目的:探讨胎膜早破（PROM）孕妇外周血CD 8+CD 25+FoxP3 +调节性T细胞（Treg）表达水平对辅助性T细胞（Th）1/Th2平衡的影响。 方法:选择2019年9月至2020年5月江苏省滨海县人民医院收治的PROM孕妇（PROM组）、正常足月妊娠孕妇（正常妊娠组）及正常未孕女性（未孕组）各30例为研究对象，取各组外周血，流式细胞仪测定CD 8+CD 25+FoxP3 +Treg比例；提取外周血单个核细胞（PBMCs），聚合酶链反应法（PCR）测定叉头翼状螺旋转录因子3（FoxP3） mRNA；Luminex液相芯片法测定Th1相关细胞因子干扰素-γ（IFN-γ）、白细胞介素（IL）-2及Th2相关细胞因子IL-10、IL-4水平；分析CD 8+CD 25+FoxP3 +Treg表达对Th1/Th2平衡的影响。 结果:PROM组、正常妊娠组CD 8+CD 25+FoxP3 +Treg比例及FoxP3 mRNA表达水平低于未孕组[（0.15 ± 0.03）%和　（0.35 ± 0.09）%比（0.47 ± 0.11）%、0.89 ± 0.11和3.15 ± 0.67比3.75 ± 0.23]，PROM组CD 8+CD 25+FoxP3 +Treg比例及FoxP3 mRNA表达水平又低于正常妊娠组，差异均有统计学意义（ P<0.05）。PROM组、正常妊娠组IFN-γ、IL-2水平高于未孕组，IL-4水平低于未孕组，PROM组IFN-γ、IL-2水平又高于正常妊娠组，IL-4水平又低于正常妊娠组，差异均有统计学意义（ P<0.05）。PROM组孕妇外周血CD 8+CD 25+FoxP3 +Treg比例及FoxP3 mRNA表达水平与IFN-γ（ r = - 0.413、- 0.451， P<0.05）、IL-2（ r = - 0.645、- 0.535， P<0.05）呈负相关，与IL-4水平呈正相关（ r = 0.558、0.469， P<0.05）。 结论:PROM孕妇外周血CD 8+CD 25+FoxP3 +Treg比例较低，FoxP3 mRNA表达水平较低，均影响Th1/Th2免疫平衡，引起Th1免疫漂移，可能为PROM发生的相关免疫机制。

目的:检测翼状螺旋转录因子叉头框家族蛋白(FOX) A1在膀胱癌组织及细胞中的表达水平，探讨FOXA1对膀胱癌细胞生物学功能的影响及机制。方法:收集郑州大学第一附属医院2016年1月1日至2020年1月1日膀胱癌根治术石蜡病理92例，癌旁组织79例，采用免疫组织化学检测膀胱癌患者及正常膀胱上皮组织中FOXA1蛋白的表达水平，并分析FOXA1表达与患者临床病理特征的关系。在膀胱癌细胞系5637中转染小干扰RNA(siRNA)-FOXA1，将细胞分为对照组(shctrl)及转染组(shFOXA1)采用蛋白质印迹法(Western blot)验证转染效率。采用荧光细胞增殖实验检测细胞增殖能力，采用Matrigel检测细胞侵袭能力。采用Western blot检测snail、波形蛋白(Vimentin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平，两组间比较采用 t检验。 结果:免疫组化显示FOXA1在膀胱癌中表达水平显著低于正常膀胱上皮组织[0.45(41/92)比0.63(50/79)， χ2＝5.986， P<0.05]，高级别尿路上皮癌、Ⅲ＋Ⅳ期、T3＋T4膀胱癌组织中FOXA1表达水平更低，差异有统计学意义[0.43(21/49)比0.70(30/43)，0.39(13/33)比0.64(38/59)，0.29(6/21)比0.63(45/71)， χ2＝6.713、5.360、7.949， P<0.05]，shFOXA1转染5637细胞系成功后，对照组在3、5 d时细胞增殖数目低于转染组[5637细胞系shctrl比shFOXA1-1为，3 d：(157.67±1.53)个比(420.00±21.52)个；5 d：(421.00±23.00)个比(1 387.01±32.36)个， t＝21.061、39.652， P<0.01；shctrl比shFOXA1-2为，3 d：(157.67±1.53)个比(407.00±16.37)个；5 d：(421.00±23.00)个比(1 493.00±40.73)个， t＝26.673、30.132， P<0.05]。