目的:探讨MAPT-IT1在乳腺癌中表达的临床意义及其体外生物学效应。方法:TCGA数据库分析MAPT-IT1在乳腺癌中的表达，收集64例乳腺癌及正常癌旁组织，培养人乳腺癌MDA-MB-231及MCF-7细胞，通过细胞转染技术过表达MAPT-IT1，回复表达miR-181a-5p，将MDA-MB-231细胞分为：空白A组、过表达A组及恢复A组；将MCF-7细胞分为：空白B组、过表达B组及回复B组。实时荧光定量PCR（RT-qPCR）实验检测组织或各组细胞MAPT-IT1及其预测靶基因miR-181a-5p及MAPT mRNA表达水平，Western blot检测MAPT蛋白表达水平，CCK-8实验检测细胞增殖能力的变化，Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力的变化。结果:MAPT-IT1在正常癌旁组织及乳腺癌组织中表达分别为0.011±0.002及0.028±0.003；MAPT-IT1在乳腺癌组织中表达显著高于正常癌旁组织（ t=4.08， P<0.001），其高表达与患者更早的临床分期、ER阳性及预后时间延长相关（ P均<0.05）。空白A组、过表达A组及回复A组MAPT-IT1表达分别为（1.000±0.078）、（8.597±0.320）、（8.540±0.177），miR-181a-5p表达分别为（1.000±0.027）、（0.263±0.024）、（4.433±0.239），MAPT表达分别为（1.000±0.071）、（3.297±0.243）、（0.497±0.029）。空白B组、过表达B组及回复B组MAPT-IT1表达分别为（1.000±0.081）、（5.716±0.309）、（5.288±0.176），miR-181a-5p表达分别为（1.000±0.024）、（0.291±0.022）、（3.648±0.073），MAPT表达分别为（1.000±0.054）、（3.309±0.177）、（0.883±0.075）。过表达MAPT-IT1后，MDA-MB-231及MCF-7细胞miR-181a-5p表达下调（ P<0.05），而MAPT的表达水平显著增高（ P<0.001），同时细胞增殖及侵袭能力显著降低（ P<0.05）。恢复表达miR-181a-5p则可下调MAPT，促进细胞增殖及侵袭能力（ P<0.05）。 结论:MAPT-IT1的过表达可显著下调乳腺癌细胞miR-181a-5p，介导MAPT表达上调及细胞体外恶性表型的抑制。

目的:探讨沉默长链非编码RNA SNHG7(LncRNA SNHG7)对缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation，H/R)诱导的心肌细胞损伤的影响及其对miR-181b-5p的靶向调控作用。方法:体外培养大鼠H9c2心肌细胞，将其随机分为对照组、H/R组、H/R+si-NC组、H/R+si-SNHG7组、H/R+si-SNHG7+anti-miR-NC组和H/R+si-SNHG7+anti-miR-181b-5p组。检测乳酸脱氢酶、丙二醛的含量与超氧化物歧化酶的活性；用流式细胞术检测细胞凋亡率；用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测SNHG7、miR-181b-5p的表达量；用双荧光素酶报告实验验证SNHG7、miR-181b-5p的靶向关系；蛋白免疫印迹法检测Bax和Bcl-2蛋白的表达量。结果:与对照组相比，H/R组心肌细胞中SNHG7的表达显著升高( P<0.05)，miR-181b-5p的表达水平显著降低( P<0.05)，乳酸脱氢酶、丙二醛的含量显著升高( P<0.05)，超氧化物歧化酶的活性显著降低( P<0.05)，细胞凋亡率显著升高( P<0.05)，Bax蛋白水平显著升高( P<0.05)，Bcl-2蛋白水平显著降低( P<0.05)；与H/R组、H/R+si-NC组相比，H/R+si-SNHG7组乳酸脱氢酶、丙二醛的含量显著降低( P<0.05)，超氧化物歧化酶的活性显著升高( P<0.05)，细胞凋亡率显著降低( P<0.05)，Bax蛋白水平显著降低( P<0.05)，Bcl-2蛋白水平显著升高( P<0.05)；双荧光素酶报告实验证实SNHG7可靶向结合miR-181b-5p；干扰miR-181b-5p的表达可减弱沉默SNHG7对H/R诱导的心肌细胞氧化应激及细胞凋亡的作用。 结论:沉默SNHG7可能通过上调miR-181b-5p的表达抑制H/R诱导的心肌细胞氧化应激及细胞凋亡，从而对心肌细胞发挥保护作用。

