目的:建立苯乙烯尿中代谢产物苯乙醇酸和苯乙醛酸的分散液液微萃取-高效液相色谱法的测定方法。方法:以正辛醇为萃取剂，乙醇为分散剂，对尿中苯乙醇酸和苯乙醛酸进行萃取，涡旋离心后取上层液体，以高效液相色谱仪测定。结果:苯乙醇酸在0~10.0 mg/L浓度范围内的线性相关系数>0.999，方法检出限为9.9 μg/L，加标回收率为86.1%~101.6%，日内精密度（ RSD）为1.07%~3.76%，日间精密度（ RSD）为1.24%~3.33%。苯乙醛酸在0.0~2.0 mg/L浓度内的线性相关系数>0.999，方法检出限为2.6 μg/L，加标回收率为88.8%~100.3%，日内精密度（ RSD）为1.02%~3.17%，日间精密度（ RSD）为1.59%~2.41%。 结论:本方法方法检出限低，富集倍数高，灵敏度好，适用于职业接触苯乙烯人群尿中苯乙醇酸和苯乙醛酸的测定。

目的:建立超声辅助离子液体微萃取-石墨炉原子吸收光谱法测定尿中镍的含量。方法:于2018年9月至2019年9月，以甲醇为分散剂，吡咯烷二硫代甲酸铵盐为螯合剂，离子液体1-己基-3-甲基-咪唑六氟磷酸盐（[Hmim] [PF 6]）为萃取剂，萃取尿中镍；加入pH 9缓冲溶液，超声10 min后，离心弃上清，加无水甲醇溶解沉淀，在涡旋混合仪上充分混匀，取15 μl混合液用石墨炉原子吸收光谱法测定。 结果:尿镍浓度为2.0~10.0 μg/L线性关系良好， r=0.999，检出限为0.43 μg/L。加标回收率为95.6%~103.7%，相对标准偏差为2.53%~4.82%。 结论:超声辅助离子液体微萃取-石墨炉原子吸收光谱法测定尿镍的检出限低、回收率高、精密度好，可用于镍职业接触人群和非职业接触人群的尿镍测定。

