目的:探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA，LncRNA)淋巴细胞白血病缺失基因1(deleted in lymphocytic leukemia1，DLEU1)对甲状腺癌细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡等过程的影响，以及其作用机制。方法:实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction，qRT-PCR)检测正常甲状腺细胞Nthy-ori 3-1与甲状腺癌细胞SW579、TPC-1、C64中DLEU1、微小RNA-624-3p(miR-624-3p)的表达水平。分别将si-con(si-con组)、si-DLEU1(si-DLEU1组)、miR-con(miR-con组)、miR-624-3p mimics(miR-624-3p组)、si-DLEU1与anti-miR-con(si-DLEU1+anti-miR-con组)、si-DLEU1与anti -miR-624-3p(si-DLEU1+anti -miR-624-3p组)转染至TPC-1细胞，将未经转染的细胞作为NC组；检测各组细胞活力、细胞凋亡率以及细胞迁移及侵袭能力；双荧光素酶验证DLEU1与miR-624-3p的靶向关系；Western blot检测Ki-67、基质金属蛋白酶2((matrix metalloproteinase-2，MMP2)、Cleaved caspase-3、Wnt、β-catenin表达量。结果:与Nthy-ori 3-1组DLEU1相比，甲状腺癌细胞SW579、C643、TPC-1中DLEU1表达水平明显升高，miR-624-3p表达水平明显降低，差异具有统计学意义( F值分别为207.87和68.45， P值均<0.05)；与NC组、si-con组相比，si-DLEU1组细胞活力显著下降，迁移细胞数与侵袭细胞数显著下降，Ki-67、MMP-2、Wnt、β-catenin蛋白相对表达量显著降低，细胞凋亡率显著升高，Cleaved caspase-3蛋白相对表达量显著升高，差异具有统计学意义( F值分别为52.93、354.43、193.75、101.74、86.80、141.66、122.14、307.83、78.49， P值均<0.05)；与NC组、miR-con组相比，miR-624-3p组细胞活力显著下降，迁移细胞数与侵袭细胞数显著下降，Ki-67、MMP-2、Wnt、β-catenin蛋白相对表达量显著降低，细胞凋亡率显著升高，Cleaved caspase-3蛋白相对表达量显著升高，差异具有统计学意义( F值分别为49.63、296.45、220.53、220.82、215.75、65.23、251.20、302.58、348.28， P值均<0.05)；miR-624-3p过表达能显著降低DLEU1野生型质粒的荧光素酶活性( t＝9.55， P<0.05)；与si-DLEU1+anti-miR-con组相比，si-DLEU1+anti-miR-624-3p组细胞活力显著升高，迁移细胞数与侵袭细胞数显著增多，Ki-67、MMP-2、Wnt、β-catenin蛋白相对表达量显著升高，细胞凋亡率显著降低，Cleaved caspase-3蛋白相对表达量显著降低，差异具有统计学意义( t值分别为9.93，15.29、20.18、6.79、4.23、8.02、9.57、11.34、8.67， P值均<0.05)。 结论:LncRNA DLEU1靶向miR-624-3p促进甲状腺癌细胞增殖、迁移及侵袭，抑制细胞凋亡，其作用机制可能与信号通路Wnt/β-catenin的活化有关。

目的 探究血清微小RNA-128-3p(miR-128-3p)和微小RNA-624-5p(miR-624-5p)水平与青少年首发抑郁患者病情严重程度的关系分析.方法 选取我院2022年1月～2023年1月收治的102例青少年首发抑郁患者为研究对象(抑郁发作组),依据汉密尔顿抑郁量表将青少年首发抑郁患者分为轻度组(n=44)、中度组(n=33)和重度组(n=25).另选取102例来我院进行体检的健康青少年为对照组,采用实时荧光定量PCR法对所有受试者血清miR-128-3p、miR-624-5p水平进行测定.比较各组间的基本资料及血清miR-128-3p、miR-624-5p水平;Spearman相关性分析青少年首发抑郁患者血清miR-128-3p、miR-624-5p水平与病情程度之间的关系;Logistic回归分析青少年首发抑郁的影响因素.结果 两组在性别、年龄及受教育年限上差异无统计学意义(P＞0.05);在性格特征、血清miR-128-3p、miR-624-5p水平有显著性差异,且抑郁发作组患者血清miR-128-3p、miR-624-5p水平显著高于对照组(P＜0.05);Spearman相关性分析结果显示,血清miR-128-3p、miR-624-5p水平与青少年首发抑郁患者病情程度均呈显著正相关(r1=0.632,r2=0.697,P＜0.05);Logistic回归分析结果显示,血清miR-128-3p、miR-624-5p是影响青少年首发抑郁的危险因素(P＜0.05).结论 青少年首发抑郁患者血清miR-128-3p、miR-624-5p显著升高,且与患者病情程度呈显著正相关,通过检测上述两种因子可有效评估患者病情程度.

