目的:研究姜黄素通过激活miR-192-5p/PI3K/Akt信号通路抑制肾母细胞瘤增殖并诱导细胞凋亡。方法:采用CCK-8法探讨姜黄素对肾母细胞瘤SK-NEP-1细胞增殖的影响，并探究其合适的作用浓度；V-FITC/PI检测SK-NEP-1细胞的凋亡率；荧光素酶报告试验验证miR-192-5p和PI3K的结合活性；RT-PCR检测miR-192-5p mRNA的表达水平；Western blot检测PI3K和Akt的蛋白质表达水平。结果:姜黄素能够显著抑制SK-NEP-1细胞的增殖，并诱导细胞凋亡，且呈剂量依赖性。RT-PCR检测结果表明姜黄素能够显著提高miR-192-5p的表达。此外，miR-192-5p显著抑制细胞的增殖并诱导其凋亡，且能够增强姜黄素对SK-NEP-1细胞的作用。荧光素酶报告试验结果表明miR-192-5p能够靶向结合PI3K，Western blot结果表明姜黄素可通过介导miR-192-5p的表达抑制PI3K和Akt的蛋白质表达水平。结论:姜黄素能够抑制肾母细胞瘤细胞的增殖并诱导其凋亡，其作用机制是通过介导miR-192-5p的表达并进一步抑制下游PI3K/Akt信号通路来实现的。

目的:检测初治多发性大动脉炎（TAK）患者血浆外泌体携带的微小RNA和蛋白，分析其在TAK发病机制中的可能作用。方法:选2020年6月至11月北京协和医院风湿免疫科确诊的初治TAK患者10例，另选与之年龄性别匹配的健康对照者5例，分别通过RNA测序和蛋白质谱技术检测血浆外泌体携带的微小RNA和蛋白，筛选出差异表达的微小RNA和蛋白，并对其进行层次聚类分析、功能、信号通路和结构域富集分析，最终筛选出与血管炎有关的微小RNA和蛋白，探究其在TAK发病机制中的可能作用。统计学采用Fisher精确概率检验或 χ2检验。 结果:TAK患者血浆外泌体携带的差异表达的微小RNA 29个，其中miR-101-3p、miR-122-5p、miR-143-3p、miR-185-3p、miR-192-5p、miR-194-5p、miR-19a-3p、miR-19b-3p、miR-20b-5p、miR-21-5p、miR-22-3p、miR-335-5p、miR-34a-5p、miR-3613-5p、miR-548ad-5p、miR-590-3p、miR-7-5p表达上调，miR-1249-3p、miR-141-3p、miR-199a-5p、miR-199b-5p、miR-200a-3p、miR-200c-3p、miR-204-5p、miR-29c-5p、miR-335-3p、miR-381-3p、miR-4433b-5p、miR-584-5p表达下调。差异表达的蛋白357个，其中236个表达上调，121个表达下调，最终筛选前激肽释放酶、激肽原1、桥粒蛋白。结论:血浆外泌体携带的miR-34a-5p、miR-200c-3p、miR-143-3p、miR-22-3p、miR-21-5p、前激肽释放酶、激肽原1、桥粒蛋白可能通过调节血管生理过程、炎症反应、自身免疫等过程参与TAK的发病机制，具有作为TAK生物标志物和治疗靶点的潜在作用。

