目的:探讨二烯丙基三硫化物（DATS）对人胃癌细胞叶酸受体α（FRα）表达的影响及相关调控机制。方法:选择人胃癌细胞株BGC823、AGS，用10、20、40、80 μmol/L DATS处理BGC823细胞48 h，5、10、20、40 μmol/L DATS处理AGS细胞48 h，以6 μmol/L组蛋白去乙酰化酶（HDAC）抑制剂曲古抑菌素A（TSA）处理细胞作为表观遗传研究的阳性对照，以未经DATS处理的细胞作为阴性对照。采用流式细胞术检测DATS诱导胃癌细胞凋亡情况。在DATS处理BGC823、AGS细胞48 h后，换无DATS细胞培养液培养不同时间，检测FRα蛋白表达变化。采用6 μmol/L TSA或40 μmol/L DATS处理BGC823细胞和AGS细胞，蛋白质印迹法检测FRα、HDAC1和HDAC2以及组蛋白H3赖氨酸9位点乙酰化修饰（H3K9ac）和组蛋白H4赖氨酸5位点乙酰化修饰（H4K5ac）蛋白表达水平。应用BGC823细胞接种BALB/c裸鼠，建立移植瘤模型，DATS组裸鼠腹腔注射10 mg/kg DATS 16 d后，提取荷瘤组织蛋白，进行靶蛋白表达的检测；对照组注射等量0.9% NaCl溶液。结果:BGC823和AGS细胞经梯度浓度DATS处理后细胞FRα蛋白表达均呈剂量依赖性上调（ F＝65.68， P<0.01； F＝26.65， P<0.01）。撤除DATS后，BGC823和AGS细胞FRα蛋白表达逐渐降低并恢复至初始水平（ F＝74.57， P<0.01； F＝30.92， P<0.01）。随着DATS处理浓度的增加，BGC823、AGS细胞凋亡率均增加（ F＝32.95， P<0.01； F＝38.97， P<0.01）。BGC823、AGS细胞经TSA处理后FRα蛋白表达分别上调约4.5倍（ t＝-12.62， P<0.01）和3.6倍（ t＝-10.00， P<0.01）。分别经40、20 μmol/L DATS作用后，BGC823和AGS细胞FRα蛋白表达水平上调（均 P<0.01），HDAC1、HDAC2的表达受抑制（均 P<0.01），H3K9ac和H4K5ac的乙酰化修饰水平升高（均 P<0.01）。裸鼠荷瘤实验显示，给药后第16天，DATS组移植瘤体积小于对照组[（214±39）mm 3比（577±98）mm 3]，差异有统计学意义（ t＝4.86， P<0.01）。与对照组相比，DATS组移植瘤组织FRα蛋白表达上调约2倍（ t＝-5.29， P<0.01），HDAC1和HDAC2蛋白表达水平均下调（ t＝9.36， P<0.01； t＝9.88， P<0.01）。 结论:DATS以剂量依赖和可逆性方式上调人胃癌BGC823、AGS细胞FRα蛋白表达，其机制可能与DATS影响肿瘤细胞组蛋白乙酰化修饰有关。

目的:探讨二烯丙基硫化物（DAS）对百草枯（PQ）中毒所致大鼠急性肺损伤的作用机制。方法:于2016年5月，将成年清洁级雄性Wistar大鼠32只，按随机数字表法分为对照组、模型（PQ）组、DAS治疗组及地塞米松（DXM）治疗组，每组8只。一次性灌胃PQ溶液（70 mg/kg）制备PQ中毒大鼠模型；制模前后分别经腹腔注射DAS 100 mg/kg（DAS治疗组）、生理盐水（对照组和PQ组）及DXM 1 mg/kg（DXM治疗组）。24 h后处死大鼠，观察肺组织损伤程度并进行病理学评分；测定肺组织诱导型一氧化氮合酶（iNOS）表达；分离获取肺泡巨噬细胞并培养，取其上清液测定NO含量；测定大鼠肺泡巨噬细胞中iNOS mRNA表达。结果:与对照组比较，PQ组大鼠肺组织病理损伤评分和iNOS表达明显增加，并且肺泡巨噬细胞分泌NO含量及iNOS mRNA表达明显增加，差异均有统计学意义（ P<0.05）。与PQ组比较，DAS治疗组和DXM治疗组大鼠肺组织病理损伤评分和iNOS表达明显降低，肺泡巨噬细胞分泌NO含量及iNOS mRNA表达明显降低，差异均有统计学意义（ P<0.05）。DXM治疗组和DAS治疗组间上述指标差异均无统计学意义（ P>0.05）。 结论:DAS可能对PQ中毒大鼠的急性肺损伤具有保护作用。