Matrigel实验中对照组侵袭细胞数目低于转染组[5637细胞系shctrl比shFOXA1-1为(151.62±13.77)个比(343.14±20.44)个， t＝21.551， P<0.05；shctrl比shFOXA1-2为(151.62±13.77)个比(407.50±22.50)个， t＝26.422， P<0.05]。Western blot实验显示FOXA1下调组snail、Vimentin表达显著高于对照组(snail：5.24±0.94比1.00±0.09， t＝7.831， P<0.05；Vimentin：5.88±0.48比1.00±0.10， t＝17.141， P<0.05)，FOXA1下调组E-cadherin表达水平显著低于对照组(0.18±0.03比1.00±0.06， t＝22.445， P<0.05)。 结论:FOXA1在膀胱癌组织中异常低表达，可作为抑癌基因在膀胱腺癌发生发展发挥重要作用。

目的:探讨miRNA-5193（miR-5193）对子宫颈癌Caski细胞顺铂敏感性的影响和机制。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）测定子宫颈癌细胞株C33A、SiHa、Caski和正常子宫颈细胞株Ect1/E6E7中miR-5193的表达水平。将Caski细胞分成对照组（不转染，正常培养）、miR-5193阴性对照（miR-NC）组（转染miR-NC模拟物）、miR-5193组（转染miR-5193模拟物）、miR-NC+顺铂组（10 μg/ml顺铂处理转染miR-NC模拟物的细胞）、miR-5193+顺铂组（10 μg/ml顺铂处理转染miR-5193模拟物的细胞）、miR-5193+顺铂+NC组（10 μg/ml顺铂处理共转染Foxp3阴性对照载体、miR-5193模拟物的细胞）、miR-5193+顺铂+Foxp3组（10 μg/ml顺铂处理共转染Foxp3过表达载体和miR-5193模拟物的细胞）。四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞增殖情况；流式细胞术PI单染法检测细胞周期，Annexin V- FITC/PI双染法检测细胞凋亡；蛋白质印迹法检测细胞CDK2、p27、C-caspase-3蛋白表达。应用生物信息学软件预测miR-5193靶基因，采用荧光素酶报告系统鉴定靶向关系。结果:子宫颈癌C33A、SiHa、Caski细胞中miR-5193相对表达量均低于正常子宫颈Ect1/E6E7细胞（0.56±0.06、0.41±0.03、0.23±0.02比1.00±0.10，均 P<0.05）。与对照组、miR-NC组比较，miR-5193组、miR-NC+顺铂组、miR-5193+顺铂组细胞增殖活性（吸光度值）降低（0.58±0.06、0.59±0.07比0.38±0.04、0.40±0.05、0.23±0.02，均 P<0.05），细胞凋亡率升高[（2.5±0.2）%、（2.7±0.3）%比（12.6±1.2）%、（11.9±1.5）%、（18.9±1.7）%，均 P<0.05]，G 0/G 1期细胞比例升高[（50.4±4.2）%、（51.3±6.3）%比（62.3±3.2）%、（61.9±5.8）%、（71.4±5.4）%，均 P<0.05]，p27、C-caspase-3蛋白表达水平升高，CDK2蛋白表达水平下降。软件预测miR-5193靶基因为Foxp3，并由荧光素酶报告系统确认。