目的:探讨微小RNA(miRNA，miR)-590靶向CCNG2对神经胶质瘤细胞增殖、侵袭和干细胞特性的影响。方法:选取2017年3月至2021年3月南阳市中心医院收集的59例神经胶质瘤和癌旁组织作为研究对象，采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析分析癌旁组织和肺癌组织miR-590表达水平。神经胶质瘤细胞U251分为miRNA对照组、miR-590组和miR-590 KD组，并采用转染试剂转染对照miRNA、miR-590-5p模拟物、miR-590-5p抑制剂，48 h后检测。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和克隆形成实验分析两组细胞增殖能力；采用Transwell实验分析两组细胞的侵袭能力。采用成球实验和流式细胞术分析两组细胞的干细胞特性；采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析miR-590靶基因。采用蛋白质印迹法(Western blot)分析细胞和肿瘤组织靶基因的表达水平。组间比较采用 t检验。 结果:癌旁组织中miR-590-5p表达水平(1.03±0.15)明显低于神经胶质瘤组织(2.25±0.27)，差异有统计学意义( t＝30.640， P<0.05)。对照组细胞48 h吸光度值(2.01±0.15)明显高于miR-590-5p KD组(1.37±0.11)，差异有统计学意义( t＝30.640， P<0.05)。克隆形成实验结果显示，对照组细胞克隆形成数量[(81.33±10.78)个]明显高于miR-590-5p KD组[(36.67±6.71)个]，差异有统计学意义( t＝8.614， P<0.05)。对照组细胞侵袭数量[(122.17±15.13)个]明显高于miR-590-5p KD组[(60.17±7.83)个]，差异有统计学意义( t＝8.913， P<0.05)。对照组细胞SP亚群比例[(3.67±1.04)个]明显高于miR-590-5p KD组[(0.71±0.32)个]，差异有统计学意义( t＝6.669， P<0.05)。对照组细胞成球数量[(32.33±8.09)个]明显高于miR-590-5p KD组[(13.33±2.16)个]，差异有统计学意义( t＝5.557， P<0.05)。CCNG2是miR-590-5p的靶基因。对照组细胞CCNG2蛋白表达水平(0.89±0.08)明显低于miR-590-5p KD组(2.32±0.30)，差异有统计学意义( t＝11.130， P<0.05)。 结论:miR-590靶向CCNG2调节神经胶质细胞的增殖、侵袭和干细胞特性等细胞生物学行为。

目的:探讨1-磷酸神经酰胺转运蛋白(CPTP)对人口腔鳞状细胞癌HSC-3细胞生物学行为的影响,阐明其相关作用机制.方法:体外培养HSC-3细胞,分为对照组和实验组,分别采用pFlag-CMV4和pFlag-CPTP质粒进行转染,采用抗性筛选法构建稳定转染(稳转)CPTP的细胞.采用Western blotting法和免疫荧光法检测2组细胞中CPTP蛋白表达水平,采用克隆形成实验和CCK-8法检测各组细胞中克隆形成数和细胞增殖活性,细胞划痕实验检测2组细胞划痕愈合率,Transwell小室实验检测 2组细胞中侵袭细胞数.小鼠随机分为对照组和实验组,分别注射 pFlag-CMV4 稳转HSC-3细胞和pFlag-CPTP稳转HSC-3细胞,制备小鼠皮下移植瘤模型,检测2组小鼠移植瘤体积和质量.采用生物信息学方法对头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)组织中CPTP差异表达基因进行富集分析.采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测2组细胞中p53、血小板反应蛋白1(THBS1)和细胞周期蛋白G2(CCNG2)mRNA表达水平.结果:与对照组比较,实验组细胞中CPTP蛋白表达量明显增加.与对照组比较,实验组细胞中克隆形成数明显增加(P<0.01),细胞增殖活性和划痕愈合率明显升高(P<0.05或P<0.01),侵袭细胞数明显增加(P<0.01).注射肿瘤细胞2、3和4周,与对照组比较,实验组小鼠移植瘤体积明显增加(P<0.05或P<0.01);注射肿瘤细胞4周,与对照组比较,实验组小鼠移植瘤质量明显增加(P<0.05).生物信息学分析,在HNSCC组织中CPTP的作用可能是通过p53等信号通路介导.与对照组比较,实验组细胞中p53、THBS1和CCNG2 mRNA表达水平明显降低(P<0.01).结论:过表达CPTP能促进HSC-3细胞增殖、迁移、侵袭和成瘤能力,CPTP通过抑制p53信号通路促进口腔鳞状细胞癌HSC-3细胞生长.

