目的:探讨miR-3607-3p对宫颈癌细胞的恶性表型的作用及相关作用机制。方法:OncoLnc生物信息学网站分析miR-3607-3p的表达与宫颈癌患者预后的关系。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测人正常宫颈上皮细胞(H8)和宫颈癌细胞系(Hela、HCC94、SiHa、C33A)中miR-3607-3p的表达情况。SiHa细胞体外转染阴性对照核苷酸序列为阴性对照(NC)组，转染miR-3607-3p模拟序列为miR-3607-3p组。qRT-PCR检测转染后的SiHa细胞中miR-3607-3p表达变化。采用CCK-8法和划痕实验检测转染前后SiHa细胞的恶性生物学行为变化。qRT-PCR和Western blot检测转染前后肌动蛋白结合蛋白2(PFN2)基因表达变化，双荧光素酶报告基因实验检测miR-3607-3p与PFN2的靶向关系。结果:miR-3607-3p表达水平高的宫颈癌患者生存期显著长于miR-3607-3p低表达患者( P<0.01)。与H8细胞相比，miR-3607-3p在人宫颈癌细胞系中异常低表达( P<0.05)，其中SiHa细胞系中表达最低( P<0.01)。NC组和miR-3607-3p组miR-3607-3p表达分别为(1.04±0.31)和(9.28±1.76)，转染miR-3607-3p模拟序列后SiHa细胞miR-3607-3p表达水平明显高于NC组( P<0.01)，增殖活性和划痕愈合率明显低于NC组(均 P<0.01)。双荧光素酶报告基因实验证实miR-3607-3p直接靶向结合PFN2( P<0.01)。qRT-PCR和Western blot结果显示，miR-3607-3p组的PFN2 mRNA和蛋白表达均低于NC组，增殖蛋白CDK3、CDK2表达低于NC组，上皮表型相关蛋白Claudin-1、ZO-1表达高于NC组(均 P<0.01)。 结论:miR-3607-3p与宫颈癌患者的生存期相关，上调miR-3607-3p表达可抑制宫颈癌SiHa细胞的增殖和迁移，其机制可能与靶向抑制PFN2有关。

目的:探讨结肠癌组织微小RNA-3607-3p(miR-3607-3p)、细胞周期蛋白E2(CCNE2)表达及其与患者术后5年预后的关系.方法:选取行结肠癌根治术治疗的88例结肠癌患者癌组织和癌旁组织.RT-qPCR法测定组织miR-3607-3p、CCNE2 mRNA表达.免疫组化法检测组织CCNE2蛋白表达.随访术后5年内结肠癌患者生存情况,根据生存情况将患者分为生存组(48例)和病死组(40例).分析miR-3607-3p、CCNE2 mRNA与TNM分期、肿瘤分化程度、淋巴结转移的相关性.Cox回归分析结肠癌患者术后5年预后的影响因素.绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-3607-3p、CCNE2 mRNA对患者术后5年内生存的预测价值.结果:结肠癌组织miR-3607-3p表达水平低于癌旁组织,CCNE2 mRNA表达水平和CCNE2蛋白阳性表达率高于癌旁组织(均P＜0.05).miR-3607-3p低表达和CCNE2 mRNA高表达患者TNM分期Ⅲ期、肿瘤低分化、有淋巴结转移的占比更高(均P＜0.05).结肠癌组织miR-3607-3p与CCNE2 mRNA、TNM分期、淋巴结转移呈负相关,与肿瘤分化程度呈正相关(均P＜0.05).CCNE2 mRNA与TNM分期、淋巴结转移呈正相关,与肿瘤分化程度呈负相关(均P＜0.05).miR-3607-3p高表达、CCNE2 mRNA低表达患者5年总生存率高于miR-3607-3p低表达、CCNE2 mRNA高表达患者(均P＜0.05).病死组TNM分期Ⅲ期、肿瘤低分化、有淋巴结转移的患者占比更高(均P＜0.05).病死组结肠癌组织CCNE2 mRNA和蛋白阳性表达率高于生存组,miR-3607-3p低于生存组(均P＜0.05).TNM分期m期、肿瘤低分化、有淋巴结转移、miR-3607-3p低表达、CCNE2 mRNA高表达、CCNE2蛋白阳性表达是影响结肠癌患者术后5年生存的独立危险因素(均P＜0.05).结肠癌组织miR-3607-3p、CCNE2 mRNA两者联合预测患者术后5年内生存的曲线下面积(AUC)高于miR-3607-3p、CCNE2 mRNA单独预测的AUC(均P＜0.05).结论:结肠癌组织miR-3607-3p呈低表达,CCNE2呈高表达,两者与患者术后5年预后有关,有望成为结肠癌患者术后5年内生存的预测指标.

