目的:探讨Zeste基因抑制子12(SUZ12)在宫颈癌组织中的表达及其对宫颈癌细胞增殖、侵袭和转移的影响。方法:选取2019年1月到2022年1月商丘市第一人民医院收治的67例宫颈癌组织和癌旁组织作为研究对象，采用蛋白质免疫印迹(Western blot)分析肿瘤组织和癌旁组织SUZ12蛋白表达水平。将宫颈癌细胞系CaSki分为对照组和SUZ12 KD组，分别采用对照慢病毒和SUZ12短发卡RNA(shRNA)慢病毒感染细胞，筛选稳定细胞系。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和体外移植瘤实验分析两组细胞增殖能力；采用Transwell分析细胞的侵袭能力；采用划痕实验分析细胞迁移能力；采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析SUZ12调控的靶基因表达水平。组间计量数据比较采用t检验。结果:宫颈癌组织中SUZ12蛋白相对表达水平(2.17±0.14)明显高于癌旁组织(0.77±0.09)，差异有统计学意义( t＝36.640， P<0.05)。对照组细胞48 h吸光度( A)值(2.07±0.13)明显高于SUZ12 KD组细胞(1.39±0.10)，差异有统计学意义( t＝10.100， P<0.05)。对照组细胞在体内成瘤的体积[(1 055.70±125.27) mm 3]明显高于SUZ12 KD组细胞[(613.30±76.33) mm 3]，差异有统计学意义( t＝9.537， P<0.05)。对照组细胞在体内成瘤的重量[(5.57±0.52) g]明显高于SUZ12 KD组细胞[(3.28±0.83) g]，差异有统计学意义( t＝7.433， P<0.05)。对照组细胞迁移数量[(142.17±9.45)个]明显高于SUZ12 KD组细胞[(76.50±7.74)个]，差异有统计学意义( t＝13.170， P<0.05)。对照组细细胞划痕愈合率[(87.36±4.95)%]明显高于SUZ12 KD组细胞[(50.68±7.63) mm 3]，差异有统计学意义( t＝9.884， P<0.05)。对照组细胞ROCK1和ROBO1 mRNA表达水平(0.47±0.07、0.54±0.12)明显高于SUZ12 KD组细胞(1.05±0.07、1.14±0.12)，差异有统计学意义( t＝14.750、8.667， P<0.05)。 结论:SUZ12通过调节KLF2和ROBO1基因表达，促进宫颈癌细胞增殖、侵袭和转移等恶性细胞生物学行为。

目的:探讨miRNA-186-3p（miR-186-3p）对子宫颈癌CaSki细胞凋亡、迁移、侵袭的影响及与转化生长因子β（TGF-β）-Smad信号通路的关系。方法:将载有miR-186-3p抑制基因、miR-186-3p模拟物的质粒分别转染至子宫颈癌CaSki细胞，分别为miR-186-3p-I组、miR-186-3p-M组；另将转染空载质粒的CaSki细胞作为对照，为miR-186-3p-C组。采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率，采用Transwell法检测各组细胞迁移和侵袭能力；采用蛋白质印迹法检测各组细胞TGF-β-Smad信号通路相关蛋白表达水平；采用Starbase软件预测miR-186-3p靶基因，并用双荧光素酶报告基因实验进行验证。结果:miR-186-3p-M组细胞凋亡率均低于miR-186-3p-I组和miR-186-3p-C组[（7.5±3.2）%比（13.9±0.7）%、（12.7±0.6）%，均 P<0.05]。miR-186-3p-M组迁移细胞数[（218±25）个比（168±13）个、（175±13）个，均 P<0.001]和侵袭细胞数均多于miR-186-3p-I组和miR-186-3p-C组[（165±21）个比（130±11）个、（142±12）个，均 P<0.001]。miR-186-3p-M组TGF-β、Smad2、Smad3、磷酸化Smad2（p-Smad2）、磷酸化Smad3（p-Smad3）蛋白相对表达量均最低，与另两组比较，差异均有统计学意义（均 P<0.001）。采用Starbase软件预测miR-186-3p与XIST RNA互补结合；双荧光素酶报告基因实验显示，XIST野生型载体+miR-186-3p模拟物质粒共转染的细胞相对荧光素酶活性低于XIST野生型载体+miR-186-3p空载质粒共转染的细胞（ P<0.001）。 结论:miR-186-3p可能直接与XIST RNA结合而下调TGF-β-Smad信号通路活性，进而增强子宫颈癌CaSki细胞凋亡、迁移、侵袭活性。