目的:研究甲状腺恶性结节超声弹性成像应变率与癌基因、血管新生基因表达的相关性.方法:选择2015年3月~2017年2月期间在我院接受超声检查的甲状腺结节患者,根据细针穿刺活检组织结果判断组织良恶性;进行超声弹性成像并测定应变率比值,进行荧光定量PCR反应并测定癌基因、血管新生基因的m RN A表达量.结果:甲状腺恶性结节的应变率比值显著低于甲状腺良性结节;甲状腺恶性结节中CCNG、RASSF1A的mRNA表达量显著低于甲状腺良性结节,FF3、TPX2、WIP1、Ang2、Tie2、VEGF、VEGFR1、c-met、Survivin的mRNA表达量显著高于甲状腺良性结节;低应变率比值的甲状腺恶性结节中 CCNG、RASSF1A 的 mRNA 表达量显著低于高应变率比值的甲状腺恶性结节, TFF3、TPX2、WIP1、Ang2、Tie2、VEGF、VEGFR1、c-met、Survivin的mRNA表达量高于高应变率比值的甲状腺恶性结节.结论:甲状腺恶性结节超声弹性成像应变率比值的升高与癌基因及血管新生基因表达的变化密切相关.

目的:研究甲状腺良性结节和恶性结节的超声造影特征比较及其与癌细胞生物学行为的相关性.方法:选择在我院手术切除的甲状腺结节患者并根据术后病理分为恶性组和良性组.术前进行超声造影检查并测定峰值强度(PI)、达峰时间(TTP)、平均通过时间(MTT);术后收集结节病灶并测定血管新生分子、增殖分子、凋亡分子的表达量.结果:恶性组患者甲状腺结节病灶PI的水平高于对照组,TTP、MTT的水平低于对照组;恶性组患者甲状腺结节病灶内VEGF、Gal-3、vWF、COX-2、BRAF、MCM7 、XIAP、Survivin的mRNA表达量显著高于对照组且与PI的水平呈正相关,与TTP、MTT的水平呈负相关,RASSF1A、CCNG2、PDCD4、P53、PTEN的mRNA表达量显著低于对照组且与PI的水平呈负相关,与TTP、MTT的水平呈正相关.结论:甲状腺恶性结节的超声造影特征为血供丰富且血流阻力较小,上述特征与血管新生、细胞增殖密切相关.

目的:研究甲状腺恶性结节超声弹性成像应变率与癌基因、血管新生基因表达的相关性.方法:选择2015年3月～2017年2月期间在我院接受超声检查的甲状腺结节患者,根据细针穿刺活检组织结果判断组织良恶性;进行超声弹性成像并测定应变率比值,进行荧光定量PCR反应并测定癌基因、血管新生基因的m RN A表达量.结果:甲状腺恶性结节的应变率比值显著低于甲状腺良性结节;甲状腺恶性结节中CCNG、RASSF1A的mRNA表达量显著低于甲状腺良性结节,FF3、TPX2、WIP1、Ang2、Tie2、VEGF、VEGFR1、c-met、Survivin的mRNA表达量显著高于甲状腺良性结节;低应变率比值的甲状腺恶性结节中CCNG、RASSF1A的mRNA表达量显著低于高应变率比值的甲状腺恶性结节,TFF3、TPX2、WIP1、Ang2、Tie2、VEGF、VEGFR1、c-met、Survivin的mRNA表达量高于高应变率比值的甲状腺恶性结节.结论:甲状腺恶性结节超声弹性成像应变率比值的升高与癌基因及血管新生基因表达的变化密切相关.

目的:探讨甲状腺良恶性结节超声造影参数的差异及其与病灶内血管新生及细胞增殖的相关性.方法:选择在本院筛查出甲状腺结节的患者178例,经细针穿刺病理检查分为甲状腺良性结节组146例,甲状腺癌组32例.两组患者均进行超声造影并获取相关参数,采用荧光定量PCR法检测病灶组织中血管新生及细胞增殖相关基因表达量,采用Pearson检验评估甲状腺癌超声造影参数与恶性分子表达量的相关关系.结果:甲状腺癌组患者A UC、Peak的水平低于甲状腺良性结节组;血管新生相关基因HIF-1α、VEGF、TTF-1、MMP-9、COX-2 mRNA的表达量高于甲状腺良性结节组;细胞增殖相关基因AG490、CCNG2、PP4R1、TBB mRNA 的表达量低于甲状腺良性结节组,BRD4、TPX2 mRNA的表达量高于甲状腺良性结节组.Pearson检验发现,甲状腺癌患者的病灶超声造影参数AUC、Peak水平与血管新生、癌细胞增殖相关基因表达量均直接相关.结论:甲状腺癌病灶超声造影参数水平异常,具体异常程度与肿瘤血管新生、细胞增殖旺盛程度直接相关.

