抑郁症严重影响全球超过3亿人的生命健康及生活质量，鉴于抑郁症发病机制不明，且抗抑郁药物起效缓慢、疗效不佳，现亟需开辟新思路研究其发病机制及寻找新的治疗靶点。临床及临床前研究表明，大量苦味受体（taste receptor type 2 members，Tas2Rs）激动剂如表没食子儿茶素没食子酸酯（Epigallocatechin gallate，EGCG）、白藜芦醇、咖啡因、啤酒花与黄连素等均可显著缓解抑郁患者症状，并干预各类抑郁动物模型抑郁样行为，提示Tas2Rs激动剂参与调节抑郁症的发病过程，然而其抗抑郁作用的具体机制鲜有报道。最近研究显示，Tas2Rs激动剂密切参与了神经递质的调节、炎症信号的传导、脑肠信号交流及血脑脊液屏障物质交换等过程。因此，本文试图从神经递质、炎症、脑肠轴、血脑脊液屏障及其他5个方面出发，综述Tas2Rs激动剂与抑郁症可能相关的致病机制及治疗靶点，为抑郁症病理机制研究及新药研发提供新的思路。

目的:探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对前列腺癌细胞PC-3侵袭的影响以及组织蛋白酶B(Cathepsin B)在其中可能的作用机制。方法:使用不同浓度EGCG培养组织来源为人前列腺癌分离自骨转移灶的PC-3细胞(购自中国科学院上海细胞库)，形态学检查分析PC-3细胞在侵袭、迁移上的改变；实验分为对照组与EGCG干预组(12.5、25.0、50.0、100.0 mg/L)，蛋白质印迹法(Western blot)，检测不同浓度EGCG对PC-3细胞Cathepsin B合成和分泌的影响；酶联免疫吸附(ELISA)实验，检测不同浓度的EGCG对PC-3细胞CathepsinB分泌的影响。研究历时2年。组间数据分析采用One-way ANOVA分析，组间两两比较采用Tukey方法。结果:抑制侵袭实验中，除12.5 mg/L EGCG干预组(341.67±25.17， t＝2.230， P>0.05)侵袭细胞数相比对照组(376.33±9.50)差异无统计学意义外，25.0 mg/L EGCG干预组(241.00±3.60， t＝23.070， P<0.05)、50.0 mg/L EGCG干预组(170.67±13.31， t＝21.780， P<0.05)和100.0 mg/L EGCG干预组(72.66±6.80， t＝45.020， P<0.05)相比于对照组明显减少，差异均有统计学意义( F＝241.050， P<0.01)；抑制PC-3迁移实验中，12.5 mg/L EGCG干预组侵袭细胞数(0.550±0.030， t＝5.730， P<0.05)、25.0 mg/L EGCG干预组(0.430±0.018， t＝20.740， P<0.05)、50.0 mg/L EGCG干预组(0.320±0.025， t＝22.620， P<0.05)和100.0 mg/L EGCG干预组(0.260±0.017， t＝38.830， P<0.05)相比对照组(0.650±0.004)明显减少，差异均有统计学意义( F＝179.60， P<0.01)；Western blot结果显示，除12.5 mg/L EGCG干预组(3.870±0.151， t＝0.710， P>0.05)CathepsinB蛋白的合成和分泌相比对照组(3.99±0.25)差异无统计学意义外，25.0 mg/L EGCG干预组(3.29±0.12， t＝4.370， P<0.05)、50.0 mg/L EGCG干预组(2.88±0.10， t＝7.140， P<0.05)和100.0 mg/L EGCG干预组(2.060±0.085， t＝12.660， P<0.05)相比于对照组明显减少，差异均有统计学意义( F＝79.080， P<0.01)。ELISA实验显示，除12.5 mg/L EGCG干预组上清的Cathepsin B前酶光密度值比值(3.00±0.17， t＝2.040， P>0.05)和总组织蛋白酶B含量(50.23±1.75， t＝2.650， P>0.05)相比对照组(3.230±0.097)和(59.65±5.91)差异无统计学意义外，25.0 mg/L EGCG干预组(2.320±0.095， t＝11.610， P<0.05)和(39.42±4.07， t＝4.880， P<0.05)、50.0 mg/L EGCG干预组(1.410±0.061， t＝27.510， P<0.05)和(25.34±2.80， t＝9.090， P<0.05)、100.0 mg/L EGCG干预组(0.86±0.10， t＝29.470， P<0.05)和(13.80±1.57， t＝12.990， P<0.05)相比于对照组明显减少，差异均有统计学意义( F＝255.980， P<0.01和 F＝78.950， P<0.01)。 结论:EGCG抑制前列腺癌细胞PC-3侵袭，其作用机制可能与其抑制Cathepsin B蛋白的合成与分泌相关。

