灯盏乙素(SCU)在抑制脏器纤维化方面的研究取得了显著的进展,文章对灯盏乙素通过TGF-β信号通路在调控脏器纤维化中的作用机制进行深入探讨,并详述了灯盏乙素对肝、肺、心脏和肾等脏器纤维化的抑制效应,为揭示灯盏乙素在治疗脏器纤维化疾病中的机制提供了深刻的认识.

目的:探究灯盏乙素对激活的小胶质细胞磷脂酰肌醇3-激酶(P13K)和磷酸化PI3K(p-PI3K)水平的影响.方法:用大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)法制备脑缺血模型,大鼠随机分成假手术组(Sham)、脑缺血组(MCAO)、脑缺血+灯盏乙素组(MCAO+S).利用糖氧剥夺(OGD)法制备BV2小胶质细胞缺血缺氧损伤模型,随机分成对照组(Control)、OGD组、OGD+灯盏乙素组(OGD+S).运用免疫荧光双标染色和Western Blot法检测不同组中小胶质细胞PI3K及PI3K磷酸化水平的变化.结果:体内和体外免疫荧光及Western Blot结果均显示,激活的小胶质细胞中PI3K磷酸化水平明显增加(P＜0.05),灯盏乙素干预后PI3K磷酸化水平进一步升高(P＜0.05);PI3K在各组间无明显变化(P＞0.05).结论:灯盏乙素可能通过上调激活的小胶质细胞中PI3K的磷酸化水平,对脑缺血发挥积极的治疗作用.

灯盏乙素是从菊科植物短莛飞蓬Erigeron breviscapus(灯盏花)中提取得到的黄酮类化合物.作为其最主要的有效成分,灯盏乙素具有抗炎、抗氧化、抗纤维化、抗胆固醇血症、抗心肌梗死等药理活性.近年来,其抗肿瘤作用被逐渐发现并受到广泛关注.研究发现灯盏乙素能显著抑制非小细胞肺癌、结直肠癌、肝癌、黑色素瘤、骨髓瘤、宫颈癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌等癌症的发生发展.其抗肿瘤作用机制包括抑制肿瘤细胞增殖、促进肿瘤细胞凋亡、阻碍肿瘤侵袭和迁移、减轻肿瘤炎症反应、增强抗肿瘤药物敏感性等多个方面,在抗肿瘤治疗领域具有巨大开发潜力.结合文献,针对灯盏乙素抗肿瘤作用机制进行综述,以期为进一步的研究和应用提供参考.

目的:探讨灯盏乙素对阿尔茨海默病(AD)大鼠β-淀粉样蛋白(Aβ)跨血脑屏障(BBB)的影响及其机制.方法:无特定病原体(SPF)级 SD大鼠 70只,随机分为假手术组、模型组、灯盏乙素低剂量组、灯盏乙素高剂量组以及阳性对照组,除假手术组大鼠外,其余组大鼠侧脑室注射 Aβ1-42氯化钠溶液建立 AD大鼠模型,灯盏乙素低剂量和高剂量组大鼠分别灌胃灯盏乙素 5 mg/kg和 10 mg/kg,阳性对照组灌胃盐酸多奈哌齐 0.9 mg/kg,持续 30 d,观察大鼠行为能力以及血脑屏障通透性,进行苏木精-伊红(HE)染色和免疫组化染色,蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、闭合蛋白-5(Claudin-5)、咬合蛋白(Occludin)、低密度脂蛋白相关蛋白(LRP-1)以及 p糖蛋白(P-gp)表达情况.结果:模型组神经元细胞排列疏松、紊乱,细胞数量减少,可见明显空泡化,灯盏乙素低剂量组、灯盏乙素高剂量组及阳性对照组神经元细胞数量增多,空泡化细胞减少,细胞排列稍整齐致密.灯盏乙素低剂量组、灯盏乙素高剂量组及阳性对照组大鼠逃避潜伏期、伊文思蓝含量、Aβ斑块面积以及 MMP-9蛋白相对表达量均低于模型组,穿过平台的次数以及 LRP-1、P-gp、Claudin-5、Occludin蛋白相对表达量高于模型组(P<0.05).结论:灯盏乙素可减轻 AD大鼠神经元病理损伤,保护血脑屏障.