目的 分析糖尿病肾病(DN)患者血清长链非编码RNA KCNQ1反向链/反义转录物1(LncRNA KCNQ1OT1)、微小核糖核酸-192-5p(miR-192-5p)与白蛋白尿短期进展及预后的关系.方法 选取2021年4月-2022年12月康复大学青岛中心医院/青岛市中心医院内分泌风湿免疫科收治的DN患者102例为观察组,根据2次检测(间隔6个月)24 h尿白蛋白及SCr水平分为未进展亚组(n=78)和进展亚组(n=24),根据随访1年预后情况分为预后良好亚组(n=84)和预后不良亚组(n=18),选择同期医院健康体检者58例为健康对照组.采用qRT-PCR检测血清 LncRNA KCNQ1OT1、miR-192-5p 相对表达量;Pearson 法分析 LncRNA KCNQ1OT1 与 miR-192-5p 的相关性;多因素Logistic回归分析患者白蛋白尿短期进展的影响因素;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清LncRNA KCNQ1OT1,miR-192-5p对患者预后的预测价值.结果 与健康对照组比较,观察组血清LncRNA KCNQ1OT1水平升高,miR-192-5p水平降低(t/P=17.619/＜0.001、16.120/＜0.001);与未进展亚组比较,进展亚组血清LncRNA KCNQ1OT1水平升高,miR-192-5p水平降低(t/P=7.698/＜0.001、9.485/＜0.001);与未进展亚组比较,进展亚组患高血压比例降低及FPG、HbA1c、BUN、SCr升高,差异均有统计学意义(x2/P=9.835/0.002,t/P=2.593/0.011、2.356/0.020、4.582/＜0.001、3.139/0.002);与预后良好亚组比较,预后不良亚组血清LncRNA KCNQ1OT1水平升高,miR-192-5p 水平降低(t/P=7.602/＜0.001,9.380/＜0.001);LncRNA KCNQ1OT1 与 miR-192-5p 呈负相关(r/P=-0.452/＜0.001);高血压、血清LncRNA KCNQ10T1水平升高为患者白蛋白尿短期进展的危险因素[OR(95％CI)=1.532(1.058～2.219)、1.638(1.100～2.438)],miR-192-5p水平升高为患者白蛋白尿短期进展的保护因素[OR(95％CI)=0.671(0.517～0.871)];LncRNA KCNQ1OT1、miR-192-5p 以及二者联合预测患者预后的 AUC 分别为 0.808、0.822、0.896,联合预测显著优于各自单独预测(Z/P=2.030/0.042、2.116/0.034).结论 DN患者血清LncRNA KCNQ1OT1水平升高,miR-192-5p水平降低,两者均为DN患者发生白蛋白尿短期进展的影响因素,且对患者预后具有一定辅助预测价值.

黄芩苷可通过抑制Nod样受体热蛋白结构域相关蛋白 3(NLRP3)炎性小体活化发挥抗炎作用,广泛应用于临床多种疾病的防治.在抑制NLRP3 炎性小体活化的过程中,黄芩苷可通过调控TLRs、MAPK、PI3K-Akt和ROS等通路抑制核转录因子-κB(NF-κB)活化,上调PKA和miR-223 表达抑制NLRP3 蛋白磷酸化,调节PERK、ROS和AMPK等路径或上调miR-192-5p抑制硫氧还蛋白互作蛋白的表达或活化,从而抑制NLRP3 炎性小体活化、细胞焦亡、促炎性因子IL-1β和IL-18 的成熟和分泌.文章主要就黄芩苷对NLRP3 炎性小体激活的抑制作用及其通路进行综述.

目的:探索非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)潜在的关键基因和microRNAs(miRNAs).方法:从美国国立生物技术信息中心(NCBI)公共基因芯片数据平台(GEO)数据库下载两个基因表达谱芯片(GSE96936和GSE62267),利用GEO2R在线工具筛选出NAFLD组与正常对照组的差异表达基因(DEGs),对DEGs进行GO和KEGG信号通路富集分析,进一步应用STRING数据库构建蛋白质—蛋白质相互作用(PPI)网络,用Cytoscape筛选出关键基因.构建NAFLD小鼠模型,通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)验证筛选出的关键基因,利用NetworkAnalyst构建关键基因的靶向miRNAs.结果:总共鉴定出192个DEGs,GO分析显示DEGs生物学功能主要涉及5个KEGG通路,包括类固醇激素生物合成、补体与凝血级联、胆汁分泌、化学致癌、视黄醇代谢相关信号通路,结合PPI网络和CytoHubba的结果,筛选出Tyrobp、Hck、Ctss、Aif1、Fcgr1、Cd68、Cd53、Ly86、Fyb和Al-ox5ap 10个关键基因,通过RT-qPCR检测,发现与正常肝组织相比,NAFLD肝组织Ly86的mRNA表达下调(P＜0.05),NAFLD肝组织Hck、Ctss、Aif1、Fcgr1、Cd68、Cd53、Alox5ap和Fyb的mRNA表达上调(P＜0.05),结合DEGs-miRNAs可视化发现4种miRNAs(mmu-miR-155-5p、mmu-miR-122-5p、mmu-miR-124-3p和mmu-miR-1a-3p)与关键基因链接紧密,预测为NAFLD的关键miRNAs.结论:研究结果将有助于确定NAFLD潜在的生物标志物和治疗的新策略.

