我国结直肠癌的发病率和死亡率逐年升高，目前缺乏有效无创、依从性高的结直肠癌筛查方法。粪便DNA和RNA检测是近年新兴的非侵入性结直肠癌筛查手段，尤其是粪便多靶点DNA和微小RNA（miRNA）检测具有无创无痛、敏感性高、安全方便等特点，能在很大程度上弥补传统筛查方法的不足。国外已将粪便多靶点DNA检测纳入结直肠癌的筛查指南，但其也存在特异性低、价格昂贵、癌前病变检出率低等不足。粪便miRNA检测具有敏感性和特异性较高（miR-451）、癌前病变检出率高（miR-92a）等优势，但缺乏大样本、多中心的循证医学证据支持。本文对粪便标志物DNA和RNA筛查结直肠癌进展进行综述，重点介绍粪便多靶点DNA和miRNA检测的特性。

目的:探讨ICE方案(异环磷酰胺、卡铂、VP16)联合甲氨蝶呤对弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者的临床疗效及miR-451a、miR-15a表达的影响。方法:前瞻性选取2013年3月至2018年5月长沙市第三医院56例DLBCL患者作为研究对象，依据随机数字表法分为观察组与对照组，各28例。对照组予以ICE方案治疗，观察组予以ICE方案联合甲氨蝶呤治疗。对比两组肿瘤控制率、毒副反应、治疗前后血清miR-451a及miR-15a表达水平、免疫功能(CD3 +、CD4 +、CD8 +、CD4 +/CD8 +)、血清肿瘤标志物[β 2微球蛋白(β 2-MG)、糖类抗原125(CA125)、乳酸脱氢酶(LDH)]水平，随访6～12个月统计两组生存率。 结果:观察组肿瘤控制率(92.86%)高于对照组(71.43%)( P<0.05)；治疗后两组miR-15a较治疗前降低，miR-451a较治疗前增高，且观察组miR-15a低于对照组，miR-451a高于对照组( P<0.05)；治疗后两组CD3 +、CD4 +、CD4 +/CD8 +较治疗前降低，CD8 +较治疗前增高( P<0.05)，但组间比较差异无统计学意义( P>0.05)；治疗后两组CA125、LDH及β 2-MG水平较治疗前降低，且观察组低于对照组( P<0.05)；观察组毒副反应发生率、治疗后6、9、12个月生存率与对照组间差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:ICE方案联合甲氨蝶呤治疗DLBCL可通过调节血清miR-451a、miR-15a表达，进一步提高治疗效果，降低血清肿瘤标志物水平，且毒副反应及对免疫损害小，安全性高。

目的:通过检测类风湿关节炎(RA)患者血浆外泌体中miRNA-146a-5p和miRNA-155-5p的表达，探讨其在RA发病中的作用。方法:采用Qiagen外泌体提取试剂盒提取56例RA患者和24例健康者血浆中的外泌体，以miRNA-451a作为内源性参考对照，实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测外泌体中miRNA-146a-5p和miRNA-155-5p的相对表达量，使用2 -△△Ct法计算相对表达水平。 结果:RA患者外泌体中miRNA-146a-5p和miRNA-155-5p的相对表达量均显著高于健康对照组[13.662(6.058，30.801)vs 5.261(2.453，12.103)和33.354(15.087，275.309)vs 11.684(1.551，17.221)， P均<0.05]，且活动期RA组中二者的相对表达量也明显高于稳定期RA组[27.542 (13.905，87.017) vs 7.217 (5.218，13.697)和155.110 (35.600，437.745) vs 15.526 (10.628，24.504)， P均<0.05]。外泌体中miRNA-146a-5p和miRNA-155-5p水平与基于C反应蛋白的28个关节疾病活动性评分(DAS28-CRP)、基于红细胞沉降率的28个关节疾病活动性评分(DAS28-ESR)、关节压痛数(tender joint count，TJC)和关节肿胀数(swollen joint count，SJC)均呈正相关。RA组和健康对照组外泌体浓度[660.381 (581.212, 807.308) μg/ml vs 675.897 (559.328, 752.316) μg/ml]，以及活动期RA组和稳定期RA组外泌体的浓度[634.963 (561.095, 756.107) μg/ml vs 676.374 (589.167, 898.333) μg/ml]差异均无统计学意义( P>0.05)。 结论:miRNA-146a-5p和miRNA-155-5p在RA患者血浆外泌体中明显高表达，且在活动期RA组中的表达明显高于稳定期RA组，提示血浆外泌体miRNA-146a-5p和miRNA-155-5p可能在RA发病中起重要作用，且与疾病活动度有关。