目的:探讨基于软骨脱细胞外基质微载体体外构建具有功能化和自我更新能力的软骨类器官。方法:取新鲜的猪关节软骨，将部分仅粉碎处理的软骨微粒设置为天然软骨组；利用物理离心化学萃取相结合的脱细胞方法，制备粒径合适的细胞外基质（ECM）微载体，设置为微载体组。通过旋转式生物反应器将人脐带干间充质干细胞（hUCMSCs）和人软骨细胞（hCho）按照3∶1的比例与微载体负载，体外构建软骨类器官，将诱导不同时间的类器官分为诱导0、7、14及21 d组。4′，6-二脒基-2-苯基吲哚（DAPI）荧光染色观察、DNA定量评估微载体组和天然软骨组细胞残留情况；番红O、甲苯胺蓝染色观察微载体ECM保留情况，二甲氨基苯甲醛比色法测定微载体组和天然软骨组胶原蛋白含量；二甲基亚甲蓝（DMMB）比色法测定微载体组和天然软骨组糖胺聚糖（GAGs）含量。扫描电镜及能谱分析对微载体进行进一步表征；将添加体积分数10%胎牛血清（FBS）的杜尔伯克改良伊戈尔低糖培养基（DMEM）培养的hUCMSCs作为对照组，将微载体浸提液培养的hUCMSCs作为实验组，两组分别设置培养1、3、5 d共3个时间点的亚组，细胞增殖及毒性检测试剂盒（CCK-8）检测两组生物相容性。活死染色检测诱导0、7、14及21 d组的软骨类器官细胞活性，Ki67荧光染色鉴定诱导14 d软骨类器官的自我更新能力。RT-PCR测定诱导7、14、21 d组的软骨类器官，包括软骨形成相关标记物聚蛋白聚糖（ACAN）、Ⅱ型胶原（COL2A1）、性别决定区Y框蛋白9（SOX9）及软骨肥大、矿化相关标记物Ⅰ型胶原（COL1A1）、Runt相关转录因子2（RUNX2）、骨钙素（OCN）的表达水平；比色法和DMMB法测定诱导0、7、14及21 d组的类器官分泌胶原蛋白和GAGs能力。结果:DAPI荧光染色结果显示，天然软骨组具有大量细胞核，而微载体组则基本无细胞核。微载体组DNA含量为（7.8±1.8）ng/mg，较天然软骨组的（526.7±14.7）ng/mg显著降低（ P<0.01）。番红O、甲苯胺蓝染色可见微载体着色较深且均一，保留大量软骨ECM成分。微载体组胶原蛋白含量为（252.9±1.4）μg/mg，GAGs含量为（173.4±0.8）μg/mg，均显著低于天然软骨组的（311.9±2.2）μg/mg、（241.3±0.7）μg/mg（ P<0.01）。扫描电镜显示，微载体表面有凹凸不平相互交错的胶原纤维网络。能谱分析结果显示，C、O、N元素均匀分布在微载体，表明该微载体成分组成均匀。微载体生物相容性良好，培养1、3 d时，对照组和实验组CCK-8实验结果比较，差异均无统计学意义（ P>0.05）；培养5 d，实验组 A值为0.53±0.02，优于对照组的0.44±0.03（ P<0.05）。诱导0、7、14及21 d组中，hUCMSCs和hCho贴附在微载体表面且细胞活性好，活死比例分别为（70.6±1.1）%、（80.5±0.6）%、（94.5±0.9）%、（90.8±0.5）%（ P<0.01）；诱导14 d时，软骨类器官有大量Ki67阳性细胞。RT-PCR显示，诱导7 d组ACAN、COL2A1、SOX9、COL1A1、RUNX2、OCN表达水平分别为1.00±0.09、1.00±0.24、1.00±0.18、1.00±0.03、1.00±0.06、1.00±0.13；诱导14 d组ACAN、COL2A1、SOX9、COL1A1、RUNX2、OCN表达水平分别为4.16±0.28、5.09±1.25、5.65±1.05、0.47±0.01、1.68±0.02、0.21±0.06；诱导21 d组ACAN、COL2A1、SOX9、COL1A1、RUNX2、OCN表达水平分别为13.42±0.92、3.07±0.21、1.84±1.08、2.72±0.17、2.91±0.18、3.32±1.20。与诱导7 d组比较，诱导14 d组ACAN、COL2A1、SOX9、RUNX2表达水平均升高（ P<0.05），COL1A1表达水平降低（ P<0.05），OCN表达水平差异无统计学意义（ P>0.05）；与诱导7 d组比较，诱导21 d组ACAN、COL1A1、RUNX2表达水平均显著升高（ P<0.01），COL2A1、SOX9、OCN表达水平差异均无统计学意义（ P>0.05）；与诱导14 d组比较，诱导21 d组ACAN、COL1A1、RUNX2、OCN表达水平均升高（ P<0.05或0.01），COL2A1表达水平差异无统计学意义（ P>0.05），SOX9表达水平降低（ P<0.05）。诱导0、7、14及21 d组胶原蛋白含量分别为（219.15±0.48）μg/mg、（264.07±1.58）μg/mg、（270.83±0.84）μg/mg、（280.01±0.48）μg/mg，GAGs含量分别为（171.18±1.09）μg/mg、（184.06±1.37）μg/mg、（241.08±0.84）μg/mg、（201.14±0.17）μg/mg。与诱导0 d组比较，诱导7、14、21 d组胶原蛋白和GAGs含量均显著升高（ P<0.01）。在诱导7、14、21 d组中，诱导7 d组胶原蛋白含量最低（ P<0.01），诱导21 d组胶原蛋白含量最高（ P<0.01）；诱导7 d组GAGs含量最低（ P<0.01），诱导14 d组GAGs含量最高（ P<0.01）。 结论:物理化学方法结合制备的微载体脱细胞成功，其基质保留较多，成分均一且无细胞毒性。基于微载体负载hUCMSCs与hCho体外成功构建软骨类器官，具有细胞活性好、自我更新能力、软骨形成相关基因表达强及分泌胶原蛋白和GAGs等特点，诱导14 d时构建的软骨类器官成软骨活性最佳。

