目的 优化即食水产制品中N-亚硝胺类化合物的前处理方法.方法 采集市售即食水产制品样品,均质后经水蒸气蒸馏,取蒸馏液加入乙醇(分散剂)、三氯甲烷(萃取剂)和3.0 g氯化钠进行分散液液微萃取(DLLME),萃取时间为10 min.离心后取下层有机相,采用气相色谱-三重四极杆质谱法(GC-MS/MS)多反应监测模式测定6种N-亚硝胺类化合物,以内标法定量.结果 6种N-亚硝胺类化合物在10.0～500 μg/L线性范围较好,相关系数均＞0.999;方法 检出限为0.05～0.6μg/kg,定量限为0.15～1.6 μg/kg;平均加标回收率为71.8％～108.9％,相对标准偏差(RSD)为1.4％～8.6％.检测市售即食水产制品样品20份,N-二甲基亚硝胺检出率最高,为90％;N-亚硝胺吡咯烷、N-二乙基亚硝胺和N-二丁基亚硝胺检出率分别为15％、10％和10％.结论 采用水蒸气蒸馏联合DLLME优化即食水产制品中N-亚硝胺类化合物的前处理方法,可满足检测要求.

目的 观察吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)对二甲基亚硝胺(dimethylnitrosamine,DMN)诱导肝纤维化大鼠肝组织核转录因子-κB (nuclear factor-κB,NF-κB)、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)及Ⅲ型胶原(collagen typeⅢ,Col-Ⅲ)表达的影响,探讨PDTC抗肝纤维化的可能机制.方法 22只SD大鼠随机分为对照组6只,模型组8只和治疗组8只.模型组和治疗组腹腔注射质量分数0.5％ DMN溶液2 mL/kg,每2d注射1次,连续4周,诱导大鼠肝纤维化模型;对照组腹腔注射等量生理盐水.治疗组造模期间给予PDTC溶液150 mg/(kg·d)灌胃,对照组、模型组给予等量蒸馏水灌胃.实验结束后处死大鼠,取肝左叶组织光镜下观察肝组织病理改变,采用电泳迁移率试验检测肝组织NF-κBp65活性,实时荧光定量PCR法检测肝组织NF-κBp65、TGF-β1和Col-ⅢmRNA表达,免疫组织化学法检测肝组织NF-κBp65着色细胞数目和Col-Ⅲ着色面积.结果 对照组肝小叶结构正常,细胞排列规律,未见肝细胞变性、坏死;模型组肝细胞融合性坏死,胶原纤维明显增生,假小叶形成;治疗组肝细胞肿胀、变性及炎症细胞浸润程度均较模型组轻;模型组、治疗组肝组织NF-κBp65活性[(76.6±6.5)％、(51.2±4.6)％],NF-κBp65 mRNA(0.019 3±0.005 0、0.009 5±0.002 1)、TGF-β1 mRNA(0.017 5±0.001 2、0.009 7±0.001 1)及Col-ⅢmRNA表达(0.077 5±0.030 5、0.030 1±0.003 3)均高于对照组((28.5±3.3)％、0.003 0±0.001 4、0.004 7±0.000 9、0.015 2±0.005 5)(P＜0.05),NF-κBp65着色细胞数目[(68.60±4.65)、(49.65±3.60)个]均较对照组[(14.68±2.98)个]多(P＜0.05),Col-Ⅲ着色面积[(10.39±1.53)、(7.36±1.17)μm2]均较对照组[(2.46±0.31)μm2]大(P＜0.05);模型组肝组织NF-κBp65活性,NF-κBp65 mRNA、TGF-β1mRNA及Col-ⅢmRNA表达均较治疗组高,NF-κBp65着色细胞数目较治疗组多,Col-Ⅲ着色面积较治疗组大(P＜0.05);Pearson相关分析结果显示,肝组织NF-κBp65活性与NF-κBp65 mRNA、TGF-β1 mRNA、Col-ⅢmRNA表达,NF-κBp65着色细胞数目,Col-Ⅲ着色面积均呈正相关(r=0.884,P＜0.001;r=0.976,P＜0.001;r=0.769,P＜0.001;r=0.934,P＜0.001;r=0.942,P＜0.001),TGF-β1 mRNA与Col-ⅢmRNA表达及Col-Ⅲ着色面积均呈正相关(r=0.831,P＜0.001;r=0.918,P＜0.001).结论 PDTC可能通过抑制NF-κB活性,下调TGF-β1表达,抑制以ColⅢ为主要成分的细胞外基质过度沉积,来发挥抗肝纤维化作用.

