目的:评价电针后处理对心肌缺血再灌注大鼠心律失常时微小RNA-1(miRNA-1)表达的影响。方法:清洁级健康成年雄性SD大鼠24只，2～3月龄，体重280～320 g，采用随机数字表法分为3组( n＝8)：假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)和电针后处理组(EP组)。采用结扎冠状动脉左前降支30 min再灌注30 min的方法制备大鼠心肌再灌注心律失常模型。开胸后S组只穿线不结扎；EP组于再灌注即刻电针持续刺激双侧内关穴30 min进行后处理。记录再灌注期间心律失常的发生情况；于再灌注30 min处死大鼠取心脏，观察心肌病理学结果，采用qRT-PCR法测定miRNA-1表达，Western blot法检测Kir2.1和缝隙连接蛋白43(Cx43)表达。 结果:与S组比较，I/R组和EP组心律失常发生率升高，心肌miRNA-1表达上调，Kir2.1和Cx43表达下调( P<0.05)；与I/R组比较，EP组心律失常发生率降低，心肌miRNA-1表达下调，Kir2.1和Cx43表达上调( P<0.05)。I/R组和EP组心肌组织病理学损伤较S组加重，EP组病理学损伤较I/R组减轻。 结论:电针后处理减少大鼠再灌注心律失常发生的机制与其下调miRNA-1表达后Kir2.1和Cx43表达上调有关。

Andersen-Tawil综合征1型（ATS1）是编码Kir2.1离子通道蛋白的KCNJ2基因发生突变的罕见的遗传性疾病，临床表现为周期性麻痹、QT/QTc间期延长、室性心律失常和发育畸形三联征，可无明显心脏相关表现，有持续性室性心动过速合并晕厥发作史者为心原性猝死的高危人群。本文报道1例典型的ATS1患者，频繁发作室性心动过速及晕厥，置入心脏复律除颤器治疗后出院，随访1个月预后良好。

目的 探讨磁共振联合关节造影在儿童Jakob Ⅱ型肱骨外髁骨折诊疗中的作用.方法 回顾性分析2018年2月至2020年2月行手术治疗的Jakob Ⅱ型肱骨外髁骨折儿童28例,其中男15例,女13例,年龄2～8岁,平均(4.3±2.1)岁.患儿术前均行肘关节磁共振检查.观察组14例,术中先采用关节造影检查骨折端移位情况,行闭合复位克氏针固定,再用C臂机透视确定复位程度和克氏针位置;对照组14例,均行肱骨外髁骨折切开复位克氏针固定.比较两组的临床效果及围术期指标.结果 与对照组比较,观察组手术时间明显缩短,术中出血量明显减少(P＜0.05),骨折愈合时间无统计学差异(P＞0.05).根据Broberg和Morrey评分标准,观察组肘关节功能优12例,良1例,中1例,优良率为92.9％,对照组优11例,良1例,中2例,优良率为85.7％,两组术后肘关节功能比较无统计学差异(P＞0.05).观察组和对照组的术后并发症发生率分别为14.3％和21.4％,组间比较无统计学差异(P＞0.05).结论 磁共振联合关节造影引导下闭合复位克氏针儿童Jakob Ⅱ型肱骨外髁骨折,手术创伤小,出血量少,并发症发生率低,值得临床推广应用.

目的 探讨再灌注房性心律失常心房肌复极时程延长的分子机制.方法 采用随机数字表法将16只由雄性SD大鼠制备的Langendorff离体心脏灌注模型分为对照组(C组,n = 8)和低温缺血-再灌注组(IR组,n = 8).根据再灌注后是否发生房性心律失常,将IR组进一步细分为再灌注非房性心律失常亚组(N-RAA组)和再灌注房性心律失常亚组(R-AA组).C组使用37℃K-H液平衡灌注120 min.IR组使用37℃K-H液平衡灌注30 min后停止,注射4℃Thomas液(20 mL/kg)使心脏停跳60 min,停跳30 min时使用半量4℃Thomas液(10 mL/kg)对离体心脏进行复灌[停跳期间用低温Thomas液(4℃)对心脏进行保护],后再次灌注37℃K-H液30 min.记录平衡灌注30 min(T0)、平衡灌注105 min/再灌注15 min(T1)和平衡灌注120 min/再灌注30 min(T2)时右心房单相动作电位(MAP),测量单相动作电位复极50%和90%的时程(MAPD50 和MAPD90).电生理指标监测完后用Western blot检测右心房组织内向整流钾通道2.1(Kir2.1)和Ca2+/CaM依赖激酶Ⅱ(CaMKⅡ)的表达.结果 与T0时点比较,R-AA组T1、T2时MAPD50、MAPD90明显延长(P<0.05);与C组比较,R-NAA组和R-AA组T1、T2时MAPD90明显延长(P<0.05);与R-NAA组比较,R-AA组T1、T2时MAPD50、MAPD90 明显延长(P<0.05).Western blot 结果显示,R-NAA组和R-AA组Kir2.1表达明显少于C组(P<0.05),且R-AA组明显少于R-NAA组(P<0.05);R-NAA组和R-AA组CaMKⅡ表达较C组明显增加(P<0.05),且R-AA组 CaMKⅡ表达较R-NAA组明显增加(P<0.05).结论 低温缺血-再灌注房性心律失常大鼠心房肌复极时程延长可能与Kir2.1表达下调和CaMKⅡ 表达增加有关.