目的:探讨血清miR-451a、miR-25-3p、GAS8-AS1联合用于早期甲状腺乳头状癌的诊断价值。方法:纳入2016年3月至2019年3月池州市人民医院收治的早期甲状腺乳头状癌患者70例为肿瘤组、良性结节患者70例为良性组、健康体检者70名为对照组。通过实时荧光定量PCR检测血清miR-451a、miR-25-3p、GAS8-AS1的表达量。通过酶联免疫吸附试验检测患者血清甲状腺球蛋白(Tg)水平。用受试者工作特征(ROC)曲线的曲线下面积(AUC)分析miR-451a、miR-25-3p、GAS8-AS1检测在早期甲状腺乳头状癌中的诊断意义。结果:肿瘤组、良性组和对照组血清miR-451a、miR-25-3p、GAS8-AS1、Tg的表达水平差异存在统计学意义( F＝14.920、9.849、15.060、9.090， P均<0.05)。血清miR-451a、miR-25-3p、GAS8-AS1、Tg鉴别肿瘤组和对照组的敏感性分别为86%、83%、87%、83%，特异性分别为93%、83%、87%、73%，鉴别肿瘤组和良性组的敏感性分别为97%、97%、78%、84%，特异性分别为87%、80%、93%、71%。miR-451a、miR-25-3p、GAS8-AS1联合对早期甲状腺乳头状癌诊断的敏感性为94.29%，特异性为88.57%，准确性为90.48%。 结论:血清miR-451a、miR-25-3p、GAS8-AS1联合检测可能在诊断早期甲状腺乳头状癌中具有一定价值。

目的 探讨美托洛尔联合沙库巴曲缬沙坦治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病(简称冠心病)合并慢性心力衰竭(CHF)的临床疗效,以及对患者心室重塑、炎性因子及微小核糖核酸(miRNA)的影响.方法 选取医院 2022 年 1 月至 2023 年 6 月收治的冠心病合并CHF患者 160 例,按随机数字表法分为观察组和对照组,各 80 例.两组患者均予美托洛尔治疗,观察组患者加用沙库巴曲缬沙坦,均连续治疗 3 个月.结果 观察组总有效率为 90.00%,显著高于对照组的 77.50%(P<0.05).治疗后,观察组患者血清氨基末端B型脑钠肽前体、基质金属蛋白酶-9、基质金属蛋白酶-2、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素 6、超敏C反应蛋白水平及左室舒张末期内径、左室收缩末期内径、明尼苏达心力衰竭生活质量调查量表(MLHFQ)评分均显著低于对照组(P<0.05);脂联素水平及左室射血分数、miR-26a-5p、miR-451a均显著高于对照组(P<0.05).观察组和对照组不良反应发生率相当(6.25%比 8.75%,P>0.05).结论 美托洛尔联合沙库巴曲缬沙坦治疗冠心病合并CHF的临床疗效良好,可促进患者心室重塑,降低炎性因子水平,上调miRNA表达,改善心功能,且安全性良好.

目的:筛选针刺内迎香穴治疗变应性鼻炎(AR)大鼠血浆外泌体中差异表达的miRNA,并对其进行生物信息学分析,探讨针刺内迎香穴治疗AR的可能作用机制.方法:将30只SPF级SD大鼠随机分为空白组(Ko组)、模型组(Mu组)和针刺组(Zh组),每组各10只.模型组和针刺组采用卵清蛋白腹腔注射及鼻黏膜刺激法建立变应性鼻炎大鼠模型,造模后对针刺组大鼠予针刺内迎香穴进行干预,每周2次,连续3周.HE染色观察鼻黏膜病理形态改变;超速离心法提取大鼠血浆外泌体,透射电镜(TEM)和粒径分析(NTA)检测外泌体形态和粒径浓度;高通量测序以P＜0.05的标准筛选大鼠血浆外泌体中显著差异表达的miRNA;利用miRanda和Targetscan得出差异表达miRNA靶基因,进行基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析.结果:针刺作用关键miRNA共有10个,其中5个上调,5个下调,共得出7 408个靶基因,涉及1 130个生物过程、158个细胞组分、166个分子功能,KEGG信号通路有31条(P＜0.05).结论:针刺内迎香穴可明显改善AR大鼠鼻黏膜组织炎性细胞浸润情况,其机制可能与通过调节 rno-miR-92a-3p、rno-let-7d-3p、rno-miR-328a-3p、rno-miR-223-3p、rno-miR-23a-3p、rno-miR-451-5p、novel_314、rno-miR-144-5p、rno-miR-23b-3p及rno-miR-144-3p的表达,进而调控MAPK信号通路有关.