目的:探讨绿茶提取物表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对人Tenon囊成纤维细胞(HTFs)活化的作用及其可能的作用机制。方法:收集9例9眼晚期原发性开角型青光眼患者小梁切除术中获取的结膜下Tenon囊组织，通过组织贴壁培养获得原代细胞，采用免疫荧光染色法(波形蛋白+角蛋白)进行细胞鉴定，取4~6代细胞进行后续实验。利用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测0~80 μmol/L EGCG干预条件下的细胞存活率。将细胞分为空白对照组、转化生长因子(TGF)-β1诱导组和EGCG干预组，分别于正常培养基、含10 ng/ml TGF-β1培养基以及含10 ng/ml TGF-β1+50 μmol/L EGCG培养基中培养。采用BrdU标记法检测各组细胞增生率，采用细胞划痕实验观察各组细胞迁移情况，采用免疫荧光法检测各组细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达，采用Western blot法检测空白对照组、TGF-β1诱导组、10 μmol/L EGCG组和50 μmol/L EGCG组Smad2/3、p-Smad2/3、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)及磷酸化Akt(p-Akt)的表达。结果:体外培养HTFs呈长梭形，生长规律，免疫荧光鉴定波形蛋白呈阳性。CCK-8检测显示，10、20、30、40、50 μmol/L EGCG处理细胞存活率与0 μmol/L EGCG处理细胞比较，差异均无统计学意义(均 P<0.05)。BrdU标记实验显示，TGF-β1诱导组细胞增生率为(66.37±12.65)%，高于EGCG组的(14.75±12.33)%，差异有统计学意义( P<0.05)。划痕实验第3天，TGF-β1诱导组相对划痕面积为(47.33±12.22)%，明显低于EGCG干预组的(92.67±4.04)%，差异有统计学意义( P<0.05)。免疫荧光染色结果显示，TGF-β1诱导组细胞α-SMA蛋白荧光较空白对照组显著增强，EGCG干预组α-SMA蛋白荧光则减弱至空白对照组水平。Western blot法检测结果显示，各组间细胞中p-Smad2/3、PI3K和p-Akt蛋白相对表达量总体比较差异均有统计学意义( F＝58.820、121.153、69.289，均 P<0.001)，其中TGF-β1诱导组p-Smad2/3、PI3K和p-Akt蛋白相对表达量明显高于空白对照组、10 μmol/L和50 μmol/L EGCG组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。 结论:EGCG能够通过Smad通路及PI3K/Akt信号通路抑制TGF-β1诱导的HTFs活化。