De novo mutations in genes encoding K+channels are implicated in many severe neurodevelopmental disorders.Specifically,mutations in KCNA2,encoding the Shaker-type voltage-gated K+channel Kv1.2,and KCNJ2,encoding the inwardly rectifying K+channel Kir2.1,associate with focal and generalized epilepsies,brain atrophy,autism,ataxia and hereditary spastic paraplegia(Syrbe et al.,2015;Masnada et al.,2017;Cheng et al.,2021).

目的:探讨桂枝甘草汤(GGD)干预心肌缺血再灌注(I/R)损伤大鼠心律失常的作用机制.方法:建立心肌 I/R损伤大鼠模型,随 机分为对照组、I/R组、GGD低剂量组、GGD高剂量组、美托洛尔组.观察并记录心肌I/R心律失常发生率和持续时间,进行心律失常评分;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)和肌钙蛋白I(cTnI)水平,分光光度法测定Na+-K+-ATP酶和 Ca2+-Mg2+-ATP酶水平,苏木精-伊红(HE)染色法观察心肌组织的病理学改变,免疫组化法检测心肌缝隙连接蛋白 43(Cx43)表达,蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测磷酸化 Cx43(p-Cx43)和 Kir2.1蛋白表达.结果:与对照组比较,I/R组大鼠室性期前收缩(VPC)次数明显增多,室性心动过速(VT)及心室纤颤(VF)的持续时间明显延长,心律失常评分增加,CK-MB和 cTnI明显增高,而Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活性、p-Cx43和Kir2.1蛋白表达降低,差异均有统计学意义(P<0.01);与I/R组相比,GGD低剂量组、GGD高剂量组和美托洛尔组 CK-MB和 cTnI降低,Na+-K+-ATP酶和 Ca2+-Mg2+-ATP酶活性增高,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);与I/R组相比,GGD高剂量组和美托洛尔组VPC发生次数减少,VT及VF持续时间缩短,心律失常评分降低,p-Cx43和 Kir2.1蛋白表达升高,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01).结论:GGD可能通过改善 Cx43 的表达、提高 Na+-K+-ATP酶和 Ca2+-Mg2+-ATP酶活性及上调 Kir2.1蛋白表达,从而发挥改善心肌I/R损伤大鼠室性心律失常发生的作用.

目的 观察家兔心房内向整流钾2.1(Kir2.1)通道mRNA表达的增龄性变化.方法 选择家兔24只,分为幼年组(14~21 d)、成年组(8~10个月)、老年组(30~35个月),每组8只.采用实时荧光定量PCR检测各组家兔心房组织的钾内向整流通道超家族J成员2(KCNJ2)mRNA表达情况.结果 幼年组、成年组及老年组的KCNJ2 mRNA 相对表达量依次升高(均P<0.05).结论 Kir2.1通道在转录水平随着年龄增加而发生变化,这可能是老年人房颤高发生率的因素之一.