MicroRNA是一类20-24 nt核苷酸长度的参与基因转录后水平调控的非编码小分子RNA.利用高通量测序技术获得鳜(Siniperca chuatsi)孵化后第3天、第17天和第28天全鱼miRNA转录组,共鉴定出1 084个miRNAs,其中432个已知、624个保守、28个新发现.第17天时鉴定出的miRNA个数最多,为926个.在3个发育时期都表达的有628个miRNAs,只在各时期中特异表达的分别有71、104和70个miRNAs.一些与鳜发育相关的miRNAs在上述3个时期呈现持续上调或下调的表达特点.进一步的实验表明,miR-199-5p和miR-203可能与鳜生长发育相关,相应的靶基因分别是WnT和MyoD.

目的 研究miR-320a和头帕肿瘤综合征蛋白( CYLD)在胃癌患者中的表达及其与临床病理特征及预后的关系.方法 选取2013年3月—2014年11月在我院行肿瘤切除术的460例胃癌患者作为研究对象,分别收集患者肿瘤组织及癌旁非肿瘤胃粘膜组织,采用荧光定量PCR检测miR-320a和CYLD mRNA表达水平,采用免疫组织化学染色法检测CYLD蛋白表达,分析miR-320a和CYLD表达水平及其与临床病理特征及预后的关系.结果 miR-320a和CYLD mRNA在肿瘤组织中的相对表达量为(0. 37 ± 0. 09)、(0. 91 ± 0. 23),在癌旁非肿瘤组织中的相对表达量为(0. 86 ± 0. 15),(1. 56 ± 0.42),miR -320a 和 CYLD mRNA 在肿瘤组织中的相对表达量与非肿瘤组织比较,差异具有统计学意义(t =60. 078, 29. 113,P<0. 001);CYLD蛋白在肿瘤组织中的阳性表达率43. 48%与癌旁非肿瘤组织73. 91%比较,差异具有统计学意义(χ2=86. 624,P=0. 003);miR-320a表达水平与患者肿瘤直径和淋巴结转移有关(χ2=25. 859,13. 742,P<0. 05);YLD表达水平与患者TNM分期和肿瘤分化程度有关(χ2=37. 725,59. 323,P<0. 05). miR-320a低表达患者中位生存期(20. 36 ± 0. 56)(95% CI:19. 252~21. 462)与miR-320a高表达患者中位生存期(28. 29个月95% CI:27. 158~29. 412个月)比较,差异具有统计学意义(χ2=87. 967,P<0. 001);CYLD阴性表达患者中位生存期(17. 70个月95% CI:16. 599~18. 796个月)与CYLD阳性表达患者中位生存期(26. 74个月95% CI:25. 474~27. 997个月)比较,差异具有统计学意义( χ2=109. 887,P<0. 001);miR-320a和CYLD共表达患者中位生存期(29. 01个月95% CI:26. 831~28. 946个月)与非共表达患者中位生存期(17. 13个月95% CI:17. 214~19. 568个月)比较,差异具有统计学意义(χ2=117. 680,P<0. 001).肿瘤组织miR-320a与CYLD mRNA表达水平呈正相关(r=0. 607,P<0. 001);miR-320a低表达、CYLD阴性表达、TNM分期、淋巴结转移及肿瘤分化程度是影响胃癌患者预后的独立危险因素( HR=1. 939、2. 180、1. 561、1. 719、1. 608,95% CI:1. 141~3. 295,1. 252~3. 796,1. 014~2. 403,1. 115~2. 650,1. 097~2. 357,P<0. 05).结论 miR-320a和CYLD在胃癌患者肿瘤组织中表达量明显降低,与疾病发生发展及不良预后有关,是潜在的胃癌诊断及治疗新靶点.

