多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)是以稀发排卵/无排卵、卵巢多囊样改变,伴高雄激素血症、胰岛素抵抗的一种内分泌疾病,它影响着全世界5％～11％的育龄期女性[1],是导致排卵障碍性不孕、降低女性生育率的重要原因[2].据不完全统计,近十年来,我国育龄女性PCOS患病率增加了 3.6％.由于PCOS的异质性,其确切发病机制目前尚不清楚,一直是人们探讨的热点.

目的:探究糖尿病足(DF)感染患者外周血miR-155及miR-132表达水平及其与下肢血管病变程度的关系.方法:选取2020年6月至2023年6月于我院就诊的62例单纯2型糖尿病(T2DM)患者,纳入T2DM 组,选取同期于我院就诊的93例T2DM 合并DF感染患者,纳入DF感染组.比较两组患者外周血miR-155、miR-132水平,分析DF感染患者外周血miR-155、miR-132水平与临床特征之间的关系.根据泛大西洋学会联盟(TASC)分级标准将DF感染患者A级、B级、C级、D级,比较不同下肢血管病变程度DF感染患者外周血miR-155、miR-132水平,采用Spearman法分析外周血miR-155、miR-132与下肢血管病变程度的相关性.结果:DF感染组miR-155水平高于T2DM 组,miR-132水平低于T2DM 组(P均＜0.05);miR-155高表达组DF溃疡病程、创面面积、Wagner分级Ⅳ级占比大于低表达组,而miR-132高表达组DF病程、创面面积、Wagner分级IV级占比小于低表达组,8周后DF溃疡愈合率大于低表达组(P均＜0.05);A级至D级DF感染患者miR-155水平依次升高,而miR-132水平依次降低(P均＜0.05);Spearman分析显示,miR-155表达水平与下肢血管病变程度呈正相关,而miR-132表达水平与下肢血管病变程度呈负相关(P均＜0.05).结论:DF感染患者外周血miR-155高表达,与下肢血管病变程度呈正相关,miR-132低表达,与下肢血管病变程度呈负相关.

目的:探讨结直肠癌(CRC)患者血清microRNA-497(miR-497)表达量与CRC侵袭转移及预后的关系。方法:实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测93例CRC患者术前及术后、30例结直肠腺瘤息肉患者及30位健康者血清miR-497表达量，同时化学发光法检测血清癌胚抗原(CEA)含量；随访CRC患者术后3年预后，复测血清miR-497表达量；分析术前血清miR-497表达量与CRC临床病理特征及预后的关系。结果:CRC组术前血清miR-497表达量显著低于其术后治疗结束时、腺瘤息肉组和正常对照组( P<0.01)，CEA含量显著高于术后治疗结束时、结直肠腺瘤息肉组和正常对照组( P<0.01)；结直肠癌组术后治疗结束时血清miR-497表达量低于正常对照组( P<0.05)，血清CEA含量高于术后正常对照组( P<0.05)；CRC组术前血清miR-497诊断阳性率显著高于血清CEA( P<0.01)；复发转移组术前及术后血清miR-497表达量均显著低于无复发转移组( P<0.01)；术前血清miR-497表达量与CRC分化程度、TNM分期、是否淋巴结转移、是否远处转移、生存期长短有关( P<0.01)，而与患者年龄、性别、肿瘤大小及部位均无相关性( P>0.05)。Cox多因素分析显示肿瘤分化程度、TNM分期、术前血清miR-497表达量、淋巴结转移及远处转移均是影响CRC患者预后的独立危险因素( P<0.05)；血清miR-497低表达量组1、2、3年生存率低于血清miR-497高表达量组( P<0.05)。 结论:术前血清miR-497低表达与CRC侵袭转移、不良预后密切相关，可成为其预后评价指标；术后血清miR-497表达量降低对CRC术后复发转移有一定预测价值。

