目的:建立皖贝母超高效液相色谱-飞行时间质谱联用技术（UPLC-Q-TOF-MS）的指纹图谱及化学计量分析模式，为其质量评价及标准制定提供参考。方法:采用CORTECS C 18色谱柱（4.6 mm×150 mm，2.7 μm），流动相为乙腈-0.1%甲酸和10 mmol/L甲酸铵水溶液进行梯度洗脱，流速0.4 ml/min，进样量为2.0 μl。采用中药指纹图谱相似度评价系统（2012年版）对9批皖贝母样品指纹图谱进行相似度评价，通过液相色谱-质谱技术进行定性分析，并结合聚类分析、主成分分析、正交最小偏二乘-判别分析进行整体质量评价。 结果:建立了不同批次皖贝母的指纹图谱，并确定了21个共有峰，初步指认出12个共有峰。聚类分析、主成分分析、正交最小偏二乘-判别分析可将9批皖贝母聚为3类。结论:本研究所建立的皖贝母指纹图谱结合化学模式识别方法灵敏度高、专属性强，可较好体现皖贝母的整体性与差异性，从而为皖贝母的质量评价及标准制定提供参考依据。

目的:探寻与卵巢癌诊断相关的血清循环多肽标志物。方法:以2018年3月至2018年9月中国医学科学院肿瘤医院妇瘤科收治的原发卵巢上皮癌患者54例(卵巢癌组)、同期在中国医学科学院肿瘤医院体检中心进行体检的健康女性40例(健康对照组)为研究对象。采用随机数字表法，将例卵巢癌患者和健康对照者各按1∶1随机分为训练集和验证集。采用基质辅助激光解吸离子飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)联合磁珠技术检测血清多肽峰，在训练集中筛选卵巢癌组与健康对照组间的差异多肽峰(评分>5)。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析，在训练集和验证集中，筛选曲线下面积(AUC)均≥0.8、诊断卵巢癌的灵敏度和特异度均>90%的差异多肽峰。采用液相色谱-质谱/质谱(LC-MS/MS)技术鉴定差异多肽峰的成分。结果:在质荷比1 000~10 000范围内，卵巢癌组和健康对照组之间有102个差异多肽峰。ROC曲线分析显示，在训练集和验证集中，AUC均≥0.8的差异多肽峰有42个，其中19个在卵巢癌组血清中高表达，23个低表达；诊断卵巢癌灵敏度与特异度均≥90%的卵巢癌血清高表达差异多肽峰有15个，质荷比分别为7 744.27、5 913.41、5 329.87、4 634.21、4 202.02、3 879.26、3 273.35、3 253.79、3 234.34、2 950.33、2 664.51、2 018.38、1 893.37、1 498.69和1 287.55；诊断卵巢癌灵敏度与特异度均≥90%的卵巢癌血清低表达差异多肽峰有15个，质荷比分别为9 288.46、7 759.77、5 925.24、4 652.77、4 210.42、3 887.02、3 279.90、3 240.82、2 962.15、2 932.70、2 022.42、1 897.16、1 501.69、1 337.38和1 290.13。在卵巢癌患者血清低表达的15个差异多肽峰中未鉴定出多肽峰的蛋白成分，在卵巢癌患者血清高表达的15个差异多肽峰中鉴定出2个多肽峰的蛋白成分，质荷比为1 498.70者是丝甘蛋白聚糖(SRGN)，质荷比为5 913.42者是纤维蛋白原α链(FGA)，二者在全部研究对象中诊断卵巢癌的灵敏度均为100%，特异度分别为90.9%和100%。结论:SRGN和FGA在卵巢癌患者血清中高表达，可能是潜在的卵巢癌诊断标志物。

