目的:探讨肠道微生物来源的石胆酸（LCA）对脓毒症小鼠肝损伤的保护作用。方法:将15只C57BL/6J小鼠分为假手术组（Sham组）、脓毒症组（Sep组）、粪菌移植组（Sep-fmt组），每组各5只。采用盲肠结扎穿孔术（CLP）构建脓毒症小鼠模型，Sham组仅行腹壁开关手术；Sep-fmt组于CLP后第2天给予粪菌液连续灌胃3 d；Sham组和Sep组根据体质量给予等剂量含10%甘油的无菌磷酸盐缓冲液连续灌胃3 d。采用粪便进行16S核糖体RNA（rRNA）测序分析并筛选出胆汁酸代谢差异代谢产物。然后将30只C57BL/6J小鼠分为假手术组（Sham组，6只）、脓毒症组（Sep组，12只）、LCA组（LCA-Sep组，12只），各组分别保证6只大鼠进行后续实验分析。LCA-Sep组在脓毒症造模之前给予100 mg/kg的LCA灌胃，连续5 d；Sham组、Sep组根据体质量给予等剂量溶媒连续灌胃5 d。采用粪便进行16S rRNA测序分析，观察各组小鼠死亡情况并进行临床严重程度评分（CSS）。检测血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）、IL-10水平并评估各组小鼠肝脏组织病理损伤。结果:Sham组、Sep组和Sep-fmt组小鼠各次级胆汁酸比较，差异均有统计学意义（P均< 0.001），且Sep-fmt组中LCA的增幅最大，故后续实验选取LCA对脓毒症小鼠进行灌胃。CLP术后24 h，Sham组小鼠无死亡，Sep组小鼠死亡4只，LCA-Sep组小鼠死亡2只；各组存活小鼠CSS比较，差异具有统计学意义[（1.0 ± 0.0）、（3.5 ± 0.5）、（2.5 ± 0.5）分，F = 47.500，P < 0.001]。α多样性分析显示，3组小鼠肠道菌群丰富度[Chao1指数和基于丰度的覆盖估计值（ACE）指数]和多样性（Shannon指数和Simpson指数）比较，差异均有统计学意义（H = 8.766、8.766、9.704、10.994，P均< 0.05），且LCA-Sep组肠道菌群多样性高于Sep组（P均< 0.05）。β多样性分析显示，3组小鼠的菌群结构存在显著差异（H = 18.322，P = 0.001）。3组小鼠拟杆菌门的平均相对丰度分别为62.17%、11.10%、34.47%，变形菌门的平均相对丰度分别为10.99%、62.81%、40.58%。3组血清TNF-α、IL-6、IL-10及肝脏切片中TUNEL阳性细胞数比较，差异均有统计学意义（H = 14.749、14.363、15.158，F = 131.688，P均< 0.001），且Sep组TNF-α、IL-6水平及肝脏切片中TUNEL阳性细胞数更高，LCA-Sep组IL-10水平更高（P均< 0.05）。免疫荧光结果显示，Sham组M2巨噬细胞数表达较多，Sep组M2巨噬细胞数表达有所减少；给予LCA预处理后，LCA-Sep组小鼠肝组织M2巨噬细胞数表达较Sep组增加。结论:脓毒症可导致小鼠肠道菌群失调、炎症因子升高和肝细胞损伤；肠道菌群代谢产物LCA可以下调脓毒症小鼠肠道菌群中的潜在致病菌丰度，促进M2巨噬细胞的极化，减轻全身炎症水平和肝细胞凋亡。