与miR-5193+顺铂+NC组相比，miR-5193+顺铂+Foxp3组细胞增殖活性（吸光度值）升高（0.24±0.03比0.65±0.05， t＝21.094， P<0.01），G 0/G 1期细胞比例降低[（71.0±6.4）%比（60.3±4.1）%， t＝4.196， P<0.01]，细胞凋亡率降低[（19.6±1.6）%比（11.5±1.2）%， t＝11.880， P<0.01]，细胞中p27、C-caspase-3蛋白表达水平下降，CDK2、Foxp3蛋白表达水平升高。 结论:体外miR-5193可能通过靶向抑制Foxp3基因提高子宫颈癌Caski细胞对顺铂的敏感性。

目的:探讨血必净注射液(简称血必净)与其组分芍药苷对脓毒症大鼠脾脏调节性T细胞(Treg)免疫功能及大鼠生存率的影响。方法:(1)免疫磁珠法分离提纯3只9～12周龄SD雄性大鼠(鼠龄、品系、性别下同)脾脏CD4 ＋CD25 ＋Treg和CD4 ＋T细胞。按照随机数字表法(分组方法下同)将CD4 ＋CD25 ＋Treg分为空白对照组、单纯CD3/CD28组、单纯内毒素/脂多糖(LPS)组、LPS＋血必净组、LPS＋芍药苷组，每组6孔。单纯CD3/CD28组、单纯LPS组、LPS＋血必净组及LPS＋芍药苷组细胞采用加入1.25 μg CD3和2.5 μg CD28的含体积分数10%胎牛血清的RPMI 1640培养基培养24 h后，单纯LPS组、LPS＋血必净组及LPS＋芍药苷组细胞加入1 μg/mL LPS 1 μL，并立即在LPS＋血必净组细胞中加入5 mg/mL血必净1 μL、在LPS＋芍药苷组细胞中加入80 μmol/L芍药苷1 μL，均继续培养72 h。空白对照组细胞加入等体积含体积分数10%胎牛血清的RPMI 1640培养基培养96 h。采用流式细胞术检测CD4 ＋CD25 ＋Treg的细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA－4)及叉头翼状螺旋转录因子3(Foxp3)表达、CD4 ＋CD25 ＋Treg凋亡率，酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测CD4 ＋CD25 ＋Treg培养上清液中白细胞介素10(IL－10)水平。将CD4 ＋T细胞分为空白对照′组、单纯CD3/CD28′组、单纯LPS′组、LPS＋血必净′组、LPS＋芍药苷′组，每组6孔，加入前述相应组处理后CD4 ＋CD25 ＋Treg共培养72 h后，流式细胞术检测CD4 ＋T细胞增殖活性，ELISA法检测CD4 ＋T细胞培养上清液中IL－4水平。(2)将120只大鼠分成假手术组、单纯脓毒症组、脓毒症＋血必净组和脓毒症＋芍药苷组，每组30只。单纯脓毒症组、脓毒症＋血必净组和脓毒症＋芍药苷组大鼠采取盲肠结扎穿孔术构建脓毒症模型，假手术组大鼠单纯开腹模拟手术。脓毒症＋血必净组大鼠术后经尾静脉注射血必净4 mL/kg，2次/d；脓毒症＋芍药苷组大鼠术后经尾静脉注射芍药苷978 μg，2次/d。分别观察并记录术后1、2、3、4、5、6、7 d的4组大鼠生存率，并绘制Kaplan－Meier生存曲线。对数据行单因素方差分析、LSD－ t检验，对生存曲线行Log－rank(Mantel－Cox)检验。 结果:(1)与空白对照组比较，单纯LPS组CD4 ＋CD25 ＋Treg的CTLA－4、Foxp3表达水平明显升高( t＝27.19、17.00， P<0.01)，细胞培养上清液中IL－10水平明显升高( t＝40.76， P<0.01)。与单纯LPS组比较，LPS＋血必净组、LPS＋芍药苷组CD4 ＋CD25 ＋Treg的CTLA－4、Foxp3表达水平明显降低( tLPS＋血必净组＝31.03、11.27， tLPS＋芍药苷组＝5.79、5.64， P<0.01)，细胞培养上清液中IL－10水平明显降低( t＝15.49、4.20， P<0.01)。