目的:利用生物信息学方法筛选外阴鳞状细胞癌(VSCC)的关键基因及分析免疫浸润特征.方法:从GEO数据库中下载VSCC相关基因表达数据,应用差异表达基因(DEGs)分析和加权基因共表达网络分析筛选出共同的DEGs,对DEGs进行富集分析.采用STRING数据库和Cytoscape软件构建蛋白互作(PPI)网络,并通过4种算法筛选出关键基因,进行关键基因GSEA分析.应用CIBERSORT分析VSCC相关免疫细胞浸润特征及关键基因与免疫细胞的相关性.结果:共筛选出182个DEGs,DO富集主要涉及生殖器官良性肿瘤、结缔组织癌等疾病;GO和KEGG富集结果主要与表皮发育、角质化包膜、氧化应激、免疫细胞迁移等有关;PPI网络中有65个节点,90条边,筛选出6个关键基因,S100A7、SPRR2B、SPRR2G、CASP14、CDSN、ESR1,共同富集到了细胞周期、蛋白酶体信号通路.免疫浸润分析结果显示,与对照组相比,VSCC组初始B细胞、静息CD4+T记忆细胞下调(均P＜0.05),记忆B细胞、调节性T细胞、活化的NK细胞、巨噬细胞M0型、静息肥大细胞、活化的肥大细胞、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞上调(均P＜0.05).Spearman相关性分析显示,S100A 7、SPRR2G、CASP14、CDSN均与γδT细胞呈负相关(均P＜0.05),与巨噬细胞M0型呈正相关(均P＜0.05);ESR1与巨噬细胞M0型呈负相关(P＜0.05),与静息CD4+T记忆细胞呈正相关(P＜0.05);S100A7、CASP14 与静息 CD4+T 记忆细胞呈负相关(均 P＜0.05);SPRR2G、CDSN 与 CD8+T 细胞呈负相关(均 P＜0.05).结论:S100A7、SPRR2B、SPRR2G、CASP14、CDSN、ESR1可能是VSCC潜在的生物标志物,长期慢性炎症刺激导致表皮终末分化过程异常可能是VSCC发生、发展的关键因素.

目的:研究规律性有氧运动对MCAO/R大鼠学习记忆功能的影响及作用机制.方法:将36只SD大鼠随机分为3组,假手术组(IS组)、有氧运动组(AE组)及模型组(IC组).IC组及AE组大鼠制备MCAO/R模型,IS组进行相同动脉分离即可.成模后AE组大鼠接受14d跑步机训练,IS组、IC组大鼠仅需在相同的持续时间于跑台自由活动.对各组大鼠进行神经功能评分;应用小动物磁共振T2WI扫描观察干预前后各组大鼠脑梗死灶;应用新物体识别实验检测各组大鼠干预前后的识别记忆能力;采用HE染色对缺血侧海马CA1区神经元损害情况进行研究;应用免疫组化检测缺血侧海马CA1区小胶质细胞活化水平;应用Western Blot检测缺血侧海马NOD样受体蛋白 3(NOD-like receptor protein 3,NLRP3)、半胱氨酸蛋白酶-1(cysteinyl aspartate specific proteinase 1,caspase-1)、消皮素D(gasdermin D,GSDMD)蛋白表达情况;应用Elisa法检测缺血侧海马白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素18(IL-18)水平;应用免疫荧光共标记实验检测缺血侧海马IBA1与NLRP3、caspase-1、GS-DMD的荧光表达及共定位情况.结果:干预前,与IS组相比,IC组神经功能评分显著升高(P＜0.05),并可见明显高信号梗死灶(P＜0.05),新物体辨别率显著下降(P＜0.05),而AE组与IC组神经功能评分、脑梗死体积百分比及新物体辨别率无显著差异(P＞0.05);干预14d后,与IC组相比,AE组大鼠神经功能评分显著降低(P＜0.05)、脑梗死体积显著减小(P＜0.05)、物体辨别能力显著提高(P＜0.05)、缺血侧海马CA1区病理情况改善、小胶质细胞活化水平降低(P＜0.05)、IL-1β、IL-18含量下降(P＜0.05),NLRP3、caspase-1、GSDMD蛋白表达显著减少(P＜0.05).除此之外,与IC组相比,AE组大鼠缺血侧海马CA1区NLRP3、GSDMD、CA3区caspase-1累计光密度显著性下降,IBA1、NLRP3与IBA1、GSDMD双阳性细胞数量明显减少.结论:规律有氧运动可提高MCAO/R大鼠的识别记忆功能,其作用机制可能是通过抑制小胶质细胞焦亡和活化来实现的.