目的:探讨miRNA-5193（miR-5193）对子宫颈癌Caski细胞顺铂敏感性的影响和机制。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）测定子宫颈癌细胞株C33A、SiHa、Caski和正常子宫颈细胞株Ect1/E6E7中miR-5193的表达水平。将Caski细胞分成对照组（不转染，正常培养）、miR-5193阴性对照（miR-NC）组（转染miR-NC模拟物）、miR-5193组（转染miR-5193模拟物）、miR-NC+顺铂组（10 μg/ml顺铂处理转染miR-NC模拟物的细胞）、miR-5193+顺铂组（10 μg/ml顺铂处理转染miR-5193模拟物的细胞）、miR-5193+顺铂+NC组（10 μg/ml顺铂处理共转染Foxp3阴性对照载体、miR-5193模拟物的细胞）、miR-5193+顺铂+Foxp3组（10 μg/ml顺铂处理共转染Foxp3过表达载体和miR-5193模拟物的细胞）。四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞增殖情况；流式细胞术PI单染法检测细胞周期，Annexin V- FITC/PI双染法检测细胞凋亡；蛋白质印迹法检测细胞CDK2、p27、C-caspase-3蛋白表达。应用生物信息学软件预测miR-5193靶基因，采用荧光素酶报告系统鉴定靶向关系。结果:子宫颈癌C33A、SiHa、Caski细胞中miR-5193相对表达量均低于正常子宫颈Ect1/E6E7细胞（0.56±0.06、0.41±0.03、0.23±0.02比1.00±0.10，均 P<0.05）。与对照组、miR-NC组比较，miR-5193组、miR-NC+顺铂组、miR-5193+顺铂组细胞增殖活性（吸光度值）降低（0.58±0.06、0.59±0.07比0.38±0.04、0.40±0.05、0.23±0.02，均 P<0.05），细胞凋亡率升高[（2.5±0.2）%、（2.7±0.3）%比（12.6±1.2）%、（11.9±1.5）%、（18.9±1.7）%，均 P<0.05]，G 0/G 1期细胞比例升高[（50.4±4.2）%、（51.3±6.3）%比（62.3±3.2）%、（61.9±5.8）%、（71.4±5.4）%，均 P<0.05]，p27、C-caspase-3蛋白表达水平升高，CDK2蛋白表达水平下降。软件预测miR-5193靶基因为Foxp3，并由荧光素酶报告系统确认。与miR-5193+顺铂+NC组相比，miR-5193+顺铂+Foxp3组细胞增殖活性（吸光度值）升高（0.24±0.03比0.65±0.05， t＝21.094， P<0.01），G 0/G 1期细胞比例降低[（71.0±6.4）%比（60.3±4.1）%， t＝4.196， P<0.01]，细胞凋亡率降低[（19.6±1.6）%比（11.5±1.2）%， t＝11.880， P<0.01]，细胞中p27、C-caspase-3蛋白表达水平下降，CDK2、Foxp3蛋白表达水平升高。 结论:体外miR-5193可能通过靶向抑制Foxp3基因提高子宫颈癌Caski细胞对顺铂的敏感性。

目的:探讨二甲双胍(2型糖尿病的一线治疗药物)干预宫颈癌的疗效。方法:体外培养Caski细胞，不同浓度二甲双胍(2.5、5.0、10.0、20.0 nmol/L)干预Caski细胞，设立对照(CON)组，二甲双胍(2.5、5.0、10.0、20.0 nmol/L)干预组。分别采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法、克隆形成实验、流式细胞术、DCFH-DA探针检测二甲双胍对Caski细胞增殖、凋亡、ROS产生的影响。