与空白对照组比较，单纯LPS组CD4 ＋CD25 ＋Treg凋亡率明显下降( t＝6.02， P<0.01)；与单纯LPS组比较，LPS＋血必净组、LPS＋芍药苷组CD4 ＋CD25 ＋Treg凋亡率明显增加( t＝20.32、8.60， P<0.01)。(2)与单纯CD3/CD28′组比较，单纯LPS′组CD4 ＋T细胞增殖率明显降低( t＝22.47， P<0.01)，细胞培养上清液中IL－4水平明显升高( t＝3.51， P<0.01)。与单纯LPS′组比较，LPS＋血必净′组、LPS＋芍药苷′组CD4 ＋T细胞增殖率均明显增加( t＝16.31、11.48， P<0.01)，细胞培养上清液中IL－4水平无明显变化。(3)假手术组、单纯脓毒症组、脓毒症＋血必净组、脓毒症＋芍药苷组大鼠术后7 d生存率分别为100%(30/30)、30%(9/30)、57%(17/30)、47%(14/30)。与单纯脓毒症组比较，脓毒症＋血必净组大鼠术后7 d内生存率明显升高( χ2＝4.34， P<0.05)，脓毒症＋芍药苷组大鼠术后7 d内生存率无明显变化。 结论:血必净及其组分芍药苷均能逆转脓毒症介导的大鼠Treg免疫抑制功能上调及凋亡抵抗，并改善效应性T细胞增殖能力。芍药苷对脓毒症大鼠生存率的改善效应明显弱于血必净。

目的:探讨白细胞介素17(IL－17)修饰的小鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)对异体小鼠皮肤移植的影响及机制。方法:(1)取5只BALB/c小鼠(均为雌性，4～8周龄，性别、鼠龄下同)，处死后取股骨、胫骨和肱骨，采用全骨髓密度梯度离心联合贴壁分离法分离纯化培养BMSC，取第3代细胞行形态学观察，该代细胞经成骨、成脂诱导分化鉴定。第4代细胞经干细胞表面标志物鉴定。取第3～6代BMSC，经终质量浓度50 ng/mL小鼠重组IL－17预处理5 d后，行形态学观察。取IL－17预处理的BMSC和未经IL－17预处理BMSC标记碳花青荧光染料(CM－Dil)，行形态学观察并计算标记率。(2)取45只C57BL/6J小鼠，按随机数字表法分为磷酸盐缓冲液(PBS)对照组13只、单纯BMSC组16只、BMSC＋IL－17组16只。在小鼠皮肤移植术前1 d，单纯BMSC组13只小鼠经尾静脉注射5×10 6个/mL未经CM－Dil标记的BMSC 0.1 mL，另3只小鼠经尾静脉注射5×10 6个/mL CM－Dil标记的BMSC 0.1 mL；BMSC＋IL－17组13只小鼠经尾静脉注射5×10 6个/mL未经CM－Dil标记的IL－17预处理的BMSC 0.1 mL，另3只小鼠经尾静脉注射5×10 6个/mL CM－Dil标记的IL－17预处理的BMSC 0.1 mL；PBS对照组13只小鼠经尾静脉注射0.1 mL PBS。取45只BALB/c小鼠作供体，将前述3组处理后的45只C57BL/6J小鼠作为受体，建立背－背全厚皮移植模型。于移植术后第2天，再次对3组小鼠注射与移植术前1 d一样的等量相应细胞或PBS。于移植术后第7天，分别取单纯BMSC组和BMSC＋IL－17组中注射CM－Dil标记的BMSC和CM－Dil标记的IL－17预处理BMSC的3只小鼠，脱颈处死后采用荧光显微镜观察BMSC的CM－Dil示踪并计数。于移植术后第6天拆除敷料后，从单纯BMSC组注射未经CM－Dil标记的BMSC的13只小鼠和BMSC＋IL－17组注射未经CM－Dil标记的IL－17预处理BMSC的13只小鼠及PBS对照组13只小鼠中选取7只小鼠，记录移植皮片的存活时间。于移植术后第8天，从3组剩余的6只小鼠中分别取3只小鼠进行移植皮片的大体观察，酶联免疫吸附测定法检测小鼠血清中γ干扰素、IL－10、转化生长因子β(TGF－β)的水平，流式细胞仪检测脾脏CD4 ＋CD25 ＋叉头翼状螺旋转录因子p3(Foxp3) ＋调节性T细胞(Treg)比例，行苏木精－伊红染色观察移植皮片的组织形态。