目的 探讨表没食子儿茶素没食子酸酯[(-)-epigallocatechin-3-gallate,EGCG]对延缓多柔比星(doxorubicin,Dox)诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)衰老的作用及机制.方法 2023年4～12月于解放军总医院第二医学中心老年医学研究所体外培养HUVEC,分为对照组、Dox(2 μmol/L)组、Dox+EGCG(50 μmol/L)组、Dox+EGCG+ML385(Nrf2特异性抑制剂,2.5 μmol/L)组,采用β-半乳糖苷酶(β-gal)染色检测细胞衰老,活性氧(reactive oxygen species,ROS)染色检测细胞内ROS含量,超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒及丙二醛(MDA)含量检测试剂盒检测SOD活力和MDA含量,CCK-8实验检测细胞活力以及Western blot检测细胞内衰老相关蛋白(P21和P53)、核因子e2相关因子2(nuclear factor-E2-related factor 2,Nrf2)、血红素加氧酶 1(heme oxygenase 1,HO-1)蛋白水平.结果 浓度(10,30,50)μmol/L的 EGCG处理HUVEC 48 h不影响细胞活力,而浓度(70,100,300)μmol/L 的 EGCG预处理后细胞活力下降,因此选择50 μmol/L作为后续使用浓度.与对照组比较,Dox组β-gal阳性率和ROS水平显著增加(P＜0.05),P21和P53蛋白表达增高(P＜0.05),加入EGCG后β-gal阳性率以及ROS水平明显降低(P＜0.05),SOD活性提高(P＜0.05),MDA含量下降(P＜0.05),同时P21和P53蛋白表达量降低(P＜0.05),Nrf2和HO-1显著增加(P＜0.05).ML385组可逆转EGCG的细胞抗衰老效应,表现为Nrf2和HO-1表达量降低(P＜0.05),而P21和P53蛋白表达量增加(P＜0.05).结论 EGCG可能通过激活Nrf2/HO-1通路延缓Dox诱导的HUVEC衰老效应.

目的 基于网络药理学和体内动物模型实验,评价表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)对顺铂(cisplatin,CIS)诱导的大鼠急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)的保护效果.方法 通过TCMSP、Gene Cards、OMIM网站收集EGCG、AKI作用靶点,取交集后构建蛋白质-蛋白质互作网络(PPI),Cytoscape 3.9.1 对交集靶点进行可视化分析,筛选出关键靶点,通过DAVID数据库进行KEGG和GO富集分析.32 只雄性Wistar大鼠,随机分为对照组(CON组)、EGCG组、顺铂组(CIS组)和CIS+EGCG组.CON组和CIS组灌胃生理盐水,EGCG组和CIS+EGCG组灌胃EGCG(40 mg/kg),连续 28 d,第 26 天CIS组、CIS+EGCG组腹腔注射CIS(7 mg/kg),第 29 天收集血液和组织.检测血清尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)水平;苏木素-伊红(HE)染色观察肾病理变化;TUNEL检测肾组织细胞凋亡情况;Western Blot、qRT-PCR及免疫组化验证分析结果.结果 网络药理学筛选出 87 个EGCG与AKI交集基因,25 个核心靶点,通过PI3K/AKT等信号通路和多种生物过程影响AKI的发展;EGCG预处理明显降低AKI大鼠血清中BUN、SCr水平,改善AKI大鼠肾病变,缓解AKI大鼠肾组织凋亡;Western Blot、qRT-PCR及免疫组化结果表明预处理 EGCG 可激活 PI3K/AKT 通路.结论 基于以上研究结果,推测出EGCG可能通过激活PI3K/AKT信号通路进而缓解CIS诱导的大鼠AKI.

阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是最常见的神经退行性疾病之一,也是最常见的痴呆类型.到目前为止,主要是针对症状的改善性药物,还没有特别有效的药物来根治.近年来,膳食多酚因其多效性的生物学活性,尤其是其抗氧化性能而受到研究者们的广泛关注.表没食子儿茶素没食子酸酯(Epigallocatechin 3-gallate,EGCG)是一种来源于绿茶提取物的丰富多酚成分,在对抗多种疾病方面具有显著的生物学活性,迄今为止已开展了在AD中潜在作用的广泛研究.本文从通过调控beta淀粉样蛋白、tau蛋白磷酸化、氧化应激和神经炎症等机制方面整理了其在AD中发挥神经保护作用的研究,进一步彰显了 EGCG的药理学特征及其在AD防治中的意义,以期对后续研究起到一定的指导作用.

