目的 研究miR-148a-3p对软骨细胞炎症因子、细胞凋亡和软骨细胞表型的影响.方法 2周龄大耳兔处死后提取原代软骨细胞.为了探究炎症对软骨细胞相关标志物及其胞内miR-148a-3p表达水平的影响,建立IL-1β-诱导的OA细胞模型,软骨细胞分为control组和IL-1β组.为了探究miR-148a-3p对软骨细胞相关标志物及细胞凋亡相关因子表达水平的影响,软骨细胞分为 blank 组、IL-1 β 组、IL-1 β+NC 组、IL-1 β+mimics 组、IL-1 β+inhibitor 组.qRT-PCR 检测 IL-1 β、SOX9、COL-Ⅱ、ACAN、MMP-13 mRNA水平;采用免疫蛋白印迹法检测软骨相关标志物MMP-13、COL-Ⅱ、ACAN、SOX9以及细胞凋亡相关因子Bax、Caspase-3、Bcl-2蛋白的表达水平.采用ELISA法检测细胞上清中IL-6和IL-10的含量.结果 ①与control组比较,IL-1 β组细胞MMP-13蛋白表达升高(P＜0.05),COL-Ⅱ和ACAN蛋白表达降低(P＜0.05);miR-148a-3p表达水平升高(P＜0.000 1);②与blank组比较,IL-1β组细胞上清液IL-6水平升高,IL-10水平降低(P＜0.05);MMP-13 mRNA和蛋白表达升高(P＜0.05),COL-Ⅱ和ACAN mRNA和蛋白表达降低(P＜0.05).与IL-1β组比较,IL-1 β+mimics组细胞上清液IL-6水平、MMP-13 mRNA 和蛋白、Bax、Caspase-3 蛋白表达升高(P＜0.05);上清液 IL-10 水平、SOX9、COL-Ⅱ、ACAN mRNA 和蛋白,以及Bcl-2蛋白表达降低(P＜0.05).IL-1β+inhibitor组和IL-1β组间上述指标差异无统计学意义(P＞0.05).结论 IL-1β诱导体外软骨细胞中miR-148a-3p表达上调,可导致软骨细胞炎症性改变、细胞凋亡、软骨细胞表型改变和细胞外基质(ECM)降解.

目的 探讨完带汤加减结合磷霉素钙颗粒治疗小儿外阴阴道炎(脾虚湿困证)的临床疗效.方法 选择2021年6月—2022年4月在保定市中医院接受治疗的72例小儿外阴阴道炎患者,采用随机数表法分为试验组和对照组,各36例.对照组给磷霉素钙颗粒口服治疗,试验组给予完带汤加减结合磷霉素钙颗粒口服治疗.比较两组临床疗效、白细胞介素 2(interleukin-2,IL-2)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素 13(interleukin-13,IL-13)、中医症状积分、临床症状缓解情况及并发症发生情况.结果 治疗后,两组总有效率比较,差异有统计学意义(P＜0.05);治疗后,两组IL-2、TNF-α、IL-13水平均降低,试验组降低更为明显(P＜0.05);治疗后,两组阴道灼热感、外阴瘙痒、头晕及口干尿赤评分水平均降低,试验组降低更为明显(P＜0.05);治疗后,试验组外阴瘙痒、外阴疼痛及白带异常改善时间均显著低于对照组(P＜0.05);治疗期间不良反应主要有恶心呕吐、头晕、头痛,两组发生率比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 在小儿外阴阴道炎中完带汤加减结合磷霉素钙颗粒治疗有较好的效果,可有效改善患者炎症水平.