目的:探讨二烯丙基一硫（DAS）对正己烷中毒大鼠周围神经损伤的干预效果。方法:成年雄性Wistar大鼠68只，随机选取50只分为5组：空白对照组、DAS对照组（100 mg/kg·bw）、正己烷模型组、DAS低剂量干预组（50 mg/kg·bw）、DAS高剂量干预组（100 mg/kg·bw）。正己烷染毒建立大鼠周围神经损伤模型，使用不同剂量的DAS进行干预，监测大鼠的行为学改变及吡咯加合物变化，并进行血清吡咯加合物的代谢分析，评价干预效果。另选18只大鼠随机分配到正己烷模型组、DAS低剂量干预组、DAS高剂量干预组中，每组各6只，作为卫星组，于第4周进行血清吡咯加合物的代谢动力学研究。结果:从第2周开始，与空白对照组比较，正己烷模型组、DAS低剂量干预组、DAS高剂量干预组大鼠体重均降低，差异均有统计学意义（ P<0.01）。在第7周实验终点，与正己烷模型组比较，DAS高剂量干预组体重增加（ P<0.05），DAS低剂量干预组体重差异无统计学意义（ P>0.05）。正己烷模型组、DAS低剂量干预组、DAS高剂量干预组大鼠依次在染毒第2、3、5周开始出现步态异常。在实验终点，与空白对照组比较，正己烷模型组、DAS低剂量干预组、DAS高剂量干预组大鼠步态评分均增高（ P<0.01），正己烷模型组、DAS低剂量干预组大鼠转棒潜伏期均缩短（ P<0.01）。与DAS对照组比较，DAS高剂量干预组大鼠转棒潜伏期差异无统计学意义（ P>0.05）。与正己烷模型组比较，DAS低剂量和DAS高剂量组大鼠转棒潜伏期均增加，差异均有统计学意义（ P<0.01）。与空白对照组比较，正己烷模型组、DAS低剂量干预组大鼠的平均神经传导速度均提高，差异均有统计学意义（ P<0.01）。与空白对照组比较，DAS对照组和DAS高剂量干预组神经传导速度差异均无统计学意义（ P>0.05）。与正己烷模型组比较，DAS低剂量和高剂量干预组大鼠神经传导速度均提高，差异均有统计学意义（ P<0.01）。在第7周实验终点，与空白对照组比较，正己烷模型组、DAS低剂量干预组、DAS高剂量干预组大鼠血清、尿、毛发吡咯加合物浓度均升高（ P<0.01），DAS对照组大鼠血清、尿、毛发吡咯加合物浓度差异均无统计学意义（ P>0.05）。在第7周实验终点，与DAS低剂量干预组比较，DAS高剂量干预组大鼠血清、尿、毛发吡咯加合物浓度均降低，差异均有统计学意义（ P<0.05）。大鼠血清吡咯加合物在9~12 h达到峰值，之后开始下降。与正己烷模型组比较，DAS低剂量和高剂量干预组大鼠血清吡咯加合物的半衰期变短、曲线下面积减少，差异均有统计学意义（ P<0.05）。 结论:DAS可能拮抗正己烷引起的大鼠周围神经病变。

目的:探讨二烯丙基一硫（Diallyl sulfide，DAS）对苯诱导大鼠细胞遗传毒性损伤的保护效果。方法:于2018年9月，选取SPF级大鼠60只，适应性喂养5 d后，按体重随机分为6组，对照组、DAS组、苯模型组、苯+DAS低剂量组、苯+DAS中剂量组、苯+DAS高剂量组，每组10只。苯+DAS低中高各剂量组和DAS组分别以40、80、160、160 mg/kg DAS剂量灌胃染毒，对照组和苯模型组给予等体积玉米油。2 h后，苯模型组和苯+DAS各剂量组给予苯（1.3 g/kg）-玉米油混合液（体积分数50%），对照组和DAS组给予等体积玉米油。1次/d，连续4周。收集样品，用于后续指标检测。结果:与对照组比较，苯模型组大鼠外周血白细胞计数（WBC）降低65.06%、淋巴细胞比例降低、微核率（‰）增加（ P=0.003、0.000、0.000），BMCs中γH2AX平均荧光强度和相对荧光强度分别增加32.69%、32.64%（ P=0.001、0.008），PBLs中γH2AX平均荧光强度和相对荧光强度分别增加397.70%、396.26%（ P=0.000、0.003）；与苯模型组比较，苯+DAS低中高各剂量组大鼠WBC计数均增加（ P=0.000、0.003、0.006），微核率（‰）分别降低（ P=0.000、0.000、0.000）；与苯模型组比较，苯+DAS高剂量组BMCs中γH2AX平均荧光强度和相对荧光强度降低明显（ P=0.000、0.000），苯+DAS高剂量组PBLs中γH2AX平均荧光强度和相对荧光强度降低明显（ P=0.000、0.000）。 结论:DAS能有效拮抗苯诱导的大鼠细胞遗传毒性损伤。