于移植术后第14天，取3组剩余3只小鼠同前行组织形态观察。对数据行独立样本 t检验、单因素方差分析、LSD检验。 结果:(1)培养5 d，经IL－17预处理的BMSC与未处理的BMSC形态和大小并无明显差别。(2)CM－Dil标记后，经IL－17预处理的BMSC与未处理的BMSC生长状态均较良好，标记率几乎可达100%。(3)移植术后第7天，单纯BMSC组小鼠皮片及邻近皮下组织CM－Dil标记阳性的BMSC数量为每100倍视野下(6.2±2.6)个，明显少于BMSC＋IL－17组CM－Dil标记阳性的IL－17预处理BMSC的每100倍视野下(15.0±5.3)个( t＝－2.962， P<0.05)。(4)单纯BMSC组和BMSC＋IL－17组小鼠移植皮片的存活时间分别为(13.3±1.2)、(17.0±1.5)d，明显长于PBS对照组的(8.7±0.8)d( P<0.01)，而BMSC＋IL－17组小鼠移植皮片的存活时间明显长于单纯BMSC组( P<0.01)。(5)移植术后第8天，PBS对照组小鼠移植皮片大部分发黑变硬且结痂坏死，单纯BMSC组小鼠移植皮片大部分存活良好，BMSC＋IL－17组小鼠移植皮片均存活良好。(6)移植术后第8天，与PBS对照组相比，单纯BMSC组和BMSC＋IL－17组小鼠的血清中IL－10和TGF－β含量明显升高( P<0.01)，γ干扰素含量明显降低( P<0.01)；与单纯BMSC组相比，BMSC＋IL－17组小鼠的血清中IL－10和TGF－β含量明显升高( P<0.01)，γ干扰素含量明显降低( P<0.01)。(7)移植术后第8天，单纯BMSC组和BMSC＋IL－17组小鼠脾脏CD4 ＋CD25 ＋Foxp3 ＋Treg比例明显高于PBS对照组( P<0.01)，BMSC＋IL－17组小鼠脾脏CD4 ＋CD25 ＋Foxp3 ＋Treg比例明显高于单纯BMSC组( P<0.01)。(8)移植术后第8天，PBS对照组小鼠移植皮片可见大量炎性细胞浸润，表皮、真皮坏死；单纯BMSC组小鼠移植皮片可见局灶性的炎性细胞浸润，仅有轻微的表皮变性；BMSC＋IL－17组小鼠移植皮片皮肤附属器存活完好，同时有血管形成。移植术后第14天，单纯BMSC组小鼠移植皮片可见广泛的炎性细胞浸润，并有较重的表皮变性和局灶性坏死；BMSC＋IL－17组小鼠移植皮片可见局灶性的炎性细胞浸润和轻微表皮变性；PBS对照组小鼠移植皮片已完全坏死。 结论:IL－17可通过提高小鼠BMSC诱导免疫耐受的能力和增强BMSC的归巢能力，最终起到减轻异体皮片移植后免疫排斥反应，延长小鼠移植皮片存活时间的作用。

目的 探讨制霉素片联合康复新液预防阻生智齿拔除术后口腔感染的临床效果及对辅助性T细胞17/调节性T细胞(Th17/Treg)细胞免疫的影响.方法 选取2022年8月-2023年8月衡水市人民医院收治的200例阻生智齿患者为研究对象,根据随机数表法分为研究组100例和对照组100例.比较两组基本资料、口腔感染发生率、口腔菌群变化、Th17/Treg及叉头翼状螺旋转录因子(Foxp3)、维甲酸相关孤核受体γt(RORγt)、白细胞介素-17(IL-17)、转化生长因子β(TGF-β)水平.结果 研究组感染发生率为1.63％,低于对照组的9.09％(P＜0.05);术前两组革兰阴性菌、革兰阳性菌、螺旋体细菌数量比较,无统计学差异,术后7 d研究组革兰阴性菌、螺旋体数量低于对照组,革兰阳性菌数量高于对照组(P＜0.05);术前两组Th17、Treg、Th17/Treg、Foxp3、RORγt、IL-17、TGF-β水平比较,无统计学差异,术后7 d研究组Th17、Th17/Treg、RORγt、IL-17、TGF-β水平低于对照组,Treg、Foxp3水平高于对照组(P＜0.05).结论 制霉素片联合康复新液可以减少阻生智齿拔除术后患者口腔感染发生率,维持口腔菌群稳态,调节Th17/Treg细胞免疫平衡,提高患者抗菌抗感染能力.

