目的 探讨ALKBH5在卵巢子宫内膜异位囊肿中的作用及其机制.方法 收集2022-01-01-10-10青岛市中心医院5例行卵巢子宫内膜异位囊肿剥除术患者的囊肿组织和正常子宫内膜组织,通过蛋白质印迹实验和实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)实验检测组织中ALKBH5蛋白和mRNA的表达,并在卵巢子宫内膜异位囊肿组织中分离培养子宫内膜间质细胞(EESCs).应用转染小干扰RNA敲低ALKBH5的表达,通过细胞计数盒8(CCK8)、克隆形成实验和Transwell实验验证ALKBH5对EESCs增殖、迁移和侵袭能力的影响,通过脉管形成实验验证ALKBH5对血管生成能力的影响.通过检测谷胱甘肽(GSH)和铁离子含量验证ALKBH5对EESCs铁死亡的影响,通过透射电镜观察ALKBH5对细胞的亚细胞结构的影响,通过qRT-PCR实验和蛋白质印迹实验验证ALKBH5对BECN1表达的影响,通过RIP和MeRIP实验明确ALKBH5是否通过m6A去甲基化修饰调控BECN1的表达.采用Student t检验进行统计学分析.结果 蛋白质印迹实验结果显示,ALKBH5蛋白在卵巢子宫内膜异位囊肿组织中的表达明显高于正常子宫内膜组织.qRT-PCR结果显示,ALKBH5 mRNA在正常子宫内膜组织中的相对表达量为1.000±0.058,在卵巢子宫内膜异位囊肿组织中的相对表达量为2.270±0.044,t=17.56,P＜0.001.CCK8实验结果显示,在72 h时siNC组和siALKBH5组的光密度值分别为1.575±0.000和0.957±0.000,t=23.05,P＜0.001.克隆形成实验结果显示,siNC组和 siALKBH5 组形成的克隆数分别为 75.330±3.712 和 22.670±1.764,t=12.82,P＜0.001.Transwell 实验结果显示,siNC组和siALKBH5组迁移细胞数分别为196.700±8.819和77.000±5.859(t=11.30,P＜0.001),侵袭细胞数分别为62.000±2.309和18.330±2.028(t=14.21,P＜0.001).脉管形成实验结果显示,siNC组和siALKBH5组形成的脉管数分别为 73.330±4.667 和 19.330±1.764,t=10.82,P＜0.001.GSH 含量检测结果显示,siNC 组和 siALKBH5组GSH相对含量分别为1.067±0.088和0.430±0.025,t=6.942,P＜0.001.铁离子含量检测结果显示,siNC组和siALKBH5组铁离子相对含量分别为1.000±0.058和2.773±0.059,t=21.43,P＜0.001.透射电镜观察到敲低ALKBH5后细胞的线粒体和内质网结构破坏和溶解.蛋白质印迹实验结果显示,敲低ALKBH5显著促进BECN1蛋白的表达.qRT-PCR结果显示,siNC组和siALKBH5组BECN1 mRNA相对表达量分别为1.033±0.067和3.277±0.043,t=28.21,P＜0.001.RNA免疫沉淀实验结果显示,IgG组和ALKBH5组BECN1相对富集量分别为1.073±0.101和79.980±3.695,t=21.35,P＜0.001.甲基化RNA免疫沉淀实验结果显示,siNC组和siALKBH5组m6A+BECN1 相对富集量分别为 1.007±0.052 和 2.453±0.098,t=13.01,P＜0.001.结论 ALKBH5 通过介导 m6A 去甲基化抑制BECN1的表达而抑制EESCs铁死亡,促进卵巢子宫内膜异位囊肿的进展.