目的 探究益景汤对早期糖尿病视网膜病变(DR)大鼠视网膜组织中微小RNA(miRNA)表达的影响,筛选出益景汤干预早期DR的靶点miRNA.方法 将20只2月龄雄性SD大鼠使用链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,随机分为模型组(MG)和益景汤组(YJG),另将常规喂养的大鼠设为对照组(CG),每组10只.YJG组大鼠每日灌胃益景汤12.50 g/kg,CG、MG组大鼠灌胃等体积0.9%氯化钠注射液,均干预16周.给药完成后记录大鼠体质量,摘除双侧眼球剥离视网膜,提取总RNA,PCR扩增构建小RNA文库,采用高通量测序技术对该文库进行测序.对差异miRNA进行靶基因预测,并对靶基因进行基因本体论(GO)、Pathway分析,选择差异倍数较大的miRNA进行PCR验证.结果 (1)已知miRNA差异:筛选出644个已知miRNA,其中差异miRNA共59个.与CG组比较,MG组35个miRNA上调、6 个miRNA下调,YJG组20个miRNA上调、4个miRNA下调;与MG组比较,YJG组6个miRNA上调、13个miRNA下调,差异均有统计学意义(均P＜0.05);其中,1个上调miRNA,11个下调miRNA为益景汤干预DM大鼠后,3组共同差异性表达miRNA.(2)新发现miRNA差异:3组筛选出242个新发现的miRNA,其中差异miRNA共105个.与CG组比较,MG组50个miRNA上调,15个miRNA下调;与CG组比较,YJG组55个miRNA上调,20个miRNA下调;与MG组比较,YJG组16个miRNA上调,6个miRNA下调,差异均有统计学意义(均P＜0.05).(3)差异miRNA生物学功能和通路:差异基因主要涉及生物学过程方面的多种蛋白的转录调节;靶基因关联的通路主要是肿瘤相关的信号通路和糖脂代谢相关通路.(4)PCR验证:MG组大鼠视网膜miR-673-3p表达低于CG组,余11个miRNA表达均高于CG组;YJG组大鼠视网膜miR-673-3p、miR-23b-5p表达均高于MG组,余10个miRNA表达均低于MG组,差异均有统计学意义(均P＜0.05).除miR-23b-5p外,其余11个miRNA与上述RNA检测结果一致.结论 miR-673、miR-1、miR-133、miR-214、miR-23b、miR-31a、miR-451等可能是益景汤干预早期DR微血管损害的靶点miRNA.

目的 探讨血清外泌体microRNA-451a(miR-451a)是否可以作为结直肠癌(CRC)早期诊断及治疗的生物标志物.方法 通过表达谱芯片筛选出CRC患者术前与术后血清外泌体中差异表达的miRNAs;利用肿瘤与癌症基因图谱(TCGA)数据库分析miR-451a在CRC组织中的表达并分析其临床意义;利用受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)分析miR-451a对CRC的诊断效能.生物信息学软件预测miR-451a的靶基因并进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析.结果 miR-451a高表达与直肠癌患者远处转移呈负相关(r=-0.179,P=0.032).miR-451a表达量对CRC组织具有较好的诊断效能(P＜0.01).生信分析结果显示miR-451a的靶基因与CRC发生发展的多种重要通路密切相关.结论 外泌体miR-451a可作为CRC早期诊断的潜在生物标志物,辅助临床进行CRC早期诊疗.

目的 研究活动性肺结核患者血清微小RNA(miR)-20a和25羟维生素D3[25(OH)D3]与结肠癌相关转录因子2(1ncRNACCAT2)及miR-451a水平变化及临床意义.方法 以2020年1月-2022年7月山东第一医科大学附属济南人民医院收治的活动性肺结核患者97例为病例组,随机选取同期在医院体检的104名健康体检者为健康对照组,统计两组一般资料及血清miR-20a、25(OH)D3、lncRNA CCAT2、miR-451a表达水平,比较不同病情严重程度患者血清miR-20a、25(OH)D3、lncRNA CCAT2及miR-451a表达水平.结果 病例组血清25(OH)D3、miR-451a表达水平低于健康对照组,血清miR-20a、lncRNA CCAT2水平高于健康对照组(P＜0.05).轻、中、重度组患者血清25(OH)D3水平呈逐渐降低趋势,血清miR-20a、lncRNA CCAT2、miR-451a表达水平呈逐渐升高趋势,组间比较差异均具有统计学意义(P＜0.05).结论 血清miR-20a,25(OH)D3、lncRNA CCAT2、miR-451a表达水平与活动性肺结核患者病情发生和发展密切相关,通过监测活动性肺结核患者血清miR-20a、25(OH)D3、1ncRNA CCAT2、miR-451a表达水平变化有助于测评患者病情情况.

目的:探究lncRNA MEG3对胃癌(GC)细胞增殖、迁移和侵袭的影响及机制.方法:qRT-PCR检测人正常胃上皮细胞 GES-1 和 GC 细胞(BGC823、MGC803、SGC7901、AGS、MKN28、MKN451)中MEG3及miR-27a-3p表达差异;将AGS细胞分为对照组、GV144组、GV144-MEG3组、GV144-MEG3+miR-27a-3p NC 组、GV144-MEG3+miR-27a-3p mimics 组;比较各组 AGS 细胞中MEG3及miR-27a-3p表达情况;检测细胞增殖、迁移和侵袭能力,Western blot检测ki-67、MMP-2、MMP-9蛋白表达,双荧光素酶报告实验验证MEG3与miR-27a-3p的靶向关系.结果:与GES-1细胞相比,GC细胞中MEG3水平降低,miR-27a-3p水平升高(P＜0.05);与对照组相比,GV144-MEG3组MEG3水平升高,miR-27a-3p、ki-67、MMP-2、MMP-9水平及增殖、迁移和侵袭能力降低(P＜0.05);上调miR-27a-3p表达可减弱MEG3过表达对AGS细胞恶性行为的抑制作用.miR-27a-3p是MEG3的靶基因.结论:过表达MEG3可能通过靶向下调miRNA-27a-3p表达抑制AGS细胞增殖、迁移及侵袭.