目的 探讨宫颈癌合并人乳头瘤病毒(HPV)感染患者血清脂质运载蛋白2(LCN2)、长链非编码RNA-OIS1(lncRNA-OIS1)、微小RNA-3607-3p(miR-3607-3p)的表达水平及意义.方法 选取2017年5月-2022年5月武汉市第三医院收治的80例宫颈癌患者为观察组,70例宫颈上皮内瘤变患者为对照组.比较两组血清LCN2、lncRNA-OIS1、miR-3607-3p表达水平,以及HPV病毒载量、HPV阳性表达率.采用Pearson相关分析法分析宫颈癌患者血清LCN2、lncRNA-OIS1、miR-3607-3p与HPV病毒载量、HPV阳性表达率的相关性,采用多因素logistic回归分析影响宫颈癌合并HPV感染发病的危险因素.结果 观察组血清LCN2水平、HPV病毒载量、HPV阳性表达率分别为(84.01±18.47)pg/mL、(1 171.40±232.33)RLU/CO、100.00％,均明显高于对照组的(43.25±12.83)pg/mL、(669.50±100.32)RLU/CO、45.71％,lncRNA-OIS1、miR-3607-3p 水平分别为(0.70±0.15)、(0.33±0.10),均明显低于对照组(0.83±0.17)、(0.65±0.14),差异均有统计学意义(t/x2=15.480、16.753、58.163、4.976、16.251,P均＜0.05).经Pearson相关分析结果显示,血清LCN2水平与HPV病毒载量、HPV阳性表达率均成正相关(r=0.515、0.430,P均＜0.05),lncRNA-OIS1、miR-3607-3p 水平与 HPV 病毒载量、HPV 阳性表达率均成负相关(r=-0.600、-0.502、-0.587、-0.459,P均＜0.05).Logistic回归性分析结果显示,血清LCN2是影响宫颈癌合并HPV感染发病的危险因素,血清lncRNA-OIS1、miR-3607-3p是发生宫颈癌合并HPV感染的保护因素,差异均有统计学意义(P均＜0.05).结论 宫颈癌合并HPV感染患者血清LCN2明显高表达,lncRNA-OIS 1、miR-3607-3p明显低表达,且与HPV病毒载量、HPV阳性表达率密切相关.

目的 研究有吸烟史的口腔白斑病(oral leukoplakia,OLK)患者病损组织microRNA(miRNA)的异常表达,并对差异miRNAs进行癌变相关生物信息学分析.方法 利用人miRNA OneArray?v5.1微阵列芯片检测吸烟组(n=6)和非吸烟组(n=4)OLK石蜡标本间差异表达的miRNA,并运用生物信息学方法从中筛选出与OLK癌变密切相关的目标miRNA,随后对目标miRNA的靶基因进行基因本体数据库(gene ontology,GO)富集分析和KEGG通路分析以预测其可能的作用机制.结果 吸烟组与非吸烟组OLK组织中共检出174个差异表达的miRNAs(P<0.05),其中,39个miRNAs在吸烟组表达上调(log2(FC)≥0.585),135个miRNAs表达下调(log2(FC)≤-0.585).运用生物信息学方法从中筛选出8个与OLK癌变密切相关的目标miRNAs,包括:hsa-miR-6857-5p、hsa-miR-6745、hsa-miR-15a-5p、hsa-miR-363-5p、hsa-miR-6867-3p、hsa-miR-95-3p、hsa-miR-3607-5p、hsa-miR-9500.对上述目标miRNAs的靶基因行GO富集分析,结果显示大部分基因参与调控细胞增殖、凋亡、刺激反应等生物学活动.KEGG通路分析发现上述基因高度相关的作用通路为癌信号通路、PI3K-Akt及FoxO信号通路.结论 吸烟可通过改变OLK组织miRNA表达水平进而改变特定基因功能促进白斑癌变进程.