目的:探讨形觉剥夺性近视(FDM)豚鼠视网膜中m6A去甲基化酶AlkB同源蛋白5(ALKBH5)表达变化及其参与近视的作用机制。方法:采用随机数字表法将30只健康SPF级3周龄三色豚鼠分为正常对照组和实验组，每组15只。实验组中眼罩遮盖右眼作为FDM组，暴露左眼为自身对照组。分别于实验前及实验1、2、3和4周时进行豚鼠眼生物学参数测量。采用带状光检影镜测量屈光度，采用A型超声仪测量眼轴长度。实验4周，通过免疫组织化学染色和免疫荧光染色检测ALKBH5在豚鼠视网膜中的表达分布。采用实时荧光定量PCR和Western blot法检测豚鼠视网膜中ALKBH5 mRNA和蛋白表达情况。结果:与正常对照组和自身对照组相比，实验2、3和4周，FDM组豚鼠近视屈光度明显增加，眼轴显著增长，差异均有统计学意义(均 P<0.001)。免疫组织化学染色和免疫荧光染色显示，ALKBH5分布在视网膜神经纤维层、视锥视杆细胞层和视网膜色素上皮(RPE)层，其中以神经纤维层和RPE层为主。正常对照组、自身对照组和FDM组豚鼠ALKBH5蛋白相对荧光强度值分别为1.000±0.204、0.874±0.076和0.571±0.053，FDM组视网膜中ALKBH5蛋白荧光强度值明显小于正常对照组和自身对照组，差异均有统计学意义( t＝4.069， P＝0.006； t＝5.176， P＝0.014)。造模后4周，FDM组豚鼠视网膜中ALKBH5 mRNA和蛋白相对表达量明显低于正常对照组和自身对照组，差异均有统计学意义(均 P<0.01)。 结论:FDM组豚鼠视网膜中m6A去甲基化酶ALKBH5表达下降，ALKBH5及相关m6A甲基化修饰可能参与了近视的发生和发展。

目的:探讨N6-甲基腺嘌呤（m 6A）在结直肠癌组织中表达及临床意义。 方法:2021年9月至2021年12月，利用癌症基因组图谱（TCGA）和基因表达综合数据库（GEO）对结直肠癌中m 6A相关调控因子的表达进行汇总分析，对不同临床病理特征及分子分型下m 6A调控因子的基因表达进行对比统计，对不同表达m 6A的结直肠癌病例做生存分析。 结果:在TCGA数据库中，胰岛素样生长因子2 mRNA绑定蛋白1（IGF2BP1），胰岛素样生长因子2 mRNA绑定蛋白3（IGF2BP3）和YTH结构域m6A RNA结合蛋白1（YTHDF1）在结直肠癌组织中较正常组织高表达（TCGA-COAD比IGF2BP3：12.80比204.46，logFC=4.00， P=0.003；YTHDF1：2 347.56比3 712.77，logFC=0.66， P < 0.001；TCGA-READ比IGF2BP1：6.20比359.32，logFC=5.82， P=0.007；YTHDF1：2 470.10比4 369.09，logFC=0.82， P=0.020）；将TCGA和GEO数据库做交集后，发现甲基转移酶样14（METTL14）、YTH结构域m6A RNA结合蛋白3（YTHDF3）和α-酮戊二酸依赖的加双氧酶AlkB同源蛋白5（ALKBH5）均在结直肠癌组织中下调（TCGA-COAD比METTL14：1 051.56比711.40，logFC=-0.56， P < 0.001；YTHDF3：4 613.85比3 155.05，logFC=-0.55， P < 0.001；ALKBH5：4 250.10比2 555.55，logFC=-0.73， P < 0.001；TCGA-READ比METTL14：1 113.3比674.36，logFC=-0.72， P < 0.001；YTHDF3：5 034.30比3 331.95，logFC=-0.60， P=0.004；ALKBH5：4 902.20比2 529.71，logFC=-0.95， P < 0.001；GEO-CRC比METTL14：6.58比6.33，logFC=-0.06， P < 0.001；YTHDF3：6.28比6.20，logFC=-0.02， P=0.002；ALKBH5：5.07比4.98，logFC=-0.02， P < 0.001）。