1-磷酸鞘氨醇(S1P)是一种具有生物活性的脂质介质，在人体内广泛表达，通过与不同部位的G蛋白耦联受体(S1PR1-5)结合，介导Ras/MEK/ERK、PI3K/AKT、PLC/IP3、Rho/NF-κB等信号通路参与多个生理病理过程；S1P及其受体的相互作用会影响气道、肺组织内的细胞增殖与迁移、凋亡，在炎症及免疫调节中也有重要作用，S1P参与哮喘、慢性阻塞性肺疾病、肺癌、肺纤维化、肺部感染、急性肺损伤等疾病的致病过程，拮抗S1P则带来积极影响，深入研究S1P可能为呼吸系统疾病提供治疗新靶点。

目的:探讨鞘氨醇激酶/1-磷酸鞘氨醇(SphK/S1P)信号通路在肝脏缺血再灌注损伤(IRI)中肝窦微循环的保护作用。方法:2015年9月至2019年9月，将40只适龄雄性大鼠(购自常州卡文斯实验动物有限公司)，信封法随机分4组包括，假手术(Sham)组，IRI＋等体积生理盐水组(IRI组)，IRI＋SphK激动剂组(PMA组)和IRI＋SphK阻断剂组(DMS组)。建立大鼠IRI模型，通过对SphK/S1P信号激动和阻滞后，应用苏木精-伊红(HE)和细胞凋亡染色原位缺口末端标记法(TUNEL)技术观察肝窦间隙、肝窦内皮细胞(LSEC)和肝细胞的形态学改变及其细胞凋亡程度，酶联免疫吸附(ELISA)和蛋白质印迹法(Western blot)对细胞间黏附分子(ICAM-1)和髓过氧化物酶(MPO)的表达进行评价。应用SPSS 17.0统计软件行 χ2检验和单因素方差分析。 结果:HE染色显示SphK激动剂(PMA)可改善缺血肝脏损伤，减轻肝窦异常扩张，LSEC损伤程度得到改善，其阻断剂反而加重LSEC的损伤。与Sham组(3.46±0.27)比较，IRI组大鼠血清S1P升高(4.71±0.42， t＝4.336， P<0.05)；与IRI组比较，PMA组血清S1P显著升高(36.01±10.13， t＝5.347， P<0.01)，DMS组血清S1P显著降低(15.83±3.14， t＝6.080， P<0.05)。与Sham组[(10.09±1.05)%]比较，IRI组肝脏细胞凋亡率显著升高(28.83±2.06)%， t＝14.040， P<0.05]；与IRI组比较，PMA组肝脏细胞凋亡率显著降低[(13.59±3.02)%， t＝7.221， P<0.05]，而DMS组肝细胞凋亡率显著升高[(61.92±7.72)%， t＝7.173， P<0.01]。与IRI组比较，PMA组肝脏S1PR的蛋白表达升高(S1PR：1.65±0.12比2.50±0.09， t＝9.930， P<0.05)，MPO、ICAM-1的蛋白表达降低(ICAM-1：3.21±0.39比1.52±0.26， t＝6.245， P<0.05；MPO：2.51±0.20比1.09±0.13， t＝10.310， P<0.05)；而DMS组肝脏S1PR的蛋白表达降低(S1PR：1.65±0.12比1.31±0.09， t＝3.926， P<0.05)，MPO、ICAM-1蛋白表达升高(ICAM-1：3.21±0.39 5.92±0.22， t＝7.855， P<0.05；MPO：2.51±0.20比5.21±0.43， t＝9.861， P<0.05)。 结论:SphK/S1P信号通过减少细胞凋亡，减少MPO和ICAM-1表达，减少白细胞和LSEC的黏附，从而改善肝窦微循环。

微小RNA(microRNA，miRNA)是一类小的非编码RNA，长度为18～24个核苷酸，可转录后调控蛋白质的表达。miR-155在促进炎症反应尤其是动脉粥样硬化中发挥重要作用，近来研究发现，miR-155在过敏性哮喘中也起着不可或缺的作用。1-磷酸鞘氨醇(sphingosine-1-phosphate，S1P)是一种有效的脂质介质，已被广泛认为是人体内重要的血管和免疫功能调节剂。1-磷酸鞘氨醇受体2(sphingosine-1-phosphate receptor 2，S1PR2)是S1P的一种受体，S1PR2通过与G蛋白不同的α亚基耦联激活不同的信号通路而发挥不同的生物学功能。S1P/S1PR2在血管发育，炎症反应及过敏反应中扮演着重要的角色。本篇综述主要对miR-155以及S1P/S1PR2在动脉粥样硬化和过敏性猝死之间的联系进行阐述。

