目的:评价孕中期大鼠丙泊酚麻醉下手术对子代认知功能及海马组蛋白去乙酰化酶2 (HDAC2)-环腺苷酸效应元件结合蛋白(CREB)-含2B亚基的N-甲基-D-天冬氨酸受体(NR2B)信号通路的影响。方法:孕14 d健康SD大鼠30只，采用随机数字表法分为3组( n＝10)：丙泊酚组(P组)、丙泊酚手术组(S组)和对照组(C组)。S组经尾静脉注射20 mg/kg丙泊酚，继之以20 mg·kg -1·h -1速率连续输注维持麻醉4 h并行剖腹探查术。P组除不行剖腹探查术外，余处理同S组；C组输注等量生理盐水。子鼠出生后30 d，采用Morris水迷宫实验评价子代大鼠学习记忆能力。采用Western blot法检测子代海马组蛋白去乙酰化酶2 (HDAC2)、磷酸化(p-)CREB、NR2B、脑源性神经营养因子(BDNF)和p-酪氨酸激酶B (p-TrkB)表达，TUNEL染色法检测海马神经元凋亡水平。 结果:与C组比较，P组和S组逃避潜伏期延长，穿越原平台位置次数减少，第二象限停留时间缩短，海马HDAC2表达上调，p-CREB、NR2B、BDNF和p-TrkB表达下调，神经元凋亡率增加( P<0.05)；与P组比较，S组逃避潜伏期延长，穿越原平台位置次数减少，第二象限停留时间缩短，海马HDAC2表达上调，p-CREB、NR2B、BDNF和p-TrkB表达下调，神经元凋亡率增加( P<0.05)。 结论:孕中期大鼠丙泊酚麻醉下手术可降低子代认知功能，其机制与调控HDAC2-CREB-NR2B信号通路，促进海马神经元凋亡有关。

近年来，中医药治疗AD得到广泛关注。中药调控AD的信号通路研究主要集中在脑源性神经营养因子（BDNF）/酪氨酸激酶B（TrkB）通路、PI3K/Akt通路、MAPK通路、蛋白激酶A（PKA）/cAMP应答元件结合蛋白（CREB）通路、NF-κB通路及Wnt通路这6条通路。

目的:观察解郁止痛方对偏头痛抑郁共病模型大鼠行为学的影响，从调控脑源性神经营养因子（BDNF）/ERK1/2/环磷腺苷效应元件结合蛋白（CREB）信号通路探讨其作用机制。方法:将36只SD雄性大鼠按随机数字表法分为空白组、模型组、尼莫地平组和中药低、中、高剂量组。采用间歇皮下注射硝酸甘油（10 mg/kg）与慢性不可预知性温和刺激复制偏头痛抑郁共病模型。各组大鼠分别予相应药物干预21 d，1次/d。记录造模前及造模后第10、21天大鼠体重，检测机械痛阈值，采用旷场实验、强迫游泳实验、新奇抑制摄食实验评价大鼠行为学，采用Western blot法检测大鼠海马组织中BDNF、酪氨酸激酶受体B（TrkB）、p-ERK1/2、p-CREB蛋白表达。结果:造模第10、21天，与模型组同时点比较，中药各剂量组大鼠体重、旷场实验水平及垂直运动得分升高（ P<0.05），新奇抑制摄食潜伏时间、强迫游泳不动时间缩短（ P<0.05）；第7、14、21天，与模型组同时点比较，中药各剂量组大鼠机械痛阈值升高（ P<0.05）；中药各剂量组海马组织中p-ERK1/2蛋白表达升高（ P<0.05），中药低、中剂量组BDNF、TrkB、p-CERB蛋白表达升高（ P<0.05）。 结论:解郁止痛方可改善偏头痛抑郁共病大鼠的症状，其作用机制可能通过影响BDNF/ERK1/2/CREB信号通路中蛋白的表达，发挥镇痛抗抑郁作用。

