近亲属所生,遵循知情同意的原则,采集三人血液数滴制成血痕样本进行亲子鉴定.

牙釉质蛋白基因(Amelogenin)检测是目前国内外最常用的性别鉴定方法,其检测方法简便、灵敏、快捷,在法医物证学实践中具有较高的应用价值,许多商品化试剂盒包含了Amelogenin基因[1].该基因座中Amelogenin-X比Amelogenin-Y小 6 bp,正常男性会在该基因座出现Amelogenin-X和Amelogenin-Y两个峰[2],如果只有Amelogenin-X一个峰经常会被判定为女性,可能是因为Amelogenin基因的变异或片段缺失而造成性别的误判.本文通过对父子在Amelogenin 基因座均只检测出一个Amelogenin-X等位基因的案例进行分析探究,为涉及性别判定的案件和鉴定提供参考.

目的 应用PowerPlex(R) 21 System试剂盒和AGCU 21+1 STR荧光检测试剂盒作为补充位点试剂盒出现的Amelogenin基因座X片段缺失情况.方法 应用Investigator Argus X-12 Kit试剂盒和Microreader?19X ID System试剂盒扩增并进行毛细管电泳,检测出完整的X基因座分型.结果 2013年3月至2016年12月,共发现4例男性个体出现Amelogenin基因座X片段缺失情况.结论 应用PowerPlex(R) 21 System试剂盒和AGCU21+ 1STR荧光检测试剂盒进行日常法医物证检案时,偶尔发生Amelogenin基因座X片段缺失,利用其他法医物证鉴定试剂盒进行验证可确保正确的基因分型.

1 案 例1.1 简要案情当事人王某怀疑孩子为其妻子与父亲所生,携带本人、孩子生母及孩子血样来本中心,要求鉴定自己与孩子之间是否存在亲生血缘关系.经常染色体STR分型检测和Y-STR分型检测之后无法排除王某与孩子之间的亲生血缘关系,因此补送王某父亲样本进行检测.1.2 检验方法1.2.1 DNA提取采用常规Chelex-100法[1]分别提取王某、王某父亲、孩子母亲与孩子血样DNA,采用人类STRtyper-21G扩增荧光检测试剂盒、STRtyper-10G试剂盒(宁波海尔施基因科技有限公司)进行27个常染色体STR基因座和Amelogenin性别基因座分型检测,采用Goldeneye(R) DNA身份鉴定系统20Y[基点认知技术(北京)有限公司]进行20个Y-STR基因座的分型,采用Investigator DIPplex试剂盒(德国QIAGEN 公司)进行30个常染色体InDel位点检测,扩增体系和扩增程序按相关操作手册进行.

目的 建立16个miniSTR基因座的复合扩增体系,探讨其在法医学降解检材中的应用价值.方法采用六色荧光标记技术,对16个miniSTR基因座进行复合扩增体系的构建及法医学应用评估.结果开发出一个六色荧光标记的miniSTR扩增试剂盒,可同时对15个常染色体STR基因座、Amelogenin基因座和DY S391基因座进行分型检测,方法特异性好,分型结果稳定、准确,灵敏度达50 pg,实际案件中常见生物检材的检验结果良好.结论16个miniSTR复合扩增体系对降解与微量检材的检测具有应用价值,灵敏度高,具有数据库兼容性,可以用于实际案件检验.

1 材料和方法1.1 简要案情在某破坏公共财物案件中,因性别位点不符, 3名"叶"姓男性犯罪嫌疑人的STR分型无法录入DNA数据库.经调查了解,该3名男性个体户籍地相同,年龄在30～50岁之间,发育状况良好,具备正常的男性特征.

目的 建立20个STR、36个Y-STR、3个Y-indel及Amelogenin基因座的复合扩增体系,并对其性能指标进行验证.方法 采用八色荧光标记技术,选择涵盖常染体和Y染色体的60个基因座,合成引物,进行复合扩增以及毛细血管电泳检测;并对其准确性、灵敏度、种属特异性、混合样本、稳定性及检材适应性等系统性能指标进行验证.结果 采用本文体系分型结果准确稳定,检测灵敏度达0.125ng/μL,能够满足对混合检材以及建库过程中批量检测的要求,具备良好的稳定性和种属特异性.结论 本文建立的60个基因座的八色荧光染料标记的STR及Y-STR复合扩增体系分型准确稳定,在今后法庭科学以及数据库建设等方面具有广阔的应用前景.

目的 建立八色荧光38个基因座的复合扩增体系.方法 采用八色荧光标记技术,对38个基因座Amelogenin、D5S818、D21S11、D7S820、CSF1PO、D2S1338、D3S1358、vWA、D8S1179、D16S539、D1S1677、PentaD、TPOX、TH01、D22S1045、D18S51、FGA、D6S1043、D13S317、D12S391、PentaE、D2S441、D1S1656、D19S433、D10S1248、D11S4463、D1S1627、D3S4529、D1GATA113、D17S974、D6S1017、D4S2408、D9S2157、D6S474、D2S1776、D18S853、D20S482及D14S1434进行复合扩增,应用GA118-24B遗传分析仪进行电泳检测,应用Gene Typer V1.0软件进行数据分析.结果 本文成功建立了38个基因座的八色荧光复合扩增体系,基因座间均衡性良好,阳性对照分型结果准确.结论 包含38个基因座的八色荧光复合扩增体系构建成功,为后续更多八色试剂盒的开发奠定了基础.在提高我国DNA检验试剂水平、遗传分析仪检测能力和数据分析软件研究方面具有重要意义.

1 案 例1.1 简要案情案例1:陈某,47岁,身份信息性别为女,出生于偏远农村,出生时外生殖器无阴茎、睾丸,故被家人一直当女孩抚养并申报户籍.陈某成年后不但未出现月经来潮,反而出现了胡须和喉结,但因家庭贫困,一直未去医院诊查.近期在某医院检查染色体为46XY,并行"阴茎伸直术".现当事人要求更改户籍上性别,遂行性别鉴定.

Y-STR基因座位于Y染色体的非重组区,是连锁遗传,可进行未知个体识别、父系鉴定、从混合斑中检验未知男性以及验证无Amel(amelogenin)基因座的男性等,所以Y-STR在法医学领域的应用具有重大意义 [1,2].本案利用Y-STR数据库,锁定了男性家系,结合亲缘关系计算,最终确定了犯罪嫌疑人,为案件的顺利侦破发挥了关键作用.