目的 比较枯芩、条芩提取物对湿热型溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)大鼠模型辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)细胞因子及转录因子维甲酸相关孤儿受体(ROR-γt)/叉头翼状螺旋转录因子3(Foxp3)表达的影响.方法 50只健康SD大鼠随机分为5组:正常组、模型组、枯芩组、条芩组和美莎拉嗪组,每组10只.采用高脂高糖饲料喂养+高度白酒灌胃+5%葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)联合诱导法,建立湿热型UC大鼠模型;各组分别于造模第1天开始灌胃给药,枯芩组、条芩组给药剂量均为5.25 g·kg-1·d-1,美沙拉嗪组给药剂量为0.266 g·kg-1·d-1,正常组、模型组灌服等体积生理盐水.连续给药28 d.给药结束后,麻醉大鼠,腹主动脉取血,分离血清,Elisa法检测大鼠血清白介素-6(IL-6)、IL-17A、IL-10、转化生长因子-β1(TGF-β1)水平;分离脾脏和结肠组织,采用流式细胞术检测脾脏Th17、Treg细胞比例,计算Th17/Treg比值;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测结肠组织ROR-γt、Foxp3 mRNA表达水平;免疫蛋白印迹(western blot)法检测结肠组织ROR-γt、Foxp3 蛋白表达水平.结果 与正常组比较,模型组大鼠血清IL-6、IL-17A、脾脏Th17细胞比例、Th17/Treg、结肠组织ROR-γt mRNA和蛋白表达水平均显著增加(P＜0.01),血清IL-10、IL-35、TGF-β1、脾脏Treg细胞比例、结肠组织Foxp3 mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P＜0.01);给药28 d后,与模型组比较,各给药组大鼠血清IL-6、IL-17A、脾脏Th17细胞比例、Th17/Treg、结肠组织ROR-γt mRNA和蛋白表达水平出现不同程度的降低(P＜0.05或P＜0.01),血清IL-10、IL-35、TGF-β1、脾脏Treg细胞比例、结肠组织Foxp3 mRNA和蛋白表达水平出现不同程度的升高(P＜0.05或P＜0.01);与枯芩组比较,条芩组、美沙拉嗪组在降低IL-6、IL-17A,增加IL-10、IL-35、TGF-β1 水平,调节ROR-γt mRNA和蛋白表达方面(P＜0.05或P＜0.01)均优于枯芩组.结论 枯芩、条芩可能通过调控转录因子ROR-γt、Foxp3表达,恢复Th17/Treg免疫失衡,抑制炎症反应,从而保护肠道黏膜屏障受损,发挥治疗湿热型UC的作用.

目的 研究益气解毒复方对实验性自身免疫性重症肌无力(Experimental autoimmune myasthenia gravis,EAMG)大鼠胸腺中自身免疫调节因子(Aire)及转录因子维甲酸相关核孤儿受体(ROR-γt)/叉头翼状螺旋转录因子3(Foxp3)相关炎症因子表达的影响.方法 通过免疫诱导注射鼠源性AchR-α亚基97-116肽段复制EAMG模型,分为正常组、模型组、阳性对照组(强的松)及益气解毒复方高、中、低剂量组,每组10只.观察大鼠行为学及Lennon评分,检测血清转化生长因子-β1(TGF-β1)、白细胞介素-6(IL-6)水平,Western blot检测EAMG大鼠胸腺组织中Aire和Foxp3的表达,RT-PCR检测各组大鼠胸腺组织中RORγt的表达情况.结果 与治疗前相比,各药物组Lennon分级评分显著降低;与强的松组相比,益气解毒复方各剂量组Lennon评分无明显差异(P>0.05).RT-PCR结果,模型组胸腺内RORγt mRNA相对表达量明显高于正常组(P<0.05),各药物组胸腺中RORγt mRNA相对表达量明显低于模型组(P<0.05).Western blot结果,与正常组比较,模型组Aire和Foxp3蛋白的表达量均显著降低(P<0.05);与模型组比较,各药物组大鼠胸腺中Aire和Foxp3蛋白的表达量均显著升高(P<0.01).ELISA结果,模型组大鼠血清IL-6含量明显高于正常组(P<0.01),而TGF-β1含量明显低于正常组(P<0.01);给药后,各药物组IL-6含量明显降低,TGF-β1含量明显升高(P<0.01).结论 益气解毒复方能改善EAMG大鼠肌无力症状,其作用机制可能通过上调Aire蛋白表达,调节免疫炎症反应,影响Th17/Treg分化,从而调控ROR-γt/Foxp3免疫平衡发挥调节自身免疫反应的作用,可能是其治疗MG的作用机制之一.

