当植物遭受昆虫取食、极端天气及人为因素等导致的机械性损伤胁迫后,会迅速在转录及代谢水平上启动一系列的应答机制,引起植物内源激素及次生代谢物含量的变化.该研究以药用模式植物丹参为例,评估机械损伤对药用植物代谢的作用.运用qRT-PCR 及 LC-MS检测叶片损伤刺激下,胁迫响应的茉莉酸类物质(jasmonates,JAs)和丹参酮类成分生物合成基因以及含量的变化情况,得出处理后不同时序叶片与根部在转录和代谢水平上的相关规律,从而探讨丹参对机械损伤胁迫的响应机制.结果显示,机械损伤诱导能够瞬时提高JAs生物合成基因的表达,其中AOC与JAR在诱导后开始上升,在2 h达到最高,AOS与OPR3则在4 h达到最高,与之相应的OPDA、JA及JA-Ile的含量均在2 h达到最高.丹参酮生物合成中二萜合酶基因CPS1与KSL1均在2 h上升至最高,而后修饰CYP450s基因则均在4 h上升至最高,4种丹参酮的含量则均在8 h内呈现持续上升的趋势.该研究为揭示机械损伤对次生代谢积累的研究提供参考,为进一步了解机械损伤胁迫下JAs在增强植物抗性、促进活性成分积累和提高药材品质方面的作用奠定基础.

目的:探讨高度微卫星不稳定（microsatellite instability-high，MSI-H）胃癌的组织学特征及其PD-L1表达对预后的预测价值。方法:收集2014年3月至2018年12月北京大学肿瘤医院行根治性胃癌手术切除和进行4种主要错配修复蛋白（MLH1、PMS2、MSH2、MSH6）免疫组织化学染色的2 472例患者的临床病理资料。对171例表现为错配修复缺陷（mismatch repair-deficient，dMMR）的患者采用聚合酶链反应（PCR）进行微卫星不稳定性检测。以PCR检测结果为标准，对MSI-H胃癌采用免疫组织化学方法进行PD-L1染色。结果:MSI-H胃癌与老年、女性、胃窦、肠型、肿瘤大于5 cm、缺乏淋巴结转移及PD-L1表达阳性有关（均 P<0.05）。PD-L1表达水平联合阳性评分可作为独立的预后危险因素（ P=0.026， HR=8.385，95% CI=1.293~54.367）。虽然未观察到PD-L1表达模式与预后的关系，但PD-L1表达模式“弥漫”与脉管癌栓侵犯（ P=0.007）、浸润深度（ P=0.040）有关，并且MSI-H+PD-L1阳性胃癌中所有发生复发或死亡的患者，PD-L1表达模式均为“弥漫”。此外，胃癌原发灶和淋巴结转移灶的PD-L1表达水平和表达模式有高度的一致性（ P=0.450）。 结论:MSI-H胃癌具有独特的组织学特征。PD-L1表达水平联合阳性评分为MSI-H胃癌患者一个重要的预后预测指标。PD-L1表达模式“弥漫”或为一个预后预测指标。晚期胃癌患者可以通过转移灶活检来获取其PD-L1表达的水平和模式。

本文报道1例新生儿期起病的氨甲酰磷酸合成酶Ⅰ（carbamoyl phosphate synthetase Ⅰ，CPSⅠ）缺乏症，患儿生后3 d出现拒奶、呕吐、反应差，血氨最高514 μmol/L，全外显子测序提示CPSⅠ基因复合杂合变异，经低蛋白饮食、降血氨药物治疗后患儿病情好转，但喂养困难、生长迟缓，于4月龄接受肝移植手术，随访至2岁，智力运动及体格发育正常。

目的:探讨嗅神经母细胞瘤（olfactory neuroblastoma，ONB）基因组特征和肿瘤免疫微环境特点。方法:对2018年5月至2022年10月在北京同仁医院诊断的19例ONB患者，根据Hyams分级系统分为低级别和高级别两组，7例为低级别，12例为高级别，将ONB患者组织标本进行全外显子测序和多重免疫荧光分析。结果:18例ONB鉴定出929个非同义突变，突变频率最高的癌症相关基因是CTNNB1（3/19）和ZNRF3（3/19），突变频率最高的通路是Wnt和RAS通路。中位肿瘤突变负荷（TMB）0.45个突变/Mb（范围为0~3.25），中位肿瘤新抗原负荷（TNB）9.39个新抗原/Mb（范围为0~38.30），中位等位基因突变的肿瘤异质性（MATH）得分为16.95（范围为3.05~117.47）。多重免疫荧光结果显示1例表达细胞程序性死亡配体1（PD-L1；综合阳性评分>1），CD8 +肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）在肿瘤区域浸润的百分比中位数为1.08%。低级别组和高级别组在突变基因、突变通路、TMB、TNB、MATH、PD-L1和CD8 +TIL表达差异无统计学意义（ P>0.05），但CD68 +巨噬细胞在低级别组肿瘤区域和总区域均显著多于高级别组（ P<0.05），M1型巨噬细胞占CD68 +巨噬细胞80.52%。 结论:CTNNB1和ZNRF3是ONB高频突变基因；PD-L1低表达和CD8 +TIL数量低提示ONB可能对免疫治疗不敏感；M1型巨噬细胞在低级别ONB表达显著高于高级别，提示可能参与ONB进展。