目的:探讨肾必宁颗粒通过鞘氨醇激酶1(sphingosine kinase 1,SphK1)/1-磷酸鞘氨醇受体2(sphingosine 1 phosphate receptor 2,S1PR2)通路改善IgA肾病(IgA nephropathy,IgAN)大鼠肾损伤的作用及机制.方法:将54只健康雄性SD大鼠按照完全随机分组法分为空白组(n=10)、模型组(n=10)、泼尼松组(n=10)、肾必宁低剂量组(n=12)和肾必宁高剂量组(n=12).除空白组外,其余4组建立IgAN模型,第9周起治疗组灌胃给药,7周后生化检测血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、谷丙转氨酶(ALT)、血清白蛋白(ALB)、尿红细胞计数及24 h尿蛋白定量(24 h-UTP);苏木素-伊红(HE)染色观察各组大鼠肾组织病理学变化;免疫荧光观察IgA沉积;蛋白免疫印迹(Western blot)法检测SphK1、S1PR2蛋白表达;实时荧光定量PCR法(RT-PCR)检测SphK1、S1PR2 mRNA表达.结果:与空白组比较,模型组大鼠尿红细胞计数、24 h-UTP、SCr、BUN水平均显著升高(P＜0.01或P＜0.05),ALB水平显著降低(P＜0.01),ALT水平有所升高,但差异无统计学意义(P＞0.05),有明显的肾脏病理损伤,免疫荧光可见大量IgA荧光沉积,肾组织SphK1、S1PR2蛋白及mRNA表达水平显著升高(P＜0.01);与模型组比较,泼尼松组、肾低组、肾高组大鼠尿红细胞数、24 h-UTP、BUN水平均明显降低(P＜0.01),ALB水平显著升高(P＜0.01),各组ALT水平有所下降,但差异无统计学意义(P＞0.05),肾低组SCr水平显著降低(P＜0.05),肾脏病理有不同程度改善,IgA荧光沉积可见不同程度减少,肾组织SphK1、S1PR2蛋白及mRNA表达水平明显下降(P＜0.01).结论:肾必宁颗粒可能通过抑制SphK1/S1PR2通路来降低IgAN大鼠尿蛋白,减轻血尿并改善肾功能,从而起到保护肾脏、防治肾损害的作用.

目的 基于鞘氨醇激酶1(Sphk1)/1-磷酸鞘氨醇受体2(S1PR2)信号通路研究雷公藤多苷片(GTW)改善免疫球蛋白A肾病(IgAN)大鼠肾损伤的作用机制.方法 通过牛血清白蛋白灌胃+蓖麻油和四氯化碳皮下注射+脂多糖尾静脉注射等手段建立IgAN大鼠模型.将造模成功大鼠随机分为模型组、对照组和实验组,每组9只;另取10只正常大鼠作为空白组.对照组灌胃给予6.25 mg·kg-1·d-1泼尼松;实验组灌胃给予9.375 mg·kg-1·d-1 GTW;空白组和模型组均灌胃给予0.5 mL·100 g-1·d-1 0.9％NaCl.各组大鼠每天给药1次.于15周末留尿取材,测定各组大鼠血白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、24 h尿蛋白定量(24 h-UTP)、尿红细胞数,用蛋白质印迹法检测各组大鼠Sphk1/S1PR2蛋白的表达水平.结果 苏木精-伊红染色及免疫荧光见对照组与实验组肾病理损伤均较模型组明显减轻.空白组、模型组、对照组和实验组的ALB分别为(32.49±2.23)、(22.98±0.51)、(26.01±1.33)和(26.53±1.92)g·L1,BUN 分别为(6.11±1.71)、(13.75±2.96)、(6.71±1.35)和(4.77±0.99)mmol·L-1,24 h-UTP 分别为(5.72±1.96)、(9.12±2.15)、(5.78±2.05)和(4.75±1.50)mg·24 h-1,尿红细胞数分别为(9.73±2.40)、(14.62±2.60)、(9.90±1.59)和(9.46±2.94)cell·μL-1,Sphk1 蛋白相对表达水平分别为 0.85±0.02、1.47±0.02、1.06±0.02 和 1.09±0.02,S1PR2 蛋白相对表达水平分别为 0.27±0.02、0.88±0.01、0.43±0.02 和 0.42±0.02.模型组的上述指标与对照组和实验组比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P＜0.01).结论 GTW可能通过抑制Sphk1/S1PR2信号通路,减少肾小球系膜细胞增殖,从而减轻IgAN大鼠的肾损伤.