目的 对水产品中N-二甲基亚硝胺气相色谱-串联质谱(GC-MS/MS)测定样品处理方法进行改进.方法 样品粉碎后,乙腈振荡提取,EMR粉末净化,冷冻离心,取上清液过0.22 μm滤膜,5 μl低温大体积进样,GC-MS/MS测定,外标法定量.结果 N-二甲基亚硝胺在1.0 μg/L～20.0 μg/L呈现良好的线性关系,相关系数(r) =0.998 8;四类水产品类样品的相对标准偏差为1.59％ ～1.99％;3个水平的加标回收率为87.9％ ～107.0％.结论 本法前处理简便,无浓缩过程,提取净化后直接上机,相对于GB 5009.26—2016水蒸汽蒸馏法,本法具有操作步骤少、称样量少、试剂用量少、前处理时间短、准确性高的特点,能够满足水产品中N-二甲基亚硝胺检测的要求.

目的:建立气相色谱-热能分析法(GC-TEA法)检测缬沙坦原料药及其制剂中N-二甲基亚硝胺(NDMA)含量.方法:色谱条件,采用INERTROAP-WAX(30 m×0.32 mm×0.5 μm)毛细管气相色谱柱,柱温为程序升温(初始温60℃,保持2 min,以10℃·min-1升至120℃,保持1 min,以50℃·min-1升至200℃,保持2 min),进样口温度230℃,不分流进样,进样量0.5 μL;热能分析仪条件,接口温度250℃,热解室温度500℃,真空度59.85～66.5 Pa,氧气压力13.79 kPa;臭氧水平244(22.8 V).结果:方法的专属性强,N-二甲基亚硝胺质量浓度在10～1 000 ng· mL-1的范围内呈线性(r=1.000,n=8),检测下限为3 ng· mL-1;13批样品中NDMA含量为0～87.09×10-6.结论:本方法可用于缬沙坦及其制剂中的NDMA检测.

[背景]亚硝胺类化合物(NAms)是一类新型消毒副产物,其种类较多、毒性较大,对人群健康具有潜在危害.目前,国内饮用水监测领域未颁布相关标准方法.[目的]建立优化同时测定生活饮用水及其水源水中9种NAms的固相萃取-气相色谱-质谱法.[方法]500mL水样通过椰壳炭填料固相萃取小柱进行NAms富集,二氯甲烷洗脱,同位素内标加入法定量,使用VF-624 MS色谱柱,气相色谱-质谱联用检测.采集上海不同类型水样以检测NAms含量.[结果]NAms待测物在10～500ng/L范围内线性良好,相关系数均大于0.995,分别以纯水和水源水为基质,方法检出限均低于4ng/L.加标浓度为20、100、200ng/L时,纯水、水源水和管网水中NAms的加标回收率在68.7％～113％ 之间,相对标准偏差均在10％ 以下.上海不同类型水样均可检出NAms,其中N-二甲基亚硝基胺(NDMA)和N-二正丁基亚硝基胺(NDBA)检出率最高.[结论]本方法灵敏度高、检出限低、准确度好,可实现水中9种NAms的同时测定.

目的 采用改进的QuEChERS法辅以低温条件进行提取和净化,建立气相色谱-质谱(GC-MS)/SIM方法,快速测定水产干制品中N-二甲基亚硝胺含量.方法 称样5g,经乙酸乙酯(10mL)提取,冷冻离心,提取液经十八烷基硅烷键合硅胶(C18)和乙二胺-N-丙基硅烷(PSA)净化,采用Rxi-624 Sil MS毛细管色谱柱(30m×0.25 mm×1.4 μm)分离,选择离子监测(SIM)模式进行测定,外标法定量.结果 N-二甲基亚硝胺在1～200 μg/L范围内线性关系良好,相关系数(r)为0.999 6,相对标准偏差(RSD)为0.8％～6.0％,检出限为0.50 μg/kg,加标回收率为88.0％～101.6％.对湛江市东风水产批发市场采集的鱼、虾、贝类样品检测结果显示,鱼类和虾类样品中均有N-二甲基亚硝胺检出,贝类样品中未检出.鱼类样品检出量为1.29～3.75 μg/kg,虾类样品检出值为0.50～ 2.63 μg/kg.结论 该法简便快速,灵敏有效,适用于水产干制品中N-二甲基亚硝胺含量的快速筛查和测定.

