目的:探讨根皮素调节CC趋化因子配体2(CCL2)-CC趋化因子受体2(CCR2)信号轴对肺癌细胞恶性进展的影响.方法:将A549细胞分为对照组(未进行任何处理的A549细胞)、低剂量根皮素组(500μmoL/L根皮素处理A549细胞)、中剂量根皮素组(750μmoL/L根皮素处理A549细胞)、高剂量根皮素组(1000μmoL/L根皮素处理A549细胞)、高剂量根皮素+GW0742组(1000μmoL/L根皮素与1.OμmoL/L CCL2-CCR2信号通路激活剂GW0742处理 A549细胞).CCK-8法和流式细胞术分别检测A549细胞增殖及凋亡;Transwell法检测细胞迁移和侵袭;Western blot测定CCL2-CCR2信号轴相关蛋白表达.结果:低、中、高剂量根皮素组细胞OD450值、迁移及侵袭数量、CCL2、CCR2蛋白表达均低于对照组(P＜0.05),细胞凋亡率高于对照组(P＜0.05),且呈剂量依赖性.高剂量根皮素+GW0742组细胞OD450值、迁移及侵袭数量、CCL2、CCR2蛋白表达均 高于高剂量根皮素组(P＜0.05),细胞凋亡率低于对照组(P＜0.05).结论:根皮素可能通过调节CCL2-CCR2信号轴介导的免疫反应进而抑制肺癌细胞的恶性进展.

目的:分析IgA肾病（IgAN）伴扁桃体炎患者辅助T细胞22（Th22）细胞及相关细胞因子、趋化因子轴的表达变化，探讨其与临床病理改变的关系。方法:纳入2015年6月至2016年6月在中南大学湘雅医院经肾活检确诊为IgAN的患者为研究对象。按照肾脏病理类型及是否合并扁桃体炎分为IgAN合并扁桃体炎（IgAN+扁桃体炎）组、单纯IgAN（IgAN）组、系膜增生性肾小球肾炎（MsPGN）组和对照组（HC）组。采用流式细胞术检测外周血Th17、Th22细胞及Th22细胞CC型趋化因子受体（CCR）4、CCR6、CCR10表达阳性细胞占比；酶联免疫吸附法（ELISA）检测Th22细胞效应因子白细胞介素（IL）-22，促分化因子IL-1β、IL-6、TNF-α、CC型趋化因子配体（CCL）22、CCL20、CCL27水平。免疫组织化学方法（IHC）检测肾组织中CCL22、CCL20和CCL27的表达。比较分析各组临床病理指标、Th22细胞占比及相关趋化因子表达的差异。结果:本研究共纳入44例IgAN患者，其中14例合并扁桃体炎，另纳入10例MsPGN患者及16例健康人作为对照。各组性别、年龄匹配，血压、肾功能、血脂等生化指标的差异无统计学意义（均 P>0.05）。IgAN组、MsPGN组及IgAN+扁桃体炎组外周血Th22细胞、CCR10表达阳性细胞占比明显高于对照组，血清IL-22、IL-1β、IL-6、TNF-α、CCL20、CCL22、CCL27水平亦较高，且IgAN+扁桃体炎组更为显著（均 P<0.05）。各组肾脏组织CCL20、CCL22、CCL27表达改变与其外周血变化一致。合并血尿的IgAN患者外周血Th22细胞占比显著高于无血尿组患者。病理分型（E1、S1或T1-2）较重的IgAN患者外周血Th22细胞占比显著高于病理分型较轻者（E0、S0或T0）。 结论:Th22细胞及CCL27/CCR10轴参与了IgAN发病过程，扁桃体炎可加重IgAN的临床与病理损伤。