目的:探究槐耳多糖(HP)调节 SPHK1/S1P/S1PR3 信号通路对宫颈癌细胞恶性生物学行为的影响.方法:MTT检测槐耳多糖(0、25、50、100、200、400μg/mL)处理的宫颈癌细胞活力,筛选最佳药物浓度.实验分为对照组(Control组)、槐耳多糖低、中、高浓度组(HP-L、HP-M、HP-H 组)和槐耳多糖高浓度+SphK1 激活剂 K6PC-5 组(HP-H+K6PC-5 组),观察细胞增殖、迁移和侵袭情况;west-ern blot检测SPHK1、S1P、S1PR3、Snail、N-cadherin、E-cadherin蛋白水平.结果:处理24、48、72h 后,与0μg/mL比较,50μg/mL、100μg/mL、200μg/mL 和 400μg/mL 的 HP 处理的细胞活力显著降低(P<0.05).HP-L组、HP-M 组和 HP-H 组细胞 Edu 阳性率、侵袭细胞数、划痕愈合率及 Snail、N-cadherin、SPHK1、S1P、S1PR3 水平显著低于Control组(P<0.05),E-cadherin 水平显著升高(P<0.05).HP-H+ K6PC-5 组细胞Edu 阳性率、侵袭细胞数、划痕愈合率及 Snail、N-cadherin、SPHK1、S1P、S1PR3 水平显著高于HP-H 组(P<0.05),E-cadherin 水平显著降低(P<0.05).结论:HP 可能通过抑制 SPHK1/S1P/S1PR3 信号通路抑制宫颈癌细胞的增殖、侵袭和迁移.

多发性硬化是一种以中枢神经系统慢性炎症、脱髓鞘和轴突损伤为主要特征的自身免疫性疾病,发病机制至今仍未阐明.近10年来口服免疫调节治疗正在兴起,其中鞘氨醇-1-磷酸受体调节剂在多发性硬化的治疗中取得了令人瞩目的疗效.文中主要关注S1P/S1PR信号通路在治疗多发性硬化中的作用、机制和临床应用现状以及展望.

鞘氨醇-1-磷酸(S1P)是由鞘氨醇激酶磷酸化鞘氨脂产生的多效鞘磷脂,可通过与G蛋白偶联S1P受体(S1PR)结合发挥作用,在细胞的生存、增殖、迁移、免疫细胞的募集、炎症介质合成和淋巴管及血管的生成等多种生理及病理生理过程中起着不可或缺的作用,S1P/S1PR信号通路参与了免疫介导的疾病发病机制,在免疫系统中发挥着重要作用.然而该信号轴在自身免疫性疾病发病机制中的参与程度有待进一步发掘.因此,文章针对近年来S1P-S1PR轴在自身免疫方面相关疾病的研究进行综述.