目的 筛选不同转移潜能肝癌细胞株的 microRNA (miRNA)差异表达谱,并预测分析差异表达miRNAs调控的靶基因与功能.方法 提取总RNA进行miRNA芯片分析,通过分析MHCC-97H(高转移)、Hep3B(不转移)两种不同转移潜能肝癌细胞株与正常肝细胞L02比较,以及两种肝癌细胞株相互比较的miRNA差异表达谱,筛选出差异表达明显的miRNAs进行qRT-PCR验证,利用4个靶基因预测软件(TargetScan、miRanda、miRWalk、miRDB)进行靶基因预测,并通过生物信息学分析来探讨候选靶基因的生物学功能.结果 与正常肝细胞 L02相比,肝癌细胞株 MHCC-97H、Hep3B中的 miR-192-5p、miR-215-5p 表达均明显上调,而miR-130a-3p、miR-196a-5p 则明显降低;与不转移肝癌细胞株Hep3B相比,miR-224-5p在肝癌细胞株 MHCC-97H中明显上调,而miR-146a-5p、miR-483-3p、miR-200b-3p则明显降低.qRT-PCR验证结果与芯片结果相一致.结论 MHCC-97H及Hep3B两种转移能力不同的肝癌细胞株的 miRNAs存在差异表达,这些差异表达的miRNAs与肝细胞癌的发生发展、转移侵袭密切相关.

目的:探讨IgA肾病(IgA nephropathy)的中医证候分布规律及模拟mRNA(microRNA)对IgA肾病的预测价值.方法:收集109例经肾脏穿刺符合IgA肾病病理诊断的临床病例,遵循中医证候诊断标准,分为肺肾气虚、脾肾气虚、肝肾阴虚、气阴两虚、脾肾阳虚5型.分析中医证候分布情况与临床指标之间的关系.从出现率最高证型的患者中,随机抽取10例标本,健康人10例标本对照,运用实时荧光定量PCR技术对其血清中microRNA的表达水平进行检测.结果:109例患者的5种证型中,肺肾气虚型临床表现最轻,病理分级最低;脾肾阳虚型临床表现最重,病理分级最高;脾肾阳虚型肾小球滤过率较其余4型低,且该型24 h尿蛋白定量、血肌酐较其余4型高.其中气阴两虚证在IgA患者中出现频率最高,共49例,其血清中 microRNA(miR)141,miR146a 高于正常组(P ＜0. 05),miR205,miR155,miR192低于正常组(P ＜ 0.05).结论:IgA肾病病理与临床理化指标改变加重的过程一定程度上反映了中医证型其病机演变规律为肺肾气虚-脾肾气虚-肝肾气虚-气阴两虚-脾肾阳虚;microRNA表达的差异与IgA肾病的严重程度及病情的进展密切相关,为IgA肾病的发病机制和诊断提供新的依据.

目的 探讨脑梗死患者血清miR-146a表达与氧化低密度脂蛋白(OXLDL)及疾病严重程度的关系.方法 选择脑梗死患者248例为脑梗死组,同期选择门诊健康体检者192例为对照组,测定患者、体检者血清miR-146a、OXLDL水平;同时对患者按照不同发病时间,不同NIHSS评分分组,比较其血清miR-146a、OXLDL水平.结果脑梗死组卒中史、高血压病、高胆固醇症、高三酰甘油症所占比例高于对照组(P<0.05);NIHSS评分5～19分组高血压病、高胆固醇症、高三酰甘油所占比例高于0～4分组(P<0.05);脑梗死组OXLDL水平高于对照组,miR-146a水平低于对照组(P<0.05);脑梗死发病12～24 h组OXLDL水平高于发病<12 h组,miR-146a水平低于发病<12 h组(P<0.01);NIHSS评分5～19分组OXLDL水平高于0～4分组,miR-146a水平低于0～4分组(P<0.05);miR-146a水平与OXLDL水平及NIHSS评分负相关关系明显(P<0.01);miR-146a、OXLDL两者的AUC相近,皆小于NIHSS评分,miR-146a、OXLDL诊断脑梗死的灵敏度、特异度相近(P>0.05),皆小于NIHSS评分(P<0.05).结论 脑梗死患者血清miR-146a水平降低,其与血清OXLDL及脑梗严重程度负相关关系明显;miR-146a、OXLDL诊断脑梗死具有较高的灵敏度、特异度,可作为判定脑梗死的生物学标志物,值得在临床上推广应用.