在不同分子分型结直肠癌中IGF2BP2、HNRNPC、TP53和YTHDF2在KRAS突变中低表达（IGF2BP2：48.53比44.04， t=2.64， P=0.008；HNRNPC：121.30比112.60， t=2.32， P=0.020；TP53：65.30比60.26， t=2.11， P=0.034；YTHDF2：54.07比51.19； t=1.97， P=0.048）。不同临床病理特征分析显示，IGF2BP1在淋巴结阳性（8.97比6.11，W=20 008， P=0.002）、存在远处转移（8.94比6.41，W=19 104， P=0.009）及Ⅲ~Ⅳ期（7.46比7.13，W=8 779， P=0.025）的结直肠癌中较对照组升高。ALKBH5高表达、高龄、存在脉管侵犯和病理分期晚与较短生存期显著相关（ALKBH5高表达比ALKBH5低表达：5.85年比NA， HR：1.63，95% CI：1.071~2.491， P=0.021。> 68岁比 < 68岁：6.78年比NA，HR：1.59，95% CI：1.049~2.422， P=0.047。Ⅲ~Ⅳ期比Ⅰ~Ⅱ期：4.55年比8.33年， HR：2.89，95% CI：1.895~4.425， P < 0.001。有静脉侵犯比无静脉侵犯：5.48年比NA， HR：2.82，95% CI：1.672~4.783， P < 0.001）与生存时间短具有明显相关性。 结论:m 6A中的部分调控因子与结直肠癌的生物学特征及预后相关。

目的:探讨甲基转移酶3（Mettl3）在血管紧张素Ⅱ（Ang Ⅱ）诱导周细胞向肌成纤维细胞转分化及肾脏纤维化过程中的作用及相关机制。方法:使用C57BL/6J小鼠，（1）细胞实验中，采用磁珠分选法培养纯化小鼠肾脏周细胞，并予以1×10 6 mmol/L的Ang Ⅱ诱导周细胞-肌成纤维细胞转分化，为Ang Ⅱ组；正常培养的周细胞为对照组。采用免疫荧光染色、蛋白质印迹（Western blot）及实时反转录PCR（RT-qPCR）检测α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）以验证转分化成功。采用斑点印迹、RT-qPCR、Western blot检测N6-甲基腺苷（m6A）修饰水平及相关酶［Mettl3、Mettl14、Wilms肿瘤蛋白1相关蛋白（WTAP）、肥胖相关蛋白（FTO）、ALKB同源蛋白5（ALKBH5）、YTH结构域家族蛋白（YTHDF）1、YTHDF2、YTHDC1、YTHDC2、YTHDC3］的表达水平。采用慢病毒转染Mettl3 shRNA的方法抑制细胞中的Mettl3表达，为sh-Mettl3组、Ang Ⅱ+sh-Mettl3组；以转染慢病毒空载体作为阴性对照，为Ang Ⅱ+sh-NC组，观察Ang Ⅱ对周细胞转分化的影响，并检测下游磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）/蛋白激酶B（AKT）信号通路蛋白的表达，包括PI3K、AKT（丝氨酸磷酸化位点473）［p-AKT（S473）］、AKT（苏氨酸磷酸化位点308）［p-AKT（T308）］等。加入放线菌素D与各组周细胞共培养以抑制PI3K基因的转录，通过检测不同共培养时间残余PI3K mRNA表达量以计算PI3K mRNA半衰期。在Ang Ⅱ+sh-Mettl3组周细胞中加入AKT激动剂SC79，观察是否可逆转Mettl3抑制对Ang Ⅱ诱导周细胞-肌成纤维细胞转分化的作用。