支气管哮喘是一种常见的慢性呼吸系统疾病,以慢性气道炎症和气道高反应性为其特征,临床常表现为反复发作的喘息、呼吸急促、胸闷、咳嗽等症状.中重度哮喘患者症状反复发作,如不能得到有效控制常导致肺功能下降.近年来生物靶向药物作为一种新的用于治疗重度哮喘的生物制剂,为哮喘患者提供了更多的治疗选择.目前可以在临床应用的主要有抗IgE单克隆抗体、抗IL-4受体单克隆抗体、抗IL-5受体单克隆抗体等.度普利尤单抗作为生物靶向治疗药物在治疗中重度支气管哮喘患者时疗效显著,其可以与IL-4Rα高亲和力结合,阻断IL-4和IL-13的信号传导,从而抑制2型气道炎症,改善肺部症状,控制哮喘发作.经度普利尤单抗治疗后的哮喘患者不仅生活质量得到提升,而且还可以减少糖皮质激素用量,减轻长期使用糖皮质激素给患者带来的一系列副作用.并且度普利尤单抗治疗哮喘安全性良好,严重不良反应较少,常见不良反应较轻且持续时间短,常可自行缓解.度普利尤单抗为哮喘患者的治疗提供新的策略,是国内外指南治疗重度哮喘患者的推荐药物.但目前国内上市时间较晚,研究报道较少,临床研究的周期短、样本量数据较少,仍需长期研究观察.本文将对度普利尤单抗治疗中重度支气管哮喘的临床治疗进展进行综述,为其进一步研究提供依据.

目的 检测过敏性鼻炎患儿变应原皮下特异性免疫治疗(SCIT)前后炎症因子表达水平,并分析这些炎症因子在评估SCIT疗效中的应用价值.方法 纳入2021年2月-2023年7月于浙江省人民医院淳安分院儿科接受标准SCIT的80例过敏性鼻炎(AR)患儿,根据疗效情况将其分为应答组(48例)和无应答组(32例).对比2组患儿基线炎症因子水平,选取P＜0.05的变量构建单因素logistic回归模型,并绘制ROC曲线分析其预测SCIT应用于AR患儿的疗效.结果 治疗后,80例患儿C反应蛋白(CRP)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6及IL-13水平降低,肿瘤坏死因子-β(TNF-β)、IL-10及IL-33水平升高(P＜0.05).应答组患儿基线IL-10及IL-33水平低于无应答组(P＜0.05).单因素logistic回归分析显示,IL-10(OR=0.344)、IL-33(OR=0.963)是SCIT疗效的影响因素(P＜0.05).ROC曲线结果显示,IL-10(AUC=0.836)、IL-33(AUC=0.833)预测SCIT疗效的价值较高.结论 AR患儿经SCIT治疗后,TNF-β、IL-10、IL-33水平上升,CRP、IL-1β、IL-6及IL-13水平下降;基线IL-10及IL-33水平对SCIT疗效有较好的预测价值.

目的 通过体内外实验,研究过敏煎改善特应性皮炎的作用机制.方法 采用2,4-二硝基氯苯(2,4-dimeth-yl sulfoxide,DNCB)反复刺激皮肤建立特应性皮炎(Atopic dermatitis,AD)模型,给予氯雷他定片及过敏煎低、中、高剂量(1.32、2.64、5.28 g/kg)进行干预,ELISA法检测血清总IgE、IL-4、IL-13水平,IHC法测定皮损组织中IL-4、IL-13的表达水平.体外运用anti-DNP-IgE/DNP-HSA诱导RBL-2H3细胞复制脱颗粒模型,MTS法检测过敏煎对RBL-2H3活力,通过ELISA法检测细胞上清中β-hex酶释放率,Histamine、LTB4、IL-4、IL-13水平,RT-PCR法检测细胞Histamine、IL-4、IL-13mRNA 表达,Western blotting 法检测 p-ERK/ERK、p-JNK/JNK、p-p38/p-38 蛋白表达.结果 与模型组比较,过敏煎各剂量组显著减轻AD小鼠血清总IgE、IL-4、IL-13水平(P＜0.05,P＜0.01),减轻AD小鼠皮损组织中IL-4、IL-13表达.明显下调RBL-2H3细胞脱颗粒后β-Hex酶释放率(P＜0.05,P＜0.01)和Histamine、LTB4、IL-4、IL-13 水平(P＜0.05,P＜0.01),显著减少细胞 Histamine、IL-4、IL-13mRNA 表达(P＜0.01)和 p-ERK/ERK、p-JNK/JNK、p-p38/p38蛋白表达(P＜0.05,P＜0.01).结论 过敏煎通过调控Th2型反应和血清中总IgE水平改善特应性皮炎,其作用机制可能是通过IgE/FcεR Ⅰ途径抑制肥大细胞脱颗粒.