目的:探讨微小RNA（miRNA）-181b-5p是否通过靶向普列克底物蛋白（PLEK）抑制皮肤黑素瘤（CM）细胞的增殖及侵袭能力。方法:生物信息学分析CM核心基因；双荧光素酶报告基因实验验证miRNA-181b-5p和PLEK的靶向结合。采用RNA oligo和siRNA分别调控A375细胞miRNA-181b-5p和PLEK的表达，具体分组为：模拟物阴性对照组、miRNA-181b-5p模拟物组、抑制剂阴性对照组、miRNA-181b-5p抑制剂组、PLEK siRNA组、siRNA阴性对照组、miRNA-181b-5p抑制剂和对照siRNA共转染组以及miRNA-181b-5p抑制剂和PLEK siRNA3共转染组。上述各组用相应试剂处理细胞48 h后，采用qPCR检测A375细胞中miRNA-181b-5p和PLEK mRNA的表达，Western印迹检测PLEK蛋白的表达，Transwell小室侵袭实验检测A375细胞的侵袭能力；继续培养24 ~ 96 h后，CCK8实验检测A375细胞增殖能力。结果:PLEK为CM的核心基因，CM原位癌组织较癌旁组织高表达PLEK（ P = 0.031），转移组织较原位癌组织高表达PLEK（ P = 0.001）。与人表皮黑素细胞HEMa-LP相比，A375细胞高表达PLEK mRNA（3.884 ± 0.156比0.997 ± 0.010， t = 18.48， P < 0.001）及PLEK蛋白（2.840 ± 0.301比1.029 ± 0.094， t = 5.47， P = 0.005），低表达miRNA-181b-5p（0.333 ± 0.042比0.967 ± 0.069， t = 7.83， P = 0.001）。双荧光素酶报告基因实验显示，miRNA-181b-5p和PLEK靶向结合。与模拟物阴性对照相比，miRNA-181b-5p模拟物转染后A375细胞的存活率显著降低（48 h， t = 7.96， P = 0.015；72 h， t = 7.50， P = 0.002；96 h， t = 7.96， P = 0.001），侵袭能力也显著降低（ t = 5.07， P = 0.007）；相反miRNA-181b-5p抑制剂组A375细胞存活率高于抑制剂阴性对照组（24 h， t =5.38， P = 0.013；48 h， t = 5.36， P = 0.013；72 h， t =7.63， P = 0.005；96 h， t =5.99， P = 0.004），侵袭能力也高于抑制剂阴性对照组（ t = 7.24， P = 0.002）；与对照siRNA组相比，PLEK siRNA转染后A375细胞的增殖能力降低（48、72、96 h时， P值分别为0.015、0.011、0.001），侵袭能力也降低（ t = 4.93， P = 0.008）；与miRNA-181b-5p抑制剂和对照siRNA共转染组相比，miRNA-181b-5p抑制剂和PLEK siRNA共转染组A375细胞的增殖率明显降低（24、48、72、96 h时， P值分别为0.042、0.042、0.037、0.017），侵袭能力也明显降低（ t = 8.52， P = 0.001）。 结论:miRNA-181b-5p抑制A375细胞增殖和侵袭能力，其机制涉及靶向下调PLEK的表达。

目的:验证过表达小RNA(micro RNA, miR)-23b的骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)回输对治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis, EAE)小鼠具有更好的协同治疗效果。方法:体外实验将EAE小鼠新鲜外周T淋巴细胞与miR23b-BMSCs (miR23b-BMSC-LN组)，未处理BMSCs(BMSC-LN组)，或未加入BMSCs的空白对照(Control-LN组)共培养48 h，应用酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测其中白细胞介素(interleukin, IL)-17、转化生长因子-β(transforming growth factor, TGF-β)的表达水平。用CD4 Percp、CD25 PE、IL-17 APC、Foxp3 APC抗体对细胞进行染色，流式细胞仪分析MOG35-55刺激后的CD4 ＋ IL-17 ＋ Th17细胞和CD4 ＋ CD25 ＋ Foxp3 ＋ Treg细胞的百分比；体内实验应用HE染色分析回输miR23b-BMSCs组(miR23b-BMSC-EAE组)，回输未处理BMSCs组(BMSCs-EAE组)，假手术组(ctrl-EAE组)的脊髓白质的炎性浸润情况。 结果:过表达miR-23b可增强BMSCs可抑制Th17细胞的分化能力[(4.34±0.32)%比(8.21±0.16)%， χ2＝10.03, P<0.05]，并促进调节性T(T regular, Treg)细胞亚群的分化[(1.05±0.27)%比(0.24±0.06)%， χ2＝12.67， P<0.05)]。在病理表现上，miR23b-BMSCs移植能够通过降低Th17/Treg细胞比率以及抑制炎症细胞浸润血脑屏障，从而减轻脊髓脱髓鞘，延缓EAE病程的进展。 结论:过表达miR23b-BMSCs回输治疗具有更高效更持久的治疗效果，为BMSCs治疗自身免疫疾病的应用奠定了基础。