目的 研究宫颈癌患者人乳头瘤病毒(HPV)感染情况及微小核糖核酸(miR)-let-7d-5p、miR-3607-3p、蛋白磷酸酶2A癌性抑制因子(CIP2A)的诊断效能.方法 选取2021年1月-2022年12月十堰市人民医院收治的124例宫颈病变患者作为研究对象,其中宫颈癌患者36例、宫颈鳞状上皮内病变(SIL)患者41例和宫颈炎患者47例,分别纳入A组、B组和C组,比较三组HPV表达情况,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-let-7d-5p、miR-3607-3p、CIP2A对宫颈癌的诊断效能.结果 A组HPV阳性表达率、HPVE6/E7信使核糖核酸(mRNA)高载量率及宫颈组织CIP2A表达水平均高于B组、C组,且B组高于C组(P＜0.05),A组宫颈组织miR-let-7d-5p、miR-3607-3p表达水平均低于B组、C组,且B组低于C组(P＜0.05);ROC曲线分析结果显示,miR-let-7d-5p、miR-3607-3p、CIP2A联合检测诊断宫颈癌的曲线下面积(AUC)、敏感度和特异度分别0.937、94.44％和85.23％.结论 宫颈癌患者HPV阳性表达率、HPV E6/E7 mRNA高载量率较高,宫颈组织miR-let-7d-5p、miR-3607-3p、CIP2A表达异常,三者联合检测诊断宫颈癌的诊断效能较高.

目的 既往研究发现,miR-3607-3p在乳腺癌和前列腺癌等肿瘤中异常低表达且涉及肿瘤的发生与发展,但miR-3607-3p在原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达及意义尚不清楚.本研究利用癌症基因图谱(the Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库信息分析HCC组织中miR-3607-3p的表达情况及其临床意义,并对miR-3607-3p靶基因进行有关的生物信息学综合分析.方法 基于TCGA数据库,比较HCC组织和癌旁组织中miR-3607-3p表达量,并分析rniR-3607-3p表达量与HCC患者临床病理特征及预后的相关性.采用生物信息学方法对miR-3607-3p的靶基因进行预测及功能富集分析,并结合蛋白互作网络及预后分析结果筛选miR-3607-3p关键靶基因.结果 HCC组织miR-3607-3p表达量较癌旁组织下调,差异有统计学意义,t=9.910,P＜0.001;且miR-3607-3p表达量对于HCC组织具有良好的诊断效能,AUC=0.853,P＜0.001.HCC组织miR-3607-3p表达量与患者TNM分期(t=2.366,P=0.019)和血清甲胎蛋白(t=3.275,P=0.001)等指标相关.生存分析表明,HCC组织中低表达miR-3607-3p是影响HCC患者总生存率[HR=2.171(95％ CI:1.435～3.286),P＜0.001]和无复发生存率[HR=1.566(95％CI:1.050～2.335),P=0.028]的独立预后因素.富集分析提示,miR-3607-3p靶基因主要富集于上皮间质转化、细胞分化、细胞周期及增殖调控等生物学功能,以及Ras信号通路等通路,均P＜0.05.此外,ANLN、CENPF、HMMR和KIF15等为本研究所筛选出的miR-3607-3p关键靶基因,其在HCC组织中均呈现表达上调(均P＜0.001),且与miR-3607-3p表达量呈负相关(ANLN:r=-0.272,P＜0.001;CENPF:r=-0.273,P＜0.001;HMMR:r=-0.104,P=0.048;KIF15:r=-0.252,P＜0.001).预后分析提示,HCC组织中ANLN、CENPF、HMMR和KIF15相对高表达者均与不良总生存率(ANLN:x2 =19.92,P＜0.001;CENPF:x2 =23.13,P＜0.001;HMMR:x2 =27.22,P＜0.001;KIF15:x2 =24.24,P＜0.001)和无复发生存率(ANLN:x2=29.14,P＜0.001;CENPF:x2=19.21,P＜0.001;HMMR:x2=18.82,P＜0.001;KIF15:x2=16.24,P＜0.001)存在统计学意义的关联.结论 miR-3607-3p可作为一种抑癌基因参与HCC发生、发展,并具有成为HCC诊断标志物、预后指标及治疗靶点的潜在应用价值.