目的:研究花椒提取物羟基-α-山椒素对异丙肾上腺素所致心肌缺血大鼠和过氧化氢(H2O2)诱导的大鼠心肌细胞(H9c2)氧化损伤的保护作用及可能机制.方法:36只SD雄性大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、盐酸地尔硫卓20 mg/kg、羟基-α-山椒素5、10和20 mg/kg组.各组大鼠连续给药14 d,在13、14 d腹腔注射异丙肾上腺素(ISO)40 mg/kg造成心肌缺血模型,超声心动图检查评估各组大鼠心功能;试剂盒检测血清丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)和IL-6含量;实时荧光定量qRT-PCR法检测心肌组织Tnfa、Il1和Il6 mRNA表达;苏木素-伊红(HE)和马松(Masson)染色观察心肌组织病理改变.体外培养H9c2细胞,用H2O2600 μmol/L处理H9c2细胞6 h构建氧化损伤体外细胞模型,随机分为正常对照组、模型对照组、羟基-α-山椒素2.5、5、10 μg/mL组.采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法筛选羟基-α-山椒素最佳给药浓度;采用流式细胞仪和激光共聚焦显微镜观测细胞凋亡情况;流式细胞仪检测细胞活性氧(ROS)浓度;ELISA法检测MDA、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和SOD含量或活力;蛋白质印迹法检测核因子E2相关因子2(Nrf2)、B淋巴细胞瘤-2基因相关X蛋白(BAX)、血红素氧合酶1(HO-1)、切割胱天蛋白酶3(Cleaved-caspase3)和B淋巴细胞瘤-2基因(BCL-2)蛋白表达水平.结果:与正常对照组相比,模型对照组大鼠左心室短轴缩短率(LVFS)和射血分数(LVEF)显著降低(P＜0.01),血清MDA、cTnl、LDH、CK-MB含量或活力显著升高(P＜0.01),GSH、SOD活力显著降低(P＜0.01),心肌组织中Il1b、Il6及Tnfa mRNA表达明显上调(P＜0.05);与模型对照组相比,羟基-α-山椒素各剂量组LVFS和LVEF明显升高(P＜0.05),羟基-α-山椒素20 mg/kg组MDA、cTnl、LDH、CK-MB含量或活力明显降低(P＜0.05),GSH、SOD活力明显升高(P＜0.05或P＜0.01),心肌组织中Il1b、Il6及Tnfa mRNA表达明显下调(P＜0.05),羟基-α-山椒素各剂量组心肌组织损伤减轻,心肌细胞胶原沉积减少.与正常对照组比较,H2O2模型对照组H9c2细胞活力、线粒体膜电位降低,细胞凋亡率、ROS水平、MDA、TNF-α、IL-1β、IL-6含量升高,GSH-Px、SOD活力降低(P＜0.01),经羟基-α-山椒素预处理后,H9c2细胞活力显著升高、线粒体膜电位升高,羟基-α-山椒素5、10 μg/mL组细胞凋亡率、ROS浓度、MDA、IL-1β、IL-6含量降低,GSH-Px、SOD活力显著升高(P＜0.01),羟基-α-山椒素10 μg/mL组细胞TNF-α含量显著降低(P＜0.01),羟基-α-山椒素处理H9c2细胞后Nrf2(核内)、HO-1、BCL-2蛋白表达上调,Nrf2(核外)、BAX、Cleaved-caspase3蛋白表达下调(P＜0.01).结论:羟基-α-山椒素可改善ISO所致心肌缺血大鼠的心功能、心肌损伤及纤维化程度,保护H2O2诱导的H9c2细胞氧化损伤,改善H9c2细胞凋亡,其作用机制可能与抑制氧化应激反应和炎症因子释放,激活Nrf2/HO-1信号通路有关.

