目的:研究小檗碱对皮肤鳞状细胞癌（cSCC）-A431裸鼠移植瘤的体积、重量、细胞增殖及凋亡的影响，探索小檗碱抑制cSCC的可能机制。方法:培养A431细胞，于20只裸鼠背部皮下注射A431细胞悬液建立cSCC移植瘤裸鼠模型。接种第15天，将荷瘤裸鼠随机平均分为4组：低、中、高剂量组裸鼠腹腔分别注射10、20、25 mg/kg小檗碱溶液，对照组腹腔注射生理氯化钠溶液，每日1次，连续给药35 d。分别于给药前、给药第7、14、21、28、35天检测移植瘤体积。实验结束后，处死裸鼠并随即剥离瘤块称重，计算肿瘤生长抑制率。移植瘤行组织病理检查，免疫组化检测Ki67表达水平，TUNNEL染色检测移植瘤组织中凋亡细胞数，荧光定量PCR和Western印迹法分别检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、caspase-3和Ezrin mRNA和蛋白的表达。多组间比较采用单因素方差分析，各组与对照组比较采用Dunnett- t检验。 结果:随小檗碱剂量升高和作用时间延长，肿瘤生长曲线逐渐变平缓，各小檗碱组肿瘤生长受到不同程度的抑制，其中高剂量组肿瘤生长抑制作用最明显。小檗碱低、中、高剂量组肿瘤生长抑制率分别为31.05%、66.68%、76.49%，瘤重均显著低于对照组（ t = 4.07、6.33、7.26，均 P < 0.01）。移植瘤组织病理检查显示，随小檗碱剂量的增加，肿瘤细胞坏死程度和范围增加。免疫组化显示，随小檗碱剂量的增加，Ki67阳性细胞逐渐减少。此外，低、中、高剂量组Ki67阳性细胞数均显著低于对照组（均 P < 0.01），而凋亡细胞数均显著高于对照组（ P < 0.05或< 0.01）。4组Bax、Bcl-2、caspase-3、Ezrin mRNA及蛋白表达差异均有统计学意义（均 P < 0.01）。其中，小檗碱低、中、高剂量组Bcl-2 mRNA的表达均显著低于对照组（均 P < 0.01），中、高剂量组Bcl-2蛋白表达显著低于对照组（均 P < 0.01）；高剂量组Bax mRNA及中、高剂量组caspase-3 mRNA的表达均显著高于对照组（ P < 0.05或< 0.01），而低、中、高剂量组Bax、caspase-3蛋白表达量均显著高于对照组（均 P < 0.01）；仅高剂量组Ezrin mRNA表达显著高于对照组（均 P < 0.01），而低、中、高剂量组Ezrin蛋白表达均显著低于对照组（均 P < 0.01）。 结论:小檗碱可抑制cSCC-A431裸鼠移植瘤细胞的增殖并促进凋亡，从而一定程度抑制cSCC-A431裸鼠移植瘤的生长，其机制可能与小檗碱上调Bax、caspase-3的表达，同时下调Bcl-2、Ezrin的表达有关。

目的 探究雷公藤红素(Celastrol)对DNCB致敏诱导特应性皮炎(atopic dermatitis,AD)小鼠组织及HaCaT细胞中Ezrin表达的影响.方法 取BALB/c小鼠,随机分为Control、DNCB 组、Celastrol 25 μg、50 μg、75 μg 治疗组、Dex组,每组8只;HaCaT细胞用TNF-α诱导,并用1μmol·L-1 Celastrol及Ezrin siRNA治疗.测厚仪测量小鼠耳部及背部皮肤厚度,取小鼠脾及淋巴结观察其变化.采用HE及甲苯胺蓝染色法观察小鼠炎症细胞浸润及肥大细胞脱颗粒情况.利用流式细胞仪检测小鼠淋巴结中IL-4及TNF-α水平,酶联免疫吸附剂测定小鼠血清中IL-4、TNF-α、IgE水平,HaCaT细胞上清液中IL-4、IL-5及IL-13的表达.Western blot检测皮肤组织P-Ezrin、Ezrin的表达.结果 Celastrol明显抑制小鼠耳部及背部皮肤组织肿胀程度,减轻炎症细胞浸润及肥大细胞脱颗粒情况,降低小鼠血清中IgE及血清、淋巴结中IL-4、TNF-α含量并减少的Ezrin活化.Ezrin siRNA治疗后,HaCaT细胞上清液中IL-4、IL-5及IL-13的表达得到恢复.结论 Celastrol可能是通过调节Ezrin的活化实现可改善AD.