目的 建立不同产地抹茶的HPLC指纹图谱及多成分含量测定,结合化学模式识别法评价不同产地抹茶的质量,为其进一步研究和开发提供依据.方法 Agilent Eclipse Plus C18色谱柱,流动相为乙腈(A)-0.1％磷酸(B)进行梯度洗脱,体积流量为1.0mL/min,检测波长278nm,柱温35 ℃,进样量10μL.采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统A版》(国家药典委员会2004版)软件建立27批不同产地抹茶的HPLC指纹图谱并分析相似度.使用IBM SPSS statistics 20和Origin 2023b软件进行聚类分析、主成分分析和偏最小二乘法-判别分析(partial least squares-discriminant analysis,PLS-DA).通过对照品对比指认化学成分并进行定量测定.结果 27批抹茶HPLC指纹图谱共匹配出23个共有峰,分别指认出,峰4是没食子酸,峰6是表没食子儿茶素(epigallocatechin,EGC),峰8是儿茶素,峰9是咖啡碱,峰12是表儿茶素,峰13是表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG),峰 14 是没食子儿茶素没食子酸酯(gallocatechin gallate,GCG),峰 16 是芦丁,峰17是表儿茶素没食子酸酯(epicatechin gallate,ECG),峰21是槲皮素,峰22是山柰酚,指纹图谱相似度范围为0.983～1.000.聚类分析将27批抹茶分为4类.主成分分析得出江口和瓮安产地的抹茶质量较好;经PLS-DA分析筛选出了咖啡碱、EGCG、儿茶素、山柰酚、GCG、没食子酸等8个差异成分.样品中没食子酸、EGC、儿茶素、咖啡碱、表儿茶素、EGCG、GCG、芦丁、ECG、槲皮素、山柰酚 11 种成分含量分别为 0.10～0.85、8.27～4.36、4.21～3.84、42.23～72.37、10.41～16.49、48.52～72.89、0.12～0.73、0.53～1.76、21.43～28.60、0.01～0.04、0.03～0.38 mg/g.结论 建立的抹茶 HPLC 指纹图谱操作简便、结果可靠,咖啡碱、EGCG、儿茶素、山柰酚、GCG、没食子酸可以作为抹茶质量评价的指标性成分.

目的 采用网络药理学和分子对接技术及分子动力学技术,研究骆驼刺治疗脓毒症作用机制,并进行动物实验验证.方法 首先筛选骆驼刺有效成分及其作用靶点,同时筛选治疗脓毒症的相关作用靶点,构建蛋白质相互作用(PPI)网络,并进行拓扑学分析,绘制中药-疾病-靶点网络图.其次对网络图中核心靶点进行京都基因与基因组百科全书富集分析,同时进行基因本体功能富集分析;接着对核心靶点进行分子对接和分子动力学模拟实验验证.最后采用小鼠进行动物实验验证.结果 筛选出骆驼刺活性成分30个,度值排名前5为(-)-儿茶素酸酯、金雀异黄酮、山奈酚、槲皮素、表没食子儿茶素,作用靶点196个;脓毒症疾病相关靶点2144个,骆驼刺-脓毒症交集靶点105个,核心靶点为TNF、IL-6、AKT1、VEGFA、CASP3、IL-1β等.涉及PI3K-Akt、TNF、HIF-1、AGE-RAGE、IL-17等信号通路,介导炎症反应、细胞凋亡等生物过程,发挥对脓毒症的治疗作用.分子对接结果显示,骆驼刺黄酮类化合物与各关键靶点结合性能均良好,其中结合能最低最稳定的构象为(-)-epigallocatechin gallate-IL-6和quercetin-IL-6,对两对复合物进行分子动力学模拟,结果表明,通过静电、范德华势能和氢键的共同作用,可以达到稳定结合的效果.动物实验证实骆驼刺可抑制脓毒症小鼠肺组织内PI3K/Akt信号通路的激活,降低Caspase-3、VEGF蛋白表达,减少外周血炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6的分泌,减轻组织及脏器炎性损伤.结论 骆驼刺对脓毒症的治疗作用是通过多生物过程、多靶点、多通路来实现的.本研究为骆驼刺的临床应用以及脓毒症治疗提供了一定的理论依据.