目的 观察参附注射液对大鼠失血性休克(HS)致肺损伤的影响并探讨潜在机制.方法 选择SPF级健康雄性SD大鼠36 只,16～17 周龄,体重400～600 g.采用随机数字表法将大鼠分为三组:假手术组(SH组)、失血性休克组(HS组)和参附注射液组(SF组),每组 12 只.SH组麻醉后仅分离出右股静脉和股动脉,不行动静脉置管,HS组和SF组制备HS大鼠模型.HS组经静脉导管进行液体复苏,复苏液为所失自体血加 1.5 倍失血量的复方氯化钠注射液与生理盐水 10 ml/kg,SF组复苏液为所失自体血加 1.5 倍失血量的复方氯化钠注射液与参附注射液10 ml/kg,灌注时间约 60 min.于术后24、48 h随机处死6 只大鼠,取肺组织检测湿重与干重比(W/D),采用ELISA法检测白细胞介素-6(IL-6)、IL-17、IL-10、转化生长因子-β(TGF-β)浓度,采用PCR法检测肺组织视黄酸相关孤核受体γt(RORγt)、叉头翼状螺旋转录因子3(Foxp3)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)mRNA表达量,采用Western blot法检测RORγt、Foxp3、HIF-1α、水通道蛋白 1(AQP1)和AQP5 蛋白含量,肺组织行HE染色后在光镜下观察病理学改变并行肺损伤评分.结果 与术后24h比较,术后48hSF组肺组织W/D、IL-6和IL-17 浓度、RORγt和HIF-1α mRNA表达量及蛋白含量、肺损伤评分均明显降低(P＜0.05),IL-10 和TGF-β浓度、Foxp3 mRNA表达量及蛋白含量、AQP1 蛋白含量均明显升高(P＜0.05).与SH组比较,术后 24、48 h HS组和SF组W/D、IL-6、IL-17、IL-10 和TGF-β浓度、RORγt、Foxp3 和HIF-1α mRNA表达量及蛋白含量、肺损伤评分均明显升高(P＜0.05),AQP1、AQP5 蛋白含量明显降低(P＜0.05),光镜下可见肺泡结构破坏,肺泡间质充满大量水肿液,其间浸润着大量炎性细胞.与HS组比较,术后 24、48 h SF组W/D、IL-6和IL-17 浓度、RORγt和HIF-1α mRNA表达量及蛋白含量、肺损伤评分明显降低(P＜0.05),IL-10 和TGF-β浓度、Foxp3 mRNA表达量及蛋白含量、AQP1 和AQP5 蛋白含量均明显升高(P＜0.05),光镜下可见肺泡结构紊乱改善,水肿程度减轻,炎性细胞数量减少.结论 参附注射液可调节促炎因子IL-6、IL-17 与抗炎因子IL-10、TGF-β平衡,升高肺组织AQP1、AQP5 蛋白含量,降低肺组织W/D和肺损伤评分,减轻HS大鼠肺损伤,机制可能与调节HIF-1α-RORγt/Foxp3 平衡有关.

目的 研究Th17、Treg细胞检测在小儿EB病毒(EBV)感染中的临床意义.方法 回顾性选取2021年1月至2023年1月泸州市人民医院收治的60例EBV感染患儿作为研究组,同时选取同一时期入院进行体检的60名健康儿童作为对照组.采用流式细胞仪测定外周血T淋巴细胞内的Th17、Treg细胞,并采用酶联免疫吸附抗体双夹心法测定相关特征性细胞因子[转化生长因子-β(TGF-β)、白细胞介素17(IL-17)]水平;同时,采用RT-PCR法测定Th 17表达孤核受体(RORγt)mRNA、Treg表达叉头翼状螺旋转录因子(Foxp3)mRNA表达水平.比较两组患者的外周血Treg细胞表达率、Th17细胞表达率、TGF-β、IL-17水平与RORγt mRNA、Foxp3 mRNA相对表达水平.结果 研究组患儿外周血Th17细胞表达率为(1.39±0.42)％,明显高于对照组[(0.82±0.19)％],外周血Treg细胞表达率为(3.48 ±0.84)％,明显低于对照组[(6.07±1.25)％],差异均有统计学意义(P＜0.05).研究组患儿外周血RORγt mRNA相对表达水平为(7.96±3.09)×10-5,明显高于对照组[(4.19±2.07)×10-5],外周血Foxp3 mRNA相对表达水平为(3.79±1.25)×10-4,明显低于对照组[(15.89±7.51)×10-4],差异均有统计学意义(P＜0.05).研究组患儿血清TGF-β 水平为(58.58±12.83)ng/L,明显低于对照组[(8.81±3.97)ng/L],IL-17 水平为(22.09±10.28)ng/L,明显高于对照组[(80.14±8.95)ng/L],差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 EBV感染相关病症发生及发展中Th17、Treg细胞发挥着重要作用,增大Th17、Treg细胞及其相关炎症因子监测力度可为EBV感染患儿的疾病情况及疗效评估提供参考依据.