ERM蛋白家族(包括ezrin、radixin、moesin)在细胞形态、迁移和信号转导中发挥着至关重要的作用.Ezrin是ERM蛋白家族的成员之一,是幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)感染宿主所致细胞毒性的重要介质,通过ezrin磷酸化可以调节其与肌动蛋白细胞骨架的相互作用,进而对细胞形态产生显著影响.本文综述了 ezrin蛋白在H.pylori感染引发的结节性胃炎中的重要性,探讨了 ezrin蛋白的结构及其功能、信号通路及磷酸化与结节性胃炎的关系,为以ezrin蛋白作为潜在的治疗靶点对结节性胃炎的防治提供新思路.

S100 钙结合蛋白 P(S100P)属于 S100 家族的钙结合蛋白,具有典型的 EF-手性结构,于 1992 年首次从胎盘中纯化.研究表明,S100P 在肿瘤中表达异常,与多种肿瘤密切相关.它可以参与各种信号通路,如NF-κB、β-catenin 和 FAK/Src/AKT 通路;还可以与晚期糖基化终末产物受体、埃兹蛋白、整合素 α7 等许多其他受体或配体相互作用,从而影响肿瘤的生物学行为.此外,S100P 在癌症治疗与肿瘤耐药等方面也发挥着重要作用.本文仅就 S100P 在肿瘤发生发展、诊断和治疗中的作用进行综述.

目的:探讨白术内酯Ⅰ通过SGLT1/NHE3通路治疗腹泻的机制.方法:Caco-2细胞建立体外肠道吸收模型,将细胞分别设为空白对照组、抑制剂(SGLT1抑制剂根皮苷、P38MAPK抑制剂SB203580、Ezrin抑制剂NSC668394)组、白术内酯Ⅰ组、白术内酯Ⅰ+抑制剂组,采用2-NBDG测定白术内酯Ⅰ对Caco-2细胞葡萄糖摄取的影响;Western Blot 法检测 SGLT1、p-P38MAPK、p-MAPKAPK2、p-AKT2、p-Ezrin、MLCK、p-MLC、NHE3 等蛋白表达,荧光定量PCR检测SGLT1、MLCK、NHE3 mRNA表达.结果:白术内酯Ⅰ促进Caco-2细胞葡萄糖摄取,上调SGLT1、NHE3、MLCK的表达;此外,白术内酯Ⅰ增加了MLCK和P38MAPK/Ezrin信号通路中的蛋白磷酸化.结论:白术内酯Ⅰ可激活SGLT1促进Caco-2细胞葡萄糖摄取,通过P38MAPK/Ezrin信号通路上调其下游靶点NHE3和MLCK促进水钠吸收是其治疗腹泻的机制之一.

背景与目的:笔者前期研究发现埃兹蛋白(Ezrin)与YAP蛋白在胃癌组织中表达升高,且与患者不良预后密切相关.因此,本研究在胃癌细胞中进一步分析两者的关系与作用.方法:将胃癌细胞分别用Ezrin特异性siRNA序列(si-Ezrin)转染、YAP激动剂(HY-101299B组)处理、si-Ezrin转染+HY-101299B处理,以转染无关siRNA序列的胃癌细胞为阴性对照.随后分别用CCK-8法及平板克隆实验检测细胞的增殖活力、Transwell实验检测细胞的侵袭能力,并用qPCR和Western blot检测各组细胞中YAP及其下游靶分子的mRNA及蛋白的表达.结果:与阴性对照组比较,转染si-Ezrin的胃癌细胞的增殖能力明显减弱,细胞中YAP及其下游分子(Mst、WW45、Lats1、Lats2、TEAD)的mRNA与蛋白水平表达明显下调,而HY-101299B处理的胃癌细胞上述指标均呈反向变化(均P＜0.05);转染si-Ezrin同时加HY-101299B处理,两者的上述作用部分相互抵消.转染si-Ezrin与HY-101299B对胃癌的侵袭能力均无明显影响(均P＞0.05).结论:Ezrin在胃癌中起了致癌因子的作用,机制可能与其激活YAP通路促进胃癌细胞的增殖有关.

目的 观察淫羊藿苷(ICA)对激素抵抗型肾病综合征(SRNS)大鼠PODXL/Ezrin及凋亡蛋白Caspase-3、Bax、Bcl-2表达的影响,探讨其减轻足细胞损伤的作用机制.方法 采用盐酸阿霉素注射法建立大鼠SRNS模型,将大鼠分为空白组、模型组、激素组、ICA组和联合组,各给药组分别予相应药物灌胃,连续6周.CCB法检测24 h尿蛋白(24-UTP)含量,全自动血液生化分析仪检测血清白蛋白(ALB)、血肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)含量,Masson染色观察肾小球基底膜及足细胞形态结构,Western blot检测肾组织PODXL、Ezrin、Caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白表达,TUNEL染色观察肾组织细胞凋亡情况.结果 与空白组比较,模型组大鼠体质量减轻,24-UTP含量升高,血清ALB含量减少,SCr、BUN含量增加;肾小球基底膜沉积物增多,足细胞肿胀、变性、增生;肾组织Bcl-2、PODXL、Ezrin蛋白表达降低,Caspase-3、Bax蛋白表达升高,细胞凋亡增加,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01).与模型组比较,ICA组和联合组大鼠体质量增加,24-UTP含量减少,联合组大鼠血清ALB含量增加,SCr、BUN含量减少;各给药组大鼠肾小球基底膜及足细胞病理结构有不同程度改善;ICA组和联合组大鼠肾组织PODXL、Ezrin、Bcl-2蛋白表达升高,联合组大鼠肾组织Caspase-3、Bax蛋白表达降低,细胞凋亡减少,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01).结论 ICA可缓解SRNS足细胞损伤,其机制与抑制足细胞凋亡、恢复足细胞结构及完整性有关.

