目的:研究菊科红花属植物红花Carthamus tinctorius L.的化学成分.方法:采用硅胶、MCI gel CHP-20、Sephadex LH-20、Toyopearl HW-40C以及半制备HPLC对红花70％含水丙酮提取物进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定化合物的结构.结果:从红花中分离得到15个芳香苷类化合物,分别鉴定为:苄基-β-D-葡萄糖苷(1)、苄基-O-芸香糖苷(2)、苯乙醇芸香糖苷(3)、3-(4-O-β-D-吡喃葡萄糖基苯基)丙酸甲酯(4)、carthamoside B5(5)、junipediol A-8-O-β-D-glucopyranoside(6)、7-O-β-苯甲酰芸香糖苷(7)、紫丁香苷(8)、4-烯丙基-2,6-二甲氧基苯基葡萄糖苷(9)、2,6-二甲氧基-4-[(1E)-丙-2-烯基]苯基-O-芸香糖苷(10)、4-O-β-D-吡喃葡萄糖基反式苯丙烯酸(11)、4-O-β-D-吡喃葡萄糖基顺式苯丙烯酸(12)、1-(4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷)苯甲酸(13)、4-(2-氨基乙基)苯基-1-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(14)、(+)-南烛木树脂酚-3α-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(15).结论:其中,化合物1～4、10、13～15为首次从红花属植物中分离得到.

目的 探讨红花提取物(Carthamus tinctorius L.extract,CTLE)对乙醇诱导的酒精性肝病小鼠氧化应激和炎症水平的影响及其作用机制.方法 SPF级C57BL/6 雄性小鼠随机分为 4 组:对照组、模型组、红花提取物低剂量组(50 mg·kg-1)、红花提取物高剂量组(100 mg·kg-1).对照组给予Lieber-Decarli液体饲料,其他组给予Lieber-Decarli酒精饲料构建小鼠慢性酒精性肝损伤模型.收集小鼠血清和肝组织,检测小鼠血清生化指标.通过HE和油红O染色观察小鼠肝组织病理变化.qRT-PCR和 Western Blot法检测Keap1/Nrf2 和STAT3/NF-κB通路相关因子的mRNA和蛋白表达水平.结果 与模型组比较,给药组丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、丙二醛(MDA)的水平明显降低(P＜0.05,P＜0.01),而高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽(GSH)的水平明显升高(P＜0.05,P＜0.01),表明红花提取物对小鼠酒精性肝损伤具有一定的保护和抗氧化作用;HE染色和油红O染色观察到小鼠肝脏病变和脂质沉积有所改善.并且通过激活Keap1/Nrf2通路相关抗氧化因子的mRNA和蛋白表达水平,抑制STAT3/NF-κB通路及相关炎症因子的mRNA和蛋白表达水平(P＜0.05,P＜0.01),从而增强机体的抗氧化和抗炎作用.结论 红花提取物可以通过调节Keap1/Nrf2 和STAT3/NF-κB信号通路发挥抗氧化应激和抗炎作用,减轻小鼠的酒精性肝损伤,为治疗酒精性肝病和后续分子机制研究提供新的思路.

目的 评价红花籽粕(红花Carthamus tinctorius的种子经过压榨提取红花籽油后的副产品)对小鼠的急性毒性及抗溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)作用.方法 C57BL/6小鼠ig不同剂量的红花籽粕,7d后计算脏器指数,采用苏木素-伊红(HE)染色观察肝、脾、肾组织病理变化,测定血清中肝功能、肾功能及血脂水平,以评价红花籽粕的急性毒性.建立葡聚糖硫酸钠(dextran sulphate sodium,DSS)诱导的UC小鼠模型,每天记录小鼠体质量,测定疾病活动指数(disease activity index,DAI)评分、结肠长度以及脏器指数,采用HE染色和阿利新蓝-过碘酸雪夫(AB-PAS)染色评价结肠组织病理学变化,采用qRT-PCR和Western blotting检测结肠组织中炎症和黏膜屏障相关因子表达.结果 急性毒性实验中,与对照组比较,红花籽粕组小鼠脏器指数、血液生化指标没有显著差异,脏器病理切片也未见异常.红花籽粕对DSS诱导的UC小鼠具有较好的保护作用,可以显著改善体质量减轻、DAI评分升高、结肠长度缩短等临床症状(P＜0.01),减轻结肠组织病理损伤,抑制肠道炎症细胞的浸润,保护杯状细胞,提高紧密连接蛋白和黏蛋白的表达(P＜0.05、0.01、0.001),改善肠道屏障完整性.结论 红花籽粕具有较高的安全性,且对DSS诱导的UC小鼠具有显著的治疗作用.