（2）动物实验中，分为假手术组（仅给予0.9%无菌生理盐水）、Ang Ⅱ组（泵入Ang Ⅱ溶液）、sh-Mettl3组（注射Mettl3 shRNA慢病毒溶液）、Ang Ⅱ+sh-Mettl3组（泵入Ang Ⅱ溶液+注射Mettl3 shRNA慢病毒溶液）、Ang Ⅱ+sh-Mettl3+SC79组（Ang Ⅱ+sh-Mettl3组处理基础上注射SC79），每组6只。手术前后采用尾夹法测定血压，术后4周测定血清肌酐、尿素含量及尿液白蛋白含量。28 d后取肾脏组织，采用苏木精-伊红（HE）及Masson三色法对组织切片进行染色，检测肾脏纤维化程度。 结果:（1）磁珠分选法可获得原代肾脏周细胞，以1×10 6 mmol/L的Ang Ⅱ处理周细胞48 h可成功诱导其向肌成纤维细胞转分化。斑点印迹结果显示，Ang Ⅱ组总RNA的m6A修饰水平高于对照组（ P<0.05），RT-qPCR及Western blot结果显示，与对照组相比，Ang Ⅱ组中Mettl3 mRNA及蛋白表达水平上调（ P均<0.05）。Ang Ⅱ+sh-Mettl3组细胞中的Mettl3蛋白表达水平低于Ang Ⅱ组，α-SMA、波形蛋白、肌间线蛋白、成纤维细胞激活蛋白a（FAPa）以及Ⅰ型胶原蛋白的表达水平亦低于Ang Ⅱ组（ P均<0.05）。与对照组相比，Ang Ⅱ组的PI3K mRNA表达水平上调，且p-AKT（S473）和p-AKT（T308）蛋白高表达；Ang Ⅱ+sh-Mettl3组的PI3K mRNA表达水平低于Ang Ⅱ组，p-AKT（S473）和p-AKT（T308）蛋白表达下调（ P均<0.05）。Ang Ⅱ+sh-Mettl3组的半衰期短于Ang Ⅱ+sh-NC组（2.34 h比3.42 h）。而Mettl3抑制对Ang Ⅱ诱导周细胞-肌成纤维细胞转分化的改善作用可被SC79逆转。（2）动物实验结果显示，与假手术组比较，Ang Ⅱ组小鼠的血压更高，血清肌酐、尿素及24 h尿蛋白测量值更高，纤维化面积更大（ P均<0.05）；而Ang Ⅱ+sh-Mettle3组的纤维化面积小于Ang Ⅱ组（ P<0.05），但在加入SC79后肾脏纤维化又加重。 结论:Mettl3介导的RNA m6A表观遗传调控参与Ang Ⅱ诱导的肾脏周细胞-肌成纤维细胞转分化及肾脏纤维化，Mettl3可能通过影响PI3K的稳定性，进而影响PI3K/AKT信号通路发挥调控作用。

目的:通过比较系统性红斑狼疮(SLE)患者与健康对照组之间血浆N6-甲基腺嘌呤(m6A)修饰相关蛋白[甲基化转移酶3(METTL3)、甲基化转移酶14(METTL14)、肾母细胞瘤1关联蛋白(WTAP)、AlkB同源蛋白5(ALKBH5)、肥胖相关蛋白(FTO)]和m6A水平变化，探讨m6A在SLE中的临床意义。方法:共选取64例SLE患者和24例健康志愿者，比较两组血浆METTL3、METTL14、WTAP、ALKBH5、FTO和m6A水平，分析METTL3、WTAP、FTO水平与临床指标的相关性。结果:SLE患者血浆METTL3水平明显高于对照组( P<0.05)，血浆WTAP和FTO水平明显低于对照组(均 P<0.05)。SLE患者血浆METTL3水平与血红蛋白水平呈负相关( r＝－0.344， P<0.05)；血浆FTO水平与血浆IgM水平呈正相关( r＝0.337， P<0.05)，与血浆IgA水平呈负相关( r＝－0.286， P<0.05)。高水平METTL3组SLE患者肾脏累及的发生率、血浆抗组蛋白抗体阳性率更高(均 P<0.05)。低水平FTO组SLE患者血浆抗dsDNA抗体、抗Sm抗体及AuaA自身抗体阳性率更高(均 P<0.05)。 结论:SLE患者血浆METTL3水平明显升高，血浆WTAP和FTO水平明显降低，并与多种临床指标相关，与SLE发病可能存在一定联系。