目的:探讨多发性骨髓瘤（MM）患者血浆微小RNA（miR）-17-5p的表达及其对肿瘤发生发展的作用。方法:纳入2013年4月至2018年4月在河南省肿瘤医院血液科就诊的意义未明单克隆丙种球蛋白血症（MGUS）患者、MM患者及20名健康志愿者，采用逆转录聚合酶链反应（qRT-PCR）法检测血浆循环miR-17-5p和骨髓单个核细胞中miR-17-5p的表达量。其中MM组患者分为初诊未治MM（NDMM）组、完全缓解MM（CRMM）组以及复发难治MM（RRMM）组。分析各组miR-17-5p的表达差异；用相关性分析评估NDMM患者的血浆miR-17-5p与血清M蛋白和骨髓浆细胞比例之间的关系；用受试者工作特征（ROC）曲线评估血浆miR-17-5p作为MM诊断相关的分子标志物的可能性；过表达或敲低miR-17-5p的表达后，细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测miR-17-5P对MM细胞系增殖的影响，裸鼠皮下成瘤实验体内检测miR-17-5p对MM细胞增殖的影响。结果:纳入MGUS患者10例，其中男6例、女4例。MM患者92例，其中男54例、女38例；MM患者中，NDMM组22例、CRMM组11例、RRMM组59例。NDMM组和RRMM组骨髓单个核细胞中miR-17-5p的表达量高于健康对照组［1.37（0.47，4.87）、2.68（1.02，5.02）比1.00（1.00，1.00），均 P<0.05］，且血浆miR-17-5p的表达水平也高于健康对照组［1.85（0.92，3.51）、2.79（1.22，5.04）比1.00（1.00，1.00），均 P<0.05］；miR-17-5p在KMS-11、RPMI-8226、H929、MM-1R、U266B1等MM细胞系中的表达量均高于健康对照组的骨髓单个核细胞（3.96±0.68、1.58±0.32、3.51±0.55、5.08±0.76、3.22±0.75比1.00±0，均 P<0.05）；血浆miR-17-5p表达与血清M蛋白和骨髓浆细胞比例均呈正相关（ r=0.50， P<0.05； r=0.60， P<0.01）；ROC曲线显示血浆miR-17-5p作为诊断MM的相关分子标志物的特异度为0.591，灵敏度为0.900（ROC曲线下面积=0.74，cut-off值为0.491）；CCK-8结果提示miR-17-5p过表达使RPMI-8226和NCI-H929等MM细胞系72 h的增殖较对照组增高（1.37±0.11比1.07±0.09，2.14±0.09比1.82±0.11，均 P<0.05），miR-17-5p低表达使NCI-H929和MM-1R等MM细胞系72 h的增殖较对照组降低（1.38±0.09比1.83±0.11，1.45±0.10比1.73±0.09，均 P<0.05）。裸鼠皮下成瘤实验提示，miR-17-5p过表达组肿瘤体积大于对照组［（1 865±181）比（1 389±227）mm 3， P<0.05］，miR-17-5p低表达组肿瘤体积小于对照组［（1 006±171）比（1 389±227）mm 3， P<0.05］。 结论:miR-17-5p可能作为MM疾病发展状态相关的血浆分子标志物，在MM细胞系中起癌基因作用。