目的 探讨NSCLC患者膜突蛋白(Ezrin)、膜结构伸展刺突蛋白(Moesin)表达及其临床意义.方法 选取NSCLC患者120 例为研究对象,所有对象均同意术中留取病灶组织标本及癌旁组织.分析Ezrin和Moesin蛋白在NSCLC组织、癌旁组织中表达,及其与性别、年龄、组织学类型、临床分期、淋巴结转移、吸烟史、分化程度等指标的关系,并记录随访12 个月的生存情况.结果 NSCLC组织Ezrin、Moesin阳性表达率均显著高于癌旁组织,差异具有统计学意义(χ2 =26.696,P =0.000;χ2 =28.254,P =0.000).Ezrin、Moesin在不同临床分期、淋巴结转移中比较,差异均具有统计学意义(P＜0.05).Ezrin、Moesin阳性表达在不同性别、年龄、组织学类型、分化程度方面比较,差异无统计学意义(P＞0.05),且Ezrin、Moesin阳性表达与吸烟史无关(P＞0.05).随访 1 年Ezrin、Moesin阳性表达患者其生存率均显著低于对应阴性表达者(χ2 =5.099,P =0.024;χ2 =12.485,P =0.000).Ezrin、Moesin蛋白表达之间呈正相关关系(γ =0.527,P =0.005).结论 Ezrin和Moesin在NSCLC组织中均呈现高表达,均与NSCLC临床分期、淋巴结转移存在关系,通过联合检测上述指标可用于预测患者预后,具有一定指导意义.

Ezrin属于ezrin-radixin-moesin(ERM)家族成员,是连接质膜(PM)和细胞骨架的连接蛋白,在介导肿瘤的侵袭和转移过程中发挥主要作用.近年研究表明Ezrin参与调节免疫细胞功能,在T细胞中,Ezrin调节免疫突触的形成,通过控制B细胞信号传导和蛋白转运调节体液免疫.此外,Ezrin还可将囊性纤维化跨膜电导调节剂(CFTR)与TLR4信号联系起来,协调巨噬细胞的抗菌免疫反应,与L-选择素结合促使中性粒细胞功能转换和黏附.以上作用表明Ezrin在炎症性疾病中发挥作用.本文主要就Ezrin在炎症及炎症性疾病中的最新研究进展进行总结.

目的:通过观察乳腺癌组织中泛素特异性蛋白酶 20(USP20)、Ezrin表达变化及其与临床病理特征之间的关系,探讨乳腺癌组织中USP20 与Ezrin表达的相关性及临床意义.方法:免疫组织化学及免疫荧光方法用于检测USP20 与Ezrin阳性细胞的表达变化以及细胞定位,并分析它们与乳腺癌患者临床病理特征的关系;shRNA-USP20 慢病毒转染乳腺癌MDA-MB-231 细胞,通过荧光定量PCR与Western Blot检测USP20 基因及蛋白的过表达水平,然后观察过表达USP20 后Ezrin基因和蛋白的表达变化.结果:USP20 与Ezrin在乳腺癌组织中的阳性表达率分别为69.6%和78.5%,而在邻近相对正常组织中的表达均为阴性,与邻近相对正常组织相比,乳腺癌组织中USP20 与Ezrin阳性表达均显著增加,差异均具有统计学意义(P<0.01);USP20 与Ezrin阳性表达均主要在乳腺癌组织细胞质中,少量在细胞核.两者在乳腺癌组织中的阳性表达与患者的年龄、性别、WHO分级、分子分型和有无淋巴结转移均无关;shRNA-USP20 慢病毒转染乳腺癌MDA-MB-231 细胞后,USP20 蛋白及mRNA的表达均明显增加(P<0.01),过表达USP20后Ezrin的mRNA表达不变,蛋白表达显著增加(P<0.01).结论:乳腺癌组织中USP20 和Ezrin表达呈正相关关系,且过表达USP20 后Ezrin蛋白表达显著增加,USP20 和Ezrin可能共同促进乳腺癌发生发展,其机制可能与USP20 去泛素化作用有密切关系,这为临床治疗、预后及进一步研究提供重要的实验依据.