目的:探讨肺腺癌组织Alk B同源蛋白(ALKBH)2、ALKBH4表达与临床病理特征和预后的关系。方法:本研究为前瞻性队列研究，采用非随机抽样的方法选取2018年1月至2020年1月于临沂市肿瘤医院接受肿瘤切除手术的135例肺腺癌患者为研究对象。免疫组织化学法检测患者术中采集的肺腺癌组织和癌旁组织(距离癌组织>3 cm)ALKBH2、ALKBH4表达。根据肺腺癌组织中ALKBH2、ALKBH4的表达情况将患者分为ALKBH2阳性表达组(77例)与ALKBH2阴性表达组(58例)；ALKBH4阳性表达组(61例)与ALKBH4阴性表达组(74例)。分析肺腺癌组织ALKBH2、ALKBH4表达与肺腺癌患者临床病理特征(包括性别、年龄、吸烟史、肿瘤部位、基因突变情况、病理分型、胸膜脉管侵犯、气腔播散和脉管癌栓情况、手术切除范围、肿瘤长径、分化程度、TNM分期、淋巴结转移情况和术后有无接受化疗)的关系。肺腺癌患者出院后通过电话随访的方式每6个月随访1次，随访3年，随访截至2023年1月或患者死亡，统计3年总生存率。Kaplan-Meier法绘制生存曲线，并采用Log-rank检验比较肺腺癌组织中不同ALKBH2、ALKBH4表达情况患者的生存曲线。采用单因素和多因素Cox回归分析肺腺癌患者预后的影响因素。结果:135例肺腺癌患者中男78例，女57例；年龄(60.28±7.43)岁，年龄范围27～74岁。肺腺癌组织ALKBH2、ALKBH4阳性表达率均高于癌旁组织[57.04%(77/135)比25.19%(34/135)，45.19%(61/135)比19.26%(26/135)，均 P<0.001]。有胸膜脉管侵犯、有气腔播散、有脉管癌栓、分化程度为低分化、TNM分期为Ⅲ期、有淋巴结转移的肺腺癌患者的肺腺癌组织ALKBH2、ALKBH4阳性表达率均高于无胸膜脉管侵犯、无气腔播散、无脉管癌栓、分化程度为中高分化、TNM分期为Ⅰ～Ⅱ期、无淋巴结转移患者(ALKBH2阳性表达率比较 χ2值分别为5.51、6.54、6.82、5.36、6.53和8.22，ALKBH4阳性表达率比较 χ2值分别为5.57、6.17、6.07、5.88、7.20和8.60，均 P<0.05)。135例肺腺癌患者随访3年，失访6例，死亡62例，3年总生存率为54.07%(73/135)。Log-rank检验结果显示，ALKBH2阴性表达组患者的生存状态优于ALKBH2阳性表达组( χ2＝11.84， P＝0.001)，ALKBH4阴性表达组患者的生存状态优于ALKBH4阳性表达组( χ2＝10.17， P＝0.001)。多因素Cox回归分析显示，病理分型为微乳头型(相比贴壁型 HR＝1.205，95% CI：1.054～1.376)、有胸膜脉管侵犯( HR＝3.587，95% CI：1.110～11.589)、有气腔播散( HR＝3.357，95% CI：1.068～10.556)、有脉管癌栓( HR＝3.671，95% CI：1.171～11.511)、低分化( HR＝3.714，95% CI：1.068～10.556)、TNM分期为Ⅲ期( HR＝4.711，95% CI：1.165～19.047)、有淋巴结转移( HR＝5.136，95% CI：1.069～24.673)、ALKBH2表达阳性( HR＝4.218，95% CI：1.149～15.482)、ALKBH4表达阳性( HR＝3.713，95% CI：1.055～13.071)为肺腺癌患者死亡的独立危险因素(均 P<0.05)。 结论:肺腺癌组织ALKBH2、ALKBH4表达上调，与病理分型、胸膜脉管侵犯、气腔播散、脉管癌栓、分化程度、TNM分期、淋巴结转移和不良预后有关。