目的:观察揿针联合糠酸莫米松鼻喷雾剂治疗过敏性鼻炎(AR)的临床疗效.方法:选取104例AR患者,应用随机数字表法分为对照组、观察组各52例.对照组剔除4例,纳入48例;观察组剔除1例,纳入51例.对照组采用糠酸莫米松鼻喷雾剂治疗,观察组在对照组基础上联合揿针治疗,2组均治疗4周.比较2组临床疗效、鼻炎症状评分及血清炎症因子水平.结果:治疗4周后,观察组总有效率94.12%,高于对照组81.25%,差异有统计学意义(P＜0.05).2组流涕、喷嚏、鼻塞、鼻痒评分均较治疗前降低,观察组上述4项鼻炎症状评分均低于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).2组血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-13(IL-13)水平均较治疗前降低,观察组血清TNF-α、IL-4、IL-13水平均低于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:揿针联合糠酸莫米松鼻喷雾剂治疗AR临床疗效较好,可有效缓解临床症状,抑制炎症反应,安全性较好.

目的:探讨含Jumonji结构域蛋白3(JMJD3)-干扰素调节因子4(IRF4)信号通路介导的巨噬细胞极化对多发性骨髓瘤(MM)细胞恶性生物学行为的影响.方法:佛波酯(PMA)诱导THP-1单核细胞分化为巨噬细胞,将THP-1巨噬细胞分为对照组(正常培养)、M2诱导组(添加重组人IL-4、IL-13蛋白)、M2+JMJD3蛋白组(添加重组人IL-4、IL-13和JMJD3蛋白)和M2+JMJD3抑制剂组(添加重组人IL-4、IL-13蛋白和JMJD3抑制剂),流式细胞术检测CD206+细胞比例,ELISA检测培养上清液中IL-10、转化生长因子-β(TGF-β)水平,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中精氨酸酶-1(Arg-1)、JMJD3、IRF4 mRNA表达水平,免疫印迹(Western blot)检测Arg-1、JMJD3、IRF4蛋白表达水平.相应地,使用各组THP-1巨噬细胞培养上清液培养人MM细胞U266,MTT法、平板克隆形成实验检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Western blot检测细胞中促凋亡蛋白Bcl-2相关X蛋白(Bax)、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved caspase-3)表达水平,Transwell实验检测细胞迁移、侵袭情况.结果:与对照组比较,M2诱导组THP-1巨噬细胞中CD206+细胞比例,Arg-1、JMJD3、IRF4 mRNA和蛋白表达水平以及细胞培养上清液中IL-10、TGF-β水平明显升高(P＜0.001),同时U266细胞增殖活力、集落形成数明显增加(P＜0.01),细胞凋亡率以及促凋亡蛋白Bax、cleaved caspase-3表达水平明显降低(P＜0.001),迁移、侵袭细胞数明显增多(P＜0.001).与M2诱导组比较,M2+JMJD3蛋白组THP-1巨噬细胞中CD206+细胞比例,Arg-1、JM-JD3、IRF4 mRNA和蛋白表达水平以及细胞培养上清液中IL-10、TGF-β水平均进一步升高(P＜0.01),同时U266细胞增殖活力、集落形成数明显升高(P＜0.05),细胞凋亡率以及促凋亡蛋白Bax、cleaved caspase-3表达水平明显降低(P＜0.01),迁移、侵袭细胞数明显增多(P＜0.001);而M2+JMJD3抑制剂组上述各指标变化趋势与M2+JMJD3蛋白组相反.结论:JMJD3-IRF4信号通路介导的巨噬细胞M2极化能够促进MM细胞增殖、迁移和侵袭,并抑制细胞凋亡.

