目的 本研究旨在应用高效液相色谱-四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Exactive MS)技术,全面鉴定蒙药烘草乌的含药血清成分.方法 通过UPLC-MS技术对蒙药烘草乌含药血清进行主要成分鉴定.采用MSDIAL软件进行峰对齐、保留时间校正和提取峰面积,最终鉴定成分.结果 共得到蒙药烘草乌含药血清46种差异化学成分.结论 通过运用UPLC-Q-Exactive MS技术,能够快速、系统地分析鉴定蒙药烘草乌的成分,这为蒙药烘草乌在临床应用和药物作用研究方面提供了参考依据.

目的 采用超高效液相-四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS)鉴定赶黄草全草及其茎、叶主要成分,结合网络药理学和分子对接探究赶黄草保肝作用机制.方法 利用质谱采集数据结合对照品、相关文献、数据库检索,鉴定和表征赶黄草及其茎、叶化学成分;运用TCMSP数据库结合文献报道筛选活性成分,通过TCMSP、SwissTargetPrediction数据库查找活性成分靶点;通过基因数据库筛选疾病靶点.药物靶点与疾病靶点取交,输入String11.5数据库和Cytoscape 3.7.2软件构建PPI网络筛选出核心靶点.利用DAVID 6.8进行富集分析,Cytoscape 3.7.2软件构建"活性成分-靶基因-通路"网络,利用AutoDockTools 1.5.6软件对活性成分与作用靶点进行分子对接验证.结果 在赶黄草及其茎、叶提取物中共鉴定出64种化学成分;筛选活性成分28个,成分靶点与疾病靶点交集126个,关键活性成分15个,核心靶点24个;基因本体(gene ontology,GO)功能富集163个条目,京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路分析131条通路;分子对接结果显示,成分与靶点蛋白结合活性良好.结论 对赶黄草化学成分进行了较全面地研究,初步阐明了其药效物质基础,预测赶黄草可通过多组分、多靶点、多途径和多通路发挥保肝作用.

目的:研究甘遂炮制前后对生理状态大鼠肝脏代谢组学的影响,探究醋制减毒机制.方法:取24只SPF级SD大鼠,随机分为空白组、生甘遂组、醋甘遂组,每组8只.空白组灌胃0.5％羧甲基纤维素钠(CMC-Na),生甘遂组、醋甘遂组给予相应的供试液,连续给药20 d,第20天收集肝脏.运用超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Exactive-MS)技术分析大鼠肝脏样本,通过Compound Discoverer 3.0软件进行数据前处理,检索HMDB等数据库.并对差异代谢物进行主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)、MetaboAnalyst对所得差异代谢物进行显著富集通路分析.结果:实验最终发现生甘遂组与空白组比对出具有生物学意义的28个差异代谢物,醋甘遂组与空白组比对出具有显著性差异的18个代谢物,其交集有13个代谢物.结论:通过生物学意义分析得到醋炙甘遂能够通过升高肝脏中牛磺脱氧胆酸和硬脂酰肉碱水平,降低早期脑损伤和2型糖尿病诱发的潜在风险;通过升高肝脏甘氨胆酸水平,促进调节机体免疫功能;通过升高肝脏20-羟基二十碳四烯酸水平,促进缺血性卒中后的神经血管重塑和功能恢复;通过升高肝脏3-羟基丁酸、油酰乙醇胺水平,发挥抗肿瘤、抗氧化和神经保护作用.其发挥减毒机制的相关代谢通路为花生四烯酸代谢、初级胆汁酸生物合成、酮体的合成与降解、牛磺酸和次牛磺酸代谢.