目的:研究蜂蜇草萃取物对胡蜂蜂毒致人红细胞溶血的拮抗作用。方法:采用水提取法对干蜂蜇草进行萃取，真空干燥获得蜂蜇草萃取物，配制成1 g/L备用；从胡蜂工蜂尾部收集蜂毒原液备用。获取A、B、O、AB型健康献血者悬浮红细胞液制成洗涤红细胞，调节红细胞计数（4.0～80.0）×10 9/L（血细胞计数板上计数红细胞数量1～20个/小格），按处理因素分成生理盐水对照组（NS组，红细胞液200 μL +生理盐水20 μL）、蜂蜇草萃取物组（FZC组，红细胞液200 μL+蜂蜇草萃取物10 μL +生理盐水10 μL）、蜂毒组（FD组，红细胞液200 μL+蜂毒10 μL+生理盐水10 μL）、蜂蜇草萃取物+蜂毒组（FCD组，红细胞液200 μL +蜂蜇草萃取物10 μL +蜂毒10 μL），每组10份。将各组溶液置于玻璃试管中，放入37 ℃温箱，10 min后于显微镜下直接观察血细胞计数板并进行红细胞计数，比较不同血型相同处理因素之间以及相同血型不同处理因素组之间红细胞计数的差异。 结果:在相同处理因素下，各血型间红细胞计数差异无统计学意义，NS组中A、B、O、AB型红细胞计数（×10 9/L）分别为5.567±1.368、5.146±1.690、4.577±0.774、5.197±1.587（ F＝0.852， P＝0.475），FZC组分别为5.751±1.489、5.268±1.418、4.727±1.174、5.298±1.229（ F＝0.987， P＝0.410），FD组分别为0.546±0.450、0.804±0.428、0.679±0.283、0.846±0.453（ F＝1.089， P＝0.366），FCD组分别为5.532±1.330、5.051±1.596、4.589±0.879、5.140±1.492（ F＝0.820， P＝0.492）。相同血型不同处理因素组间比较红细胞计数：在FZC组与NS组间比较差异无统计学意义，说明蜂蜇草萃取物对红细胞溶血无影响；而在FD组则明显低于NS组（均 P<0.05），说明蜂毒对红细胞有明显的溶血作用；但在FCD组与NS组间比较红细胞计数差异也无统计学意义，说明蜂蜇草萃取物拮抗蜂毒的溶血作用而不影响红细胞计数；而FCD组红细胞计数明显高于FD组（均 P<0.05），进一步说明蜂蜇草萃取物拮抗蜂毒的溶血作用。 结论:胡蜂蜂毒具有明显的溶血作用，而蜂蜇草萃取物能有效拮抗蜂毒的溶血作用；蜂毒的溶血作用与人ABO血型无关。

目的:建立涡旋辅助液液微萃取-高效液相色谱法测定尿中双酚S的方法。方法:以乙腈为分散剂，正辛醇为萃取剂，萃取尿中双酚S。采用单因素轮换实验确定最佳萃取条件，并评估方法学性能指标。结果:尿中双酚S在0.0~160 μg/L范围线性相关系数大于0.999，检出限为0.76 μg/L，样品加标回收率为88.06%~103.81%，日内精密度范围为1.78%~2.85%，日间精密度范围为2.65%~4.25%。结论:该法准确可靠，灵敏度高，适用于职业接触人群及非职业人群尿中双酚S的测定。

目的:建立乙二醇单甲醚的代谢产物尿中甲氧基乙酸的柱前衍生-液液微萃取-气相色谱测定法。方法:向尿样中加入磷酸盐缓冲液、叔丁氧基乙酸（内标物）、五氟苄基溴（衍生剂），随后置于90 ℃水浴锅中衍生40 min，冷却后过滤，二氯甲烷萃取，振荡离心后吸取下层有机相注入气相色谱仪，DB-5毛细管色谱柱分离，ECD检测器检测。结果:尿中甲氧基乙酸浓度在0.6~60.0 mg/L时线性关系良好，相关系数>0.999，平均回收率为76.6%~110.7%，日间精密度为8.00%~8.82%，检出限为0.13 mg/L。结论:该方法灵敏度高，有机试剂用量少，适用于职业接触乙二醇单甲醚人群尿中甲氧基乙酸的检测。

目的:建立离子液体微萃取-石墨炉原子吸收光谱法测定尿锰含量。方法:以乙醇为分散剂，8-羟基喹啉为螯合剂，离子液体1-辛基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐（[Omim] [PF 6] ）为萃取剂，萃取尿锰。采用单因素轮换试验确定萃取条件后，评价离子液体微萃取-石墨炉原子吸收光谱法测定尿锰的精密度、准确度和检出限等性能指标。 结果:该方法测定尿锰线性范围为0.0~1.6 μg/L，相关系数为0.992，检出限为0.03 μg/L，样品加标回收率为84.90%~96.50%，相对标准偏差为0.36%~1.84%。结论:该方法检出限低，灵敏度高，回收率高，可用于职业接触人群及普通人群尿锰的测定。