目的:探讨活膝汤含药血清对脂多糖诱导的软骨细胞焦亡的保护作用.方法:构建CCL2过表达质粒,制备活膝汤含药血清,CCK8法检测血清干预软骨细胞的最佳浓度及最佳时间.将培养的软骨细胞分为:空白对照组、模型对照组、12.81 g/kg活膝汤20％含药血清组、核因子κB(NF-κB)抑制组、CCL2过表达组、CCL2过表达+NF-κB抑制组、CCL2过表达+12.81 g/kg活膝汤20％含药血清组;应用ELISA法检测细胞上清中白介素-18(IL-18)、IL-1β的含量;RT-PCR法检测半胱天冬酶-1(Caspase-1)、削皮素D(Gsdmd)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(Nlrp3)mRNA的表达;Western blot法检测半胱天冬酶剪切体-1(Cleaved-Caspase-1)、GSDMD、NLRP3、磷酸化P65(Ser536)(p-P65(Ser536))蛋白的表达;免疫荧光双染检测Caspase-1介导的软骨细胞焦亡水平.结果:与空白对照组比较,模型对照组软骨细胞IL-18、IL-1β含量显著升高,NLRP3、GSDMD、Caspase-1、Cleaved-Caspase-1、p-P65(Ser536)表达显著上调(P＜0.01),软骨细胞焦亡增多;与模型对照组比较,12.81 g/kg活膝汤20％含药血清组及NF-κB抑制组软骨细胞 IL-18、IL-1β 含量显著降低,NLRP3、GSDMD、Caspase-1、Cleaved-Caspase-1、p-P65(Ser536)表达显著下调(P＜0.01),软骨细胞焦亡减少;CCL2 过表达组软骨细胞 IL-18、IL-1β含量显著升高,NLRP3、GSDMD、Caspase-1、Cleaved-Caspase-1、p-P65(Ser536)表达显著上调(P＜0.01),软骨细胞焦亡增多.结论:活膝汤含药血清可能通过抑制CCL2/CCR2/NF-κB信号轴下调Caspase-1介导的软骨细胞焦亡.

目的:探讨高良姜素调节趋化因子配体2(CCL2)/趋化因子受体2(CCR2)通路对自身免疫性甲状腺炎(AIT)大鼠炎症反应的影响.方法:84只大鼠随机分为对照组、模型组、高良姜素低剂量组、高良姜素中剂量组、高良姜素高剂量组、硒酵母片组、高良姜素高剂量+大鼠CCL2重组蛋白(rCCL2)组,每组12只.除对照组外,其他组大鼠均构建AIT模型,造模成功后给药,1次/d,持续8周.ELISA检测大鼠血清中甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、游离甲状腺素(FT4)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)水平及甲状腺组织TNF-α、IL-6、IL-1β水平;HE染色检测大鼠甲状腺组织病理变化并对甲状腺组织进行炎症评分;qRT-PCR检测大鼠甲状腺组织CCL2、CCR2 mRNA表达;Western blot检测大鼠甲状腺组织CCL2、CCR2蛋白表达.结果:与对照组比较,模型组大鼠甲状腺组织病理损伤严重,炎症评分、TGAb、TPOAb、FT4、FT3、TNF-α、IL-6、IL-1β水平、CCL2、CCR2 mRNA及蛋白表达升高(P<0.05);与模型组比较,高良姜素低剂量组、高良姜素中剂量组、高良姜素高剂量组、硒酵母片组大鼠甲状腺组织病理损伤减轻,炎症评分、TGAb、TPOAb、FT4、FT3、TNF-α、IL-6、IL-1β水平、CCL2、CCR2 mRNA及蛋白表达降低(P<0.05);与高良姜素高剂量组比较,高良姜素高剂量+rCCL2组大鼠甲状腺组织病理损伤加剧,炎症评分、TGAb、TPOAb、FT4、FT3、TNF-α、IL-6、IL-1β水平、CCL2、CCR2 mRNA及蛋白表达升高(P<0.05).结论:高良姜素可能通过抑制CCL2/CCR2信号通路抑制AIT大鼠炎症反应.

目的 探讨毛兰素调节CC趋化因子配体2(CCL2)/CC趋化因子受体2(CCR2)轴对关节软骨细胞炎性损伤的影响.方法 将人关节软骨细胞分为control组(正常培养)、LPS组、毛兰素低(10 nmol/L)、中(25 nmol/L)、高(50 nmol/L)剂量组、pcDNA 组(转染 pcDNA3.1)、pcDNA-CCL2 组(转染 pcDNA3.1-CCL2),实时荧光定量 PCR(qRT-PCR)检测细胞中 CCL2、CCR2 mRNA表达水平;MTT法、平板克隆实验与流式细胞仪分别检测细胞增殖和凋亡情况;qRT-PCR和ELISA检测IL-6、IL-1β、TNF-α水平;Western blot法检测细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞抗凋亡因子B细胞淋巴瘤蛋白2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)及CCL2/CCR2通路蛋白表达.结果 与control组比较,LPS组细胞凋亡率、IL-6、IL-lβ、TNF-α mRNA表达水平、CCL2、CCR2 mRNA及Bax、CCL2、CCR2蛋白表达水平显著升高,OD490值、集落形成数、PCNA、Bcl-2蛋白表达水平降低(P＜0.05);与LPS组比较,毛兰素低、中、高剂量组细胞凋亡率、IL-6、1L-iβ、TNF-α mRNA表达水平、CCL2、CCR2 mRNA及Bax、CCL2、CCR2蛋白表达水平逐渐降低,OD490值、集落形成数、PCNA、Bcl-2蛋白表达水平逐渐升高(P＜0.05);过表达CCL2减弱了毛兰素对LPS诱导的关节软骨细胞的影响(P＜0.05).结论 毛兰素可抑制LPS诱导的关节软骨细胞凋亡和炎症反应,其机制可能与抑制CCL2/CCR2通路有关.