目的 鉴定胀果甘草地上部分的黄酮类化合物,为后续药效及质量评价与控制等的研究奠定基础.方法 用超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱(UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS)联用技术,用 Waters Acquity UPLC BEH-C18 色谱柱(100 mm × 2.1 mm,1.7μm),以乙腈(A)-5 mL·L-1甲酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱,流速为0.2 mL·min-1,在电喷雾正负离子模式下采集数据.依据高分辨质谱提供的准分子离子峰和碎片离子的精确分子质量信息及相关文献数据,确证黄酮类化合物及其特征碎片离子的分子组成.结果 鉴定出胀果甘草地上部分的乙醇提取物共含有95个黄酮类化合物,其中水溶性部位有52个黄酮,主要以黄酮苷类为主;脂溶性部位有83个黄酮类化合物,主要为黄酮苷元类.水溶性和脂溶性部位含37个共有黄酮,主要为黄酮苷、二氢黄酮.结论 胀果甘草地上部分含有多种黄酮类化合物,用UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS技术可以快速、准确、灵敏地鉴别胀果甘草地上部分的黄酮类化合物的结构.

目的 基于中药质量标志物(Q-Marker)理念,使用UPLC-Q Exactive四级杆-静电场轨道阱高分辨液质联用技术,对清热灵颗粒主要化学成分进行快速识别和鉴定,建立清热灵颗粒的潜在Q-Marker库,为探讨建立中成药清热灵颗粒的系统质量控制方法奠定基础.方法 以50％甲醇作为提取液制备供试液,采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(100 mm×2.1mm,1.7 μm)进行分离,以甲醇-0.1％甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,质谱采用负离子监测模式、全扫描及自动触发二级质谱扫描的功能,对清热灵颗粒中成分进行识别及鉴定.并采用Autodock vina 1.1.2软件,以H5N1禽流感病毒为神经氨酸酶受体,利用AutoDock Tools 1.5.6程序确定靶蛋白的活性口袋,对所选标志物进行分子对接研究.结果 通过高分辨UPLC-Q Exactive四级杆-静电场轨道阱高分辨液质联用技术共鉴定了39个化学成分,包括黄酮类化合物25个,苯乙醇苷类6个,有机酸4个,三萜类化合物2个,木脂素类2个.32个化学成分为首次在该制剂中鉴别出,其中15个为专属性成分,建议其中的黄芩苷、汉黄芩苷、连翘酯苷A、甘草苷、连翘酯苷E、连翘酯苷B、异甘草苷、黄芩素、连翘苷、汉黄芩素、甘草素11个成分可作为清热灵颗粒的Q-Marker.结论 通过高分辨UPLC-Q Exactive四级杆-静电场轨道阱高分辨液质联用技术,可以快速分析和确定中成药清热灵颗粒的化学成分,建立清热灵颗粒的潜在Q-Marker库.

目的:研究心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠经肉豆蔻-8散给药后尿液中内源性代谢物的变化,探讨MIRI的发病机制以及药物预保护作用机制.方法:大鼠随机分为假手术组(0.5％羧甲基纤维素钠溶液,10 mL·kg-1),模型组(0.5％羧甲基纤维素钠溶液,10 mL·kg-1)和肉豆蔻-8散组(5.4 mg·kg-1).采用超高效液相色谱联用四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Exactive-MS)技术表征3组大鼠尿液代谢物,使用SIMCA 14.1软件进行多元统计分析,筛选潜在生物标志物.结果:经正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA),模型组与假手术组、肉豆蔻8-散组明显分离,肉豆蔻-8散组与假手术组部分区域重叠.共筛选出8个与MIRI相关的生物标志物,与氨基酸代谢、脂肪酸代谢相关.结论:肉豆蔻-8散能有效调节与MIRI模型大鼠尿液代谢有关的氨基酸代谢和脂肪酸代谢失衡,通过多通路、多途径对MIRI起到预保护作用.