目的 研究大气细颗粒物(particulate matter 2.5,PM2.5)暴露对C57BL/6J小鼠和代谢相关脂肪性肝病模型小鼠肝淋巴生成的影响,为防治PM2.5暴露所致肝损伤提供新靶点.方法 将40只雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常组,PM2.5组,代谢相关脂肪性肝病模型组(MAFLD组)和PM2.5-MAFLD组.MAFLD组和PM2.5-MAFLD组小鼠连续12周给予高脂饲料,其余两组给予普通饲料.从13～16周,PM2.5组和PM2.5-MAFLD组小鼠通过气管滴注法进行PM2.5染毒(每周2次);其余两组小鼠同时通过气管滴注法滴注生理盐水.末次PM2.5染毒结束24 h后将实验动物处死.测定小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)和天冬氨酸氨基转移酸(aspartate aminotransferase,AST)水平;用免疫荧光染色法评估肝淋巴LYVE1表达水平;测定肝氧化应激指标(4-HNE和T-GSH/GSSG)水平;用蛋白免疫印迹法测定肝淋巴生成标志蛋白(PROX1和LYVE1),淋巴生成调节蛋白VEGF-C和淋巴连接蛋白VE-cadherin的蛋白质表达水平.结果 PM2.5染毒显著增加了 MAFLD组小鼠血清AST和ALT水平,显著降低了肝组织PROX1、LYVE1和VEGF-C蛋白表达水平,增加肝4-HNE水平和降低了肝T-GSH/GSSG水平(P＜0.05).然而,PM2.5染毒并没有显著影响C57BL/6J小鼠血清AST和ALT水平、肝组织中 PROX1、LYVE1、VEGF-C 和 VE-cadherin 的蛋白表达水平及肝的 4-HNE 和 T-GSH/GSSG(P＞0.05).结论 PM2.5染毒能显著加重MAFLD小鼠肝的氧化损伤,并且能通过降低肝VEGF-C减少肝淋巴生成.

目的 构建人源R-spondin 2(roof plate-specific spondin 2,RSPO2)的真核表达载体,表达、纯化融合蛋白RSPO2-Fu-Fc,用3C蛋白酶切除Fc结构域后,检测RSPO2-Fu的生物学活性.方法 基于生物信息学方法分析人源RSPO2蛋白的理化性质和结构,筛选获得可在溶液中稳定存在的RSPO2截短蛋白RSPO2-Fu.将编码RSPO2-Fu蛋白的基因亚克隆至pCMV-Fc载体后,将质粒pCMV-RSPO2-Fu-Fc瞬时转染入HEK293F细胞中表达72 h,通过Protein A层析柱纯化融合蛋白RSPO2-Fu-Fc,用3C蛋白酶切去Fc结构域,分子筛进一步提纯获得RSPO2-Fu蛋白.最后,通过M50 Super 8 × TOPFlash检测RSPO2-Fu蛋白的生物学活性.结果 生物信息学分析结果显示,RSPO2全长有243个氨基酸,相对分子质量为28 300,等电点为9.42,为亲水性不稳定蛋白,RSPO2-Fu截短蛋白在溶液中的稳定性得到了极大提高;重组表达质粒pCMV-RSPO2-Fu-Fc经菌落PCR及测序证明构建正确;获得了纯度达95％的RSPO2-Fu蛋白;生物学活性检测结果显示,RSPO2-Fu的EC5.值为1.5× 10-12 mol/L.结论 对RSPO2蛋白适当截短后,可获得稳定表达的RSPO2-Fu蛋白,其对Wnt信号通路有明显激活作用,为Wnt信号通路中RSPO2相关生物学研究提供了更好的参考.

目的 探讨脾虚湿热型2型糖尿病经半夏泻心汤联合常规西医治疗后的临床效果.方法 宜兴市中医医院2020年1月—2022年3月收治的脾虚湿热型2型糖尿病患者100例,分为观察组、对照组,每组50例.给予对照组患者常规西医治疗.在对照组治疗方案的基础上,给予观察组患者半夏泻心汤进行治疗,均给予两组患者12周的治疗时间.对比两组患者治疗后临床疗效,治疗前后中医证候积分、血脂、血糖、血清超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平,治疗期间安全性.结果 经比较两组患者治疗后的临床总有效率得出,观察组比对照组更高;治疗后,两组患者血清总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglycerides,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、糖化血红蛋白(glycosylated hemoglobin,HbA1c)、餐后 2 h 血糖(2-hour postprandial blood glucose,2 h PG)、MDA、IL-6、TNF-α 水平、胰岛素抵抗指数(homeostasis model assessment insulin resistance,HOMA-IR)、各项中医证候主症、次症评分与治疗前比较,均呈现降低趋势,其中与对照组比较,观察组处于较低水平;两组患者血清高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、SOD 水平、胰岛 β 细胞功 能指数(homeostasis model assessment-β,HOMA-β)与治疗前比较,均呈现升高趋势,其中与对照组比较,观察组处于较高水平,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 半夏泻心汤联合常规西医治疗脾虚湿热型2型糖尿病效果显著,可改善患者中医证候,调节血糖血脂水平,同时有助于减轻机体氧化应激及炎性损伤.