目的 探讨基因组合表达模型作为辐射生物剂量计的可行性.方法 0～8 Gy 60C0 γ射线照射正常人外周血,利用实时荧光定量PCR检测10个辐射敏感基因表达变化,应用逐步回归方法建立基因组合表达模型;双盲法验证模型估算剂量的准确性.结果 照后6和12 h,10个辐射敏感基因的表达水平随受照剂量的增加而增加,均呈现良好的剂量-效应关系(R2=0.61～0.97,P＜0.05);TNFSF4、PHPT1和FDXR基因相对表达量存在较大的个体间差异;照后6h,PCNA、CCNG1、TNFSF4、PHPT1、GADD45A和FDXR建立的基因组合表达模型R2为0.88(F =54.8,P＜0.001);照后12 h,PCNA、CCNG1、TNFSF4、MDM2、GDF15和TNFRSF10B建立的基因组合表达模型R2为0.82(F =42.767,P＜0.001);各时间点基因组合表达模型估算的受照剂量均接近于真实照射剂量.结论 基因组合表达模型具备作为辐射生物剂量计的基本条件.

目的:研究甲状腺癌的超声弹性成像参数与病灶组织中癌细胞生长、新生血管形成的关系.方法:选择在大竹县人民医院接受手术切除并经病理学确诊的甲状腺癌患者作为病例组,另取同期在大竹县人民医院接受超声检查并判断为甲状腺良性肿瘤的患者作为对照组,测定超声弹性成像参数应变率比值以及甲状腺癌组织、甲状腺癌旁组织中癌基因的表达量、血管新生分子的含量.结果:甲状腺癌组织中DMBT1、CCNG2、Bax 的 mRNA 表达量以及 ES的蛋白含量显著低于甲状腺癌旁组织,WIP1、RET/PTC的mRNA表达量以及VEGF、vWF、ANG-1的蛋白含量显著高于甲状腺癌旁组织;应变率比值≥3.14的甲状腺癌组织中DMBT1、CCNG2、Bax 的mRNA 表达量以及ES的蛋白含量显著低于应变率比值<3.14的甲状腺癌组织,WIP1、RET/PTC的mRNA 表达量以及VEGF、vWF、ANG-1的蛋白含量显著高于应变率比值<3.14的甲状腺癌组织.结论:甲状腺癌的超声弹性成像参数应变率比值以3.14为诊断阈值的能够准确评估病灶组织中癌细胞生长、新生血管形成的活力.

目的 检测Cyclin G2(CCNG2)在人食管鳞癌组织中的表达及其与食管鳞癌临床病理参数的关系.方法 用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测28例食管鳞癌新鲜组织及相应癌旁正常食管组织中CCNG2 mRNA的相对表达水平,运用免疫组化方法检测59例食管鳞癌组织中CCNG2蛋白表达情况,并分析CCNG2蛋白表达与食管鳞癌临床病理参数的关系.结果 CC-NG2 mRNA在食管鳞癌及癌旁正常食管组织中都有表达,但在食管鳞癌中的表达水平显著低于正常食管组织.经免疫组化检测,CCNG2蛋白在食管鳞癌组织中表达率为22.03％(13/59),正常食管上皮中CCNG2的蛋白表达率为74.58％(44/59),CCNG2在食管鳞癌组织中的表达水平与食管鳞癌的组织分化程度、TNM分期、浸润程度和淋巴结转移相关(P<0.05),在不同性别和年龄患者中,CCNG2的表达差异无统计学意义(P>0.05).结论 CCNG2 mRNA和CCNG2蛋白在食管鳞癌组织中呈低表达,在食管鳞癌的发生发展及转移过程中可能起了重要作用.

目的 观察甲状腺癌的超声弹性成像参数与病灶组织中癌细胞生长、新生血管形成的关系.方法 随机选择我院进行甲状腺癌手术的患者80例作为观察组,随机选择同期至我院进行甲状腺良性肿瘤治疗患者80例作为对照组,所有患者均给予弹性成像检查.收集患者适量术后甲状腺癌与良性甲状腺肿瘤组织,对DMBT1、CCNG2、Bax、WIP1、RET/PTC等基因进行荧光定量PCR反应,采用Elisa试剂盒测定VEGF、ES、vWF、ANG-1的蛋白含量.观察两组患者中的癌基因表达的变化情况以及血管中新生分子含量的变化,比较观察组患者不同应变率比值下的癌基因表达变化以及血管中新生分子含量变化.结果 观察组应变率比值明显高于对照组,观察组患者的DMBT1、CCNG2、Bax表达均低于对照组,WIP1、RET/PCT表达均高于对照组,观察组患者CEGF、vWF均明显高于对照组,ES、ANG-1均明显低于对照组,应变率比值高于3.14的患者,其DMBT1、CCNG2、Bax表达均低于应变率比值低于3.14的患者,WIP1、RET/PCT表达均高于应变率比值低于3.14的患者,应变率比值高于3.14的患者,其CEGF、vWF均明显高于应变率比值低于3.14的患者,ES、ANG-1均明显低于应变率比值低于3.14的患者.结论 甲状腺超声弹性成像参数应变率比值能够对甲状腺癌患者病灶中的癌细胞生长情况以及新生血管的活力进行准确评估,从而为病情的发展和治疗方案的制定提供临床依据.