目的:探讨外泌体微RNA-93-5p（miR-93-5p）作为慢性肾脏病（chronic kidney disease，CKD）早期诊断的生物标志物的可能性。方法:选取2018年12月至2020年12月于南通大学附属医院诊断为CKD的患者（≥18周岁）和同期年龄匹配的健康志愿者，分为CKD组（160例）与对照组（70例），其中CKD组行肾活检者60例（包括糖尿病肾病、IgA肾病、膜性肾病各20例），以20例行肾切除手术的肾癌患者癌旁正常肾组织作为对照。采用实时定量PCR法检测血清、尿液外泌体miR-93-5p的表达水平，分析其与临床指标及肾间质纤维化（renal interstitial fibrosis，RIF）的相关性；采用受试者工作特征曲线（ROC曲线）评估血清、尿液外泌体miR-93-5p诊断CKD的价值；采用荧光原位杂交技术（FISH）对不同病理类型CKD患者肾组织miR-93-5p进行定位定量分析。结果:CKD组血清外泌体miR-93-5p表达低于对照组，尿液外泌体miR-93-5p表达高于对照组。Spearman秩相关分析结果显示，CKD患者血清外泌体miR-93-5p相对表达水平与血红蛋白呈正相关（ r=0.70， P=0.04），与血肌酐（ r=-0.57， P=0.03）、血胱抑素C（Cys-C）（ r=-0.71， P=0.02）、血清β2微球蛋白（β2-MG）（ r=-0.23， P=0.03）及RIF指数（ r=-0.57， P=0.03）呈负相关；尿液外泌体miR-93-5p相对表达水平与血清β2-MG（ r=0.89， P=0.01）、尿β2-MG（ r=0.54， P=0.03）、尿N-乙酰-β- D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）（ r=0.35， P=0.02）及RIF指数（ r=0.65， P=0.03）呈正相关。血清外泌体miR-93-5p、尿液外泌体miR-93-5p诊断CKD的ROC曲线下的面积分别为0.627（ P<0.05）和0.741（ P<0.05）。FISH检测结果显示，不同病理类型CKD患者肾组织内miR-93-5p表达水平均高于对照组，并且表达于肾小管内。 结论:血清、尿液外泌体miR-93-5p与肾小管间质损伤相关，对CKD诊断有一定参考价值，可作为CKD早期诊断的生物标志物。

外泌体是由细胞分泌的一种膜性囊泡，可广泛参与细胞间通讯、抗炎、免疫调节等。眼表相关的外泌体来源细胞有间充质干细胞(MSC)、调节性T细胞(Treg)、未成熟树突状细胞(imDC)和髓源性抑制细胞(MDSC)。不同细胞来源的外泌体通过递送不同的生物分子给受体细胞而发挥作用。MSC来源的外泌体通过抑制T细胞增生、转换巨噬细胞表型、调控辅助性T(Th)细胞分化、上调Treg表达等机制对眼表炎症与免疫相关疾病有积极作用，同时可减少新生血管和炎症反应，培育了一个可促进角膜损伤修复的微环境。Treg来源外泌体内含微小RNA(miRNA)(miR-503、miR-330和miR-9)和诱导型NO合成酶，可通过干扰细胞周期进程，诱导凋亡和其他T细胞分化为Treg表型，抑制T细胞的同种异体排斥反应从而诱导免疫耐受。imDC来源外泌体通过递送miR-682抑制角膜植片免疫排斥。MDSC来源外泌体在体内外促进Treg扩增，抑制活化T细胞的增生和细胞毒性反应，还表达miR-29a-3p和miR-93-5p，可抑制Th1和Th17细胞分化。鉴于上述外泌体的抗炎及免疫抑制作用，本文就其对眼表炎症与免疫相关疾病如角膜损伤、黏多糖贮积症、干眼、干燥综合征和眼部移植物抗宿主病等的研究进行综述。