目的 探讨乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)感染孕妇外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中微小RNA(microRNA,miRNA)表达谱的变化和外周血免疫因子的表达差异.方法 应用高通量测序对182例HBV感染孕妇、40名无HBV感染孕妇和35名无HBV感染非妊娠期妇女的PBMC中的RNA进行检测,用间接酶联免疫吸附测定法检测外周血中细胞因子的变化.结果 与无HBV感染的孕妇比较,HBV感染孕妇的PBMC有18个差异表达的miRNA(P＜0.01),其中miR-3607-3p、miR-20a、miR-1296、miR-153-1和miR-X4能直接诱导调控靶基因IL-10、IL-18、IL-16、单核细胞趋化蛋白-1 (MCP-1)、核孔蛋白50 (NUP50)和趋化因子受体1(CCR1)的转录水平.另外,HBV感染孕妇外周血细胞因子IL-10、IL-18、IL-16和MCP-1明显上调(P＜0.01),且IL-16和MCP-1的表达水平与HBV病毒载量呈高度相关关系.结论 HBV感染孕妇的miRNA表达谱及细胞因子发生明显变化,提示miRNA和细胞因子可能均参与HBV感染孕妇的免疫反应.

目的 鉴定喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC)中自噬相关微小RNA(microRNA,miRNA),探讨其在肿瘤发展中的作用.方法 数据库下载自噬相关基因及各个LSCC样本的miRNA表达谱,用limma包筛选差异表达的miRNA,并构建miRNA与自噬相关基因之间的共表达网络,从而筛选出自噬相关miRNA.Cox回归分析用于评估自噬相关miRNA在LSCC中的预后价值,建立基于自噬相关miRNA的风险指数模型以预测LSCC的预后.结果 最终鉴定了6个关键自噬相关miRNA分别为hsa-miR-100-5p、hsa-miR-143-3p、hsa-miR-3607-5p、hsa-miR-454-3p、hsa-miR-455-5p、hsa-miR-99a-5p,均与LSCC的预后显着相关.富集分析表明所有的关键自噬相关miRNA在mTOR信号传导途径中均显著富集,利用多元Cox回归计算每个样品的风险指数,风险指数较低的患者具有更好的生存结果.结论 关键自噬相关miRNA可以做为LSCC潜在的治疗靶标,基于自噬相关miRNA新构建的风险指数模型可以预测LSCC的预后.

目的 建立基于激光捕获显微切割(laser capture microdissection,LCM)-Agilent miRNA芯片技术的结肠癌化疗耐药microRNA(miRNA)表达谱,筛选结肠癌化疗耐药相关靶标.方法 应用LCM技术对Ⅲ期结肠癌化疗后复发/未复发的肿瘤实质细胞进行细胞纯化.Agilent miRNA芯片检测两种细胞中的miRNA表达情况,根据差异表达倍数和功能预测筛选结肠癌化疗相关靶标.结果 包括miR-194-3p、miR-3607、miR-887、miR-424-5p、miR-1237等16个miRNA为差异基因,可作为潜在结肠癌化疗耐药相关靶标进一步研究.qRT-PCR证实,miR-194-3p在结肠癌化疗后复发样本中高表达(P<0.001).结论 运用LCM结合Agilent miRNA芯片技术筛选出16个与结肠癌化疗耐药相关的miRNA,且miR-194-3p在结肠癌化疗后复发样本中高表达,是潜在结肠癌化疗耐药治疗靶标.