目的:探讨延胡索酸水合酶（FH）缺陷型肾细胞癌的细胞程序性死亡配体1（PD-L1）的表达情况、临床病理特征、免疫组织化学表达及分子特征，探寻免疫治疗在FH缺陷型肾细胞癌中的应用前景。方法:对福建医科大学附属第一医院2020年1月至2022年10月收集的6例FH缺陷型肾细胞癌的PD-L1表达情况、临床资料、组织学形态、免疫表型、二代测序基因检测进行总结并随访预后。结果:患者均为男性，年龄37~72岁，平均年龄45.7岁。4例高级别FH缺陷型肾细胞癌病例均可见2种或2种以上的结构混杂存在，以乳头状结构最常见，还可见到腺管状、腺泡状、筛状、巢团状、囊性变、实性结构混杂存在，癌细胞WHO/国际泌尿病理协会（ISUP）核分级为3~4级。2例低级别FH缺陷型肾细胞癌病例表现为巢团状、腺管状排列，嗜酸性、絮状胞质及小的胞质内空泡。6例2-琥珀酸半胱氨酸（2SC）均为强阳性，5例FH表达丢失、GATA3阳性，4例高级别病例肿瘤浸润的CD4、CD8阳性的T淋巴细胞平均值分别是180.3/mm 2、130.5/mm 2，PD-L1联合阳性评分（CPS）分别是20、50、5、30，Ki-67阳性指数分别为20%、20%、10%、30%；2例低级别病例肿瘤浸润的CD4、CD8阳性的T淋巴细胞平均值分别是123.0/mm 2、100.5/mm 2，PD-L1 CPS评分均为1，Ki-67阳性指数均为3%。高通量测序3例检测到FH基因体系突变，2例检测到FH基因胚系突变，1例未测出FH基因突变。 结论:FH缺陷型肾细胞癌以高级别形态常见，低级别形态少见。FH和2SC是诊断FH缺陷型肾细胞癌特征性的免疫组织化学标志物，GATA3阳性对诊断具有提示作用。高级别FH缺陷型肾细胞癌肿瘤浸润的CD4、CD8阳性的T淋巴细胞增加，PD-L1高表达，抗PD-L1免疫治疗将可作为患者的治疗选择。

目的:评估安徽省宿州市艾滋病抗病毒治疗效果，分析治疗失败患者的基因型耐药情况，为调整治疗方案提供科学依据。方法:对宿州市2019年第四季度正在治疗的1 060例艾滋病患者进行随访，检测其CD4 + T淋巴细胞计数和HIV-1病毒载量（viral load，VL），并对VL>1 000 cps/mL的患者进行基因型耐药检测。 结果:1 060例患者最近一次CD4 + T淋巴细胞计数较初始治疗前显著升高（ t=-31.014， P<0.01）)；HIV-1病毒抑制率（VL<1 000 cps/mL）为93.4%（990/1 060），VL>1 000 cps/mL的患者耐药率为49.3%（33/67）；针对非核苷类反转录酶抑制剂（non-nucleoside reverse transcriptase inhibitor，NNRTI）、核苷类反转录酶抑制剂（nucleoside reverse transcriptase inhibitor，NRTI）和蛋白酶抑制剂（protease inhibitor，PI）耐药突变率分别为44.8%（30/67）、20.9%（14/67）和4.5%（3/67）；突变频率最高的位点是M184、K103和V106，均为17.9%（12/67），同时耐NRTI和NNRTI的双重耐药突变达19.4%（13/67），并出现1例同时耐PI、NRTI和NNRTI的多重耐药突变，耐药以3TC/FTC/NVP/EFV为主。 结论:宿州市抗病毒治疗后病毒抑制率较高，但治疗失败人群耐药率较高，且出现多重耐药，建议及时进行病毒载量和基因型耐药检测，为调整治疗方案提供科学依据。