红花作为传统的活血化瘀中药,具有抗肿瘤、抗炎、免疫调节等药理活性.黄酮糖苷是红花植物的主要生物活性组分,糖基转移酶作为活性糖苷化合物生物合成的下游后修饰酶,具有重要的研究意义.该研究基于红花转录组数据分析,挖掘到一条糖基转移酶基因CtUGT49,对其进行了系统的生物信息学分析和酶学性质考察.该基因开放阅读框(ORF)长度为1 416 bp,编码 471 个氨基酸残基,相对分子质量约为 52 kDa.系统进化分析表明,该糖基转移酶属于UGT73 家族.体外酶促结果显示,CtUGT49 可催化柚皮素查尔酮生成樱桃苷和南酸枣苷;催化根皮素生成的主产物为根皮苷和三叶苷,并且具有良好的底物宽泛性.通过蛋白异源表达与纯化得到较为纯净的重组蛋白CtUGT49 后,进行CtUGT49 催化柚皮素查尔酮的酶学性质考察.结果显示,CtUGT49 催化反应的最适pH为7.0,最适温度为37℃,反应8 h后,底物转化率达到最高.采用米氏方程计算CtUGT49 的酶活常数Km=209.90 μmol·L-1,kcat =48.36 s-1.该研究发现的新颖糖基转移酶CtUGT49 对于丰富糖基化工具酶库具有重要意义,且能为进一步解析红花黄酮糖苷的糖基化过程奠定基础.

以蒸馏水为对照,探究不同浓度不同比例的盐碱混合溶液对红花幼苗生理特性的影响.结果表明:在盐碱溶液处理下,红花叶片的叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素以及丙二醛的含量均发生不同程度的变化;可溶性糖和脯氨酸的含量均高于对照;超氧化物歧化酶活性部分高于对照,部分低于对照,而过氧化物酶活性均低于对照.根系活力除胁迫为NaCl∶NaHCO3 = 1∶1,0.3 mol/L时低于对照,其余均高于对照.因此,在盐碱地栽培红花时,要根据土壤的盐碱浓度范围,选择适宜红花品种,才能为优质高产打下基础.

量化植物地上部和地下部元素含量对于理解和预测植物养分平衡如何响应大气氮沉降的变化至关重要.通过盆栽试验研究了氮沉降增加背景下外生菌根真菌对马尾松幼苗营养元素的影响.对马尾松幼苗进行了接种两种外生菌根真菌:(彩色豆马勃(Pisolithus tinctorius,Pt)与厚环乳牛肝菌(Suillus grevillei,Sg))以及4种氮素浓度添加:0 kg N hm-2a-1(NO)、正常氮沉降30 kg N hm-2,-1(N30)、中度氮沉降60 kg N hm-2a-1(N60)、重度氮沉降90 kg Nhm-2a-1(N90),共12个处理,测定了马尾松地上部和地下部大量元素和微量元素的含量.结果表明:施氮改变了营养元素在马尾松幼苗地上部和地下部的含量,马尾松幼苗磷(P)、钙(Ca)、铁(Fe)、锰(Mn)等元素均在N60时达到临界值,而当输入的量超过了马尾松对氮的需求时,氮沉降会使马尾松营养元素含量较最适浓度时降低,地上部碳(C)随施氮浓度的升高先升高后降低,N随施氮浓度的升高而升高,根系和叶片钾(K)、Ca、镁(Mg)均随施氮浓度的升高而降低,施氮也降低了根系C及微量元素的含量.但在同一施氮浓度下,接种外生菌根真菌(EMF)后能够提高大多数元素的含量,N90时接种厚环乳牛肝菌(Sg)和彩色豆马勃(Pt)的叶片N含量与对照相比分别提高112.6％和138.6％,根系N含量分别提高73.1％、71.6％;N60时接种Sg和Pt的植株叶片P含量比不施氮未接种对照分别提高了 166.3％、132.9％,根系P含量分别提高了 40.8％、38.5％.EMF能够维持植物养分平衡,从而降低高施氮量对植物的影响效果.这为未来气候变化情景中氮沉降增加下接种EMF可以调节植物元素含量,从而达到更适应环境的元素平衡来促进生长提供理论依据.