目的:探讨金郁欢汤对抑郁状态-痰瘀互结小鼠的作用机制及BDNF/TrkB/CREB信号的影响.方法:选择成年雄性C57BU6J小鼠30只,根据随机数字表法分为空白组、模型组、氟西汀组、低、中、高剂量金郁欢汤组,每组5只,除空白组外其余组建立抑郁状态-痰瘀互结小鼠模型.造模完成后,氟西汀组灌胃给予3mg/kg氟西汀悬浮灌胃,金郁欢汤低、中、高剂量组分别给予0.2g/kg、0.5g/kg、0.8g/kg金郁欢汤灌胃,对照组、模型组均给予等体积的生理盐水灌胃,1次/d,连续灌胃3周.对比6组小鼠造模前、造模后、给药后的体质量、糖水偏嗜率、水平得分、垂直得分、实验不动时间、实验漂浮时间、海马组织中的BD-NF/TrkB/CREB mRNA 及蛋白表达水平.结果:造模后,空白组的体质量、糖水偏嗜率、水平得分、垂直得分、海马组织中的BD-NF/TrkB/CREB mRNA及蛋白表达水平明显较其余5组低,实验不动、漂浮时间较其余5组高(P均＜0.05).给药后,空白组、氟西汀组、中、高剂量金郁欢汤组体质量、糖水偏嗜率明显较模型组、低剂量组高,低剂量组体质量明显较模型组高(P均＜0.05);空白组的水平、垂直得分明显较其余5组高,氟西汀组、中、高剂量金郁欢汤组以上指标明显较模型组、低剂量组高,低剂量组明显较模型组高(P均＜0.05);空白组的实验不动、漂浮时间明显较其余5组低,氟西汀组、中、高剂量金郁欢汤组实验不动、漂浮时间显较模型组、低剂量组低,低剂量组明显较模型组低(P均＜0.05);BDNF/TrkB mRNA水平、BDNF、TrkB蛋白表达水平:氟西汀组＞高剂量组＞中剂量组＞低剂量组＞空白组＞模型组;其中氟西汀组、高剂量组、中剂量组三组间无差异(P＞0.05),其余组间均有差异(P＜0.05);CREB mRNA水平、BDNF蛋白表达:空白组＞氟西汀组＞高剂量组＞中剂量组＞低剂量组＞模型组;其中空白组、氟西汀组、高剂量组、中剂量组四组间无差异(P＞0.05),其余组间均有差异(P＜0.05).结论:0.5g/kg金郁欢汤可明显改善抑郁状态-痰瘀互结小鼠的抑郁行为,增强海马神经元的修复、再生,可能与其可上调小鼠海马组织的BDNF/TrkB/CREB信号通路相关.

目的:观察电针联合五子衍宗丸对帕金森病小鼠黑质脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸激酶受体B(TrkB)/环磷酸腺苷反应原件结合蛋白(CREB)通路的影响.方法:将108只雄性C57BL/6小鼠按照随机数字表法分为正常组、模型组、电针组、五子衍宗丸组、联合观察组、抑制剂组、电针+抑制剂组、五子衍宗丸+抑制剂组、联合+抑制剂组9组,每组12只.除正常组、抑制剂组外,其余组给予1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)腹腔注射造模,第1天15 mg/kg,第2天20 mg/kg,第3～7天30 mg/kg,均0.2 mL/次,1次/d.自造模第1天进行干预,电针观察组别给予电针干预,五子衍宗丸观察组别早晚给予五子衍宗丸药液,抑制剂注射组别腹腔注射TrkB抑制剂ANA-12,连续干预14 d.干预结束后对比各组步态实验、旷场实验、爬杆实验结果,小鼠黑质酪氨酸羟化酶(TH)及BDNF、TrkB、CREB表达.结果:与正常组比较,模型组出现明显的运动障碍,黑质TH平均荧光强度及TH、BDNF、TrkB、CREB蛋白表达低(P＜0.05);与模型组比较,电针组、五子衍宗丸组、联合观察组运动障碍均得到改善,黑质TH平均荧光强度及TH、BDNF、TrkB、CREB蛋白表达高(P＜0.05);与电针组、五子衍宗丸组比较,联合观察组的运动障碍得到改善,其他指标表达增高(P＜0.05).结论:电针联合五子衍宗丸可能通过调控BDNF/TrkB/CREB信号通路来改善PD小鼠的运动障碍,保护多巴胺能神经元.