应用蛋白质印迹法(Western blot)检测线粒体功能障碍的特异性蛋白以及腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/p53途径表达。结果:细胞学实验结果显示，CON组和二甲双胍(2.5、5.0、10.0、20.0 nmol/L)干预组的A450值分别为0.98±0.10、0.85±0.10、0.58±0.08、0.46±0.04、0.38±0.03，组间差异有统计学意义( F＝42.36， P<0.01)；CON组和二甲双胍(2.5、5.0、10.0、20.0 nmol/L)干预组的细胞凋亡率依次为(3.85±0.35)%、(8.55±0.62)%、(12.50±1.02)%、(20.56±2.36)%、(25.76±2.45)%，组间差异有统计学意义( F＝56.74， P<0.01)；CON组B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)/B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)(1.00±0.05)，细胞色素C(Cyt C)(1.00±0.04)，裂解的半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)(1.00±0.03)，Cyto Cyt C(1.00±0.03)和Mito Cyt C(1.00±0.05)浓度，与二甲双胍(2.5、5.0、10.0、20.0 nmol/L)干预组比较(2.5 nmol/L组：bax/bcl-2：1.95±0.09，Cyt C：1.45±0.06，cleaved Caspase-3：1.65±0.05，Cyto Cyt C：1.46±0.06，Mito Cyt C：0.72±0.04；5.0 nmol/L组：bax/bcl-2：3.26±0.25，Cyt C：1.86±0.18，cleaved Caspase-3：1.92±0.24，Cyto Cyt C：1.84±0.21，Mito Cyt C：0.65±0.03；10.0 nmol/L组：bax/bcl-2：4.14±0.28，Cyt C：2.25±0.25，cleaved Caspase-3：2.38±0.28，Cyto Cyt C：2.26±0.25，Mito Cyt C：0.53±0.03；20.0 nmol/L组：bax/bcl-2：6.18±0.36，Cyt C：3.65±0.42，cleaved Caspase-3：3.42±0.36，Cyto Cyt C：2.98±0.32，Mito Cyt C：0.42±0.02)，组间差异有统计学意义( P<0.05)；与CON组比较[磷酸化AMPK(p-AMPK)/AMPK：1.00±0.06，p-p53/p53：1.00±0.05]，二甲双胍治疗后p-AMPK/AMPK(2.5 nmol/L组：1.65±0.12；5.0 nmol/L组：1.98±0.23；10.0 nmol/L组：2.32±0.22；20.0 nmol/L组：2.86±0.24)和p-p53/p53蛋白水平(2.5 nmol/L组：1.54±0.11；5.0 nmol/L组：1.86±0.19；10.0 nmol/L组：2.01±0.25；20.0 nmol/L组：2.35±0.25)显著上升( P<0.05)。 结论:二甲双胍治疗激活了AMPK/p53通路，从而抑制Caski细胞活力，提高凋亡细胞百分率和促进ROS生产。

目的:探讨miR-199a-5p对宫颈癌CaSki细胞放射敏感性的影响及潜在机制。方法:体外培养宫颈癌CaSki细胞。采用脂质体Lipofectamine 2000将miR-199a-5p模拟物(miR-199a-5p mimics)转染至宫颈癌CaSki细胞，记为miR-199a-5p组，以转染模拟物对照(mimics control)的CaSki细胞为阴性对照(NC组)，以未转染的CaSki细胞为空白对照(Control组)，各组细胞经X射线照射后，采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组细胞中miR-199a-5p的表达量，通过克隆形成实验和流式细胞凋亡实验检测miR-199a-5p对CaSki细胞放射敏感性和凋亡的影响，使用生物信息学软件预测miR-199a-5p的靶基因，通过双荧光素酶报告基因实验和蛋白免疫印迹(Western blot)验证miR-199a-5p和甲状腺激素受体相互作用因子4(TRIP4)的靶向关系。