目的 探讨灯盏乙素对脂多糖(LPS)诱导的BV-2 小胶质细胞神经炎症的影响.方法 培养BV-2小胶质细胞系,将BV-2小胶质细胞分为对照组(Ctrl)、环状GMP-AMP合酶(cGAS)抑制剂RU320521(RU.521)组、LPS组、LPS+RU.521 组、LPS+灯盏乙素预处理(LPS+S)组、LPS+S+RU.521 组,共 6 组.Western blotting及免疫荧光双标染色法检测并观察BV-2小胶质细胞中cGAS、干扰素基因刺激因子(STING)、核因子κB(NF-κB)、磷酸化NF-κB(p-NF-κB)、PYD结构域蛋白 3(NLRP3)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达变化(n=3).结果 Western blotting和免疫荧光双标染色均显示,与对照组相比,LPS 诱导后,BV-2 小胶质细胞中 cGAS、STING、p-NF-κB、NLRP3 和TNF-α蛋白的表达水平显著升高(P<0.05);与LPS组相比,LPS+S组中cGAS、STING、p-NF-κB、NLRP3和TNF-α蛋白的表达水平显著下降(P<0.05).使用cGAS通路抑制剂RU.521 后显示了与灯盏乙素预处理组相似的作用效果.此外,NF-κB在各组的变化不明显(P>0.05).结论 灯盏乙素干预抑制BV-2 小胶质细胞介导的神经炎症反应,可能与cGAS-STING 信号通路有关.

目的 应用黄芩茎叶葡萄糖醛酸水解酶(Scutellaria baicalensis stems and leaves glucuronic hydrolase,sbsl GUS)酶解灯盏花中野黄芩苷制备野黄芩素,经分离纯化获得高纯度的野黄芩素提取物.方法 采用正交试验优选灯盏花提取工艺参数;以野黄芩苷酶解转化率为指标,对酶用量、酶解pH值、温度、时间、抗氧化剂等进行考察,优选野黄芩素制备工艺参数;采用乙醇提取、活性炭脱色和分步结晶精制纯化粗提物.结果 灯盏花提取工艺为灯盏花切段,加 10 倍水煎煮提取 2 次,每次 1h.野黄芩素制备工艺为sbsl GUS提取液和灯盏花水煎液加入量(以生药计)比为 1∶10,加 0.5%偏重亚硫酸钠,酶解pH值约 6.0,温度约 45℃,时间20 h,得到含量大于 60%的野黄芩素粗提物.经分步结晶对粗提物进行纯化,用 80%乙醇回流提取,活性炭脱色,浓缩、析晶,得到含量大于 85%的野黄芩素提取物.结论 该工艺应用sbsl GUS酶解技术制备野黄芩素,生产简便可行,为野黄芩素的生产制备提供了新的途径.

目的 探讨灯盏花素(breviscapine,BVP)对牙龈卟啉单胞菌脂多糖(porphyromonas gingivalis,Pg-LPS,简称LPS)诱导的人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGFs)损伤的影响.方法 体外培养HGFs细胞,分为对照组、LPS组、LPS + BVP低、中、高剂量组.CCK-8 法检测细胞增殖;ELISA法检测细胞上清液中IL-1β、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)、IL-6 水平及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性;蛋白质印迹法检测细胞中细胞周期素D1(Cyclin D1)、细胞周期素B1(Cyclin B1)及凋亡相关B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、BCL-2 相关X蛋白(BCL-2-associated X protein,Bax)、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)蛋白表达水平;TBA比色法检测细胞丙二醛(malondial-dehyde,MDA)水平;二氢荧光素二乙酸酯(dichloro-dihydro-fluorescein diacetate,DCFH-DA)法测定细胞中活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平.结果 与对照组比较,LPS组HGFs细胞存活率、细胞迁移率、Cyclin B1、Cyclin D1、Bcl-2 蛋白表达水平及 SOD 活性显著降低(P<0.05),细胞凋亡率、Bax、Caspase-3 蛋白表达水平、炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6 水平及MDA、ROS水平显著升高(P<0.05);与LPS组比较,LPS +BVP低、中、高剂量组细胞存活率、细胞迁移率、Cyclin B1、Cyclin D1、Bcl-2 蛋白表达水平及SOD活性显著升高(P<0.05),细胞凋亡率、Bax、Caspase-3 蛋白表达、炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6 水平及MDA、ROS水平显著降低(P<0.05).结论 BVP可通过抗炎、抗氧化作用减轻LPS诱导的HGFs细胞损伤.