目的:探讨胡杨树脂提取物对脂多糖(LPS)刺激小鼠单核巨噬白血病细胞RAW264.7细胞炎症保护作用及利用UPLC-Q-Exactive四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱联用技术,对胡杨树脂化学成分进行识别和鉴定.方法:用不同浓度(12.5、25、50、100、200μg·mL-1)的胡杨树脂提取物处理RAW 264.7细胞,MTT法检测细胞增殖活性;通过LPS(1μg·mL-1)诱导RAW 264.7细胞建立炎症模型,用不同浓度胡杨树脂提取物处理炎症模型,MTT法检测胡杨树脂提取物对细胞的保护作用;采用UPLC-Q-Exactive四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱仪联用技术,借助数据挖掘方法识别和鉴定胡杨树脂中的化学成分,对其高分辨一级和二级质谱数据进行解析,并与数据库比对,对胡杨树脂化学成分的结构推测和确认.结果:在实验浓度范围内,胡杨树脂提取物对细胞无细胞毒性作用;与LPS模型组比较,浓度为12.5、25、50、100、200μg·mL-1胡杨树脂提取物均能显著改善LPS诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7的炎症反应,具有较好的浓度依赖性;通过高分辨数据推测鉴定出6个化合物,分别为棕榈油酸、邻苯二甲酸二丁酯、十六酰胺、油酸酰胺、硬脂酰胺、芥酸酰胺.结论:该结果为胡杨树脂的提取分离及抗炎活性作用研究奠定基础,为进一步对胡杨树脂的综合研究提供科学的依据.

目的 建立适用于蔬菜中氟虫腈及其代谢物的UPLC-四级杆-静电场/轨道阱质谱法.方法 将蔬菜样品均质后,加乙腈超声提取,再加氯化钠和无水硫酸钠除水,最后加N-甲基己二胺粉末、C18粉末以及无水硫酸钠去除杂质,净化样品.选用Thermo Syncronis C18(100 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱对待测物进行色谱分离,在Q-Exactive高分辨质谱Full MS-ddms2扫描模式下采集数据进行定性定量分析.结果 氟虫腈及其代谢物在0.1 ～ 5.0 μg/L浓度范围内线性良好,相关系数r2均＞0.9900.各组分的平均加标回收率在95.4％ ～ 108.6％,RSD值为0.769％ ～5.563％,24 h内RSD为1.531％～4.959％.结论 本法操作简便、快速、重现性好、稳定性好、灵敏度高,适用于蔬菜中氟虫腈及其代谢物的快速定性定量筛查.

目的:利用UPLC-Q-Exactive四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱仪联用技术,对唐古红景天干燥根中的化学成分快速识别和鉴定.方法:以100％甲醇作为提取液制备供试液,采用Thermo Scientific Hypersil GOLD aQ(100 mm×2.1 mm,1.9 μm)色谱柱分离,以乙腈-0.1％甲酸溶液为流动相,梯度洗脱,质谱采用正、负离子监测模式,全扫描及自动触发二级质谱扫描的功能,快速识别和鉴定唐古红景天中的化学成分.结果:通过高分辨数据共鉴定50个化学成分,包括黄酮及其苷类21个、萜类12个、酚酸类10个、香豆素类3个、其他类4个,其中11个成分经与对照品比对而准确鉴定.结论:UPLC-Q-Exactive四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱联用技术可以快速鉴定唐古红景天中的化学成分,为唐古红景天化学成分的提取分离及其药效物质基础提供科学依据.

研究防风不同极性部位指纹图谱与抗流感病毒活性的谱效关系,推断防风中具有抗流感病毒活性的有效成分.本实验采用细胞病变效应(cytopathic effect,CPE)法检测防风不同极性部位的抗流感病毒活性;建立防风不同极性部位的UPLC-Q-Exactive Orbitrap/MS指纹图谱;采用Spearman分析、灰色关联度分析(GRA)及偏最小二乘回归(PLSR)分析法分析防风不同极性部位的UPLC特征指纹峰与其抗流感病毒活性之间的谱效关系.在标定的28个特征指纹峰中,确定了1、5、7、11、13、20、24号峰与抗流感病毒活性呈正相关,其对应的物质依次是焦谷氨酸、divaricatacid、升麻苷、亥茅酚苷、补骨脂素、异嗪皮啶、5-羟基-8-甲氧基补骨脂素,为深入研究防风抗流感病毒活性物质基础提供实验基础.