目的:采用网络药理学、分子对接和动物实验探讨舒心安神汤治疗抑郁症的作用及机制.方法:通过TCMSP、Swiss Target Prediction、Uniprot数据库筛选舒心安神汤中的活性成分及作用靶点,采用Gene Cards、OMIM、Drug Bank数据库获得抑郁症疾病靶点;用Cytoscape软件构建可视化网络,利用Venny 2.1软件筛选、收集药物与疾病的共有靶点.将筛选出的药物和疾病的共同靶点输入String数据库,获得蛋白质相互作用(PPI)网络图,进一步筛选出核心靶点.于DAVID数据库中对交集基因进行GO富集和KEGG通路分析,预测其富集的信号通路并进行可视化展示,将核心靶点与相关活性成分在CB-Dock在线平台进行分子对接验证,并采用LC-MS对舒心安神汤主要化学成分进行分析鉴定.构建皮质酮诱导抑郁小鼠模型,利用行为学实验、尼氏染色、Western blotting法进行舒心安神汤药效评估并对脑源性神经营养因子(BDNF)、酪氨酸激酶受体B(TRKB)、环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)反映突触可塑性相关蛋白的表达进行考察.结果:网络药理学预测得到舒心安神汤治疗抑郁症的潜在活性成分141个,主要为槲皮素、β-谷甾醇、山柰酚、芍药苷、莫诺苷、斯皮诺素及姜辣素等活性成分,关键靶点包括IL6、ESR1、AKT1和EGFR等,GO富集分析结果发现抑郁反应与蛋白磷酸化调控、细胞外基质激酶结合及蛋白激酶活性等相关.KEGG通路富集结果显示,舒心安神汤治疗抑郁可能通过调节PI3K-AKT、HIF-1及MAPK等信号通路发挥作用.分子对接发现芍药苷、莫诺苷、斯皮诺素、姜辣素与ESR、AKT1和BDNF结合能力较强.LC-MS鉴定出舒心安神汤中含有15种高响应化学成分,与网络药理学核心成分预测基本一致.动物实验结果表明,与模型对照组比较,舒心安神汤20.5 g/kg组的小鼠体质量、蔗糖偏好明显增加,强迫游泳时间和新奇抑制摄食试验潜伏期明显减少(P＜0.05);尼氏染色显示模型对照组小鼠海马CA3区神经元排列欠规则,细胞周围间隙增宽,胞质内尼氏小体明显减少,而舒心安神汤20.5 g/kg组小鼠海马CA3区神经元排列较为规则,细胞周围间隙缩短,尼氏体较为丰富;舒心安神汤20.5 g/kg组能明显上调小鼠海马组织TRKb、p-AKT、BDNF、CREB的蛋白表达(P＜0.05).结论:舒心安神汤可能通过其含有的槲皮素、β-谷甾醇、芍药苷、姜辣素和斯皮诺素等主要成分作用于ESR1、AKT1等靶基因,并影响BDNF/TRKB信号通路及下游相关蛋白等,发挥改善抑郁症的作用,其机制可能与上调BDNF、TRKB、p-AKT及CREB蛋白表达,改善海马神经元可塑性有关.