OBJECTIVE To explore the protection mechanism of metformin and tanshinone IIA on myocardial injury. METHODS The cultured neonatal rat ventricular cells (NRVCs) were exposed to 100 μmol·L-1H2O2to simulate the in vitro model of ischemia-reperfusion injury.MTT,TUNEL and Viability/Cytotoxicity Assay were used to evaluate the effect of metformin on the viability of cardiomyocytes after treated with H2O2. The target of miR-1 was verified by Dual luciferase reporter assay. ChIP analyses was adopted to reveal the relationship between C/EBP β and miR-1.Tanshinone IIA was administrated daily for 7 d before ligation of the left anterior descending artery (LAD) and lasted for 3 months after LAD.Whole-cell patch-clamp techniques were used to measure the inward rectifying K+current(IK1)in rat isolated ventricular myocytes.GRP94,p-AMPKα,C/EBP β,CHOP,Caspase-3,Kir2.1,p38 MAPK, Cx43, MEF2 and SRF levels were analyzed by Western blot and miR-1 level was quantified by Real-time PCR.RESULTS The expression of miR-1 was significantly increased in NRVCs exposed to H2O2 in vitro. miR-1 was shown to target the 3′-untranslated region (UTR) of GRP94, which results in the accumulation of un/misfolded proteins,leading to the endoplasmic reticulum(ER)stress.C/EBP β directly induces the upregulation of miR-1 by binding to its promoter.Furthermore,metformin,a direct allosteric AMPK activator, significantly reduces C/EBP β and miR-1 levels comparing with control group. Similarly, tanshinone IIA decreased the incidence of arrhythmias and relieved ischemia-induced injury.Moreover, tanshinone IIA depressed the elevated miR-1 level and inhibited the activation of p38 MAPK and heart special transcription factors SRF and MEF2 in ischemic cardiomyocytes. CONCLUSION Metformin protects cardiomyocytes against H2O2damage through AMPK/C/EBPβ/miR-1/GRP94 pathway.Tanshi-none IIA play a role in protection cardiomyocytes from ischemic injury based on inhibiting miR-1 expres-sion through p38 MAPK signal pathway.

目的 观察不同状态下培养的乳鼠心肌细胞上清液对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)心肌动作电位相关离子通道基因表达的影响.方法 分别取大鼠骨髓MSCs和乳鼠心肌细胞进行体外培养.实验分为MSCs组、5-氮胞苷(5-Aza)诱导组、正常诱导组、缺氧诱导组和心肌细胞组,MSCs组为正常培养的MSCs,5-Aza诱导组为心肌定向诱导剂5-Aza干预的MSCs,正常诱导组为正常心肌细胞上清液干预的MSCs,缺氧诱导组为缺氧状态下的心肌细胞上清液干预的MSCs,心肌细胞组为不予干预的正常心肌细胞.采用RT-PCR法检测各组细胞膜上钠通道(SCN2a)、钾通道(Kv2.1、Kv1.4、Kir1.1、EAG1)和钙通道基因(CCHL2α)mRNA表达的变化.结果 MSCs组细胞膜上表达与心肌动作电位相关的离子通道基因.与MSCs组相比,其余各组SCN2a、Kv2.1、Kir1.1、EAG1、CCHL2αmRNA表达均升高(P<0.05或<0.01),且缺氧诱导组、心肌细胞组Kv1.4 mRNA表达升高(P<0.05或<0.01),但5-Aza诱导组、正常诱导组、缺氧诱导组各种离子通道基因表达两两比较差异无统计学意义.结论 乳鼠正常心肌细胞上清液和缺氧心肌细胞上清液可诱导大鼠MSCs心肌动作电位相关离子通道基因表达增加,心肌微环境有利于大鼠MSCs发生心肌电生理变化.

目的:研究内向整流钾通道(IK1)激动剂扎考必利(zacopride,Zac)对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导的心脏成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CFb)细胞活力和凋亡的影响,探讨其抑制心肌纤维化的机制.方法:以组织块消化和差速贴壁法原代分离培养SD乳鼠心室成纤维细胞,用AngⅡ诱导细胞建立细胞活化模型.将分离培养的CFb随机分为空白对照组、AngⅡ模型组、Zac干预组、Zac+BaCl2干预组、Zac+氯喹干预组和AngⅡ+卡托普利阳性对照组.CCK-8法检测Zac对CFb活力的影响;ELISA法测定CFb上清液中Ⅰ、Ⅲ型胶原含量;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blot检测心肌内向整流钾通道蛋白Kir2.1表达的变化.结果:与空白对照组比较,AngⅡ模型组CFb活力及胶原合成显著增加,Kir2.1的表达降低(P<0.05);与AngⅡ模型组比较,Zac干预组CFb活力及胶原合成显著降低,凋亡率显著升高,Kir2.1的表达明显上调(P<0.05);IK1阻断剂BaCl2和氯喹可阻断Zac对IK1通道的激动效应,明显逆转Zac的抗心肌纤维化作用.结论:Zac可明显抑制AngⅡ诱发的心肌纤维化,其机制可能与激动心肌内向整流钾通道,进而抑制成纤维细胞活力并诱导其凋亡有关.