目的 研究灯盏花乙素对子宫内膜癌Ishikawa细胞的影响,并分析与磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路的相关性.方法 将Ishikawa细胞分为空白组及低、中、高剂量实验组,分别用含0、5、10及20μmol·L-1的灯盏花乙素的完全培养基处理.用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验检测细胞活力;用平板克隆实验检克隆形成能力;用划痕及Transwell实验检测转移及侵袭能力;用流式细胞术检测凋亡;用蛋白质印迹法检测蛋白表达情况.结果 空白组和低、中、高剂量实验组48 h的细胞活力分别为(100.00±0.00)％、(78.51±7.54)％、(52.93±4.91)％和(41.62±5.33)％;克隆形成率分别为(100.00±0.00)％、(56.59±6.34)％、(35.23±4.62)％和(10.66±1.91)％;划痕愈合率分别为(53.70±6.19)％、(40.59±4.75)％、(34.25±4.40)％和(15.78±2.14)％;侵袭细胞数分别为(189.70±14.06)、(106.82±12.67)、(84.37±8.13)和(53.74±6.78)个;基质金属蛋白酶-2(MMP-2)蛋白相对表达水平分别为0.96±0.10、0.73±0.06、0.68±0.08 和0.42±0.05;MMP 抑制药-1(TIMP-1)蛋白相对表达水平分别为 0.35±0.04、0.51±0.05、0.74±0.08和 1.20±0.14;细胞凋亡率分别为(4.21±0.53)％、(15.83±2.42)％、(22.72±3.85)％和(34.41±4.67)％;B 淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白表达水平分别为 1.38±0.15、0.90±0.10、0.56±0.06 和 0.24±0.03;Bcl-2 相关 X 蛋白(Bax)表达水平分别为 0.31±0.02、0.44±0.04、0.93±0.11 和 1.26±0.14;PI3Kp85 蛋白表达水平分别为 0.67±0.05、0.42±0.04、0.36±0.02 和0.28±0.03;磷酸化 Akt(p-Akt)蛋白表达水平分别为 0.78±0.06、0.53±0.04、0.46±0.05和0.42±0.03;低、中、高剂量实验组上述指标与空白组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结论 灯盏花乙素可以通过调控PI3K/Akt信号通路抑制Ishikawa细胞增殖、转移及侵袭,并诱导其凋亡.

目的 评价灯盏花乙素磷脂复合物脂微球质量.方法 HPLC法测定灯盏花乙素含量,观察脂微球外观形态,测定其pH值、粒径、酸值、甲氧基苯胺值、游离脂肪酸含量、过氧化值,再进行有关物质检查.结果 灯盏花乙素在 1～128 μg/mL范围内线性关系良好(r=0.999 8),加样回收率为 89.85%～97.52%,RSD为 0.35%～1.87%,3 批样品中其平均含量为(35.77±0.14)μg/g.所得脂微球呈乳白色,呈球形或类球形,pH值为 7.00～7.05,平均粒径为 160.59 nm,酸值为 0.94 mg/g,游离脂肪酸含量为 3.57 mmol/L,甲氧基苯胺值为 0.80,过氧化值为 0.45 mmol/kg,均符合相关规定.在规定条件下的破坏性试验中,未发现相关杂质产生.结论 该方法稳定可行,所制得的灯盏花乙素磷脂复合物脂微球相关指标均符合国家质量标准检查项目要求.

目的 探讨灯盏细辛(EB)对过氧化氢(H2O2)诱导的心肌细胞损伤的影响及其作用机制.方法 建立体外H2O2诱导的心肌细胞氧化应激损伤模型.将体外培养的HL-1小鼠心肌细胞分为空白组(常规培养)、对照组(4 mg·L-1 EB 1 h)、模型组(800 μmol·L-1 H2O2 1 h)、实验组(4 mg·L-1 EB+800μmol·L-1 H2O2 1 h).用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测细胞活力;用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测细胞损伤情况;用流式细胞术检测活性氧(ROS)含量;用蛋白质印迹法检测核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、消皮素D(GSDMD)和电压依赖性阴离子通道1(VDAC1)蛋白表达水平;用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测白细胞介素-1β(IL-1β)含量;用钙黄绿素乙酰甲酯(Calcein AM)检测线粒体通透性转换孔(mPTP)的开放程度.结果 空白组、对照组、模型组和实验组的细胞活力分别为(93.58±7.33)％、(95.18±4.24)％、(52.20±6.98)％和(74.80±5.33)％;LDH 释放量分别为(44.18±6.36)、(46.16±5.01)、(689.60±124.00)和(365.60±87.79)U·L-1;ROS 释放量分别为 0.97±0.10、0.97±0.05、5.18±0.21 和 3.08±0.41;NLRP3 蛋白表达水平分别为 0.98±0.06、0.99±0.01、1.98±0.19 和 1.60±0.17;GSDMD 蛋白表达水平分别为1.00±0.07、1.00±0.05、1.97±0.09和1.46±0.10;IL-1β释放量分别为(25.39±5.35)、(2 5.02±2.37)、(2 14.8±35.90)和(117.50±23.66)pg·mL-1;VDAC1 蛋白表达水平分别为 1.00±0.04、1.01±0.05、3.18±0.15和 1.80±0.18;30 min 的 mPTP 孔开放水平分别为 1.22±0.02、1.22±0.01、1.14±0.02、1.17±0.01.模型组上述指标与空白组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01);实验组上述指标与模型组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).结论 灯盏细辛减轻H2O2诱导的HL-1心肌细胞损伤,其机制可能与通过VDAC1调节ROS/NLRP3通路有关.