目的:观察大蒜素有效成分二烯丙基化三硫(DATS)对感染根管粪肠球菌生物膜的作用.方法:选取60颗健康单根管恒牙,45颗建立粪肠球菌感染根管模型.分为4组(n=15):阴性对照组(未感染组)、DATS组、氢氧化钙组和阳性对照(无抗菌处理)组.二倍稀释法测定DATS对粪肠球菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC).分别于实验第1天、第3天和第7天,取根管内层牙本质粉末,置于2mL BHI中培养72 h,电子比浊仪读取肉汤上层液体浊度.使用SPSS 26.0统计软件进行数据分析.结果:DATS对粪肠球菌的MIC和MBC(μg/mL)分别为2 560和5 120.第1天,DATS组、氢氧化钙组、阳性对照组与阴性对照组浑浊度,DATS组小于氢氧化钙组(P＜0.05);第3天时,DATS组与阴性对照组浑浊度无统计学差别(P=0.454),已基本杀灭细菌;第7天时,氢氧化钙糊剂组与阴性对照组有统计学差别(P＜0.05),不能完全杀灭细菌.各时间点阳性对照组浑浊度最高.结论:DATS能够有效杀灭或抑制感染根管中的粪肠球菌.

目的 探讨二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)是否增强 DJ-1(protein/nucleic acid deglycase,蛋白/核酸去糖化酶)过表达人胃癌SGC7901细胞对5-FU(5-fluorouracil,5-氟尿嘧啶)的敏感性.方法 实验分为Control组、DADS组、VCR(Vincristine,长春新碱)组、VCR+DADS 组、DJ-1 组、DJ-1+DADS组;MTT检测DADS对5-FU抑制细胞增殖的影响;流式细胞术检测DADS对细胞凋亡的影响;qRT-PCR、Western blot、免疫荧光检测DADS对耐药相关基因表达的影响.结果 DADS增强5-FU对VCR耐药细胞和DJ-1过表达细胞增殖的抑制作用;DADS诱导VCR耐药细胞凋亡;DADS下调DJ-1表达、诱导DJ-1过表达细胞凋亡;过表达DJ-1 上调 P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)、Bcl-2、XIAP(X 连锁凋亡抑制蛋白),下调caspase-3表达;DADS降低DJ-1过表达细胞和VCR耐药细胞P-gp、Bcl-2、XIAP,升高caspase-3表达.结论 DADS能增强DJ-1过表达细胞对5-FU的敏感性,与其拮抗DJ-1介导的P-gp、Bcl-2、XIAP上调、caspase-3下调有关.

目的:探讨二烯丙基二硫(DADS)对人胃癌MGC803细胞侵袭与上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transformation,EMT)的影响及其机制.方法:体内外实验分为MGC803细胞组与DADS处理组.MTT、划痕实验与侵袭实验检测DADS对增殖、迁移与侵袭的影响.Western Blot检测LIMK1-Cofilin1通路与EMT相关蛋白表达.相差显微镜观察MGC803细胞形态改变.裸鼠实验检测DADS对移植瘤的作用.结果:MTT显示,DADS可呈时间依赖性抑制MGC803细胞增殖(P＜0.05).划痕实验显示,DADS组细胞迁移距离(59.9±1.9)μm较MGC803组(127.1±2.0)μm明显缩短(P＜0.01).侵袭实验显示,DADS 组穿膜细胞(30.0±2.6)个较MGC803组(48.3±2.5)个明显减少(P＜0.01).Western Blot显示,DADS作用6 h、12 h、24 h、48 h 后,MGC803细胞LIMK1、p-LIMK1与p-Cofilin1(P＜0.001),Vimentin(P＜0.001)与MMP-9(P＜0.001)分别呈时间依赖性下调,而E-cadherin(P=0.001)与TIMP-3明显上调(P＜0.001).相差显微镜显示,DADS处理后,纤维母细胞样细胞减少,异型性显著降低.裸鼠实验显示,DADS组移植瘤较MGC803细胞组生长缓慢(P＜0.05),DADS组移植瘤重量较MGC803细胞组降低,抑瘤率为60.19％(P＜0.001),Ki-67、Vimentin、Snail和CD34阳性表达均降低,E-cadherin表达增加.结论:DADS可通过LIMK1-Cofilin1通路体内外抑制MGC803细胞侵袭与EMT.