目的:探究胃癌侵袭转移中的胃癌干细胞鉴定价值及其分子机制。方法:采用成球培养法将胃癌干细胞成功分离或者富集，鉴定其生物学特性，分析胃癌干细胞在多药耐药、侵袭转移中的作用，通过基因芯片对可能参与胃癌干细胞生物学行为的重要分子和信号通路进行筛选，发现炭疽热毒素受体2 (ANTXR2)在胃癌细胞侵袭转移、成球、成瘤中发挥重要作用，同时分析其分子机制。结果:SGC7901、MGC803细胞球细胞在Sox2和Bmi1表达上明显比单层培养细胞高，为15.39±3.23；SGC7901、MGC803细胞球细胞在Oct4表达上明显比单层培养细胞高，为4.19±0.62。SGC7901－SC细胞中干性相关基因Bmi1、Sox2和Oct4表达水平分别为(3.29±0.52)、(3.12±0.49)、(2.58±0.35)，高于SGC7901－MN细胞的(1.41±0.39)、(2.04±0.33)、(1.39±0.32)，差异均有统计学意义( t＝5.392、7.316、6.449，均 P<0.05)。在原代细胞XN0422－SC和SGC7901－SC细胞中miR－638呈现高表达(0.69±0.11)，miR－181b、miR－181a呈现低表达(0.12±0.05)、(0.15±0.07)。SGC7901－SC细胞中ANTXR2的miRNA表达水平明显高于SGC7901－MN细胞，差异有统计学意义( t＝6.216， P<0.05)。SGC7901－SC中ANTXR2阳性细胞增加比例达到85.48%，而在SGC7901中为4.98%。受PLVT713作用，胃癌细胞XN0422和SGC7901的ANTXR2蛋白表达水平下降。 结论:ANTXR2通过激活Src/ERk信号通路发挥调控作用。

目的:探讨miRNA-181b（miR-181b）与骨髓增生异常综合征（MDS）预后因素的相关性及预测的miR-181b靶基因主要生物学功能，评价miR-181b对MDS风险预测能力。方法:选择2019年1月至9月中国医学科学院血液病医院符合2016年世界卫生组织（WHO）诊断标准的131例MDS患者的骨髓样本，同时收集患者临床资料，包括血常规检查、血液疾病相关基因检测结果等，进行回顾性研究。应用荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测所有骨髓样本中miR-181b的表达量。根据国际预后评分系统（IPSS）、基于WHO分型的预后评分系统（WPSS）以及修订版IPSS（IPSS-R）三种评分系统将患者按不同危险度分组，比较各组患者miR-181b的表达差异，并分析部分预后评分因素[白细胞计数（WBC）、血红蛋白（Hb）、血小板计数（Plt）、中性粒细胞计数（ANC）、原始粒细胞比例、突变基因]与miR-181b表达的相关性。通过生物信息学在线工具TargetScan对miR-181b进行靶基因预测，并进行功能分析。结果:miR-181b表达量随IPSS、WPSS、IPSS-R危险度的升高均增加，且在各评分系统中不同危险度的患者间miR-181b表达量差异均有统计学意义（均 P<0.01）；miR-181b表达量与三种预后评分系统分数均呈正相关（r值分别为0.437、0.368、0.327，均 P=0.001）；miR-181b表达量与患者骨髓原始粒细胞比例呈正相关（ r=0.450， P<0.01），与Plt呈负相关（ r=-0.199， P=0.024），与WBC、Hb、ANC以及是否有血液疾病相关基因突变均无相关性（均 P>0.05）。生物信息学预测miR-181b潜在靶基因1 363个，主要富集的生物学过程有转录调控、RNA代谢过程的调控等，其中有22个靶基因与血液疾病相关，包括5个已证实的与MDS发病相关的基因（RUNX1、ASXL2、NRAS、ATM和KRAS）；有血液疾病相关且为miR-181b靶基因的突变患者（32例）miR-181b相对表达量[中位数（ P25， P75）]为1.33（0.63，1.60），高于无突变患者（99例）的0.85（0.49，1.38），差异有统计学意义（ Z=2.285， P=0.022）。 结论:miR-181b与MDS预后评分系统危险度有相关性，其可能参与了MDS发病的分子生物学过程。

目的 探讨紫草素抑制肝细胞肝癌(HCC)细胞增殖的分子机制.方法 将人HCC细胞株HepG2分为对照组、紫草素低剂量组、紫草素高剂量组和miR-181c空白组、miR-181c抑制组和miR-181c转染组,培养基中分别加入工作浓度为2.5和5.0 μmol/L紫草素溶液以及miR-181c抑制物和miR-181c模拟物转染处理.采用细胞计数(CCK-8)法检测细胞增殖率,流式细胞术检测细胞凋亡率;qRT-PCR法检测细胞中miR-181c和非染色体结构维护凝缩蛋白I复合体G亚基(NCAPG)mRNA相对表达量,Western blot法检测细胞NCAPG和B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白相对表达量.结果 与对照组相比,高剂量组、低剂量组细胞增殖率显著降低(均P＜0.05);与低剂量组相比,高剂量组显著降低(P＜0.05).与miR-181c空白组相比,miR-181c抑制组细胞增殖率显著升高,miR-181c转染组显著降低(均P＜0.05).高剂量组细胞凋亡率明显高于低剂量组和对照组(均P＜0.05);与miR-181c空白组相比,miR-181c抑制组细胞凋亡率显著降低(P＜0.05),miR-181c转染组显著升高(P＜0.05).高剂量组miR-181c mRNA相对表达量明显高于低剂量组和对照组(均P＜0.05);与miR-181c空白组相比,miR-181c抑制组miR-181c mRNA相对表达量显著降低(P＜0.05),miR-181c转染组显著升高(P＜0.05).高剂量组NCAPG mRNA相对表达量、NCAPG和Bcl-2蛋白相对表达量均明显低于低剂量组和对照组(均P＜0.05);与miR-181c空白组相比,miR-181c抑制组NCAPG mRNA相对表达量、NCAPG和Bcl-2蛋白相对表达量均显著升高(P＜0.05),miR-181c转染组均显著降低(均P＜0.05).结论 紫草素可上调HCC细胞中miR-181c表达从而抑制其增殖.