目的 探讨益生菌辅助清肠愈疡汤联合康复新液保留灌肠对溃疡性结肠炎疗效、免疫炎症和氧化应激的影响.方法 回顾性选取2021年6月至2023年12月收治的溃疡性结肠炎患者68例为研究对象,根据治疗方案分为A组(常规治疗+清肠愈疡汤联合康复新液保留灌肠治疗+益生菌制剂治疗,n=21)、B组(常规治疗+清肠愈疡汤联合康复新液保留灌肠治疗,n=23)和C组(常规治疗,n=24),三组疗程均为3个月.统计比较三组治疗有效率,治疗前后的中医证候积分、肠黏膜屏障功能指标[二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸(D-LA)]、免疫炎症指标[白细胞介素-6(IL-6)、转化生长因子β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、CD3+、CD4+、CD4+/CD8+]和氧化应激指标[丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)]水平,以及不良反应发生情况.结果 A组治疗有效率为95.24％(20/21),高于B组的65.22％(15/23)和C组的54.17％(13/24)(P＜0.05);但B组和C组治疗有效率比较差异无统计学意义(P＞0.05).与同组治疗前比较,三组治疗后的中医证候积分及血清DAO、D-LA、IL-6、TGF-β1、TNF-α、MDA水平均降低(P＜0.05);而三组治疗后的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+和血清SOD水平则提高(P＜0.05).与C组治疗后比较,A组和B组治疗后的中医证候积分及血清DAO、D-LA、IL-6、TGF-β1、TNF-α、MDA水平均降低而同期CD3+、CD4+、CD4+/CD8+和血清SOD水平则提高(P＜0.05);与B组治疗后比较,A组治疗后的中医证候积分及血清DAO、D-LA、IL-6、TGF-β1、TNF-α、MDA 水平均降低而同期 CD3+、CD4+、CD4+/CD8+和血清 SOD 水平则提高(P＜0.05).三组治疗期间均无明显不良反应发生.结论 益生菌辅助清肠愈疡汤联合康复新液保留灌肠对溃疡性结肠炎疗效显著,可有效提高治疗有效率,改善中医症候症状、肠黏膜屏障功能、免疫炎症和氧化应激状况,且安全可靠,值得临床应用.

目的:探讨调补肺肾三法对慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)大鼠肾损伤的影响及机制.方法:将SPF级SD大鼠随机分为对照(control)组、COPD组、吡咯烷二硫代甲酸铵(pyrro-lidinedithiocarbamate ammonium,PDTC)组、补肺健脾方(Bufei-Jianpi formula,BJF)组、补肺益肾方(Bufei-Yishen for-mula,BYF)组、益气滋肾方(Yiqi-Zishen formula,YZF)组、BJF联合PDTC(BJF+PDTC)组、BYF联合PDTC组(BYF+PDTC)和YZF联合PDTC(YZF+PDTC)组.采用香烟烟雾暴露联合细菌感染的方法建立COPD稳定期大鼠模型,筛选COPD肾损伤大鼠进行后续治疗.第16周末取材观察大鼠肺、肾功能;HE染色观察肺、肾病理形态学;检测24 h尿量和尿生化指标;免疫组化检测水通道蛋白(aquaporins,AQPs)水平;取支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar la-vage fluid,BALF)进行细胞分类计数;测定血清炎症因子水平及肾组织IKK和NF-κB的mRNA和蛋白表达变化.结果:与control组比较,COPD大鼠肺功能指标用力肺活量(forced expiratory vital capacity,FVC)、第0.1秒用力呼气容积(forced expiratory volume in 0.1 second,FEV0.1)及FEV0.1/FVC显著降低(P<0.05),肺组织病理表现为肺泡壁断裂、融合,气道炎症细胞浸润;肾功能指标血清肌酐(creatinine,Cr)、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)及血清胱抑素C(cystatin C,Cys-C)水平显著升高(P<0.01);肾组织病理表现为肾小管上皮细胞肿胀、排列紊乱;24 h尿量降低(P<0.01),尿生化指标24 h尿总蛋白、尿肾损伤分子1、尿Cys-C和尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶水平显著升高(P<0.01),肾小管AQP1～4蛋白水平显著升高(P<0.01);BALF中性粒细胞和淋巴细胞百分比增高(P<0.01),单核细胞百分比降低(P<0.01);血清炎症因子TNF-α、IL-6、IL-13、IL-1β和TGF-β1水平显著升高(P<0.01),肾组织IKK和NF-κB的mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.05).与COPD组比较,各治疗组干预后大鼠上述症状及指标均有不同程度的改善,其中BJF、BYF和YZF组表现出与PDTC相似的作用效果,BJF+PDTC、BYF+PDTC和YZF+PDTC组改善效果优于对应的中药组.结论:调补肺肾三法能缓解COPD大鼠气道和全身炎症反应,改善肾功能,减轻肾组织损伤,其机制可能与抑制NF-κB信号通路有关.