目的 基于乳酸乳球菌(Lactococcus lactis,L.lactis)诱导表达系统制备呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial vi-rus,RSV)口服疫苗,并对其免疫原性进行分析.方法 将构建的质粒pUC57-Pre F与pNZ8149分别经Nco Ⅰ和Kpn Ⅰ双酶切,酶切产物经T4 DNA连接酶连接后获得重组质粒pNZ8149-Pre F,电转化至感受态L.lactis NZ3900,经乳糖培养基筛选获得非分泌型重组L.lactis NZ3900/pNZ8149-Pre F,以nisin A为诱导剂诱导表达,经Western blot和免疫荧光标记对其表达产物进行分析;将雌性BALB/c小鼠随机分为PBS、L.lactis NZ3900/pNZ8149、L.lactis NZ3900/pNZ8149-Pre F组,15只/组,每只口服500 μL,于第1、2天进行初次免疫,第16、17天进行加强免疫,第14和28天经小鼠下颌取血并分离脾脏细胞,ELSIA法检测重组L.lactis NZ3900/pNZ8149-Pre F诱导的体液和黏膜免疫应答水平,ELISpot法检测重组L.lactis NZ3900/pNZ8149-Pre F诱导的细胞免疫应答水平.结果 重组L.lactis NZ3900/pNZ8149-Pre F经PCR及测序鉴定,证明构建正确;抗原蛋白Pre F特异性地表达在L.lactis NZ3900中,相对分子质量约 50 000;初次免疫后第 14 和 28天,与 PBS 和L.lactis NZ3900/pNZ8149组相比,L.lactis NZ3900/pNZ8149-Pre F组小鼠血清Pre F-特异性IgG抗体效价、肠洗液中特异性分泌型IgA抗体以及脾脏细胞中IFNγ和IL-4分泌水平均明显升高,且差异均有统计学意义(t=-30.268～-3.087,P均＜0.05).结论 基于L.lactis诱导表达系统构建的RSV 口服疫苗具有较强的免疫原性,为研发RSV黏膜疫苗提供了参考,也为开发其他病毒或细菌口服疫苗提供了新的研究策略及方法.

目的 分析2002-2021年浙江省宁波市居民溺水死亡流行特征和趋势.方法 从浙江省慢性病监测信息管理系统导出2002-2021年宁波市户籍居民的溺水死亡资料,分析不同年龄、性别人群的溺水死亡率以及溺水死亡地点、时间分布;以2010年全国第六次人口普查人口为标准对溺水死亡率进行标化,拟合线性回归计算年度变化百分比(APC)和平均年度变化百分比(AAPC)判断其变化趋势.结果 2002-2021年宁波市居民溺水死亡5 190人,年均溺水粗死亡率为4.50/10万,其中男性为5.28/10万,女性为3.71/10万;溺水标化死亡率呈逐年下降趋势(AAPC=-5.02％,P＜0.001),男性溺水标化死亡率AAPC为-5.37％,高于女性的-3.14％.0～14岁、15～59岁、60岁以上年龄组分别占溺水死亡总人数的17.94％、35.34％、46.72％,3个年龄组的溺水死亡率均呈逐年下降趋势(AAPC=-12.64％、-1.76％、-3.08％;t=-18.525、-4.497、-7.155,均 P＜0.001).6-9 月溺水死亡人数最多,分别为472人(9.09％)、780人(15.03％)、708人(13.64％)、415人(8.00％).85.82％的溺水死亡发生在自然水域,13.06％的发生在其他地点(水库、水渠等).结论 2002-2021年浙江省宁波市居民溺水死亡呈下降趋势,针对目前溺水死亡流行特征应采取针对性的干预措施.