目的 探讨血清 miR-140-3p 在孤独症谱系障碍( ASD ) 儿童中表达及其与白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-8(IL-8)及白细胞介素-17A( IL-17A)的相关性,为该病的诊治提供依据.方法 选取2015年1月至2018年6月海南省安宁医院收治的ASD儿童172例作为病例组,另选择80例体检健康者作为对照组.采用ASD行为评定量表和儿童孤独症评定量表将172例ASD儿童分为轻-中度组(n=116)和重度组(n=56).采用实时荧光定量聚合酶链反应( RT-PCR)和酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组血清miR-140-3p、IL-4、IL-8及IL-17A水平变化.应用ROC曲线分析miR-140-3p、IL-4、 IL-8 及 IL-17A 对 ASD 的诊断价值,采用 Pearson 相关分析 ASD 儿童血清miR-140-3p与IL-4、IL-21及IL-17A的相关性.结果 病例组血清 miR-140-3p( 0. 86 ± 0. 17,0. 15 ± 0. 03)、IL-4[(48. 65±13. 82) pg/ml,( 31. 42± 7. 50) pg/ml]、IL-8[(7. 14± 2. 05) pg/ml,( 2. 30± 0. 74) pg/ml]及IL-17A[(112. 35±51. 64) pg/ml,(58. 20±26. 40) pg/ml]水平均明显高于对照组(P<0. 05).重度组血清miR-140-3p[(1. 08±0. 24),(0. 71±0. 12)]、IL-4[(53. 28±16. 30) pg/ml,(43. 70±13. 52) pg/ml]、IL-8[(9. 42±2. 85) pg/ml,( 5. 63± 1. 48) pg/ml]及IL-17A[( 138. 40± 65. 72) pg/ml,( 96. 74± 40. 83)pg/ml]水平均明显高于轻-中度组(P<0. 05).血清miR-140-3p诊断ASD的AUC( 95%CI)为0. 827(0. 773~0. 886)明显高于 IL-4[ 0. 719( 0. 651~0. 764) pg/ml]、IL-21[ 0. 683( 0. 625~0. 743) pg/ml]及IL-17A[0. 745(0. 683~0. 817)pg/ml],其最佳截值取0. 75时,敏感度和特异度为84. 8%和78. 2%.相关分析显示,ASD儿童血清miR-140-3p与IL-4、IL-8及IL-17A均呈正相关( r=0. 681、r=0. 624、r=0. 775,均P<0. 01).结论 血清miR-140-3p水平在ASD儿童中明显升高,且与IL-4、IL-8及IL-17A水平相关,是诊断ASD的潜在生物标志物.

