目的:探讨灯盏花素上调核因子E2相关因子2/血红素氧合酶-1(Nrf2/HO-1)通路抑制大鼠液压冲击脑损伤内质网应激介导凋亡的具体机制。方法:72只成年雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组和灯盏花素组。应用Dixon法制作颅脑损伤模型，造模后24 h用改良大鼠神经功能缺损评分(mNSS)、干湿重法、蛋白印迹法(Western blot)和原位缺口末端标记法(TUNEL)法分别评价动物神经功能障碍、脑组织含水量、内质网应激介导凋亡标志蛋白[葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白(CHOP)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-12]、Nrf2/HO-1通路关键蛋白[Nrf2、HO-1和醌氧化还原酶1(NQO-1)]表达以及神经细胞凋亡变化。组间比较差异性分析采用Student’s t检验。 结果:灯盏花素组造模后24 h大鼠mNSS评分[(8.12±1.76)分比(9.89±1.64)分， t＝2.549， P<0.05]和脑组织含水量[(80.01±2.12)%比(83.88±5.74)%， t＝2.187， P<0.05]均明显低于模型组。Western blot结果显示灯盏花素能够抑制GRP78(4.07±0.68比5.74±0.98， t＝4.850， P<0.05)、CHOP(1.01±0.18比1.38±0.21， t＝4.634， P<0.05)、Caspase-12(0.55±0.11比1.11±0.13， t＝10.391， P<0.05)和Caspase-3(0.77±0.12比1.10±0.21， t＝4.726， P<0.05)蛋白表达并减轻神经细胞凋亡(24.26±4.38比32.14±6.87， t＝3.350， P<0.05)，同时上调Nrf2(胞核)(0.21±0.04比0.15±0.03， t＝4.157， P<0.05)、HO-1(0.31±0.05比0.21±0.05， t＝5.941， P<0.05)和NQO-1(0.27±0.05比0.20±0.00， t＝4.159， P<0.05)。 结论:灯盏花素通过激活Nrf2/HO-1通路抑制内质网应激介导凋亡发挥神经保护作用。