目的 研究益气清毒化瘀汤加减联合奥沙利铂+卡培他滨(XELOX)方案治疗老年结肠癌的效果及对炎症因子、免疫功能的影响.方法 选取2021年12月—2023年1月在东台市人民医院进行治疗的老年结肠癌患者80例,随机分为观察组和对照组各40例,对照组采用XELOX方案,观察组采用益气清毒化瘀汤加减联合XELOX方案治疗,比较两组患者的中医证候积分、治疗效果、炎症因子水平[C反应蛋白、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)]、免疫功能(CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)、不良反应发生率.结果 (1)治疗前,两组患者中医证候积分接近(P＞0.05);治疗后,两组患者中医证候积分均降低,且观察组较对照组而言更低(P＜0.05);(2)治疗后,观察组患者治疗效果好于对照组(P＜0.05);(3)治疗前,两组患者C反应蛋白、IL-4、IL-6水平比较差异无统计学意义(P＞0.05);治疗后,两组患者上述水平均降低,且观察组较对照组而言更低(P＜0.05);(4)治疗前,两组患者CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平比较差异无统计学意义(P＞0.05);治疗后,两组患者CD4+、CD4+/CD8+水平均升高,且观察组高于对照组(P＜0.05),两组患者CD8+水平均降低,且观察组较对照组而言更低(P＜0.05);(5)治疗后,两组患者不良反应发生率接近(P＞0.05).结论 采用益气清毒化瘀汤加减联合XELOX方案治疗老年结肠癌患者可提高其中医证候积分,并对患者炎症因子水平、免疫功能均起到改善作用,效果显著,安全性高.

目的 观察波动性高血糖和持续性高血糖对2型糖尿病(T2DM)患者血管并发症的影响,探讨其可能的机制.方法 选择2022年11月-2023年5月在徐州医科大学附属医院新诊断的112例T2DM患者,根据平均血糖波动幅度(MAGE)分为持续性高血糖组(52例)与波动性高血糖组(60例),评估大血管、微血管并发症.结果 波动性高血糖组较持续性高血糖组2 h血糖、2 h胰岛素、颈动脉内膜中层厚度(IMT)明显升高(P＜0.05),高敏C反应蛋白(hs-CRP)、尿白蛋白/尿肌酐(UACR)、肱动脉内皮依赖性舒张功能(EDD)、踝肱指数(ABI)明显降低(P＜0.05);冠心病[30.0％(18 例)vs.13.5％(7 例),x2=4.394,P=0.036]和脑梗死发生率[26.7％(16 例)vs.11.5％(6 例),x2=4.039,P=0.044]增高,糖尿病肾病[10.0％(6 例)vs.25.0％(13 例),x2=4.450,P=0.035]及糖尿病视网膜病变发生率[8.3％(5例)vs.23.1％(12例),x2=4.703,P=0.030]降低.多因素logistic回归分析显示:大血管并发症影响因素为2 h血糖、2 h胰岛素、MAGE＞3.9 mmol/L、肱动脉EDD(P＜0.05);微血管并发症影响因素为空腹血糖、糖化血红蛋白、MAGE≤3.9 mmol/L、hs-CRP(P＜0.05).结论 波动性高血糖对T2DM患者大血管并发症影响更明显,可能与内皮功能受损有关,而持续性高血糖对T2DM患者微血管并发症影响更显著,可能与炎性反应有关.

目的 优化基于ASTM F2131-02标准试验的重组人骨形态发生蛋白-2(recombinant human bone morphogenetic protein-2,rhBMP-2)体外生物活性的检测方法,并进行验证.方法 在美国试验材料学会(American Society for Testing Material,ASTM)建立方法的基础上,对检测细胞株(W-20-17及C2C12细胞)、rhBMP-2稀释方式(2及3倍系列稀释)、细胞培养时间(24、36、48、72h)、细胞冷冻温度(-20及-80 ℃)进行优化,并验证优化方法的特异性、中间精密性、线性及耐用性.应用优化方法检测不同厂家来源rhBMP-2的比活性.结果 确定采用C2C12细胞作为检测细胞;最佳rhBMP-2稀释方式为2倍系列稀释;最佳细胞培养时间为48 h;最佳细胞冷冻温度为-80 ℃.rhBMP-2样品中加入杂蛋白(牛血清白蛋白)时,C2C12细胞可特异性响应其中的rhBMP-2诱导作用;2名实验员于2个时间点共12次检测结果的CV为11.7％;rhBMP-2样品的理论效价在70％～142％范围内与实测效价呈良好的线性关系,拟合直线回归方程为:y=0.983 1 x-0.010 3,R2为0.996 4;采用4、11、21代次C2C12细胞检测rhBMP-2比活性的CV为5.2％.采用优化方法重复2次测定不同厂家来源rhBMP-2样品比活性的CV为1.3％～7.5％.结论 优化的方法具有良好的特异性、中间精密性、线性及耐用性,可用于rhBMP-2体外生物活性的检测,为其研究、生产和应用提供了可靠的分析方法.

