目的:研究改性柑橘果胶（MCP）对兔关节软骨细胞的糖酵解代谢的影响。方法:分离、培养兔膝关节软骨细胞至第3代后，分别用含0、500 μg/ml MCP的培养液（MCP0和MCP500）培养3 d，设MCP0为对照组；连续传代培养软骨细胞，每代软骨细胞分别以MCP0和MCP500培养3 d；以白细胞介素-1β（IL-1β）处理软骨细胞1 d后，再分别用MCP0和MCP500培养3 d。以2-脱氧-葡萄糖（2DG）处理软骨细胞1 d后，再分别用MCP0和MCP500培养3 d；于培养3 d后，通过CCK-8方法检测软骨细胞的相对增殖情况；利用葡萄糖和乳酸检测试剂盒测定软骨细胞的葡萄糖摄取量和乳酸生成量；通过免疫荧光染色方法考察连续传代软骨细胞的Ⅱ型胶原α1（COL2A1）合成情况；采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测软骨细胞的 COL2A1、蛋白聚糖（ ACAN）、性别决定区Y框蛋白9（ SOX9）、缺氧诱导因子-1α（ HIF-1α）、葡萄糖转运蛋白-1（ Glut-1）、丙酮酸激酶M2（ PKM2）、乳酸脱氢酶A（ LDHA）和葡萄糖转运蛋白-3（ Glut-3）的基因表达情况。 结果:与对照组相比，MCP处理提高了软骨细胞的葡萄糖摄取量和乳酸生成量，上调了 ACAN、 HIF-1α、 Glut-1和 PKM2的基因表达水平；与对照组相比，连续传代过程中，MCP可以促进软骨细胞的增殖、维持软骨细胞的表型，上调 COL2A1、 ACAN、 SOX9、 HIF-1α、 Glut-1、P KM2和 LDHA的基因表达，提高软骨细胞COL2A1合成量和乳酸生成量；在经IL-β处理后，与对照组相比，MCP处理提高了软骨细胞的葡萄糖摄取量，上调了 COL2A1、 ACAN、 HIF-1α和 Glut-1的基因表达。在经2DG处理后，MCP处理提高了软骨细胞的葡萄糖摄取量，上调 SOX9、 HIF-1α、 PKM2和 Glut-3的基因表达。 结论:MCP能够增强软骨细胞的葡萄糖摄取能力，提高软骨细胞糖酵解代谢水平。

目的:评价缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)-糖酵解通路在丙泊酚减轻急性睡眠剥夺老龄大鼠脑损伤中的作用。方法:SPF级健康雄性SD大鼠48只，20～22月龄，体质量500～600 g，采用随机数字表法分为4组( n＝12)：对照组(Con组)、睡眠剥夺组(SD组)、睡眠剥夺＋丙泊酚组(SP组)和睡眠剥夺＋丙泊酚＋二甲基乙二酰氨基乙酸(DMOG)组(SPD组)。采用睡眠剥夺仪建立睡眠剥夺模型。于睡眠剥夺前20和3 h时，SP组腹腔注射1%丙泊酚0.04 mg/g，SPD组腹腔注射1%丙泊酚0.04 mg/g和HIF-1α特异性激动剂DMOG 0.05 mg/g。采用条件恐惧实验、新旧物体识别实验评估大鼠记忆能力。行为学实验结束后，取血液和脑组织标本，采用伊文思蓝(EB)染色法检测血脑屏障通透性，HE染色后观察海马组织病理学变化，TUNEL染色法确定海马神经元凋亡率，ELISA法检测血清神经丝轻链蛋白(NfL)、NSE浓度以及海马组织ROS、IL-6、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、乳酸和丙酮酸含量，计算乳酸/丙酮酸比值；采用Western blot法检测海马HIF-1α、丙酮酸激酶M2 (PKM2)、己糖激酶2(HK2)、离子钙结合适配器分子1(IBA1)以及裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cleaved caspase-3)的表达。 结果:与Con组相比，SD组和SPD组僵直时间百分比和识别指数降低，血清NSE和NfL浓度、脑组织EB含量、海马组织ROS、IL-6、iNOS含量和乳酸/丙酮酸比值升高，HIF-1α、PKM2、HK2、IBA1、cleaved caspase-3表达上调，神经元凋亡率升高( P<0.05)，海马区神经细胞发生病理学损伤。与SD组相比，SP组僵直时间百分比和识别指数升高，血清NSE和NfL浓度、脑组织EB含量、海马组织ROS、IL-6、iNOS含量和乳酸/丙酮酸比值降低，HIF-1α、PKM2、HK2、IBA1、cleaved caspase-3表达下调，神经元凋亡率降低( P<0.05)，海马神经细胞病理学损伤减轻。与SP组相比，SPD组僵直时间百分比和识别指数降低，血清NSE和NfL浓度、脑组织EB含量、海马组织ROS、IL-6及iNOS含量、乳酸/丙酮酸比值升高，HIF-1α、PKM2、HK2、IBA1、cleaved caspase-3表达上调，神经元凋亡率升高( P<0.05)，海马区神经细胞病理学损伤加重。 结论:丙泊酚可减轻急性睡眠剥夺诱导的老龄大鼠脑损伤，其机制可能与抑制HIF-1α-糖酵解通路，减轻神经炎症反应有关。