结果:转染miR-199a-5p mimics后，miR-199a-5p组中miR-199a-5p的表达量显著高于Control组( P<0.05)，经X射线照射后，miR-199a-5p过表达更明显( P<0.05)；过表达miR-199a-5p降低CaSki细胞克隆形成能力( P<0.05)，促进CaSki细胞的凋亡；且过表达miR-199a-5p能够进一步降低放射后细胞的克隆形成，并促进放射后细胞凋亡( P<0.05)；双荧光素酶报告基因实验和Western blot证实了miR-199a-5p能够靶向负调控TRIP4。 结论:miR-199a-5p可通过靶向负调控TRIP4的表达提高宫颈癌CaSki细胞的放射敏感性。

目的:探讨微小RNA(miR)-214-5p靶向SUZ12对宫颈癌细胞增殖和侵袭能力的影响。方法:选取2020年6月到2022年6月商丘市第一人民医院收治的宫颈癌组织和癌旁组织作为研究对象，采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析miR-214-5p表达水平。人宫颈癌细胞株CaSki随机分为对照组和miR-214-5p组。分别采用对照慢病毒和miR-214-5p慢病毒感染建立稳定细胞株。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和BrdU实验分析两组细胞的增殖活性；采用划痕实验分析细胞的迁移能力；采用Transwell分析两组细胞的侵袭能力。通过数据库和双荧光素酶报告基因分析miR-214-5p的靶基因。采用蛋白质免疫印迹(Western blot)分析靶蛋白的表达水平。组间计量数据比较采用 t检验。 结果:癌旁组织中miR-214-5p表达水平(1.37±0.13)明显高于宫颈癌组织(0.56±0.14)，差异有统计学意义( t＝32.110， P<0.05)。对照组细胞miR-214-5p表达水平(1.16±0.08)明显低于miR-214-5p组细胞(2.79±0.18)，差异有统计学意义( t＝19.300， P<0.05)。对照组细胞吸光度( A)值(2.79±0.18)明显高于miR-214-5p组细胞(1.16±0.08)，差异有统计学意义( t＝19.300， P<0.05)。对照组细胞BrdU阳性率[(55.83±4.00)%]明显高于miR-214-5p组细胞[(28.29±3.90)%]，差异有统计学意义( t＝12.080， P<0.05)。对照组细胞划痕愈合率[(80.98±5.36)%]明显高于miR-214-5p组细胞[(47.81±3.11)%]，差异有统计学意义( t＝13.120， P<0.05)。对照组细胞侵袭细胞数量[(124.17±12.22)个]明显高于miR-214-5p组细胞[(72.83±10.78)个]，差异有统计学意义( t＝7.716， P<0.05)。SUZ12是miR-214-5p的靶基因。对照组细胞SUZ12蛋白表达水平(1.10±0.08)明显高于miR-214-5p组细胞(0.46±0.08)，差异有统计学意义( t＝13.730， P<0.05)。 结论:miR-214-5p在宫颈癌组织中呈低表达，通过靶向调控SUZ12蛋白，调控着宫颈癌细胞的增殖、迁移和侵袭过程。

目的:探究甜橙黄酮(Sinensetin,SIN)调节Yes相关蛋白(YAP)/PDZ结合域的转录共刺激因子(TAZ)轴对宫颈癌细胞增殖、凋亡和上皮间质转化的影响.方法:免疫组织化学和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测120例宫颈癌组织、癌旁组织中YAP、TAZ表达.以不同浓度SIN(0、5、10、25、50、100、200 μg/mL)处理宫颈癌细胞,检测细胞活力.