目的 探讨细胞色素P450 家族成员2E1(CYP2E1)介导酒精性心肌病心肌纤维化的作用及可能的机制.方法 将心脏成纤维细胞分为:对照组(control)、酒精组(ethanol,100 mmol/L)、二烯丙基硫醚组(diallyl sulfide,DAS,CYP2E1 抑制剂,100 μmol/L)及酒精+DAS组(ethanol+DAS);利用激光共聚焦显微镜技术检测心脏成纤维细胞活化为肌成纤维细胞的标志蛋白α-SMA,应用Western blotting检测成纤维细胞中CYP2E1 的蛋白表达水平,以及由成纤维细胞生成的细胞间质Ⅰ型胶原(Collagen Ⅰ)水平和具有调控纤维化的重要细胞因子TGF-β1 的水平.将心脏成纤维细胞分为4 组:对照组(control)、肿瘤坏死因子β1 组(TGF-β1,10 ng/ml)、DAS组(100 μmol/L)及TGF-β1+DAS组.利用激光共聚焦显微镜技术检测心脏成纤维细胞活化为肌成纤维细胞的标志蛋白α-SMA.结果 与对照组相比,酒精组心脏成纤维细胞CYP2E1、α-SMA及Collagen Ⅰ蛋白表达水平都显著升高(P＜0.01);与酒精组相比,酒精+DAS组酒精对心脏成纤维细胞的上述效应被显著抑制(P＜0.05).同时,与对照组相比,酒精组心脏成纤维细胞TGF-β1 蛋白水平显著升高(P＜0.01);与酒精组相比,酒精+DAS组心脏成纤维细胞TGF-β1 蛋白的水平未受显著影响(P＞0.05).与对照组相比,TGF-β1 组α-SMA表达水平显著升高(P＜0.01);与TGF-β1 组相比,TGF-β1+DAS组α-SMA的表达水平显著降低(P＜0.01).结论 酒精通过促进TGF-β1 蛋白水平增加,导致CYP2E1 蛋白水平升高,刺激心脏成纤维细胞活化成为肌成纤维细胞,并促进细胞外基质生成,最终导致心脏纤维化.

目的 探讨二烯丙基二硫(DADS)通过RORα/β-catenin信号对人胃癌MGC803 细胞迁移侵袭与上皮-间质转化(EMT)的影响.方法 MGC803 细胞实验分为MGC803 组、DADS组、SR1078 组、SR1078+DADS组.MTT检测细胞增殖能力;细胞划痕和Transwell实验分别检测细胞迁移与侵袭能力.Western blotting与免疫荧光检测RORα/β-catenin信号与EMT相关分子表达情况,免疫共沉淀检测RORα蛋白与β-catenin蛋白结合能力,相差显微镜观察细胞形态改变.结果 与MGC803 组比较,DADS组、SR1078 组细胞增殖能力分别呈时间依赖性降低(P<0.05);细胞迁移与侵袭能力降低(P<0.05);RORα蛋白与E-cadherin明显上调(P<0.05),而核内β-catenin、转化生长因子-β1、Rac1 与Vimentin表达下调(P<0.05);RORα与β-catenin结合明显减少(P<0.05);长梭形细胞减少,异型性降低(P<0.05).SR1078+DADS组的上述指标结果更明显(P<0.05).结论 DADS通过RORα/β-catenin信号抑制人胃癌MGC803 细胞增殖、迁移侵袭与EMT,提示DADS与SR1078 的作用相似.

目的:探讨二烯丙基三硫化物(diallyl trisulfide,DATS)抑制缝线诱导的大鼠角膜新生血管(corneal neovascularization,CNV)的生长情况,检测大鼠新生血管化角膜中VEGF、p-AKT的表达量,初步探讨其抑制CNV的可能机制.方法:缝线法诱导大鼠CNV模型,随机分为A组:含DMSO的生理盐水对照组(10只);B组:25μmol/L DATS治疗组(10只);C组:50μmol/L DATS治疗组(10只);D组:100μmol/L DATS治疗组(10只);E组:200 μmol/LDATS治疗组(10只).缝线后第7d裂隙灯下观察各组CNV的生长情况并计算面积.缝线后第14d取各组大鼠角膜组织行HE染色,光镜下观察各组角膜病理组织形态,并采用RT-PCR法检测VEGF mRNA的表达情况,Western-blot法检测VEGF、p-AKT蛋白表达情况.结果:C、D、E组的CNV面积分别与A组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).HE切片显示,与A组相比,B、C、D组角膜水肿、新生血管、炎症细胞浸润情况逐渐减轻.与A组相比,B、C、D、E组的VEGF mRNA的表达水平均降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).与A组相比,C、D、E组的VEGF、p-AKT蛋白的表达逐渐下降,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:DATS能够抑制缝线诱导的大鼠CNV的形成,其机制可能与抑制VEGF的表达及使得p-AKT的失活有关.