目的 观察电针对甲基苯丙胺(MTHE)戒断后抑郁小鼠海马水通道蛋白 4(AQP4)及脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸蛋白激酶B(TrkB)/环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)信号通路的影响,探讨电针改善MTHE戒断后抑郁潜在的作用机制.方法 健康雄性C57BL/6J小鼠随机分为空白组、模型组和电针组,每组 10 只.模型组、电针组采用条件性位置偏爱实验(CPP)复制小鼠MTHE成瘾模式,自然戒断后制备戒断后小鼠抑郁模型.空白组、模型组、电针组不给予任何干预,电针组取"百会"、"大椎"穴给予电针干预,选用连续波,频率 2 Hz,1 次/d,15 min/次,连续治疗 28 d.分别于戒断后和干预后对各组小鼠进行强迫游泳试验和开放旷场试验,Western blot法检测小鼠海马AQP4、BDNF、TrkB、CREB和p-CREB等蛋白表达情况,免疫荧光染色法检测小鼠海马AQP4 表达情况,实时荧光定量PCR法检测小鼠海马AQP4 mRNA表达.结果 造模后,与空白组比较,模型组、电针组CPP 值均升高(均P<0.01),模型组、电针组CPP值差异无统计学意义(P>0.05).戒断后,与空白组比较,模型组、电针组水中自主不动状态持续时间均增加(均P<0.01)、中央区活动持续时间均减少(均P<0.01),模型组与电针组差异无统计学意义(P>0.05);干预后,与空白组比较,模型组、电针组水中自主不动状态持续时间增加(P<0.01)、中央区活动持续时间减少(P<0.01),与模型组比较,电针组水中自主不动状态持续时间减少(P<0.01),中央区活动持续时间增加(P<0.01);干预后,与空白组比较,模型组、电针组AQP4、BDNF、TrkB、CREB、p-CREB蛋白表达均减少(均P<0.01),与模型组比较,电针组AQP4、BDNF、TrkB、CREB、p-CREB蛋白表达均增加(均P<0.01).干预后,与空白组比较,模型组、电针组AQP4 阳性减少(P<0.01),与模型组比较,电针组AQP4 阳性表达增加(P<0.01).干预后,与空白组比较,模型组、电针组AQP4 mRNA表达减少(P<0.01).干预后,与模型组比较,电针组AQP4 mRNA表达增加(P<0.01).结论 电针可改善METH戒断后小鼠抑郁样行为,其作用机制可能与调控AQP4 表达,以及BDNF/TrkB/CREB信号通路活性相关.

目的:观察腧穴"解郁方"对慢性不可预测轻度应激(CUMS)抑郁大鼠下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴和脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸激酶 B受体(TrkB)/环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)信号通路的影响.方法:40 只无特定病原体(SPF)级Sprague Danley(SD)雄性大鼠随机分为空白组(10只)、模型组(10只)、西药组(10只)、针刺组(10 只),除空白组外,其余 3 组连续28d构建CUMS抑郁大鼠模型,造模成功后,西药组连续 14d灌胃盐酸帕罗西汀混悬液,每日 1次;针刺组针刺百会、太冲、神门,每日 1次,每次 20 min,连续针刺 14 d.苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠海马病理变化,酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质醇(CORT)水平;免疫组化(IHC)检测海马 BDNF、TrkB表达情况,蛋白质免疫印迹法(Western Blot)及实时荧光定量-聚合酶链式反应(PCR)测定海马BDNF、TrkB、CREB蛋白及mRNA的表达.结果:与空白组比较,模型组血清 CRH、ACTH和 CORT含量上升(P<0.01),海马病理损伤严重,海马BDNF、TrkB 平均光密度降低(P<0.01),BDNF、TrkB、CREB蛋白及 mRNA明显下降(P<0.05或P<0.01).与模型组比较,针刺组血清 CRH、ACTH、CORT含量下降(P<0.05),海马病理损害明显减轻,BDNF、TrkB平均光密度明显增加(P<0.05),BDNF、CREB、TrkB蛋白及 mRNA表达水平上升(P<0.05).结论:腧穴"解郁方"可能通过调节 HPA轴和调控 BDNF/TrkB/CREB信号通路,改善 CUMS诱导的大鼠抑郁样行为.