目的 建立饮用水中9种卤代苯醌的悬浮固化分散液液微萃取-液相色谱-质谱联用分析方法.方法 向10 ml水样中加入1.5 g的NaCl,在0.3 ml甲醇作为分散剂的情况下,用20 μl的1-十二醇进行分散液液微萃取,离心后萃取剂在-20℃冰箱中凝固,沥干水分后加入80 μl甲醇复溶.以甲醇-0.2％甲酸水为流动相,经AcclaimTM RSLC120C18色谱柱(2.1 mm×100mm,2.2 μm)分离后,采用四极杆串联质谱仪电喷雾负离子模式和多反应监测(MRM)模式进行检测,外标法定量.结果 9种氯代苯醌化合物在50～2 000 ng/L的浓度范围内,所得回归方程的线性关系良好,RSD＞0.99.该方法的检出限为4～20 ng/L;加标回收率为79.6％～121.3％,RSD为4.4％～14.7％.结论 该方法简单、快速,可用于饮用水中9种氯代苯醌的同时检测.

目的 开发一种基于聚苯乙烯纳米纤维的固相萃取结合超高效液相色谱串联质谱法测定人尿液中氨磺必利、奥氮平、利培酮、帕利哌酮4种非典型抗精神病药物.方法 用静电纺丝技术制备聚苯乙烯纳米纤维,并以聚苯乙烯纳米纤维为吸附剂制备固相萃取小柱萃取人尿液中的4种非典型抗精神病药物;色谱柱采用Waters XBridge BEH C18,流动相为0.1％甲酸水溶液(A)-乙腈(B),梯度洗脱,流速:0.25 mL·min1,柱温:40℃,进样量:3 μL.考察该方法的专属性、标准曲线、定量下限、精密度、准确度、提取回收率、基质效应和稳定性.结果4种分析物的线性范围均为1～100 ng·mL-1,相关系数均大于0.996.定量下限为1 ng·mL-1,检测限为0.01～0.10 ng·mL-1.4种分析物的批内、批间相对标准偏差(RSD)范围为2.34％～14.48％,提取回收率均大于75.75％,基质效应基质效应在85.00％～115.00％.各样品在自动进样器中放置24 h稳定性 RSD 为 2.19％～12.06％;冻融 3 次稳定性 RSD 为 3.65％～13.81％.结论 本法灵敏度高,适用于尿液样本中微量分析物的提取和测定,为抗精神病药物检测提供了可靠的分析手段.

为了确定岳西小黄姜精油最佳提取工艺,探究不同提取方法对小黄姜精油得率和微观结构的影响,建立岳西小黄姜挥发性物质GC-MS检测方法.该研究分别采用水蒸气蒸馏法、超声辅助水蒸气蒸馏法、超声-微波协同辅助水蒸气蒸馏法、超声-酶解协同辅助水蒸气蒸馏法提取小黄姜精油.比较各方法的精油得率,选择得率最高的方法进行单因素试验和正交优化确定最佳提取工艺.结果表明,超声-酶解协同辅助水蒸气蒸馏法的精油得率最高,最佳提取工艺为∶料液比1∶3.5(g/mL)、超声温度50 ℃、超声功率400 W、超声时间20 min、复合酶用量(半纤维素酶∶β-葡萄糖苷酶=1∶1)40 U/g、酶解温度40℃、酶解pH值5.5、酶解时间2 h、提取时间45 min.在此条件下精油得率为3.28％.对精油提取后的姜渣进行扫描电镜观察,经超声-酶解协同辅助水蒸气蒸馏法得到的姜渣细胞完整性破坏最为严重,说明该方法对精油的提取更为彻底.采用顶空固相微萃取(headspace solid-phase microextraction,HS-SPME)提取法和超声-酶解协同辅助水蒸气蒸馏法从鲜姜中共提取鉴定出75种挥发性物质,其中HS-SPME提取法鉴定出49种,超声-酶解协同辅助水蒸气蒸馏法提取鉴定出60种.本研究为小黄姜精油提取提供了新思路,并为生姜深加工利用提供了参考依据.