目的 探讨微小RNA-138(miR-138)对zeste同源增强子2( EZH2)的靶向调控作用及甲状腺癌细胞8505C侵袭迁移的影响.方法 miR_pathway在线分析miR-138在甲状腺癌组织中的表达及调控的生物学过程;脂质体法向8505C细胞转染miR-138模拟物(过表达组)或阴性对照序列(NC组)并设未转染的细胞为对照组,采用实时定量PCR( QPCR)检测miR-138水平,活细胞计数CCK-8试剂盒检测增殖情况,划痕实验和Transwell小室实验分别检测划痕愈合率和穿膜细胞数, QPCR检测EZH2、基质金属蛋白酶-9( MMP-9)、Janus激酶1(JAK1)和信号转导和转录激活因子3( STAT3)的mRNA水平, Western blotting检测EZH2、MMP-9、JAK1、磷酸化JAK1(p-JAK1)、STAT3、磷酸化STAT3( p-STAT3)和MMP-9的蛋白水平;双荧光素酶报告基因实验验证miR-138对EZH2的靶向调控作用.结果 miR_pathway在线分析发现miR-138在甲状腺癌中调控多个生物学过程,且在甲状腺癌组织中的表达低于正常组织(P＜0. 05).过表达组的miR-138水平为12. 657±2. 263,高于对照组的1. 025±0. 087和NC组的1. 109±0. 097(P＜0. 05);与对照组和NC组相比,过表达组转染24、48 h的细胞增殖活力降低(P＜0. 05).过表达组的划痕愈合率和穿膜细胞数目分别为( 22. 571± 2. 168)%和(152. 3± 16. 5)个,低于对照组的(59. 424± 3. 624)%和(287. 4±17. 5)个及NC组的(61. 280±4. 035)%和(278. 5±16. 3)个( P＜0. 05);miR-138模拟物对EZH2野生型3’端非翻译区的荧光素酶活性有抑制作用( P＜0. 05),但对突变型无影响(P＞0. 05).与其余两组相比,过表达组的 MMP-9、EZH2、p-JAK1和p-STAT3水平降低(P＜0. 05),而JAK1和STAT3水平的差异无统计学意义( P＞0. 05).对照组和NC组上述指标的差异无统计学意义(P＞0. 05).结论 miR-138在甲状腺癌组织中低表达,且该miRNA在甲状腺癌中发挥抑制增殖和侵袭迁移的抑癌作用,可能与靶向调控EZH2和JAK1／STAT3／MMP-9通路有关,有作为甲状腺癌治疗候选靶点的潜能.

目的:探讨肝细胞癌组织中microRNA(miRNA)的表达水平与肝细胞癌早期复发的相关性.方法:下载公共数据库TCGA的肝细胞癌患者临床信息、随访结果及miRNA表达情况,根据复发时间将患者分为早期复发组(≤2年复发)和晚期复发组(＞2年复发),连续变量资料采用独立样本t检验评估2组之间是否存在差异,分类变量资料采用卡方检验评估2组间是否存在差异,将单因素分析P≤0.01的指标纳入logistic多因素回归分析.结果:独立样本t检验分析显示,P≤0.01的miRNA分别为 hsa-mir-550a-1 Nhsa-mir-550a-2、hsa-mir-550a-3、hsa-mir-331、hsa-mir-514a-1、hsa-mir-210、hsa-mir-155、hsa-mir-3170N hsa-mir-4677、hsa-mir-4677、hsa-mir-508、hsa-mir-514a-3、hsa-mir-514a-2、hsa-mir-624,卡方检验显示P≤0.01 的指标为患者肿瘤T分期.Logistic 多因素回归分析显示hsa-mir-155(OR=0.660,95％CI=0.519～0.841)、hsa-mir-331(OR=1.475,95％CI=1.004～2.168)、hsa-mir-514a-1(OR =0.603,95％CI=0.413～0.879)、hsa-mir-550a-1(OR=1.680,95％CI=1.034～2.703)、肿瘤 T分期(OR=1.640,95％CI=1.126～2.389)是早期复发的独立影响因素,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:肝细胞癌组织中hsa-mir-155、hsa-mir-331、hsa-mir-514a-1、hsa-mir-550a-1的表达水平和肿瘤T分期是影响肝细胞癌术后早期复发的独立影响因素.