目的:探讨高压电烧伤后大鼠肾脏氧化应激损伤的特点及灯盏花素的干预作用。方法:该研究为实验研究。将160只8~10周龄雄性SD大鼠按随机数字表法分为假伤组、电烧伤组、盐水组、低灯盏花素组、中灯盏花素组、高灯盏花素组，其中假伤组、电烧伤组各60只大鼠，余4组各10只大鼠。将假伤组和电烧伤组大鼠按伤后0 h（即刻）、8 h、24 h、48 h、72 h和1周，分为每个时间点10只。将假伤组大鼠不通电致假伤，余5组大鼠致高压电烧伤。伤后对假伤组和电烧伤组大鼠不行干预，对盐水组、低灯盏花素组、中灯盏花素组、高灯盏花素组大鼠分别另经腹腔按5 mL/kg剂量注射生理盐水及0.4、1.6、4.0 g/L灯盏花素，每24小时1次，至伤后72 h。模型制作成功后14只大鼠死亡，包括伤后24 h、48 h、72 h、1周电烧伤组各1、2、2、1只，伤后72 h盐水组、低灯盏花素组、中灯盏花素组、高灯盏花素组各4、1、2、1只。取6组大鼠的肾脏组织，称重后计算肾/体比。取假伤组，伤后8 h、24 h、48 h、72 h和1周的电烧伤组，伤后72 h的盐水组、低灯盏花素组、中灯盏花素组、高灯盏花素组各4只大鼠的左肾上极组织，行苏木精-伊红染色后采用半定量病理评分系统行肾小管与肾间质损伤评分。取6组大鼠下腔静脉血，采用肌氨酸氧化酶法检测血清肌酐水平，采用脲酶法检测血清尿素氮水平；取6组大鼠右肾皮质，采用钼酸铵法检测肾组织上清液中过氧化氢酶（CAT）活力，采用酶联免疫吸附测定法检测肾组织上清液中晚期氧化蛋白产物（AOPP）水平和Klotho蛋白水平。结果:伤后8 h、48 h、72 h、1周，电烧伤组大鼠肾/体比均明显高于假伤组（ t值分别为-0.52、-3.75、-4.05、-2.25， P<0.05）。伤后72 h，与电烧伤组、盐水组、低灯盏花素组、中灯盏花素组比较，高灯盏花素组大鼠肾 /体比明显降低（ P值均<0.05）。与假伤组比较，电烧伤组大鼠伤后48 h、72 h、1周肾小管与肾间质损伤评分均明显升高（ P<0.05）；与电烧伤组伤后8、24 h比较，电烧伤组大鼠伤后1周肾小管与肾间质损伤评分明显升高（ P值均<0.05）。伤后72 h，5组电烧伤大鼠肾小管与肾间质损伤评分相近（ P>0.05）。伤后8 h、24 h、48 h、72 h、1周，电烧伤组大鼠血清肌酐和尿素氮水平均明显高于假伤组（ Z值分别为-2.00、-2.37、-2.62、-2.67、-3.67和-2.34、-3.11、-3.43、-3.11、-3.51， P<0.05）。与电烧伤组伤后0 h比较，电烧伤组大鼠伤后72 h、1周血清肌酐水平均明显升高（ P<0.05）；与电烧伤组伤后8 h比较，电烧伤组大鼠伤后72 h、1周血清肌酐水平均明显升高（ P<0.05）；与电烧伤组伤后24 h比较，电烧伤组大鼠伤后1周血清肌酐水平明显升高（ P<0.05）。伤后72 h，5组电烧伤大鼠血清肌酐水平相近（ P>0.05）；与电烧伤组比较，低灯盏花素组、中灯盏花素组、高灯盏花素组大鼠血清尿素氮水平均明显降低（ P<0.05）；与盐水组比较，中灯盏花素组、高灯盏花素组大鼠血清尿素氮水平均明显降低（ P<0.05）。伤后48 h、72 h、1周，电烧伤组大鼠肾组织上清液中CAT活力均明显低于假伤组（ Z值分别为-2.22、-2.13、-3.51， P<0.05）；伤后8 h、24 h、48 h、72 h、1周，电烧伤组大鼠肾组织上清液中AOPP水平均明显高于假伤组（ Z值分别为-2.00、-3.15、-2.71、-2.04、-2.33， P<0.05）；伤后0 h~1周，假伤组和电烧伤组大鼠肾组织上清液中Klotho蛋白水平均相近（ P>0.05）。与电烧伤组伤后0 h比较，电烧伤组大鼠伤后72 h和1周肾组织上清液中CAT活力及伤后48 h、72 h、1周肾组织上清液中Klotho蛋白水平均明显降低（ P<0.05）；与电烧伤组伤后8 h比较，电烧伤组大鼠伤后72 h和1周肾组织上清液中CAT活力及伤后48 h、72 h、1周肾组织上清液中Klotho蛋白水平均明显降低（ P<0.05）；与电烧伤组伤后24 h比较，电烧伤组大鼠伤后72 h和1周肾组织上清液中CAT活力均明显降低（ P<0.05）；与电烧伤组伤后48 h比较，电烧伤组大鼠伤后1周肾组织上清液中CAT活力明显降低（ P<0.05）。伤后72 h，5组电烧伤大鼠肾组织上清液中Klotho蛋白水平相近（ P>0.05）；与电烧伤组［14.6（12.6，23.6）U/mgprot］比较，低灯盏花素组、中灯盏花素组、高灯盏花素组大鼠肾组织上清液中CAT活力［20.5（18.0，39.8）、24.9（14.7，28.9）、28.0（21.9，39.1）U/mgprot］均明显升高（ P<0.05）；与盐水组［15.7（13.7，25.6）U/mgprot］比较，中灯盏花素组、高灯盏花素组大鼠肾组织上清液中CAT活力均明显升高（ P<0.05）；与低灯盏花素组比较，高灯盏花素组大鼠肾组织上清液中CAT活力明显升高（ P<0.05）；与电烧伤组及盐水组比较，中灯盏花素组、高灯盏花素组大鼠肾组织上清液中AOPP水平均明显降低（ P<0.05）。 结论:高压电烧伤后大鼠肾脏发生氧化应激损伤，且随时间的延长呈进行性加重，应用灯盏花素可减轻高压电烧伤大鼠肾脏氧化应激损伤。