目的 研究巴戟天对慢性应激抑郁大鼠海马神经元损伤及脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)/细胞内环磷腺苷效应元件结合蛋白(cyclic adenosine phosphate response element binding protein,CREB)信号通路的影响.方法 从40只SD大鼠随机选取其中10只为正常组,对其余大鼠构建慢性不可预知温和应激模型后,再将其分为3组,即模型组,盐酸氟西汀组(3.17 mg·kg-1),巴戟天组(3.17 g·kg-1).持续灌胃后给药8周,1次/d,并先后在造模前、造模后和给药后开展了行为学实验,以判断大鼠的抑郁情况.通过苏木素-伊红染色(hematoxylin-eo-sin staining,HE)研究大鼠海马形态学改变,用免疫组织化学法(Immunohistochemistry,IHC)测定大鼠海马BDNF蛋白表达,用HE染色研究大鼠海马组织病理损伤并评分,用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR,RT-PCR)测定大鼠海马BDNF、TrkB、CREB mRNA相对表达,用蛋白免疫印迹法(western blot,WB)测定大鼠海马BDNF、TrkB、CREB蛋白的相对表达.结果 与正常组比较,模型组大鼠活动总路程显著减少(P＜0.05),自主游泳时间显著减少(P＜0.05),悬尾挣扎时间显著减少(P＜0.05).HE染色结果中表明海马神经元组织受到破坏,病理损伤评分显著下降(P＜0.05),免疫组织化学染色中海马BDNF表现显著下降(P＜0.05),BDNF、TrkB、CREB mRNA的基因相对表达显著下降(P＜0.05);与模型组对比,盐酸氟西汀组和巴戟天组大鼠活动的总里程明显提高(P＜0.05),自主游泳时间显著增加(P＜0.05),悬尾挣扎时间显著增加(P＜0.05),HE染色结果表明海马神经元组织明显复原,病理损伤评分增加(P＜0.05),免疫组织化学染色中BDNF表现显著增加(P＜0.05),BDNF、TrkB、CREB mRNA的基因相对表达明显增加(P＜0.05).结论 经慢性应激刺激后,巴戟天可能通过激活BDNF/TrkB/CREB信号通路对抑郁大鼠海马神经元损伤发挥神经保护作用,改善其抑郁样行为.

目的 探讨奥氮平通过对环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)/脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸蛋白激酶受体B(TrkB)通路的影响对精神分裂模型大鼠的神经修复作用.方法 将60只大鼠纳入对照组、模型组、奥氮平低、中、高剂量组,各组均10只.模型组、奥氮平低、中、高剂量组大鼠进行MK-801腹腔注射0.2mg/(kg·d),对照组注射等量生理盐水.模型建立成功24 h后,奥氮平低、中、高剂量组分别以0.5、1.0、1.5mg/(kg·d)奥氮平溶液灌胃,对照组、模型组同剂量生理盐水灌胃.按照共济失调和刻板行为标准对大鼠行为学进行评分;Morris水迷宫实验评定大鼠认知功能及学习能力;ELISA法检测大鼠血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)水平;观察海马组织病理学变化;检测海马区细胞凋亡及CREB/BDNF/TrkB通路相关蛋白表达.结果 与对照组比较,模型组大鼠共济失调、刻板行为评分、TNF-α、IL-6表达、细胞凋亡率极显著增加(P＜0.01),奥氮平低、中剂量组显著增加(P＜0.05).与对照组比较,模型组大鼠跨越平台次数、目标象限停留时间、CREB、磷酸化CREB(p-CREB)、磷酸化TrkB(p-TrkB)、TrkB、BDNF蛋白相对表达极显著减少(P＜0.01),奥氮平低、中剂量组显著减少(P＜0.05).与模型组比较,奥氮平低、中剂量组跨越平台次数、目标象限停留时间显著增加(P＜0.05),奥氮平高剂量组极显著增加(P＜0.01).模型组以及奥氮平低剂量组中海马细胞肿大明显、细胞核破碎分裂、固缩,组织排列杂乱;奥氮平中、高剂量组大鼠海马细胞中少见破碎分裂以及核固缩现象,整体组织与对照组大鼠相似.结论 奥氮平对精神分裂症模型大鼠的神经修复作用机制涉及到改善大鼠认知功能受损、保护大鼠海马神经细胞以及激活CREB/BDNF/TrkB信号通路的表达.