目的 建立一种能够快速富集、测定大体积水样中N-二甲基亚硝胺的分析方法.方法 预处理基于超声辅助-分散固相萃取,在水样中加入活化的椰壳活性炭粉末,经超声分散快速完成对水中N-二甲基亚硝胺的富集,后对悬浮液进行抽滤,结束后用二氯甲烷进行洗脱并旋蒸浓缩,使用配备大气压化学电离源的超高效液相色谱串联质谱进行多反应监测模式测定,同位素内标法定量.结果 当取样量为500 mL时,N-二甲基亚硝胺的检出限为2.0 ng/L,定量限为6.0 ng/L,目标物在1.0～200.0 ng/mL浓度范围内线性良好,相关系数达0.999以上,在不同水样(水源水及饮用水)中三水平加标实验回收率可达95.7％ ～ 100.8％,相对标准偏差均小于4.2％.最终,利用建立的方法对48份实际水样进行测定,N-二甲基亚硝胺检出范围为＜2.0～14.4 ng/L.结论 本方法相对于传统固相萃取方法更加快速高效,可节约至少50％预处理时间,同时方法学参数表现令人满意.

目的 探讨肉制品中食品添加剂硝酸盐和亚硝酸盐的标准管理.方法 通过对国际食品法典以及美国、加拿大、欧盟、澳新、日本、韩国和中国肉制品中硝酸盐和亚硝酸盐食品添加剂标准规定的分析,结合风险评估、监测结果和食品中毒事件数据分析的情况,探讨相关标准未来的发展方向.结果 从生产加工过程控制、终产品检测可操作性或进出口口岸检测便利性的角度出发,美国、加拿大、澳新选择制定最大添加量,日本和韩国选择制定最大残留量,欧盟则根据具体食品产品,选择制定最大添加量或最大残留量.我国在食品添加荆标准中采用了添加量和残留量兼顾策略的同时,在污染物限量标准中规定了食品中N-二甲基亚硝胺的限量.膳食暴露评估显示硝酸盐和亚硝酸盐作为食品添加剂对膳食暴露贡献较低,对公众食品安全风险较低.结论 虽然目前标准中保留硝酸盐和亚硝酸盐最大添加量和残留量的做法符合过程控制原则和实际监管需求,但仍建议继续开展关于食品加工工艺改进和替代品的研究,同时也要继续加强对消费者和餐饮业者食品安全教育,减少误食误用引起的食物中毒.

亚硝胺类化合物是公认的强致恶性肿瘤物,在自然界分布很广,人们主要通过水、肉制品及塑料制品等途径摄入亚硝胺等.近年来,随着缬沙坦中检出N,N-二甲基亚硝胺(NDMA),引起全球药企及监管部门注意,对于药物中亚硝胺类杂质的检测技术也成为了热点,亚硝胺类化合物的检测范围不断增加,药品种类也从沙坦等血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂(ARB)类药物扩展到雷尼替丁和二甲双胍等.我们主要对近年来国内外亚硝胺类化合物中NDMA的健康危害、产生来源以及检测手段等研究进展进行综述.

共轭亚油酸(conjugated linoleic acid,CLA)是存在于人和动物体内的营养物质,具有抗肿瘤、抗动脉粥样硬化和调节免疫等功能,但其口服生物利用度低.本文制备了CLA粉雾剂(conjugated linoleic acid dry powder inhalers,CDPIs),经大鼠气管给药后治疗大鼠原发性肺癌.首先,制备CLA纳米乳,加入10％甘露醇冻干后得到CDPIs疏松白色粉末,其空气动力学粒径(aerodynamic median diameter,Da)为3.10 μm,适合肺吸入给药.用3-甲基胆蒽及N,N-二甲基亚硝胺经气管喷入大鼠肺中,45天后得到原发性肺癌模型.所有动物实验经军事科学院军事医学研究院伦理委员会批准且实验均按照相关指导原则和规定进行.分别将CDPIs、吉非替尼混悬液和空白粉雾剂经气管喷入肺癌大鼠肺中.与模型组比较,吉非替尼混悬液组和CDPIs组的肿瘤结节和炎性细胞数量均明显减少,其中CDPIs组的药效优于吉非替尼混悬液组.CDPIs组CD31和NF-κB p65表达明显减少,优于吉非替尼混悬液组;CDPIs组血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)水平明显降低,与吉非替尼组治疗效果相当;CDPIs组Tunel检测表明细胞凋亡明显增多,明显优于吉非替尼混悬液组.CDPIs能直接将具有优良药理活性的药物递送至肺部肿瘤,是一种具有前景的用于肺癌治疗的肺吸入给药剂型.