目的:研究花旗松素(Taxifolin)对急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞恶性进展的影响及单核细胞趋化蛋白-1(CCL2)/CC趋化因子受体2(CCR2)轴发挥的作用.方法:体外培养ALL-T淋巴细胞CCRF-CEM;CCK-8法检测不同浓度Taxifolin对CCRF-CEM细胞活力影响,筛选本实验用Taxifolin浓度;将CCRF-CEM 细胞分为 control 组、Taxifolin-L 组、Taxifolin-M 组、Taxifolin-H 组、Taxifolin+rCCL2 组;EDU法检测各组CCRF-CEM细胞增殖;流式细胞术检测各组CCRF-CEM细胞凋亡;Trans well检测各组CCRF-CEM细胞侵袭能力;平板克隆形成实验检测各组CCRF-CEM细胞集落形成能力;RT-PCR检测各组CCRF-CEM细胞CCL2、CCR2基因表达水平;Western blot检测各组CCRF-CEM细胞CCL2、CCR2、Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达水平.结果:选择25、50、100 μmol/L三个Taxifolin浓度进行后续实验;与control组相比,Taxifolin-L、M、H组CCRF-CEM细胞凋亡率、Bax、Caspase-3蛋白表达水平显著升高,CCRF-CEM细胞EDU阳性细胞率、侵袭细胞数量、细胞克隆集落数、CCL2、CCR2基因表达水平、CCL2、CCR2、Bcl-2蛋白表达水平均显著性降低,且呈剂量依赖性(P＜0.05);与Taxifolin-H组相比,Taxifolin+rCCL2组CCRF-CEM细胞凋亡率、Bax、Caspase-3蛋白表达水平显著性降低,CCRF-CEM细胞EDU阳性细胞率、侵袭细胞数量、细胞克隆集落数、CCL2、CCR2基因表达水平、CCL2、CCR2、Bcl-2蛋白表达水平均显著性升高(P＜0.05).结论:Taxifolin可能通过抑制CCL2/CCR2轴,从而抑制CCRF-CEM细胞恶性进展.

目的:探讨乌司他丁(UTI)调节CC趋化因子配体2(CCL2)-C-C趋化因子受体2(CCR2)信号轴对胃癌(GC)细胞上皮-间质转化(EMT)和免疫逃逸的影响.方法:qRT-PCR、Western blot分别检测GC组织/细胞中CCL2、CCR2 mRNA及蛋白表达水平;以不同浓度的UTI(0、100、200、400、800 U/ml)干预细胞,MTT法检测细胞增殖情况;将AGS细胞分为control组、UTI组、pcDNA组、pcDNA-CCL2组,平板克隆和Transwell小室分别检测细胞增殖、迁移、侵袭.AGS细胞和CD8+T细胞共培养后,将CD8+T分为T细胞组、共培养组、UTI组、pcDNA组、pcDNA-CCL2组,流式细胞仪检测CD8+T细胞凋亡,ELISA检测CD8+T细胞上清中IFN-γ、IL-2、TNF-α水平;Western blot检测基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimen-tin)、程序性死亡配体1(PD-L1)及CCL2-CCR2信号通路蛋白表达.结果:在GC组织/细胞中,CCL2、CCR2蛋白及mRNA表达水平升高(P<0.05);UTI显著抑制AGS细胞的增殖、迁移、侵袭及EMT,降低AGS细胞中MMP-2、Vimentin、PD-L1、CCL2、CCR2蛋白表达,升高E-cadherin蛋白表达(P<0.05);过表达CCL2可逆转UTI对细胞增殖、迁移、侵袭及EMT的抑制作用;与T细胞组比较,共培养组CD8+T细胞IFN-γ、IL-2、TNF-α水平降低,细胞凋亡率升高(P<0.05);与共培养组比较,UTI组CD8+T细胞IFN-γ、IL-2、TNF-α水平升高,细胞凋亡率降低(P<0.05);与pcDNA组比较,pcDNA-CCL2组CD8+T细胞上述指标变化均显著逆转(P<0.05).结论:UTI可能通过抑制CCL2-CCR2信号通路抑制AGS细胞的EMT和免疫逃逸.