目的 观察重组人白细胞介素-1受体拮抗剂(recombinant human interleukin-1 receptor antagonist,rhIL-1 Ra)对碘乙酸钠(sodium iodoacetate,MIA)诱导的骨关节炎(osteoarthritis,OA)大鼠的治疗作用.方法 将雌性Wistar大鼠根据热痛阈值均衡分为正常对照组(11只)和造模组(55只),造模3d后,依据左后肢膝关节肿胀率将造模组随机分为溶剂对照模型组(安慰剂)及原料药低(9 mg/kg rhIL-1Ra)、高(18 mg/kg rhIL-1Ra)剂量组,每组12只,均经颈部皮下注射给药,1mL/kg,1次/d,连续14d.分别于造模前后3 d及首次给药后2、4、7、14d,测量左后肢膝关节同一处的直径,计算肿胀度、肿胀率及肿胀抑制率;取左后肢膝关节标本固定,经石蜡包埋、切片后,番红O染色,显微镜下进行病理损伤评分.结果 造模3d后,除正常对照组外,其他各组大鼠膝关节肿胀率均约达30％;与溶剂对照模型组比较,原料药低剂量组肿胀度和肿胀率在给药后2、4 d(1.52±0.38、1.26±0.43)时均降低(t分别为1.924、1.945,P均＜0.05),而原料药高剂量组在给药后2、4、7 d(1.51±0.37、1.15±0.24、1.14±0.39)时均显著降低(t分别为2.976、2.874、2.902,P均＜0.01).与溶剂对照模型组比较,原料药低、高剂量组(8.33±1.86、8.17±2.79)大鼠关节软骨病变程度相似,病理评分统计结果显示有轻微降低(t=1.814,P均＞0.05),造模成功.结论 给药14 d,高剂量rhIL-1Ra能显著减轻MIA诱导的大鼠骨关节炎急性期关节肿胀,但对MIA诱导的慢性骨关节炎的痛觉感受无明显影响,且未见其显著逆转MIA诱导的膝关节软骨损伤.

目的:分析福建省2008-2022年0～14岁儿童肺结核报告发病情况及流行特征,为制定儿童结核病防控策略提供依据.方法:从"全民健康保障信息化工程疾病预防控制信息系统"的子系统"监测报告管理系统"和"基本信息系统"收集2008-2022年福建省0～14岁儿童肺结核报告发病数据和人口数据,采用回顾性描述和Joinpoint回归模型分析疾病的三间分布、病原学检查等情况.结果:2008-2022年福建省共报告0～14岁儿童肺结核患者1430例,占全人群肺结核患者比例年均为0.46％(1430/307 833),15年间儿童肺结核年均报告发病率为1.44/10万(1430/99 435 600),总体趋于稳定[全局平均年度变化百分比(AAPC)=-5.69％,t=-1.618,P=0.106].10～14岁儿童肺结核年均报告发病率为3.20/10万(929/29 051 400),高于0～4岁和5～9岁儿童(x2=887.195,P＜0.001);0～4岁儿童肺结核报告发病率总体呈明显下降趋势(AAPC=-8.55％,t=-2.438,P=0.015),5～9岁和10～14岁儿童呈阶段性变化,分别在2010-2022年[分段年度变化百分比(APC)=3.28％,t=2.416,P=0.036]和 2010-2019 年(APC=7.57％,t=2.787,P=0.027)出现明显上升趋势.每年儿童肺结核报告发病无周期性变化.儿童肺结核患者中病原学阳性患者年均占35.24％(504/1430),每年病原学阳性所占比例呈上升趋势(x2趋势=55.195,P＜0.001).儿童年均报告发病率最高和最低的地区分别为宁德市和龙岩市,差异有统计学意义(x2=169.688,P＜0.001);除莆田市(AAPC=-6.77％,t=-2.957,P=0.011)和南平市(AAPC=-5.67％,t=-2.195,P=0.047)的儿童报告发病率呈明显下降趋势外,其余地市变化趋势稳定.结论:2008-2022年福建省儿童肺结核报告发病率处于较低水平,整体趋势较为稳定,5～9岁和10～14岁儿童出现波段上升,宁德市发病率较高且下降趋势不明显,需重点关注.