目的 探讨循环外泌体miR-222与进展期胃癌患者临床特征的关系以及对FOLFOX新辅助化疗(NACT)疗效的预测价值.方法 选择2016年7月至2018年5月期间在我院进行NACT联合手术治疗的192例进展期胃癌(cT3/4 N0/+M0)患者,采用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测患者循环血外泌体中miR-222的表达量的变化,分析miR-222的表达水平与患者病理缓解情况和预后的关系,采用受试者工作曲线(ROC)评估外泌体miR-222在进展期胃癌接受FOLFOX新辅助化疗疗效的预测价值.结果 经过2～4周期FOLFOX方案治疗,47例(24.48％)患者获得完全缓解(pCR),145例(75.52％)患者未获得pCR.胃癌患者治疗前后循环外泌体miR-222的平均表达量分别为(1.387±0.096)和(1.291±0.059),两者差异具有统计学意义(P<0.0001),获得pCR患者循环外泌体中miR-222水平为(1.251±0.041),显著低于未获得pCR的(1.308±0.047,P<0.05).多因素Logistic回归分析显示,淋巴结转移(OR3.579)、TNM分期Ⅲ-Ⅳ期(OR=5.101)、miR-222高表达(OR2.213)是患者预后的独立危险因素.ROC曲线分析显示,循环外泌体miR-222预测进展期胃癌一线FOLFOX方案NACT疗效的AUC为0.74(95％CI:0.55～0.85),最佳截断值为1.255,其灵敏度为0.643,特异度为0.775结论 进展期胃癌患者循环外泌体miR-222表达量与肿瘤分化程度、淋巴结转移、TNM分期有关,其有望成为预测进展期胃癌患者接受FOLFOX方案进行NACT疗效的标志分子之一.

目的:采用基因芯片检测腺嘌呤造模诱导肾阳虚证大鼠肾组织中显著差异表达的小分子核糖核酸(miRNA),并用生物信息学方法分析其意义.方法:模型组大鼠灌胃150 mg·kg-1腺嘌呤诱导肾阳虚肾损伤模型,正常组灌服等量生理盐水.麻醉处死后取部分肾组织病理切片做苏木素-伊红(HE)染色并检测血液中血尿素氮(BUN),血肌酐(SCr)的含量,尿液中24 h尿蛋白(24U-TP)含量;trizol法提取肾脏组织中RNA,RNA经检测质量合格后用于后续芯片分析.μParaflo(R)微流体芯片分析肾组织中差异表达的miRNA;通过实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)进一步验证芯片结果;利用生物信息学网站分析差异表达miRNA的靶基因及其功能.结果:基因芯片结果显示造模后共有50个miRNA差异表达,与正常组比较,模型组只有9个miRNA在肾组织中高表达且具有显著性差异,其中,与正常组比较,模型组中rno-miR-21-5p,rno-let-7 i-5p,rno-miR-146b-5p和rno-miR-15b-5p表达明显升高(P ＜0.05,P＜0.01);rno-miR-6215,rno-miR-192-5p,rno-miR-378b,rno-miR-378a-3p和rno-miR-194-5p表达明显降低(P＜0.05).经PCR验证表明,与正常组比较,rno-miR-21-5p,rno-miR-146b-5p表达显著上升(P＜0.01);rno-miR-192-5p,rno-miR-378b,rno-miR-378a-3p,rno-miR-194-5p表达显著下降(P＜0.01).其中,miR-192,miR-21,miR-378与上皮细胞-间充质转化/间充质-上皮细胞转化(EMT/MET)平衡相关,miR-192和miR-378可作为抗纤维化因子保护肾脏,而miR-21可作为促纤维化因子诱导肾脏损伤.miR-194可通过靶向调控脑Ras同源蛋白(Rheb)拮抗缺氧再灌注诱导的人肾近端肾小管上皮细胞HK-2损伤.这些差异miRNA的靶基因主要富集在Wnt和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路上.这两条信号通路与EMT/MET平衡密切相关.结论:通过基因芯片表达谱,发现4个参与肾间质纤维化(RIF)作用调节和2个未知功能miRNA表达.为进一步深入分析肾阳虚的调控网络提供了一个新的线索.