目的:评价小鼠神经细胞氧糖剥夺-复糖复氧时微小RNA-93-5p(miR-93-5p)与线粒体融合蛋白2(Mfn2)的关系。方法:体外培养小鼠神经母细胞瘤细胞至对数生长期。实验Ⅰ　采用随机数字表法将细胞分为5组( n＝20)：对照组(C组)、氧糖剥夺-复糖复氧组(OGD/R组)、miR-93-5p抑制剂组(I组)、siRNA-Mfn2+miR-93-5p抑制剂组(siMfn2+I组)和miR-93-5p阴性对照组(NC组)。氧糖剥夺：在低糖平衡盐溶液、37 ℃ 5%CO 2-95%N 2的环境中培养3 h，复糖复氧：在正常培养基、37 ℃ 5%CO 2-95%空气中复氧24 h。I组、siMfn2+I组与NC组在模型制备前48 h分别转染miR-93-5p抑制剂、miR-93-5p抑制剂+siRNA-Mfn2及阴性对照miRNA。采用CCK-8法检测细胞活力，流式细胞术检测细胞凋亡率，qRT-PCR法检测miR-93-5p、Mfn2 mRNA表达水平，Western blot法检测Mfn2表达水平。实验Ⅱ　构建野生型(WT)-Mfn2和突变型(MUT)-Mfn2质粒，并分别与miR-93-5p模拟物和miR-93-5p空白对照(miR-93-5p NC)载体转染至神经母细胞瘤细胞，转染48 h后，采用随机数字表法将细胞分为4组( n＝5)：miR-93-5p NC-WT-Mfn2共转染组、miR-93-5p模拟物-WT-Mfn2共转染组、miR-93-5p NC-MUT-Mfn2共转染组和miR-93-5p模拟物-MUT-Mfn2共转染组。采用双荧光素酶实验检测荧光素酶活性。 结果:实验Ⅰ　与C组比较，其余各组细胞活力降低，细胞凋亡率升高，miR-93-5p表达上调，Mfn2及其mRNA表达下调( P<0.05)；与OGD/R组或NC组比较，I组细胞活力升高，细胞凋亡率降低，miR-93-5p表达下调，Mfn2及其mRNA表达上调( P<0.05)；与I组比较，siMfn2+I组细胞活力降低，细胞凋亡率升高，Mfn2及其mRNA表达下调( P<0.05)。实验Ⅱ　与miR-93-5p NC-WT-Mfn2共转染组比较，miR-93-5p模拟物-WT-Mfn2共转染组荧光素酶活性降低( P<0.05)；与miR-93-5p NC-MUT-Mfn2共转染组比较，miR-93-5p模拟物-MUT-Mfn2共转染组荧光素酶活性差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:miR-93-5p表达上调，进而靶向下调Mfn2表达，可能是小鼠神经细胞氧糖剥夺-复糖复氧损伤的机制。

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)HAGLR通过靶基因微小RNA(miR)-93-5p调控胃癌细胞增殖和迁移的分子机制。方法:采用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测胃癌细胞株(HS-746T、BGC823、SGC7901、MGC803)和正常胃黏膜上皮细胞(GES-1)中HAGLR的表达水平。选择HAGLR表达最低的细胞株分别转染阴性对照质粒(阴性对照组)和HAGLR高表达质粒(HAGLR组)。分别采用MTS法和划痕愈合实验检测转染后细胞的增殖情况和迁移能力。生物信息学软件miRcode数据库预测HAGLR的靶基因，双荧光素酶报告基因实验验证HAGLR与靶基因的结合。qRT-PCR检测HAGLR靶基因的表达。Western blot检测Hippo信号通路的表达。采用SPSS 21.0软件进行统计分析，组间比较应用 t检验，多组间比较应用单因素方差分析。 结果:与GES-1细胞相比，胃癌细胞株HAGLR的表达水平均降低(均 P<0.05)，HAGLR表达最低的细胞株是SGC7901细胞( P<0.01)。HAGLR组和阴性对照组SGC7901细胞中HAGLR表达分别为1.03±0.13和9.75±1.10，阴性对照组HAGLR的表达水平明显低于HAGLR组( t＝7.87， P<0.01)。与阴性对照组比较，HAGLR组SGC7901细胞的吸光度值明显降低( P<0.05)，划痕愈合率明显减少( P<0.01)。miRcode数据库显示HAGLR与miR-93-5p存在互补结合位点。双荧光素酶报告基因实验显示HAGLR可互补结合miR-93-5p( P<0.01)。与阴性对照组比较，HAGLR组SGC7901细胞中miR-93-5p表达明显降低( P<0.01)，Hippo信号通路蛋白表达明显降低(均 P<0.01)。 结论:HAGLR在胃癌细胞株中呈低表达，HAGLR通过靶向负调控miR-93-5p抑制胃癌SGC7901细胞的增殖和迁移能力。

目的:探讨血清miR-451a、miR-25-3p、GAS8-AS1联合用于早期甲状腺乳头状癌的诊断价值。方法:纳入2016年3月至2019年3月池州市人民医院收治的早期甲状腺乳头状癌患者70例为肿瘤组、良性结节患者70例为良性组、健康体检者70名为对照组。通过实时荧光定量PCR检测血清miR-451a、miR-25-3p、GAS8-AS1的表达量。通过酶联免疫吸附试验检测患者血清甲状腺球蛋白(Tg)水平。用受试者工作特征(ROC)曲线的曲线下面积(AUC)分析miR-451a、miR-25-3p、GAS8-AS1检测在早期甲状腺乳头状癌中的诊断意义。结果:肿瘤组、良性组和对照组血清miR-451a、miR-25-3p、GAS8-AS1、Tg的表达水平差异存在统计学意义( F＝14.920、9.849、15.060、9.090， P均<0.05)。血清miR-451a、miR-25-3p、GAS8-AS1、Tg鉴别肿瘤组和对照组的敏感性分别为86%、83%、87%、83%，特异性分别为93%、83%、87%、73%，鉴别肿瘤组和良性组的敏感性分别为97%、97%、78%、84%，特异性分别为87%、80%、93%、71%。miR-451a、miR-25-3p、GAS8-AS1联合对早期甲状腺乳头状癌诊断的敏感性为94.29%，特异性为88.57%，准确性为90.48%。 结论:血清miR-451a、miR-25-3p、GAS8-AS1联合检测可能在诊断早期甲状腺乳头状癌中具有一定价值。