目的:探讨灯盏花素上调核因子相关因子-2(Nrf2)通路抑制大鼠液压冲击脑损伤后脑组织炎性损伤的具体机制。方法:成年雄性SD大鼠36只(河北医科大学实验动物中心)，应用Dixon法制作颅脑损伤模型，造模后24 h用干湿重法、酶联免疫吸附试验(ELISA)法和蛋白质印迹法(Western blot)分别测定脑组织含水量、炎性因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)以及胞核Nrf2、血红素氧化酶1(HO-1)、磷酸酰胺腺嘌呤二核苷酸醌氧化还原酶1(NQO-1)蛋白表达。应用SPSS 22.0统计软件分析，计量资料用均值±标准差( Mean± SD)表示，组间比较差异性分析采用Student’s t检验。 结果:与模型组[创伤性脑损伤(TBI)组]比较，灯盏花素组(Bre组)造模后24 h脑组织含水量[(81.82±2.64)%比(83.04±1.89)%， t＝2.335， P<0.05]和改良大鼠神经功能缺损评分(mNSS)[(7.98±1.68)分比(9.61±1.74)分， t＝5.271， P<0.05]均明显降低；ELISA结果显示Bre组炎性因子IL-1β[(834.19±95.68) ng/L比(1213.35±167.72) ng/L， t＝6.802， P<0.05]、IL-6[(627.82±86.54) ng/L比(1336.72±198.25) ng/L， t＝9.643， P<0.05]和TNF-α[(586.64±76.98) ng/L比(1416.67±136.85) ng/L， t＝10.312， P<0.05]表达明显降低；Western blot结果显示Bre组胞核Nrf2[(1.52±0.34)比(0.49±0.09)， t＝5.139， P<0.05]、HO-1[(0.87±0.21)比(0.49±0.09)， t＝5.762， P<0.05]和NQO-1[(1.46±0.36)比(0.99±0.19)， t＝4.998， P<0.05]蛋白表达明显上调。 结论:灯盏花素通过激活Nrf2-抗氧化元件(ARE)信号系统，上调下游抗氧化蛋白HO-1和NQO-1，抑制炎性损伤。

目的:探讨灯盏乙素对阿尔茨海默病(AD)大鼠β-淀粉样蛋白(Aβ)跨血脑屏障(BBB)的影响及其机制.方法:无特定病原体(SPF)级 SD大鼠 70只,随机分为假手术组、模型组、灯盏乙素低剂量组、灯盏乙素高剂量组以及阳性对照组,除假手术组大鼠外,其余组大鼠侧脑室注射 Aβ1-42氯化钠溶液建立 AD大鼠模型,灯盏乙素低剂量和高剂量组大鼠分别灌胃灯盏乙素 5 mg/kg和 10 mg/kg,阳性对照组灌胃盐酸多奈哌齐 0.9 mg/kg,持续 30 d,观察大鼠行为能力以及血脑屏障通透性,进行苏木精-伊红(HE)染色和免疫组化染色,蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、闭合蛋白-5(Claudin-5)、咬合蛋白(Occludin)、低密度脂蛋白相关蛋白(LRP-1)以及 p糖蛋白(P-gp)表达情况.结果:模型组神经元细胞排列疏松、紊乱,细胞数量减少,可见明显空泡化,灯盏乙素低剂量组、灯盏乙素高剂量组及阳性对照组神经元细胞数量增多,空泡化细胞减少,细胞排列稍整齐致密.灯盏乙素低剂量组、灯盏乙素高剂量组及阳性对照组大鼠逃避潜伏期、伊文思蓝含量、Aβ斑块面积以及 MMP-9蛋白相对表达量均低于模型组,穿过平台的次数以及 LRP-1、P-gp、Claudin-5、Occludin蛋白相对表达量高于模型组(P<0.05).结论:灯盏乙素可减轻 AD大鼠神经元病理损伤,保护血脑屏障.

目的 探讨氧化应激在大鼠高压电烧伤肝损伤过程中的作用及灯盏花素的干预效果.方法 本研究分为电伤实验和治疗实验两部分.采用随机数字表法将 170 只雄性SD大鼠分配至电伤实验(120 只)和治疗实验(50 只).将电伤实验分为电伤组(60 只)和假伤组(60 只),观测时相为电伤后 0、8、24、48、72 h及 1 周,每个观测时相 10 只.将治疗实验分为高、中、低剂量组,电伤组和盐水组,每组 10 只.采用实验高压电击系统制作电压 3 kV、电击 3s的大鼠高压电烧伤模型.电伤实验大鼠按时相采集血清及肝脏组织.治疗实验大鼠高、中、低剂量组分别腹腔注射 6 mg/kg、4 mg/kg和 2 mg/kg灯盏花素,盐水组腹腔注射生理盐水1mL/kg,电伤组作空白对照,治疗72h后处死并采集血清及肝脏组织.光镜下观察肝组织形态学变化,检测血清中总胆红素(TBIL)含量,谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性,检测肝脏匀浆上清中还原型谷胱甘肽(GSH)、超氧阴离子(O2-·)、总巯基(-SH)含量,黄嘌呤氧化酶(XOD)活性及羟自由基(·OH)清除率.结果 高压电烧伤大鼠肝组织进行性微循环障碍及炎性细胞浸润,使用灯盏花素治疗后肝损伤减轻.电伤实验中,电伤组TBIL、O2-·含量和·OH清除率与假伤组比较,差异无统计学意义(F=0.184、0.485、0.119,P=0.678、0.504、0.739);电伤组ALT、AST和XOD活性高于假伤组,差异有统计学意义(F=215.500、92.010、65.400,P＜0.001);电伤组-SH和GSH含量低于假伤组,差异有统计学意义(F=27.890、113.500,P＜0.001).治疗实验组间相互比较,TBIL、O2-·含量和·OH清除率差异无统计学意义(F=1.441、1.890、0.249,P= 0.236、0.129、0.909);与电伤组和盐水组比较,中剂量组ALT、AST、XOD活性和-SH含量降低,GSH含量升高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 高压电烧伤导致大鼠肝脏组织和细胞损伤,可能与氧化应激相关.灯盏花素对高压电烧伤大鼠肝脏损伤和氧化应激有改善作用.