目的 分析茵栀黄颗粒联合复方甘草酸二铵治疗黄疸型肝炎的效果.方法 选取安庆市立医院怀宁院区2020年1月—2022年12月诊治的黄疸型肝炎患者98例,随机分成对照组与试验组.对照组使用复方甘草酸二铵治疗,试验组联合使用茵栀黄颗粒治疗,对比两组治疗前后的炎症因子水平、肝功能指标、生活质量.结果 (1)治疗后两组白细胞介素(interleukin-6,IL-6)、C 反应蛋白(C-reactive protein,CRP)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平明显降低,其中试验组患者各测定值低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).(2)治疗后两组谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)和总胆红素(total bilirubin,TBIL)指标明显减小,试验组患者各指标小于对照组(P＜0.05).(3)治疗后和随访3个月两组患者的健康调查简表(the MOS 36 item short form health survey,SF-36)评分持续增高,试验组评分结果高于对照组(P＜0.05).结论 茵栀黄颗粒联合复方甘草酸二铵治疗黄疸型肝炎疗效确切,能显著降低炎症因子水平,改善肝功能和生活质量,值得推广.

目的 探究苍龟探穴针法联合体外膈肌起搏器(external diaphragm pacer,EDP)对慢性阻塞性肺疾病急性加重期(acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease,AECOPD)患者的临床疗效及对其肺通气功能、机体炎症的影响.方法 选取2022年1月—2022年12月珠海市第五人民医院接收的AECOPD患者90例,采用随机数表法分为观察组和对照组,各45例.对照组患者行EDP治疗,观察组在对照组基础上联合探究苍龟探穴针法治疗.比较两组治疗前后临床症状评分、肺通气功能、机体炎症以及血气指标变化.结果 治疗后,观察组患者AECOPD临床症状(咳嗽、咯痰、喘息、肺部啰音)评分均低于对照组(P＜0.05),同时最大呼气第一秒呼出的气量容积(forced expiratory volume in 1 second,FEV1)、最大自主通气 量(maximum autonomous ventilation volume per minute,MVV)以及用 力 肺活量(forced vital capacity,FVC)均低于对照组(P＜0.05).治疗后,观察组血清降钙素原(procalcitonin,PCT)及C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)浓度低于对照组(P＜0.05),外周血白细胞计数(white blood cell,WBC)计数低于对照组(P＜0.05).治疗后,观察组患者PaO2高于对照组(P＜0.05),PaCO2低于对照组(P＜0.05).结论 苍龟探穴针法联合EDP可有效改善AECOPD的临床症状和通气功能,缓解机体炎症,提高患者的血气功能,值得在临床中推广.

目的 分析瑞舒伐他汀联合经皮冠状动脉介入术(PCI)治疗冠心病(CHD)的临床效果及对冠脉病变造影评分(SYNTAX)、血脂及炎症指标的影响.方法 采用随机数字表法将我院2022年1月至2022年12月收治的需进行PCI术的82例CHD患者分为2组,各41例.2组均行PCI术,对照组予以阿托伐他汀,研究组予以瑞舒伐他汀治疗.治疗1个月后,对比2组疗效、冠状动脉病变程度[SYNTAX评分、冠状动脉狭窄程度积分(Gensini积分)]、血脂指标[低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、甘油三酯(TG)]、炎症相关指标[C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-8(IL-8)、可溶性细胞间黏附因子-1(sICAM-1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)]、并发症及心血管不良事件发生率.结果 研究组总有效率(90％)高于对照组(73％),差异有统计学意义(P＜0.05);治疗后研究组SYNTAX评分、Gensini积分低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);治疗后研究组LDL-C、TC、TG低于对照组,HDL-C高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);治疗后研究组CRP、IL-8、sICAM-1、MMP-9低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);研究组心血管不良事件及并发症发生率(7％)低于对照组(24％)(P＜0.05).结论 瑞舒伐他汀联合PCI治疗CHD效果确切,可抑制炎症反应,改善血脂指标,减轻冠状动脉病变程度,降低心血管不良事件及并发症发生率.