目的 评价富马酸丙酚替诺福韦片(25 mg)在中国健康受试者中的药代动力学(PK)行为,以及2种制剂的生物等效性.方法 空腹试验采用单次给药、随机、开放、两周期、双交叉设计,餐后试验采用单次给药、随机、开放、三周期、部分重复交叉设计.空腹和餐后试验各入组42例健康受试者,每周期单次口服富马酸丙酚替诺福韦片受试制剂和参比制剂各25 mg.用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法检测人血浆中丙酚替诺福韦和替诺福韦的浓度,用WinNonlin软件(8.1版本)以非房室模型计算PK参数,并评价2种制剂的生物等效性,并对试验期间受试者进行相关的安全性评价.结果 空腹口服受试制剂和参比制剂后,酚替诺福韦的主要PK参数:Cmax分别为(215.17±94.24)和(199.30±71.11)ng·mL-1,AUC0-t 分别为(135.44±71.60)和(123.91±53.82)h·ng·mL-1;替诺福韦的主要PK参数:受试制剂和参比制剂的 Cmax 分别为(7.30±2.27)和(7.12±1.74)ng·mL-1,AUC0-t 分别为(186.78±60.22)和(179.44±47.44)h·ng·mL-1.餐后口服受试制剂和参比制剂后,丙酚替诺福韦主要药代动力学参数:Cmax分别为(197.69±82.19)和(197.10±110.54)ng·mL-1,AUC0-t分别为(197.69±82.19)和(197.10±110.54)h·ng·mL-1;替诺福韦主要PK参数:受试制剂和参比制剂的 Cmax 分别为(2.57±1.37)和(2.58±1.31)ng·mL-1,AUC0-t 分别为(227.08±74.33)和(238.51±128.30)h.ng·mL-1.空腹和餐后试验受试制剂和参比制剂的Cmax、AUC0-t的几何均值比的90％置信区间均在80.00％-125.00％.空腹和餐后试验的不良事件发生率分别为21.43％和30.95％,未发生严重不良事件.结论 富马酸丙酚替诺福韦片受试制剂和参比制剂具有生物等效性,且安全性良好.

目的:建立反义寡核酸药物AD00510-AS的LC-UV-Q-TOF方法,并探索小核酸药物AD00510-AS在体外肝S9 和血浆中的代谢产物和代谢途径.方法:基于固相萃取的方法对孵育24h后的肝S9 和血浆样品进行处理,采用SCIEX OS进行数据采集,采用Molecule ProfilerTM软件分析空白样品和给药后孵育24h样品的提取离子流图(XIC)的差异,得到可能的代谢产物,并推测代谢途径.结果:AD00510-AS分别与小鼠、大鼠、猴、人肝S9 孵育24h后,共检测到3 个代谢产物(M1,M4 和M5),母药的相对丰度分别为73.9%,87.1%,78.4%和81.3%;AD00510-AS分别与小鼠、大鼠、猴、人血浆孵育 24h后,共检测到 4 个代谢产物(M2,M3,M4 和M5),母药的相对丰度分别为69.1%,94.5%,67.8%和68.1%;通过MS及MS/MS的测定,鉴定的代谢产物如下:M1:3'末端丢失9 个核苷酸代谢产物(MW =4 544);M2:3'末端丢失2 个核苷酸代谢产物(MW =6857);M3:3'末端丢失1 个核苷酸代谢产物(MW =7232);M4:双脱硫代谢产物(MW =7559);M5:脱硫代谢产物(MW =7 575).结论:采用确认的LC-UV-Q-TOF方法可以检测到AD00510-AS及其 5 个代谢产物,AD00510-AS在体外肝S9 和血浆中主要通过降解(丢失核苷酸)和脱硫进行代谢.

目的:采用色谱-质谱联用技术鉴定地佐辛注射液中的有关物质.方法:采用Agilent Eclipse Plus C18(150 mm × 4.6 mm,5 μm)色谱柱,以甲醇-10mmol·L-1 甲酸铵缓冲溶液(甲酸调节pH至2.7)为流动相梯度洗脱,对地佐辛注射液有关物质进行分离,电喷雾正离子化-四极杆-飞行时间串联高分辨质谱(ESI-Q-TOF/MS)测定各有关物质母离子及其子离子的准确质量和元素组成,通过光谱解析鉴定其结构.结果:在所建立的分析条件下,地佐辛及其有关物质分离良好,检测并鉴定出地佐辛注射液及其强制降解试验样品中20个含量大于0.1％的有关物质,其中2个为已知杂质,其他杂质均未见报道.结论:色谱-质谱联用技术能有效地分离鉴定地佐辛注射液中的有关物质,为其质量控制提供参考依据.

目的 分析柠檬酸三甲酯及其碱降解产物的降解途径,并初步对其主要杂质进行结构解析.方法 采用液相色谱-离子阱-飞行时间质谱联用(LC-IT-TOF/MS)法,色谱柱为Thermo Hypersil GOLD Dim柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈-水(10∶90,V/V),流速为 1.0 mL/min,检测波长为 214 nm,柱温为 35℃,进样量为 20 μL.电喷雾离子源(ESI);接口电压 4.5 kV;扫描范围,一级质谱m/z 10～1 500;自动多级m/z 50～1 000;雾化气为氮气,流速为 1.5 L/min;漂移管温度为 200℃;干燥气为氮气,流速为 10 L/min;加热模块温度为 200℃;碰撞气为氩气;检测器电压为 1.52 kV.结果 初步确认杂质a,b的结构分别与柠檬酸单甲酯及柠檬酸二甲酯一致,并提出柠檬酸三甲酯碱破坏降解途径.结论 所建立的方法可用于柠檬酸三甲酯碱降解产物及降解途径研究,进而可为改进柠檬酸三甲酯合成工艺及提高产品质量提供参考.