Dear Editor,Plant UDP-dependent glycosyltransferases(UGTs),belonging to the carbohydrate-active enzyme glycosyltransferase 1 family(Louveau and Osbourn,2019),not only play important roles in adaptation to various environments(Cai et al.,2020;Pastorczyk-Szlenkier and Bednarek,2021)but also endow plant natural products with great pharmaceutical and ecological significance(Margolin et al.,2020).In recent years,an increasing number of plant UGTs have been characterized to function in the biosynthesis of many bioactive compounds such as ginsenosides(Wei et al.,2015),breviscapine(Liu et al.,2018),and rubusoside(Xu et al.,2022).However,a majority of UGTs encoded in plant genomes still remain to be characterized.We constructed a comprehensive plant UGT database(pUGTdb,http://pugtdb.biodesign.ac.cn/)and then investigated the interaction mechanisms of substrates and sugar donors with the characterized UGTs.A web tool was also constructed for UGT virtual screening and sugar donor prediction of unknown UGTs.

目的:探究灯盏花素对大鼠体内普伐他汀转运过程影响的作用机制,为临床合理用药提供数据支撑.方法:正常SD大鼠24只,随机分为生理盐水组、普伐他汀组、灯盏花素组和普伐他汀+灯盏花素组,每组6只.正常KM小鼠60只,随机分为普伐他汀组和普伐他汀+灯盏花素组,每组30只.按照不同剂量给药后采集大鼠胆汁样品和小鼠组织样品处理,采用高效液相色谱法测定样品中普伐他汀的药物浓度;采用RT-PCR和WB技术检测单独及联合给药对大鼠肝脏中Mrp2转运体基因表达和蛋白表达水平的影响.结果:与普伐他汀组比较,普伐他汀+灯盏花素组中除脑组织以外各组织内普伐他汀的药物浓度显著增加(P<0.05);普伐他汀的胆汁分泌量明显降低(P<0.01);与生理盐水组比较,普伐他汀组Mrp2基因和蛋白表达均无明显变化(P>0.05),灯盏花素组及普伐他汀+灯盏花素组中Mrp2转运体基因表达量明显下降(P<0.05),蛋白含量略有减少,但差异无统计学意义(P>0.05).结论:联用后,灯盏花素可能通过竞争抑制Mrp2转运体功能,使普伐他汀外排转运减慢,体内药物浓度增加,进而提高普伐他汀的临床疗效.

目的 探讨灯盏花素(breviscapine,BVP)对牙龈卟啉单胞菌脂多糖(porphyromonas gingivalis,Pg-LPS,简称LPS)诱导的人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGFs)损伤的影响.方法 体外培养HGFs细胞,分为对照组、LPS组、LPS + BVP低、中、高剂量组.CCK-8 法检测细胞增殖;ELISA法检测细胞上清液中IL-1β、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)、IL-6 水平及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性;蛋白质印迹法检测细胞中细胞周期素D1(Cyclin D1)、细胞周期素B1(Cyclin B1)及凋亡相关B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、BCL-2 相关X蛋白(BCL-2-associated X protein,Bax)、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)蛋白表达水平;TBA比色法检测细胞丙二醛(malondial-dehyde,MDA)水平;二氢荧光素二乙酸酯(dichloro-dihydro-fluorescein diacetate,DCFH-DA)法测定细胞中活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平.结果 与对照组比较,LPS组HGFs细胞存活率、细胞迁移率、Cyclin B1、Cyclin D1、Bcl-2 蛋白表达水平及 SOD 活性显著降低(P<0.05),细胞凋亡率、Bax、Caspase-3 蛋白表达水平、炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6 水平及MDA、ROS水平显著升高(P<0.05);与LPS组比较,LPS +BVP低、中、高剂量组细胞存活率、细胞迁移率、Cyclin B1、Cyclin D1、Bcl-2 蛋白表达水平及SOD活性显著升高(P<0.05),细胞凋亡率、Bax、Caspase-3 蛋白表达、炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6 水平及MDA、ROS水平显著降低(P<0.05).结论 BVP可通过抗炎、抗氧化作用减轻LPS诱导的HGFs细胞损伤.