目的:了解以多粘菌素为基础的联合治疗方案对碳青霉烯耐药的鲍曼不动杆菌（CRAB）、肺炎克雷伯杆菌（CRKP）和铜绿假单胞菌（CRPA）细菌感染的临床疗效及不良反应发生情况，给临床上合理应用多粘菌素提供参考。方法:回顾性分析2019年1月至2023年8月使用多粘菌素治疗的42例患者临床资料。应用SPSS 24.0软件进行数据分析，计量资料以（）表示，采用独立样本t检验；计数资料以[例（%）]表示，采用χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。结果:42例使用多粘菌素联合抗感染治疗，28例有效，14例无效，治疗有效率66.7%。多粘菌素B的治疗有效率（72.4%）高于多粘菌素E（53.8%），两组比较有统计学差异（P<0.05）；应用多粘菌素前抗菌药物的使用时间影响疗效，抗菌药物使用时间在14 d内更改为多粘菌素，治疗有效率为73.3%（30/42），优于2周后再更改治疗方案的有效率50%（21/42）（P<0.05）；CRPA的清除率较高，CRKP、CRAB细菌清除率较低；能显著降低炎症指标CRP和PCT（P<0.05）；多粘菌素治疗后的不良反应主要是肾毒性，急性肾损伤（AKI）发生率16.7%，多粘菌素E肾毒性发生率38.5%高于多粘菌素B 6.9%。结论:以多粘菌素为基础的联合治疗CRAB、CRKP和CRPA细菌感染有效，且多粘菌素B的疗效优于多粘菌素E。多粘菌素主要不良反应是肾毒性，多粘菌素E肾毒性发生率高于多粘菌素B。使用期间应加强对肾功能的监测，避免同时使用其他肾功能损伤药物。

目的:评估机器人辅助单孔腹膜外根治性前列腺切除术（RA-SPERP）在高危前列腺癌患者中的瘤控效果，探讨影响RA-SPERP瘤控效果的风险因素。方法:回顾性纳入2020年1月至2023年7月于上海交通大学医学院附属仁济医院行RA-SPERP的高危前列腺癌患者共94例，患者中位年龄及PSA中位数分别为70岁和49.8 ng/ml，所有患者均为高危前列腺癌（PSA>20 ng/ml或GS>7或cT2c；任何PSA，任何GS，cT3～4或cN+）。建立腹膜外通道后，安置Lagiport套件，连接da Vinci Si系统后进行前入路腹膜外根治性前列腺切除术。以根治病理的切缘阳性率和术后6周PSA是否达到根治水平作为RA-SPERP的瘤控效果指标，使用Logistic回归方法分析影响瘤控效果的因素。结果:所有患者均顺利完成RA-SPERP，无中转腹腔镜或开放手术。病理报告提示切缘阳性11例（11.70%），术后6周复诊检查PSA未达根治标准（PSA≥0.2 ng/ml）共14例（14.89%）。Logistic回归的结果显示，切缘阳性事件与术前较高的T分期有关，其OR=2.450；术后6周PSA未达根治标准事件，则与初诊PSA、前列腺穿刺的国际泌尿病理协会（ISUP）分级、术前T分期及淋巴结转移情况均有关，且各自变量的OR值均>1，由此建立预测术后PSA无法下降到根治水平的列线图。结论:高危前列腺癌患者实施RA-SPERP安全可行，手术的瘤控效果可靠。术前细致评估个体的肿瘤部位与肿瘤负荷是降低切缘阳性率及避免术后PSA无法降至根治水平的关键。