目的:研究Warburg效应通路的分子丙酮酸脱氢酶激酶1(pyruvate dehydrogenase kinase 1, PDK1)、磷酸化的丙酮酸脱氢酶(phosphorylated Pyruvate dehydrogenase, p-PDH)和丙酮酸激酶M2型(Pyruvate kinase isozyme type M2, PKM2)在宫颈癌组织中的表达情况，并探讨上述分子对宫颈癌预后和术后放疗疗效的影响。方法:免疫组织化学法检测102例接受根治性手术的宫颈癌患者原发灶组织中PDK1、p-PDH和PKM2的表达水平，其中63例接受术后放疗，分别单独和联合分析三分子的表达对宫颈癌预后和术后放疗疗效的影响。利用GEO数据集300例数据进行mRNA水平验证。生存分析用Kaplan-Meier法，COX回归模型用于单因素和多因素预后分析。结果:PDK1和PDK1 high/p-PDH high/PKM2 high指标同时高表达与盆腔淋巴结转移正相关( χ2＝10.890、7.407， P<0.05)。PDK1 high/p-PDH high/PKM2 high、国际妇产科联盟(FIGO)分期、盆腔淋巴结转移和术后放疗是影响总生存(OS)和无病生存(DFS)的因素( P<0.05)；多因素分析显示，PDK1 high/PDH high/PKM2 high、FIGO分期和术后放疗是影响OS和DFS的独立预后因素( P<0.05)。GEO数据集验证结果显示，PDK1 high/PDH high/PKM2 high是DFS的危险因素( P<0.05)。病理分型、盆腔淋巴结转移和PDK1 high/p-PDH high/PKM2 high是术后放疗DFS的影响因素( P<0.05)；多因素分析显示，病理分型和PDK1 high/p-PDH high/PKM2 high( P<0.05)是影响术后放疗DFS的独立预后因素。 结论:PDK1 high/p-PDH high/PKM2 high亚型宫颈癌患者预后和术后放疗无复发生存差，此亚型患者可能为Ⅰ～Ⅱ B期宫颈癌预后不良和术后放疗易复发的高危人群，为宫颈癌的分层治疗提供新思路。

目的:探讨星形细胞上调基因-1(AEG-1)和M2型丙酮酸激酶(PKM2)在骨肉瘤组织和骨软骨瘤组织中表达及其临床意义。方法:收集大庆市龙南医院(齐齐哈尔医学院第五附属医院)2014年3月至2020年11月资料完整的21例骨软骨瘤和71例骨肉瘤组织标本，使用免疫组织化学法检测AEG-1和PKM2的表达水平，并采用 χ2检验进行统计学分析。 结果:骨肉瘤组织中AEG-1阳性表达率60.56%(43/71)，明显高于骨软骨瘤组织AEG-1阳性表达率19.05%(4/21)，两者差异有统计学意义( χ2＝11.178， P<0.01)，AEG-1表达水平与骨肉瘤恩内金分期(Eneeking分期)、肺转移明显相关( χ2＝4.461、6.277， P<0.05)。骨肉瘤组织中PKM2阳性表达率66.20%(47/71)，明显高于骨软骨瘤组织PKM2阳性表达率28.57%(6/21)，两者差异有统计学意义( χ2＝9.395， P<0.01)，PKM2表达水平与骨肉瘤Eneeking分期、肺转移和软组织浸润明显相关( χ2＝6.552、5.253、5.591， P<0.05)。 结论:AEG-1和PKM2在骨肉瘤组织中表达水平升高，AEG-1和PKM2可能与骨肉瘤的恶性程度、疾病的进程以及骨肉瘤侵袭转移密切相关。