目的:探讨基于生物信息学构建胰腺癌患者预后相关微小RNA(miRNA)预测模型及其应用价值。方法:采用回顾性队列研究方法。收集肿瘤基因图谱计划(TCGA)数据库(https：//cancergenome.nih.gov/)自建库起至2017年9月171例胰腺癌患者的临床病理资料；男93例，女78例；中位年龄为65岁，年龄范围为35～88岁。171例患者中，64例临床病理资料完整。171例患者采用随机抽样法按7∶3比例分为训练集123例和测试集48例。训练集用于构建预测模型，测试集用于验证预测模型效能。从GEO基因公共表达数据库中下载包含9对胰腺癌及对应癌旁组织的miRNA测序数据的数据集GSE41372，从癌组织及癌旁组织差异表达的miRNA中筛选出候选差异表达miRNA，基于训练集患者信息，进行LASSO-COX回归分析，从候选差异表达miRNA中筛选出与生存相关miRNA，将其拟合成一个相对精简的预后相关miRNA模型。分别在训练集和测试集中对构建的预后相关miRNA模型的预测效能进行验证，以受试者工作曲线下面积(AUC)评价模型准确性，以一致性指数(C-index值)评价模型效能。观察指标：(1)患者生存情况。(2)差异表达miRNA筛选结果。(3)预后相关miRNA模型的构建。(4)预后相关miRNA模型的验证。(5)胰腺癌患者临床病理因素比较。(6)影响胰腺癌患者预后的相关因素分析。(7)预后相关miRNA模型与第8版TNM分期预测效能的比较。正态分布的计量资料以 ± s表示，两组间比较采用Student- t检验，多组间比较采用方差分析。偏态分布的计量资料以 M(范围)表示，组间比较采用Mann-Whitney U检验。计数资料以绝对数或百分比表示，组间比较采用 χ2检验。等级资料分析采用秩和检验。采用计数资料相关性分析，挖掘预后相关miRNA模型与患者临床病理参数之间的相关性。采用COX进行单因素及多因素分析，并判断相关性，结果以风险比及95%可信区间表示，风险比<1时，证明该因素为保护因素；风险比>1时，证明该因素为危险因素；风险比＝1时，说明对生存无明显影响。采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线并计算生存率，采用Log-rank检验进行生存分析。 结果:(1)患者生存情况：123例训练集患者随访时间为31～2 141 d，中位随访时间为449 d，3、5年总体生存率分别为16.67%、8.06%。48例测试集患者随访时间为41～2 182 d，中位随访时间为457 d，3、5年总体生存率分别为15.63%、9.68%。两组患者3、5年总体生存率比较，差异均无统计学意义( χ2＝0.017，0.068， P>0.05)。(2)差异表达miRNA筛选结果：生物信息学分析结果显示，共筛选102个候选差异表达miRNA，其中63个miRNA在癌组织中上调，39个miRNA在癌组织中下调。(3)预后相关miRNA模型的构建：在102个候选差异表达基因中，筛选出5个与生存相关的miRNA。名称分别为miR-21、miR-125a-5p、miR-744、miR-374b、miR-664，差异表达模式(癌组织对比癌旁组织)分别为升高、升高、降低、升高、降低，差异表达倍数分别为4.00、3.43、3.85、2.62、2.35倍。由5个与生存相关miRNA构建的预后表达方程＝0.454×miR-21表达量－0.492×miR-125a-5p表达量－0.49×miR-744表达量－0.419×miR-374b表达量－0.036×miR-664表达量。(4)预后相关miRNA模型的验证：在训练集和测试集中，预后相关miRNA模型C-index值分别为0.643和0.642。(5)胰腺癌患者临床病理因素比较：COX分析结果显示，预后相关miRNA模型与肿瘤病理学T分期和肿瘤位置具有相关性( Z＝45.481, χ2＝10.176， P<0.05)。(6)影响胰腺癌患者预后的相关因素分析：单因素分析结果显示为肿瘤病理学N分期、接受放射治疗、接受分子靶向治疗、预后相关miRNA模型评分是胰腺癌患者预后的相关因素(风险比＝2.471，0.290，0.172，2.001，95%可信区间为1.012～6.032，0.101～0.833，0.082～0.364，1.371～2.922， P<0.05)。多因素分析结果显示：接受分子靶向治疗是胰腺癌患者预后的独立保护因素(风险比＝0.261，95%可信区间为0.116～0.588， P<0.05)；预后相关miRNA模型评分≥1.16分是胰腺癌患者预后的独立危险因素(风险比＝1.608，95%可信区间为1.091～2.369， P<0.05)。(7)预后相关miRNA模型与第8版TNM分期预测效能的比较：在训练集中，预后相关miRNA模型对胰腺癌患者3、5年生存时间预测概率与第8版TNM分期比较，差异有统计学意义( Z＝－1.671，－1.867， P<0.05)。预后相关miRNA模型与第8版TNM分期AUC分别为0.797、0.935与0.737、0.703，95%可信区间分别为0.622～0.972、0.828～1.042与0.571～0.904、0.456～0.951；C-index值分别为0.643与0.534。在测试集中，预后相关miRNA模型对胰腺癌患者3、5年生存时间预测概率与第8版TNM分期比较，差异有统计学意义( Z＝－1.729，－1.923， P<0.05)。预后相关miRNA模型与第8版TNM分期AUC分别为0.750、0.873与0.721、0.703，95%可信区间分别为0.553～0.948、0.720～1.025与0.553～0.889、0.456～0.950；C-index值分别为0.642与0.544。 结论:基于5个与胰腺癌生存相关miRNA构建可用于胰腺癌患者生存预测的预后相关miRNA模型。该模型可与现有TNM分期系统及其他临床病理参数形成互补，为患者提供个体化、准确的生存时间预测，为临床治疗提供参考。