目的 探讨茯苓酸对急性心肌梗死(AMI)大鼠心肌损伤的影响,以及单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1/CCL2)-CC趋化因子受体 2(CCR2)信号轴发挥的作用.方法 采用左前降支结扎法构建AMI大鼠模型,将造模成功大鼠分为模型组,低、中、高剂量茯苓酸组,每组 15 只,另取 15 只大鼠作为假手术组;药物干预 14d后,小动物超声仪检测心功能相关指标变化;ELISA法检测血清炎性因子水平;HE染色检测心肌组织病理损伤;TUNEL染色观察心肌细胞凋亡;Western blot检测心肌组织CCL2、CCR2、Caspase-3 蛋白表达水平.结果 与假手术组相比,模型组大鼠心肌组织结构被严重破坏,有大量炎性细胞浸润,心功能相关指标左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室收缩末期内径(LVESD)、血清中炎性因子IL-6、TNF-α、IL-1β水平、心肌细胞TUNEL阳性率、心肌组织CCL2、CCR2、Caspase-3 蛋白表达水平均显著升高,左心室射血指标(LVEF)、左心室短轴缩短率(LVFS)显著降低(P<0.05);与模型组相比,低、中、高剂量茯苓酸组大鼠心肌组织结构逐渐恢复,炎性细胞浸润减轻,心功能指标LVEDD、LVESD、血清中炎症因子IL-6、TNF-α、IL-1β水平、心肌细胞TUNEL阳性率、心肌组织CCL2、CCR2、Caspase-3蛋白表达水平均显著降低,LVEF、LVFS显著升高,呈剂量依赖性(P<0.05).结论 茯苓酸可能通过调节CCL2-CCR2 信号轴减轻AMI大鼠心肌损伤.

趋化因子配体2(C-C motif chemokine ligand 2,CCL2)及其受体CCR2与肿瘤的发生、发展密切相关.CCL2/CCR2信号轴通过多种机制促进肿瘤进展,一方面CCL2与肿瘤细胞表面的CCR2结合促进肿瘤的生长/存活和转移;更为重要的是CCL2可以招募多种免疫抑制细胞在肿瘤微环境中聚集,抑制免疫细胞的功能和活性,促进肿瘤进展.本文综述了CCL2/CCR2信号轴以及其在肿瘤及肿瘤微环境中的作用,并重点介绍了靶向CCL2/CCR2信号轴药物的临床研究进展,以期深入并全面了解CCL2/CCR2信号轴在肿瘤进展中的作用机制,开发更有效的肿瘤免疫治疗药物.

目的:通过构建牙周炎大鼠模型探讨川陈皮素对牙周炎大鼠炎性损伤的影响及作用机制.方法:采用丝线结扎联合10%蔗糖饮水建立牙周炎大鼠模型;将牙周炎大鼠分为模型组、川陈皮素低剂量组、川陈皮素中剂量组、川陈皮素高剂量组,每组 10 只,另取 10 只大鼠为对照组;川陈皮素低、中、高剂量组分别灌胃25mg/kg、50mg/kg、100mg/kg川陈皮素,对照组、模型组灌胃等量生理盐水.HE染色检测各组大鼠牙周组织病理形态变化;qPCR 检测各组大鼠牙周组织 C-C 趋化因子配体 2(CCL2)、C-C趋化因子受体2(CCR2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6 mR-NA水平;免疫组织化学染色检测各组大鼠牙周组织 CCL2 表达;Western blot 检测各组大鼠牙周组织CCL2、CCR2、TNF-α、IL-1β、IL-6 蛋白表达.结果:牙周炎大鼠模型建立4 周后,与对照组相比,造模大鼠出现牙槽骨吸收、牙根松动有出血现象,表明牙周炎大鼠模型构建成功;与对照组相比,模型组大鼠牙周组织出现牙槽骨吸收、有大量炎性细胞浸润、CCL2 阳性细胞数目增多,牙周组织 CCL2、CCR2、TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA和蛋白水平均显著升高(P<0.05);与模型组相比,川陈皮素低、中、高剂量组大鼠牙周组织炎性细胞浸润逐渐减轻,成纤维细胞数量逐渐增加,CCL2 阳性细胞数目减少,牙周组织CCL2、CCR2、TNF-α、IL-1β、IL-6 水平显著降低,呈剂量依赖性(P<0.05).结论:川陈皮素可能通过抑制CCL2-CCR2 信号轴减轻牙周炎大鼠炎性损伤.