目的 分析鉴定柴胡水提物中的化学成分,探究柴胡抗抑郁活性成分.方法 利用超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)分析鉴定柴胡水提物中的化学成分.采用皮质酮(CORT)诱导低分化PC12抑郁细胞模型,给予柴胡单体成分预处理PC12细胞24 h,利用CCK-8试剂盒检测细胞活力;利用乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测细胞LDH释放率.结果 共鉴定出53个化学成分,主要为Ⅰ型、Ⅱ型及Ⅲ型柴胡皂苷类成分.其中,柴胡皂苷A、柴胡皂苷B2、柴胡皂苷C、柴胡皂苷E、柴胡皂苷F和6″-O-乙酰基柴胡皂苷A对柴胡代谢轮廓的贡献度最大,并可增强CORT诱导PC12细胞活力(P<0.05、P<0.01);柴胡皂苷A、柴胡皂苷B2、柴胡皂苷C、柴胡皂苷E、柴胡皂苷F可降低CORT诱导PC12细胞LDH释放率(P<0.05、P<0.01).结论 柴胡皂苷A、柴胡皂苷B2、柴胡皂苷C、柴胡皂苷E、柴胡皂苷F可能为柴胡抗抑郁的主要活性成分,为柴胡质量控制及药效物质基础研究提供依据.

基于液质联用(LC-MS)技术,对金钱草及其习用品(小金钱草、连钱草)中化学成分差异性进行研究,为金钱草及其习用品区分鉴别和合理使用提供参考.首先采用超快速液相色谱-三重四级杆飞行时间质谱(UFLC-Triple TOF-MS/MS)结合多元统计分析对金钱草及其习用品中化学成分差异性进行分析,然后建立超快速液相色谱-三重四极杆/线性离子阱质谱(UFLC-QTRAP-MS/MS)同时测定共有差异化学成分含量的方法.结果共鉴定出13个差异化学成分,其中绿原酸、金丝桃苷、芦丁、异槲皮苷、槲皮苷和山柰酚-3-O-芸香糖苷为3者共有差异化学成分;同时测定了这6个共同差异成分的含量,6个成分在相应的浓度范围内线性关系相关系数(r)均大于0.999 4,精密度、重复性和稳定性良好,平均回收率为99.77％～101.89％,且相对标准偏差(RSD)为1.27％～2.19％.金钱草中芦丁和山柰酚-3-O-芸香糖苷的含量较高,其余4个成分在小金钱草中含量较高,而连钱草中6个成分的含量均较少.本研究所建立的方法准确、可靠,可为建立金钱草药材的综合品质评价体系提供基础资料.

目的 使用超高效液相色谱-四极杆串联飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF MS)对脂肪酸修饰型胰高血糖素-1(GLP-1)类似物利拉鲁肽和司美格鲁肽一级结构进行测定.方法 分别在完整分子和酶切肽段水平上检测,采用ACQUITY UPLC peptide BEH C18(2.1 mm×100 mm,30 nm,1.7 μm)色谱柱,流动相 A 为 0.1%甲酸-水溶液,流动相 B 为 0.1%甲酸-乙腈溶液,梯度洗脱,流速0.3 ml/min;采用正离子 ESI+ 离子源和 MSE 采集模式进行数据采集.结果 分别从完整分子和肽段水平准确测定了两种脂肪酸修饰型 GLP-1 类似物一级完整序列结构信息,并对修饰侧链位点进行准确定位.肽段覆盖率为 100%,且专属性强、重复性好.结论 液质联用技术快速、灵敏、准确,可用于 GLP-1 类似物一级结构的表征分析.

为了对芒果核中的化学成分进行系统全面地分析,本研究采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱(UP-LC-Q-TOF-MS/MS)对芒果核中的化学成分进行了分析和鉴定.采用电喷雾离子源(ESI),于负离子模式下采集数据;结合对照品质谱数据及相关文献,对样品中成分的二级质谱数据进行分析,共鉴定出135个化合物,主要包括没食子酸鞣质类47个、黄酮类47个、有机酸类30个、香豆素类3个、环烯醚萜苷类8个,其中17个化合物首次在芒果核中鉴定得出.本实验运用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术对芒果核的化学成分进行了较为全面系统地解析,可为其后续的药效物质基础研究及临床应用奠定基础.