目的:观察中西医结合治疗觉醒型脑卒中的临床疗效,并进行安全性评价.方法:将60患者按随机数字表法分为治疗组和对照组,每组30例.对照组西医常规对症治疗,如脱水给以甘露醇、抗感染、纠正电解质平衡、调血脂、稳血压、降血糖等措施.治疗组在对照组治疗的基础上加用中药汤剂治疗,每天1剂,每天2次,口服.按气虚血瘀、风痰阻络、痰热腑实三个证候相应中药汤剂治疗.①气虚血瘀证采用补阳还五汤加减(黄芪30 g,当归15 g,桃仁10 g,红花9 g,葛根20 g,赤芍15 g,茯苓20 g,石菖蒲15 g,丹参15 g,甘草6 g)治疗.②风痰阻络证采用化痰通络汤加减(法半夏10 g,白术15 g,天麻10 g,胆南星9 g,葛根20 g,丹参15 g,茯苓20 g,石菖蒲15 g,酒大黄6 g,甘草6 g)治疗.③痰热腑实证采用星蒌承气汤加减(全瓜蒌30 g,胆南星9 g,当归15 g,玄参12 g,葛根20 g,丹参15 g,茯苓20 g,石菖蒲15 g,大黄9 g,甘草6 g)治疗.两组患者均外加心理疏导、康复指导.两组患者疗程均为14 d.所有患者治疗前后分别检测纤维蛋白原、高敏C反应蛋白,并观察两组患者的临床疗效.结果:观察组30例,痊愈4例,显效10例,有效8例,无效8例,有效率为60.0％.对照组30例,痊愈3例,显效8例,有效7例,无效12例,有效率为73.3％.两组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).两组患者治疗后纤维蛋白原、高敏C反应蛋白均有不同程度下降,两组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:中西医结合治疗觉醒型脑卒中疗效显著、安全性好,且能降低纤维蛋白原、高敏C反应蛋白水平.

目的:探讨郭宪章主任医师治疗慢性腰腿痛的遣方用药规律.方法:收集郭宪章主任医师2014—1015年治疗慢性腰腿痛的内服药处方197份, 运用方剂计量学方法, 对其用药范围、性味、归经和功效等进行规律分析.结果:郭宪章治疗慢性腰腿痛以补益肝肾、祛湿通络、化瘀止痛为主, 方剂中以炒杜仲、川牛膝、生甘草、川续断、当归、威灵仙、赤芍、桃仁、红花、淫羊藿使用频次最高, 药味以苦、辛、甘为主;药性以温、平、寒为主, 药物归经以肝经、脾经、肾经为主.结论:郭宪章治疗慢性腰腿痛时辨病辨证相结合, 强调肝肾亏虚、经络失养、经气不利、气滞血瘀、脉络不通、不通则痛是该病病机的关键, 为临床治疗该病提供用药参考及研究思路.

MSC transplantation has been explored as a new clinical approach to stem cell-based therapies for bone diseases in regenerative medicine due to their osteogenic capability.However,only a small population of implanted MSC could successfully reach the injured areas.Therefore,enhancing MSC migration could be a beneficial strategy to improve the therapeutic potential of cell transplantation.Catharmus tinctorius volatile oil (CTVO) was found to facilitate MSC migration.Further exploration of the underlying molecular mechanism participating in the pro-migratory ability may provide a novel strategy to improve MSC transplantation efficacy.This study indicated that CTVO promotes MSC migration through enhancing ROCK2 mRNA and protein expressions.MSC migration induced by CTVO was blunted by ROCK2 inhibitor,which also decreased myosin light chain (MLC) phosphorylation.Meanwhile,the siRNA for ROCK2 inhibited the effect of CTVO on MSC migration ability and attenuated MLC phosphorylation,suggesting that CTVO may promote BMSC migration via the ROCK2/MLC signaling.Taken together,this study indicates that C.tinctorius volatile oil could enhance MSC migration via ROCK2/MLC signaling in vitro.C tinctorius volatile oil-targeted therapy could be a beneficial strategy to improve the therapeutic potential of cell transplantation for bone diseases in regenerative medicine.

建立三臣丸药代动力学的UPLC-Q-Exactive-MS检测方法,同时测定大鼠血浆中胆酸、猪胆酸、羟基红花黄色素A、山奈酚-3-O-芸香糖苷、脱水红花黄色素B和紫丁香苷6种活性成分的含量.HPLC分离采用SHIMADZU GIST C18色谱柱,流动相为乙腈-0.1％甲酸溶液梯度洗脱.质谱检测采用HESI离子源负离子检测模式.6种活性成分的线性范围0.50-1280 ng/mL,r均大于0.99;日内及日间精密度(RSD)均小于12.7％;提取回收率、基质效应和稳定性的计算值均符合FDA生物分析方法验证准则.该文中的三臣丸为传统的蒙药复方,由牛黄、红花和天竺黄三味药材等量组成.该方法为首次报道,并且已成功应用于三臣丸的药代动力学研究.