目的:研究糖酵解通路关键酶在婴幼儿血管瘤中的表达变化并探究其作用。方法:收集从2020年6月至2020年12月在四川大学华西医院小儿外科行手术切除的8例婴幼儿血管瘤（infantile hemangioma，IH）组织标本。免疫组织化学分析增殖期组织与消退期组织中糖酵解关键酶的表达，进一步在细胞水平采用Western blot分析在血管瘤内皮细胞（hemangioma-derived endothelial cell，HemEC）与人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cell，HUVEC）的表达情况。应用CCK8、Transwell与Annexin V/PI法检测抑制剂PFK15干预磷酸果糖激酶2/果糖2，6二磷酸酶3（6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2，6-biphosphatase 3，PFKFB3）表达后的HemEC的增殖、迁移及凋亡能力。结果:在增殖期血管瘤组织中，糖酵解关键酶葡萄糖转运体1（glucose transporter 1，Glut1）、己糖激酶2（hexokinase 2，HK2）、PFKFB3、磷酸果糖激酶1（phosphofructokinase-1，PFK1）、M2型丙酮酸激酶（pyruvate kinase M2，PKM2）及乳酸脱氢酶A（lactate dehydrogenase A，LDHA）的表达水平均高于消退期血管瘤组织。在细胞表达层面，Western blot结果显示，增殖期HemEC中糖酵解关键酶的表达水平均高于HUVEC。使用PFKFB3特异性抑制剂PFK1干预细胞后，HemEC增殖受到显著抑制（ P<0.05），HemEC迁移受到显著抑制（163±12比64±7， P<0.01），细胞凋亡升高（11.67±0.74比7.25±0.41， P<0.01）。 结论:糖酵解关键酶在IH增殖期血管瘤组织中比消退期组织中表达高，在HemEC中表达强于HUVEC。阻断糖酵解关键酶PFKFB3的活性能抑制HemEC增殖，促进凋亡。

目的:探讨小鼠肝脏黏膜相关恒定T（MAIT）细胞在2型糖尿病（T2DM）发病中的作用。方法:将5周龄雄性C57BL/6小鼠分为模型组与正常对照组，每组各5只，模型组给予高脂饮食16周建立T2DM小鼠模型。利用密度梯度离心分离肝脏单个核细胞，流式细胞仪检测肝脏MAIT细胞比例及干扰素γ（IFN-γ）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素17（IL-17）及IL-4表达水平。分选T2DM小鼠肝脏MAIT细胞与正常小鼠原代肝细胞，共培养后检测肝细胞糖代谢关键酶基因［葡萄糖-6-磷酸酶（G6pc）、丙酮酸激酶M1/2（Pkm）、6-磷酸果糖激酶1（Pfk1）］ mRNA的相对表达量。组间比较采用独立样本 t检验。 结果:与正常对照组相比，T2DM小鼠体重显著增加［分别为（49.87±0.99）和（26.41±0.81）g， t=36.76， P<0.05］，空腹血糖显著升高［分别为（11.52±0.46）和（6.12±0.48）mmol/L， t=16.22， P<0.05］；肝脏脂肪变明显；流式细胞仪检测结果显示肝脏MAIT细胞比例显著升高［分别为（1.06±0.46）% 和（0.42±0.20）%， t=2.85， P<0.05］，IFN-γ表达显著升高［分别为（27.18±13.14）% 和（47.56±13.08）%， t=2.46， P<0.05］。体外共培养实验表明，与正常对照组比较，T2DM小鼠肝脏MAIT细胞正常小鼠原代肝细胞中G6pc表达量升高（ t=14.60， P<0.01），Pkm（ t=22.27， P<0.01）及Pfk1（ t=4.28， P<0.05）表达量降低。 结论:肝脏MAIT细胞在T2DM中比例升高、IFN-γ表达增加，可能通过促进肝糖输出驱动T2DM发生。

目的:探讨抑制转录共激活因子TAZ和M2型丙酮酸激酶(PKM2)在头颈鳞癌(SCCHN)组织的表达及临床意义。方法:收集2014年3月至2020年5月吉林省肿瘤医院手术治疗92例SCCHN患者组织标本，包括25例口腔癌、33例喉癌、l4例下咽癌、6例面颊癌、7例颌面癌、5例舌癌、2例唇癌，另选择25例口腔和咽喉良性病变患者手术时留取的正常口腔、咽喉黏膜组织作为对照组；采用免疫组织化学法检测各组织中TAZ和PKM2的表达水平，并结合临床资料进行 χ2检验。 结果:TAZ在SCCHN组织中的阳性表达率[83.75%(67/92)]，明显高于正常对照组织阳性表达率[54.55%(12/25)]，差异有统计学意义( χ2＝10.495， P<0.01)，TAZ表达水平与SCCHN组织学分化程度、美国癌症联合委员会分期(AJCC分期)、淋巴结转移明显相关( χ2＝6.525、5.872、6.107， P<0.05)。PKM2在SCCHN组织中的阳性表达率[68.48%(63/92)]，明显高于正常对照组织阳性表达率[16.00%(4/25)]，差异有统计学意义( χ2＝22.122， P<0.01)，PKM2表达水平与SCCHN的AJCC分期、淋巴结转移明显相关( χ2＝6.736、5.312， P<0.05)。 结论:TAZ和PKM2在SCCHN组织中的阳性表达率高于对照组织，TAZ和PKM2在SCCHN组织中高表达与肿瘤恶性进展明显相关。