目的:探讨血清MicroRNA-27（miR-27）和MicroRNA-93（miR-93）、骨形态发生蛋白15（bone morphogenetic protein15，BMP-15）在多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome，PCOS）患者中的表达意义。方法:选择2015年8月至2019年1月烟台市烟台山医院收治的63例PCOS患者，依据身体质量指数（body mass index，BMI）将其分为肥胖组（肥胖型PCOS，BMI≥25 kg/m 2， n=22）和非肥胖组（非肥胖型PCOS，BMI<25kg/m 2， n=41），同期选择30例体检正常的健康妇女作为健康组。分析3组血清miR-27、miR-93表达水平及骨形态发生蛋白15（BMP-15）浓度，并比较3组内分泌代谢指标，使用受试者工作特征曲线（ROS）评估血清miR-27、miR-93、BMP-15对PCOS及肥胖型PCOS患者的预测价值。 结果:内分泌指标：与健康组比较，肥胖组和非肥胖组卵泡刺激素（FSH）较低，睾酮（T）、促黄体生成素/卵巢刺激素比值（LH/FSH）及胰岛素抵抗（IR）均较高（ P<0.05）；与非肥胖组比较，肥胖组T和IR较高（ P<0.05）。血清miR-27、miR-93及BMP-15：与健康组比较，肥胖组和非肥胖组血清BMP-15[（74.93±12.75）vs（28.62±8.06）、（30.37±9.48）]浓度较低，血清miR-27[（0.98±0.21）vs（2.52±0.41）、（1.34±0.09）]、miR-93[（0.76±0.22）vs（2.69±0.54）、（1.22±0.35）]表达水平较高（ P<0.05）；与非肥胖组相比较，肥胖组血清miR-27、miR-93表达水平较高（ P<0.05）；miR-27、miR-93及BMP-15均对PCOS具有预测价值，BMP-15曲线下面积最高，为0.970（ P<0.05）；miR-27、miR-93对肥胖型PCOS具有预测价值，miR-93曲线下面积最高，为0.927（ P<0.05）。 结论:肥胖型PCOS患者除存在显著内分泌指标紊乱外，血清miR-27、miR-93属于高表达状态且BMP-15水平相对较低，BMP-15可作为辅助诊断PCOS的有效参数，而miR-93可作为辅助诊断肥胖型PCOS的有效参数。