目的 通过体外实验探讨清疕饮和鞘氨醇-1-磷酸受体 5(sphingosine-1-phosphate receptor 5,S1PR5)信号对鞘氨醇-1-磷酸(sphingosine-1-phosphate,S1P)诱导的人永生化角质形成细胞(human immortalized keratinocytes,HaCaT)生物学功能的影响,研究清疕饮在角质细胞(keratinocytes,KC)上对银屑病的治疗机制.方法 脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)(1 μg/mL,24 小时)刺激HaCaT细胞,酶联免疫吸附测定实验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定细胞上清中 S1P 含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real time-polymerase chain reaction,q-PCR)法检测S1PRs mRNA转录水平,筛选出高特异性的S1P/S1PR5 通路.细胞增殖和细胞毒性检测(cell counting kit-8,CCK-8)法测定细胞存活率,q-PCR法检测白介素(interleukin,IL)-17、IL-23 mRNA表达,筛选适宜的 S1P处理浓度和时间,蛋白质免疫印迹法(Western blot,WB)检测清疕饮对S1PR5 蛋白表达的抑制,WB检测S1PR5 蛋白表达筛选高效siRNA构建S1PR5基因缺陷模型.将细胞分为阴性对照组(PBS+NC siRNA)、S1P 炎症模型组(S1P+PBS+NC siRNA)、清疕饮处理组(S1P+清疕饮+NC siRNA)、S1PR5 基因缺陷组(S1P+PBS+S1PR5 siRNA)、清疕饮处理S1PR5 基因缺陷组(S1P+清疕饮+S1PR5 siRNA)予对应处理,划痕试验检测细胞迁移率,EILSA法检测细胞上清中 IL-36γ 分泌,WB 法检测细胞核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)通路相关蛋白核因子抑制蛋白(inhibitor kappa B alpha,IκBα)、kappa B 抑制因子激酶(inhibitor of kappa B kinase,IKK)、磷酸化(p)-IKK、p65、p-p65 的表达.结果 相比于正常细胞,LPS刺激HaCaT银屑病炎症模型细胞上清S1P含量显著上升(P＜0.01),S1PR5 mRNA表达增加最明显(P＜0.01).筛选出浓度0.5 μmol/L的S1P处理 48 小时为炎症造模方案,清疕饮冻干粉溶液能显著抑制S1P造成的S1PR5 蛋白高表达(P＜0.01).与阴性对照组比较,S1P炎症模型组HaCaT细胞迁移能力显著增强,上清液IL-36γ显著增加,细胞中p-IKK、p-p65 蛋白的表达水平显著增加(P＜0.01),IκBα、IKK、p65 蛋白未发现显著变化.与S1P炎症模型组比较,清疕饮处理组、S1PR5 基因缺陷组、清疕饮处理S1PR5 基因缺陷组HaCaT细胞迁移能力显著降低,IL-36γ分泌量显著减少,细胞中p-IKK、p-p65 表达水平显著降低(P＜0.01),IκBα、IKK、p65 蛋白未发现显著变化,但清疕饮处理 S1PR5 基因缺陷组 IL-36γ、p-IKK、p-p65 的变化相较于另外两组更明显(P＜0.01).结论 清疕饮可以部分通过阻碍S1P与S1PR5 结合抑制HaCaT细胞迁移和IL-36γ分泌,截断NF-κB通路信号,从而干预炎症反应.

目的:探究降浊合剂影响肥胖大鼠糖脂代谢的机制.方法:30只健康雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、降浊合剂组,每组各10只,其中正常对照组给予普通饲料喂养,模型对照组给予高脂饲料喂养,降浊合剂组在给予高脂饲料喂养的同时给予50 g/kg降浊合剂浓缩液灌胃.各组干预8周后,采用全自动生化分析仪检测各组大鼠血糖、总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平;采用定量逆转录PCR法检测各组大鼠白色、棕色脂肪中PR结构域蛋白16(PRDM16)、解偶联蛋白1(UCP1)信使RNA表达;采用蛋白质印迹法检测各组大鼠白色、棕色脂肪中PRDM16以及各组大鼠白色脂肪中Toll样受体4(TLR4)、磷酸化核因子抑制蛋白(IκBα)和核因子κB(NF-κB)蛋白表达水平;采用免疫组织化学法检测各组大鼠白色、棕色脂肪中UCP1蛋白表达水平.结果:与正常对照组比较,模型对照组白色脂肪质量(P<0.01)、白色脂肪系数(P<0.05)和Lee's系数(P<0.01)均显著升高;血糖、总胆固醇、三酰甘油、LDL-C含量均升高,其中三酰甘油含量升高明显(P<0.05);白色脂肪和棕色脂肪PRDM16、UCP1的信使RNA和蛋白表达水平均明显降低(均P<0.05).与模型对照组比较,降浊合剂组的白色脂肪质量、白色脂肪系数和Lee's系数均明显降低(均P<0.01);血糖、总胆固醇、三酰甘油、LDL-C含量均有所降低,其中三酰甘油含量明显降低(P<0.01);棕色脂肪和白色脂肪中PRDM16、UCP1的信使RNA和蛋白的表达水平上升.此外,与正常对照组比较,模型对照组白色脂肪中TLR4、磷酸化IκBα和NF-κB-p65蛋白表达水平明显升高(P<0.01),而降浊合剂组上述蛋白的表达水平相对于模型对照组显著下降(均P<0.05).结论:降浊合剂可以通过调节SD大鼠体内TLR4/IκBα/NF-κB信号通路缓解高脂饮食诱导的体脂增加、生化指标异常表达及促进关键转录因子UCP1和PRDM16在白色、棕色脂肪中的表达,进而抑制肥胖大鼠的体脂形成,降低体重,缓解肥胖.