目的:探讨M2型丙酮酸激酶(PKM2)和富含脯氨酸蛋白11(PRR11)在乳腺癌组织中的表达及其与乳腺癌患者预后的关系。方法:收集金华市中心医院磐安分院(磐安县人民医院)和金华市中心医院2012年5月至2019年10月病理科归档的病历资料完整的88例乳腺癌组织标本，采用免疫组织化学法检测88例乳腺癌患者癌组织和对应癌旁组织中PKM2和PRR11的表达水平。各组间比较采用 χ2检验。 结果:PKM2在乳腺癌组织中阳性表达率为81.82%(72/88)，在对应癌旁组织中阳性表达率为57.95%(51/88)，两者差异有统计学意义( t＝11.906， P<0.05)，PRR11在乳腺癌组织中阳性表达率为76.14%(67/88)，在对应癌旁组织中阳性表达率为37.50%(33/88)，两者差异有统计学意义( t＝26.771， P<0.01)；PKM2表达水平与乳腺癌肿瘤大小、TNM分期、淋巴结转移明显相关( t＝5.353、7.015、4.698， P<0.05)；PRR11表达水平与乳腺癌TNM分期、淋巴结转移明显相关( t＝7.912、6.299， P<0.05)。 结论:PKM2和PRR11在乳腺癌中呈高表达，PKM2和PRR11可能参与乳腺癌的发生、发展过程。

原发性肝细胞癌是世界上常见、恶性程度很高的肿瘤之一，在中国恶性肿瘤中发病率排第5位，肝癌的各种治疗措施疗效不佳。M2型丙酮酸激酶作为糖酵解途径关键酶，它的异常表达与肝癌的增殖、转移、诊断、治疗及预后密切相关，与肝癌药物治疗的耐药和放射线抗拒也有关联，采用多种途径靶向调控肝癌细胞的M2型丙酮酸激酶，有望成为治疗原发性肝癌的一个新方向。

目的:探讨CXC趋化因子受体7(CXCR7)和M2型丙酮酸激酶(PKM2)在结直肠癌组织的表达及其临床意义。方法:采用免疫组织化学法检测2017年10月至2022年12月大庆龙南医院(齐齐哈尔医学院第五附属医院)121例结直肠癌组织和对应癌旁组织中CXCR7和PKM2的表达，采用 χ2检验分析CXCR7和PKM2表达与结直肠癌临床病理因素的关系。 结果:CXCR7在结直肠癌组织中表达率为62.81%(76/121)，明显高于对应癌旁组织中阳性表达率33.06%(40/121)，差异有统计学意义( χ2＝21.458， P<0.01)。CXCR7表达水平与结直肠癌患者淋巴结转移、TNM分期、浸润深度明显相关( χ2＝5.061、5.945、4.831， P<0.05)，CXCR7表达水平与结直肠癌患者组织学分化程度、性别、年龄、肿瘤部位无明显相关( χ2＝0.001、0.001、0.371、0.068， P>0.05)。PKM2在结直肠癌组织中表达率为72.73%(88/121)，明显高于对应癌旁组织中阳性表达率15.70%(19/121)，差异有统计学意义( χ2＝79.762， P<0.01)。PKM2表达水平与结直肠癌患者浸润深度、淋巴结转移、组织学分化程度、TNM分期明显相关( χ2＝5.459、0.020、6.050、6.594， P<0.05)，PKM2表达水平与结直肠癌患者性别、年龄、肿瘤部位无明显相关( χ2＝0.013、0.001、0.043， P>0.05)。 结论:CXCR7和PKM2在结直肠癌组织中的表达水平明显升高，且CXCR7和PKM2高表达与结直肠癌患者预后不良相关，检测CXCR7和PKM2的表达有助于评判结直肠癌患者的恶性程度和预后。