目的:探究表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCg)特异性抑制芳香乙酰胺脱乙酰基酶蛋白(arylacetamide deacetylase,AADAC)来诱导卵巢癌细胞发生铁死亡的分子机制.方法:体外培养卵巢癌细胞系(SK-OV-3、A2780、Hey和SW626).CCK-8检测EGCg对卵巢癌细胞的半数抑制浓度(median inhibition concentration,IC50).铁离子检测试剂盒检测细胞内Fe2+的含量.活性氧(reactive ox-ygen species,ROS)检测试剂盒检测细胞内ROS的含量.Western blot检测细胞内铁死亡相关蛋白GPX4和NOX1的表达.酶活实验检测EGCg对AADAC活性的影响.Western blot检测EGCg对AADAC蛋白的影响.应用免疫组化和Western blot检测卵巢癌患者组织中AADAC的表达.应用siRNA沉默卵巢癌细胞总AADAC的表达.应用AADAC-KO敲除卵巢癌细胞中AADAC的表达.皮下成瘤验证小鼠体内EGCg对卵巢癌移植瘤生长的影响.结果:EGCg能抑制卵巢癌细胞的增殖,且对SK-OV-3和SW626细胞较为敏感.EGCg使卵巢癌细胞中Fe2+含量增加,ROS含量增加,并抑制GPX4蛋白表达,促进NOX1蛋白的表达.EGCg能抑制AADAC蛋白的活性并促进其降解.AADAC在卵巢癌患者癌组织中高表达.沉默AADAC能促进卵巢癌细胞发生铁死亡.沉默AADAC后EGCg对卵巢癌细胞变得不敏感,并不能促进铁死亡的发生.相对于NC组,EGCg能抑制裸鼠移植瘤的生长,且移植瘤中AADAC表达下降,铁死亡被激活.结论:EGCg能特异性抑制AADAC来诱导卵巢癌细胞发生铁死亡.

背景:研究表明,抑制内质网应激所致的细胞凋亡能够挽救神经部分功能.茶多酚能抑制内质网应激,但是存在生物利用率差不易透血脑屏障等问题,结合外泌体靶向脊髓修复及高效载药,理论上两者结合能够发挥更优的脊髓保护效能.目的:探讨茶多酚联合骨髓间充质干细胞外泌体对脊髓缺血再灌注损伤大鼠神经功能及内质网应激的影响.方法:SD雄性大鼠50只,随机分为假手术组、模型组、茶多酚组、外泌体组、联合治疗组,每组10只,除假手术组外,其余4组制作脊髓缺血再灌注损伤模型,术后2 h经尾静脉注射生理盐水、外泌体、茶多酚、茶多酚+骨髓间充质干细胞外泌体混合液;脊髓损伤后7,14,28 d进行BBB神经功能评分,脊髓损伤后14 d,取脊髓组织进行苏木精-伊红染色、尼氏染色、ATF6和GADD153内质网应激标志物免疫荧光染色.结果与结论:①神经功能评分:与假手术组比较,模型组、外泌体组、茶多酚组、联合治疗组神经功能评分均不同程度下降,术后14 d联合治疗组神经功能评分优于茶多酚组、外泌体组、模型组(P<0.05),术后28 d后联合治疗组神经功能评分优于模型组和茶多酚组(P<0.05);②苏木精-伊红染色和尼氏染色显示:模型组大鼠神经元细胞数量减少,脊髓损伤区域内大量空洞坏死及瘢痕增生,茶多酚组、外泌体组、联合治疗组神经元数量和周边空洞坏死有不同程度改善,联合治疗组改善最为明显;③内质网应激相关蛋白ATF6、GADD153表达:术后14 d联合治疗组GADD153表达低于模型组和茶多酚组(P<0.05),联合治疗组ATF6表达低于模型组、外泌体组和茶多酚组(P<0.05);④结果表明:茶多酚联合骨髓间充质干细胞外泌体能改善脊髓缺血再灌注损伤大鼠的神经功能,可能与抑制内质网应激相关蛋白ATF6、GADD153表达有关.