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)牛磺酸上调基因1(TUG1)对胃癌细胞增殖、迁移和血管生成的影响.方法 基于公共数据库分析LncRNA TUG1在胃癌组织和癌旁组织中的表达水平.通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测lncRNA TUG1在胃癌细胞系中的表达;采用si-TUGl、si-NC转染胃癌细胞SGC-7901,分别采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法、克隆形成实验、Transwell实验和基质胶成管实验分析敲低lncRNA TUG1对胃癌细胞增殖、集落形成、迁移和血管生成的影响.基于公共数据库分析烷基化修复蛋白B同源物5(ALKBH5)基因与lncRNA TUG1的相关性.采用放线菌素D实验验证ALKBH5与lncRNA TUG1的调控关系.通过细胞功能实验分析敲低ALKBH5对胃癌细胞增殖、集落形成、迁移和血管生成的影响.结果 lncRNA TUG1在胃癌组织和胃癌细胞系中均表达上调;敲低lncRNA TUG1后,SGC-7901细胞增殖、集落形成、迁移、血管生成能力均较对照细胞下降,差异有统计学意义(P＜0.05).数据库分析结果显示,在胃癌中,ALKBH5与lncRNA TUG1表达呈正相关(r=0.37,P＜0.05).与对照细胞相比,敲低ALKBH5的SGC-7901细胞lncRNA TUG1的RNA稳定性下降,且细胞增殖、集落形成、迁移、血管生成能力均下降,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 ALKBH5通过诱导lncRNA TUG1表达,促进胃癌细胞的增殖、集落形成、迁移和血管生成.

目的 探讨麦芽酚铝暴露对miR-193a-3p、去甲基化酶AlkB同源蛋白5(ALKBH5)、第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物基因(PTEN)和蛋白激酶B(AKT)的影响,以及miR-193a-3p是否通过调控ALKBH5/PTEN/AKT信号通路参与铝致认知障碍的机制.方法 将无特定病原体级健康雄性SD大鼠随机分为对照组和低、中、高剂量组,每组8只.3个剂量组大鼠分别予浓度为10.00、20.00和40.00μmol/kg体质量的麦芽酚铝溶液腹腔注射染毒,对照组大鼠予等体积0.9％氯化钠溶液;每周连续染毒5 d,持续3个月.染毒结束后,以新物体识别实验检测大鼠学习记忆能力,以实时荧光定量聚合酶链反应法检测大鼠海马组织中miR-193a-3p和B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的mRNA相对表达水平,以蛋白质印迹法检测大鼠海马组织中ALKBH5、PTEN和AKT2蛋白的表达.结果 高剂量组大鼠辨别指数和偏好指数分别低于对照组和低剂量组(P值均＜0.05).高剂量组大鼠海马组织中miR-193a-3p和Bcl-2 mRNA相对表达水平分别低于对照组和低剂量组(P值均＜0.05),Bax mRNA相对表达水平分别高于对照组和低剂量组(P值均＜0.05),Caspase-3 mRNA相对表达水平分别高于其他3组(P值均＜0.05).高剂量组大鼠海马组织中ALKBH5蛋白相对表达水平低于对照组(P＜0.05),PTEN蛋白相对表达水高于对照组和低剂量组(P值均＜0.05),AKT2蛋白相对表达水平低于对照组和低剂量组(P值均＜0.05).结论 亚慢性铝暴露可抑制大鼠海马组织中miR-193a-3p的表达,从而破坏ALKBH5/PTEN/AKT通路,影响正常的神经元稳态和细胞功能;此机制可能在铝诱导的认知障碍过程中发挥重要作用.