将SiHa细胞分为对照(control)组、SIN低、中、高剂量(SIN-L、M、H)组、SIN-H+XMU-MP-1组,EdU检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell小室实验检测细胞迁移和侵袭,Western blot 检测 YAP、TAZ、PCNA、Bax、Bcl-2、N-cadherin、Vimentin、E-cadherin 蛋白表达水平.构建宫颈癌裸鼠模型,分为NC组、SIN组、SIN-H+XMU-MP-1组,测量肿瘤质量与体积,HE染色观察肿瘤组织形态,免疫组化法检测肿瘤组织Ki67、YAP、TAZ蛋白表达.结果:120例宫颈癌组织中YAP阳性率、TAZ阳性率显著升高(P＜0.05);宫颈癌组织中YAP、TAZ mRNA表达水平显著高于癌旁组织(P＜0.05).宫颈癌细胞CaSki、C-33A、HeLa、SiHa细胞活力随着SIN浓度的升高而逐渐降低(P＜0.05),选择SiHa作为后续实验细胞,选择25、50和100 μmol/L的SIN作为后续实验浓度.与对照组相比,SIN-L、M、H组细胞EdU阳性率、迁移细胞数、侵袭细胞数、PCNA、Bcl-2、N-cadherin蛋白表达显著下降,凋亡率、Bax、E-cadherin蛋白表达显著升高(P＜0.05);与SIN-H组相比,SIN-H+XMU-MP-1组细胞EdU阳性率、迁移细胞数、侵袭细胞数、PCNA、Bcl-2、N-cadherin蛋白表达显著升高,凋亡率、Bax、E-cadherin蛋白表达显著降低(P＜0.05).SIN能够抑制肿瘤体积和质量,促进肿瘤组织坏死,降低Ki67、YAP、TAZ阳性表达.结论:SIN能够抑制宫颈癌细胞增殖和上皮间质转化,促进凋亡,其作用机制可能与抑制YAP/TAZ轴有关.

目的 探究纺锤体和动粒相关复合物亚基2(SKA2)在宫颈癌组织中的表达和预后价值,及其对宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响.方法 通过生物信息学数据库及免疫组化SP法分析SKA2在宫颈癌组织中的表达,并分析其表达水平与宫颈癌患者临床病理特征的关系及其预后价值.RT-qPCR检测SKA2在人正常宫颈细胞(HcerEpic)以及宫颈癌细胞(HeLa、SiHa、CaSki、C-33A)中的mRNA表达,选取SKA2表达水平较高的宫颈癌细胞SiHa作为研究对象.构建下调SKA2表达的SiHa细胞模型,并验证其敲低效果,CCK-8法检测细胞增殖能力,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力.结果 宫颈癌组织和细胞中SKA2的mRNA和蛋白表达水平较正常宫颈组织及细胞增高,差异有统计学意义(P<0.05).SKA2高表达与宫颈癌患者的FIGO分期相关.敲低SKA2可抑制宫颈癌SiHa细胞的增殖、迁移和侵袭(P<0.05).结论 SKA2在宫颈癌组织和细胞中表达上调,并能够促进宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭.SKA2的表达水平与宫颈癌的进展相关,SKA2高表达的宫颈癌患者预后较差.

目的 探讨宫颈癌患者血清长链非编码RNA(lncRNA)心脏和神经嵴衍生物表达转录本2反义序列1(HAND2-AS1)表达的临床意义,分析lncRNA HAND2-AS1对宫颈癌Caski细胞增殖、侵袭和迁移的影响机制.方法 采用基因表达交互分析(GEPIA)数据库分析lncRNA HAND2-AS1在宫颈癌组织和正常宫颈组织中的表达情况.选取2019年1月—2021年12月焦作市妇幼保健院宫颈癌患者48例(宫颈癌组)、宫颈上皮内瘤变(CIN)患者48例(CIN组)和健康体检者48名(正常对照组).收集其中14例宫颈癌患者术后癌组织和癌旁组织(距癌组织边缘＞2 cm)样本,同时收集所有研究对象血清样本和临床资料,检测lncRNA HAND2-AS1相对表达量.将宫颈癌细胞系Caski按转染质粒的不同分为过表达组(转染pcDNA3.1-HAND2-AS1)和阴性对照组(转染pcDNA3.1-NC)、干扰组(转染si-HAND2-AS1)和干扰对照组(转染si-NC).采用CCK-8实验、Transwell实验和划痕实验检测细胞的增殖、侵袭和迁移能力,采用免疫印迹法检测细胞内磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)、蛋白激酶B(Akt)和磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)的表达情况.