目的 观察灯盏花素对心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia-reperfusion injury,MIRI)大鼠的心肌保护作用,并探讨其可能的机制.方法 将60只SD大鼠随机分为健康组、模型组、灯盏花素低剂量和灯盏花素高剂量组,各15只;灯盏花素低剂量、灯盏花素高剂量组大鼠腹腔注射灯盏花素(50、100 mg·kg-1);健康组、模型组大鼠腹腔注射等体积生理盐水.每日1次,干预5 d.模型组、灯盏花素低剂量组、灯盏花素高剂量组最终均纳入10只大鼠.检测心电图指标;2,3,5-氯化三苯基四氮(2,3,5-tri-phenyltetrazolium chlorid,TTC)染色检测心肌梗死面积;检测血清心肌损伤指标;检测血清氧化应激指标;检测血清炎性因子水平;蛋白质印迹法(Western blotting)检测心肌组织白细胞介素-23(interleukin-23,IL-23)、白细胞介素-17(interleukin-17,IL-17)蛋白的表达水平.结果 与模型组比较,灯盏花素低剂量组大鼠室颤(ventricular fibrillation,VF)和室性心动过速(ventricular tachycardia,VT)发生次数、血清肌酸激酶同工酶(creatine kinase isoenzyme,CK-MB)活性、心肌肌钙蛋白T(cardiac troponin T,cTnT)活性、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、心肌组织IL-23及IL-17蛋白的表达水平降低,VF、VT持续时间缩短,血清超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性升高(P＜0.05);灯盏花素低剂量组和灯盏花素高剂量组各指标水平变化规律相同,灯盏花素变化高剂量组变化更显著(P＜0.05).结论 灯盏花素可缓解MIRI大鼠心律失常、减轻心肌损伤及氧化应激反应和炎症反应.推测其作用机制可能与抑制IL-23/IL-17轴活性有关.

目的 探讨灯盏花素注射液(Bre)对大鼠子宫内膜异位症(EMs)的影响,并基于p38MAPK信号通路探讨其机制.方法 将60只雌性大鼠按体重随机分为假手术组、模型组、Bre(1 mg·kg-1)组、SB202190(p38MAPK 抑制剂,15 mg·kg-1)组、Bre(1 mg·kg-1)+SB202190(15 mg·kg-1)组,每组12只.除假手术组外,其他4组均采用自体内膜移植法制备EMs大鼠模型.造模完成后,各组分别腹腔注射给药,1次·d-1连续4周.通过超声影像测量异位病灶体积,根据Haber评分标准进行盆腔粘连评分,HE染色法观察异位病灶组织病理改变,酶联免疫吸附法检测炎症因子(TNF-α、IL-6、IL-8)含量,Western blot法检测p38MAPK信号通路相关蛋白p38和p-p38、细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、p-ERK1/2、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、p-JNK以及核因子-κB p65(NF-κB p65)、p-NF-κB p65、p-IκBα 表达.结果 与模型组比较,Bre、SB202190和Bre+SB202190可显著降低EMs大鼠异位病灶体积和盆腔粘连评分(P＜0.05);促进异位病灶结构紊乱、间质疏松、上皮细胞坏死、新生血管减少、腺体萎缩、炎性细胞浸润减少等病理改变;显著降低 TNF-α、IL-6、IL-8 含量,p-p38/p38、(p-ERK1/2)/(ERK1/2)、p-JNK/JNK、p-NF-κB p65/NF-κB p65比值及p-IκBα相对表达量(P＜0.05).Bre+SB202190组上述作用均显著优于Bre组和SB202190组(P＜0.05).结论 Bre可抑制EMs大鼠异位病灶生长、减轻盆腔粘连,其机制可能与抑制p38MAPK信号通路过度激活,进而抑制炎症反应有关.