目的 探讨冻干重组人脑利钠肽(rhBNP)联合呋塞米对老年急性心力衰竭(AHF)患者血清心肌酶的影响.方法 选取2020年1月至2023年11月成都市第三人民医院急诊科住院的老年AHF患者162例,根据随机数字表法分为呋塞米组和rhBNP组,每组81例.呋塞米组给予呋塞米治疗,rhBNP组在呋塞米治疗基础上给予rhBNP治疗,观察2组临床症状缓解时间,对比治疗前及治疗2周后心力衰竭程度评分、病情危重程度评分、超声心动图指标以及血清生化指标变化,包括左心室收缩末期内径(LVESD)、左心室射血分数(LVEF)、左心室舒张末期内径(LVEDD)、每搏输出量(SV)、α-羟丁酸脱氢酶(α-HBDH)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、微小核糖核酸-181b(miR-181b)、瞬时受体电位C1(TRPC1)、生长分化因子15(GDF-15)水平.结果 rhBNP组治疗后气促缓解时间和水肿消退时间明显短于呋塞米组[(3.31±0.62)d vs(5.18±1.08)d,(3.86±0.82)d vs(6.08±1.19)d,P＜0.01].2组治疗后心力衰竭程度评分、急性生理与慢性健康状况Ⅱ评分、LVEDD、LVESD、LDH、CK、CK-MB、α-HBDH、TRPC1 及 GDF-15 水平较治疗前明显降低,LVEF、SV、miR-181b 水平较治疗前明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 rhBNP联合呋塞米治疗老年AHF患者能缩短症状持续时间,不仅可改善心力衰竭病情,而且能改善血清心肌酶指标,减少心肌损伤程度,保护心脏.

目的:探究食管鳞状细胞癌外泌体miR-181b-5p对M2型巨噬细胞极化的影响及机制.方法:提取并鉴定食管鳞状细胞癌外泌体,qRT-PCR检测miR-181b-5p在食管鳞状癌细胞及其外泌体中的表达.M0型巨噬细胞分为PBS组、HEEC exo组、Eca-109 exo组、miR-NC exo组、miR-181b-5p exo组、miR-NC组、miR-181b-5p mimic组、si-NC组、si-PTEN组、miR-181b-5p exo+PTEN组,qRT-PCR检测各组细胞中CD163、CD206、iNOS、TNF-α表达.双荧光素酶报告基因实验验证miR-181b-5p和PTEN的靶向关系.结果:miR-181b-5p在食管鳞状癌细胞TE-13、TE-12、TE-10、Eca-109、KYSE30及其外泌体中显著高表达(P<0.001).相比于miR-NC组,miR-181b-5p mimic组细胞CD163和CD206表达显著上调(P<0.001),iNOS和TNF-α表达显著下调(P<0.001).双荧光素酶报告基因结果显示PTEN为miR-181b-5p的靶基因.相比于si-NC组,si-PTEN组细胞CD163和CD206表达显著上调(P<0.001),iNOS和TNF-α表达显著下调(P<0.001).相比于PBS组,Eca-109 exo组细胞CD163和CD206表达显著上调(P<0.001),而iNOS和TNF-α表达显著下调(P<0.001).相比于miR-NC exo组,miR-181b-5p exo组细胞CD163和CD206表达显著上调(P<0.001),而iNOS和TNF-α表达显著下调(P<0.001).相比于miR-181b-5p exo组,miR-181b-5p exo+PTEN组CD163和CD206表达显著下调(P<0.001),而iNOS和TNF-α表达显著上调(P<0.001).结论:外泌体miR-181b-5p抑制PTEN表达而促进M2型巨噬细胞极化.