结果 GEPIA数据库分析结果显示,宫颈癌组织lncRNA HAND2-AS1表达显著低于正常宫颈上皮组织(P＜0.05).14例宫颈癌患者癌组织lncRNA HAND2-AS1相对表达量显著低于癌旁组织(P=0.001).宫颈癌组血清lncRNA HAND2-AS1相对表达量显著低于CIN组和正常对照组(P＜0.001),CIN组与正常对照组之间差异无统计学意义(P＞0.05).不同肿瘤大小、国际妇产科学联合会(FIGO)分期和有无淋巴转移的宫颈癌患者之间血清lncRNA HAND2-AS1相对表达量差异均有统计学意义(P＜0.05).过表达组lncRNA HAND2-AS1相对表达量显著高于阴性对照组(P＜0.01),细胞增殖活性、侵袭细胞数、划痕愈合率和p-PI3K、p-Akt蛋白相对表达量均低于阴性对照组(P＜0.05).干扰组lncRNA HAND2-AS1相对表达量显著低于干扰对照组(P＜0.001),细胞增殖活性、侵袭细胞数、划痕愈合率和p-PI3K、p-Akt蛋白相对表达量均显著高于干扰对照组(P＜0.05).过表达组与阴性对照组之间、干扰组与干扰对照组之间PI3K和Akt蛋白相对表达量差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 宫颈癌患者血清lncRNA HAND2-AS1呈低表达,且与病情严重程度有关.lncRNA HAND2-AS1可能通过调控PI3K/Akt信号通路影响宫颈癌细胞的增殖、侵袭和迁移.

目的 探讨环状RNA含普列克底物蛋白同源域的家族M3 成员(PLEKHM3)(circRNA_PLEKHM3)通过调控微小RNA-320(miR-320)/畸变样因子 4(KLF4)轴在宫颈癌细胞上皮间质转化(EMT)行为中的作用与机制.方法 采用实时定量PCR(qRT-PCR)法检测宫颈癌细胞Hela和CaSki中circRNA_PLEKHM3 的表达水平;RNA 荧光原位杂交检测circRNA_PLEKHM3 在人宫颈癌上皮细胞 CaSki中的定位;双荧光素酶报告基因实验检测 circRNA_PLEKHM3 和 miR-320 的靶向关系,以及miR-320 和KLF4 的靶向关系;对CaS-ki细胞过表达circRNA_PLEKHM3;另外设置三组,分别为在过表达 circRNA_PLEKHM3 的基础上过表达 miR-320、沉默KLF4,以及在过表达 miR-320 的基础上沉默 KLF4.qRT-PCR检测 CaSki 中 miR-320 的表达水平;Western blot 检测CaSki细胞中KLF4 和EMT标志物上皮钙黏蛋白(E-cadher-in)、神经钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、基质金属蛋白酶(MMP)-2 和MMP-9 的表达;Transwell实验检测细胞迁移数和侵袭细胞数.结果 circRNA_PLEKHM3 在Hela和CaSki中的表达均降低(P<0.05),其主要定位在细胞质中;双荧光素酶报告基因实验显示miR-320 和circRNA_PLEKHM3 存在靶向关系,KLF4 和 miR-320 存在靶向关系;过表达circRNA_PLEKHM3 抑制miR-320 和N-cadherin、Vim-entin、MMP-2、MMP-9 的蛋白表达,上调E-cadherin的蛋白表达,减少细胞迁移和侵袭数(P<0.05);在过表达circRNA_PLEKHM3 的基础上过表达miR-320 或沉默KLF4 均能够促进miR-320 和N-cadherin、Vimentin、MMP-2、MMP-9 蛋白的表达,上调E-cadherin蛋白的表达,减少迁移和侵袭细胞数(P<0.05);然而在过表达miR-320 的基础上沉默KLF4,KLF4和N-cadherin、Vimentin、MMP-2、MMP-9 蛋白的表达受到抑制,E-cadherin蛋白的表达上调,细胞迁移和侵袭数减少(P<0.05).结论 circRNA_PLEKHM3 过表达可能通过 miR-320/KLF4 轴调控宫颈癌细胞的EMT.