目的:分析1例氨甲酰磷酸合成酶1缺乏症(CPS1D)患儿临床资料及基因检测结果，总结国内外报道儿童病例的相关特点。方法:回顾性分析四川省妇幼保健院收治的1例CPS1D患儿的临床资料、实验室检查、基因检测结果。以"氨甲酰磷酸合成酶1缺乏症"和"carbamoyl phosphate synthetase 1 deficiency"为检索词，分别检索中国知识资源总库、万方数据库和PubMed数据库，检索建库以来至2022年6月发表的文献，并进行文献资料总结。结果:先证者表现为吐奶、呼吸窘迫、抽搐、意识障碍，血氨升高。基因检测： CPS1基因c.2424delT(p.F809Sfs*12)(未报道)和c.1145C>T(p.P382L)(已报道)复合杂合突变，确诊CPS1D。数据库检索获得符合纳入标准的文献14篇，共报道31例CPS1D患者，临床表现多样，缺乏特异性。共统计57个 CPS1基因突变，错义突变最常见(69.8%)。新生儿发病23例，病死率73.9%，基因型、血氨水平对病死率的影响不显著( P>0.05)。 结论:本研究扩大了 CPS1基因突变谱；CPS1D发病率低，临床症状不典型，病死率高，容易延误诊断；提高对CPS1D的认识，有助于早期诊断和干预。

临床应用免疫检查点抑制剂（ICI）为局部进展期胃癌（LAGC）或胃食管结合部腺癌（AGEJ）提供了新的治疗手段，获得了更高的治愈率。通过免疫组织化学、基因检测与分子特征分析，发现对于错配修复缺陷（dMMR）/微卫星高度不稳定（MSI-H）、PD-L1综合阳性评分（CPS）≥5或EB病毒高表达、MSI-H和微卫星稳定（MSS）/TP53阳性的肿瘤患者，在围手术期联合应用ICI可作为标准的治疗方案。深入了解“冷”和“热”肿瘤的免疫反应机制，能帮助更好地筛选ICI治疗获益者；同时可为将无应答的“冷”肿瘤转化为有应答的“热”肿瘤提供理论依据，使无应答患者能受益于ICI免疫治疗。最近的一些临床试验明确地表明，ICI与化疗或放化疗联合，或者ICI联合抗HER-2或抗血管内皮生长因子（VEGF）/VEGF受体（VEGFR）与化疗具有多药协同与互补作用；与单纯化疗相比，联合治疗能明显提高病理完全缓解率、主要缓解率或ypT0N0比例等，并有望改善患者预后。本文总结了近年来在LAGC/AGEJ围手术期联合应用ICI与其他治疗模式的一系列临床试验结果，深入讨论了ICI应用于LAGC/AGEJ新辅助和辅助治疗的现状，探讨了未来新的围手术期免疫联合治疗的可行性。

目的 从毛萼香茶菜中挖掘Ⅱ型二萜合酶并进行功能鉴定.方法 利用转录组测序和生物信息学分析技术从毛萼香茶菜的根、茎、叶、顶芽 4 种组织中挖掘Ⅱ型二萜合酶候选基因,通过 RT-PCR 方法获取候选基因 cDNAs,运用无缝克隆技术构建携带候选基因的表达载体,并基于大肠杆菌异源表达体系及 GC-MS 测定分析技术进行二萜合酶基因的催化功能鉴定.结果 分别从毛萼香茶菜的根、茎、叶、顶芽组织中提取总RNA,经过转录组测序和生物信息学分析获得 4 个Ⅱ型二萜合酶候选基因 IeTPS1、IeTPS2、IeTPS3 和 IeTPS4.利用大肠杆菌异源表达体系对其中的 IeTPS1 和 IeTPS4基因进行功能验证,发现 IeTPS1 能够催化底物香叶基香叶基焦磷酸(GGPP)生成对映-柯巴基焦磷酸(ent-CPP),命名为 IeCPS4;IeTPS4 能够催化底物 GGPP 生成柯巴基焦磷酸(normal-CPP),命名为 IeCPS5.结论 从毛萼香茶菜中筛选并鉴定了两个新的Ⅱ型二萜合酶基因 IeCPS4 和 IeCPS5,其中 IeCPS5 是首个从毛萼香茶菜中发现的专一合成 normal-CPP 的二萜合酶基因,这不仅丰富了毛萼香茶菜的二萜合酶种类,而且为毛萼香茶菜二萜化合物生物合成途径的解析奠定了坚实基础.

目的 评价BRAF抑制剂维莫非尼(vemurafenib)治疗难治性颅咽管瘤(CP)的疗效和不良反应,增加临床用药经验.方法 分析 2 例难治性CP的治疗过程并随访3～5 年,评价药物疗效和不良反应.结合文献,提出CP治疗的新流程.结果 1)2 例成年乳头型CP患者,多次手术和放射治疗难以控制肿瘤,临床处理困难.2)基因检测显示肿瘤存在BRAF-V600E突变.患者接受维莫非尼治疗 6.5～7.5 个月,肿瘤体积缩小 95%～99%.停药后随访3～5 年,残留病灶稳定.3)主要不良反应为皮疹,呈剂量依赖性.4)文献报道 33/34 例患者治疗效果良好,肿瘤体积缩小 50%～100%.结论 BRAF抑制剂维莫非尼能有效治疗BRAF-V600E突变导致的难治性CP,不良反应可耐受.药物治疗或许会改变CP将来的诊治流程.