目的 探讨circ_LAS1L通过调控分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)影响心肌细胞存活的机制.方法 本实验时间为2023年1-5月.(1)将心肌细胞H9c2随机分为对照组(不进行转染)、NC组(转染空载体)、circ_LAS1L组(转染circ_LAS1L过表达载体),然后检测各组circ_LAS1L表达水平及m6A修饰酶[甲基转移酶3(METTL3)、甲基转移酶14(METTL14)、Wilms肿瘤1相关蛋白(WTAP)、脂肪和肥胖相关蛋白(FTO)、α-酮戊二酸依赖性双加氧酶alkB同系物5(ALKBH5)]、SFRP5 mRNA、蛋白表达水平.(2)将心肌细胞H9c2随机分为对照组、si-NC组(转染siRNA)、si-circ_LAS1L组(转染circ_LAS1L siRNA),各组检测指标同上.(3)将心肌细胞H9c2随机分为对照组、NC组、si-circ_LAS1L组、si-METTL3组(转染METTL3 siRNA)、si-circ_LAS1L+METTL3组(共转染circ_LAS1L siRNA和METTL3过表达载体),检测各组circ_LAS1L表达水平和METTL3、SFRP5 mRNA、蛋白表达水平及N6-甲基腺苷(m6A)+SFRP5 mRNA表达水平、心肌细胞存活指标[细胞存活力、乳酸脱氢酶(LDH)释放率、细胞凋亡率].结果 circ_LAS1L组circ_LASIL表达水平及METTL3、METTL14、WTAP、SFRP5 mRNA、蛋白表达水平高于对照组,FTO、ALKBH5 mRNA、蛋白表达水平低于对照组(P＜0.05).si-circ_LAS1L组circ_LASIL表达水平及METTL3、METTL14、WTAP、SFRP5 mRNA、蛋白表达水平低于对照组,FTO、ALKBH5 mRNA、蛋白表达水平高于对照组(P＜0.05).si-circ_LAS1L组、si-circ_LAS1L+METTL3组circ_LAS1L表达水平低于对照组,si-circ_LAS1L组、si-METTL3组METTL3、SFRP5 mRNA、蛋白表达水平及m6A+SFRP5 mRNA表达水平低于对照组、si-circ_LAS1L+METTL3组(P＜0.05).si-circ_LAS1L组、si-METTL3组细胞存活力低于对照组、si-circ_LAS1L+METTL3组,LDH释放率、细胞凋亡率高于对照组、si-circ_LAS1L+METTL3组(P＜0.05).结论 circ_LAS1L通过METTL3提高SFRP5的m6A修饰水平,从而促进SFRP5表达,进而维持心肌细胞存活,且circ_LAS1L/METTL3/SFRP5轴是与心肌细胞功能密切相关的重要信号通路.

N6-methyladenosine(m6A)denotes the addition of a methyl group to the sixth nitrogen atom of ade-nosine,a common occurrence in eukaryotic RNA.The m6A modifications govern RNA splicing,translocation,stability,and translation into proteins.The RNA methyltransferases,like methyltransferase-like protein 3(METTL3),METTL14,and Wilms'tumor 1-associated protein(WTAP),are responsible for these modifications,while the removal process in-volves demethylases,specifically fat mass and obesity-associated protein(FTO)and ALKB homolog 5(ALKBH5).Recog-nition of these modifications is facilitated by m6A-binding proteins,such as YTH family proteins and insulin-like growth factor 2 mRNA-binding proteins(IGF2BPs).The m6A modification regulators are involved in the onset and progression of non-small-cell lung cancer through multiple mechanisms.This review concentrates on the biological functions and molecu-lar mechanisms of m6A modification-related regulatory factors in the malignant progression of non-small-cell lung cancer.