目的:探讨木犀草素调节单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)/CC趋化因子受体2(CCR2)信号轴,对神经性疼痛(NP)模型大鼠神经胶质细胞激活和免疫炎症的影响.方法:采用坐骨神经慢性压迫损伤法构建大鼠NP模型.将大鼠按随机数字表法分为模型组、阿魏酸钠组及木犀草素低、中、高剂量组,每组12只;另选择同期12只大鼠为假手术组.各组大鼠腹腔注射及灌胃相应药物,每天1次,连续14d.测定大鼠机械性缩足反射阈值(MWT)和热刺激缩足反射潜伏期(TWL);实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)及免疫组织化学法检测脊髓中胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及小胶质细胞标志物离子钙接头蛋白分子1(Iba-1)mRNA及蛋白表达;流式细胞仪检测大鼠外周血中CD4+、CD8+水平;苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠脊髓病理损伤情况;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测脊髓中炎症因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子(TNF-α)水平;蛋白质印迹法(Western blotting)检测脊髓中MCP-1、CCR2蛋白表达.结果:与假手术组比较,模型组大鼠MWT、TWL、CD4+T细胞比例及CD4+/CD8+比值降低,Iba-1、GFAP mRNA及蛋白表达、CD8+T细胞比例、炎症因子水平(IL-6、IL-1β、TNF-α)、MCP-1及CCR2蛋白表达升高(P＜0.05);与模型组比较,木犀草素低、中、高剂量组及阿魏酸钠组大鼠MWT、TWL、CD4+T细胞比例及CD4+/CD8+比值升高,Iba-1、GFAP mRNA及蛋白表达、CD8+T细胞比例、炎症因子水平(IL-6、IL-1β、TNF-α)、MCP-1及CCR2蛋白表达降低,且木犀草素作用效果呈剂量依赖性(P＜0.05).结论:木犀草素具有抗炎、增强免疫、抑制胶质细胞活化,缓解NP的作用,其作用机制可能与抑制MCP-1/CCR2信号轴的激活有关.

目的 基于血浆中tau蛋白磷酸化探讨多奈哌齐对阿尔茨海默病(AD)的保护机制.方法 2019年1月至2022年7月从齐齐哈尔市第一医院神经内科招募了两组参与者作为样本.在第一组样本中包括58名轻度至重度AD患者和20名健康老年对照组;另一组样本包括37名轻度至中度AD患者的样本,其中18名患者接受了 24周的多奈哌齐治疗,19名患者接受了 24周安慰剂治疗.从患者的血液标本中提取神经元衍生的细胞外囊泡(EV),采用酶联免疫吸附分析试剂盒对β淀粉样蛋白42(Aβ42)、P-T181-tau、P-S396-tau、总tau蛋白(t-tau)、神经颗粒蛋白(NRGN)水平进行分析.结果 与对照组相比,AD患者的EV中Aβ42、t-tau、P-T181-tau、P-S396-tau水平显著升高(P＜0.05),NRGN水平显著降低(P＜0.05).在AD患者中,t-tau、NRGN和沉默转录因子(REST)的EV水平与简易智力状态检查量表(MMSE)和阿尔茨海默病合作研究-日常生活活动量表(ADCS-ADL)评分呈负相关(P＜0.05),并与阿尔茨海默病评估量表-认知子量表的14项扩展版本(ADAS-cog+)评分呈正相关(P＜0.05).在为期24周的治疗期间,与安慰剂组患者相比,多奈哌齐组患者血浆中Aβ42、t-tau、P-T181-tau和P-S396-tau的表达水平(EV水平)从基线水平到第24周结束时均呈显著降低趋势(P＜0.05).结论 轻重度AD患者血浆EV中Aβ42、t-tau、P-T181-tau和P-S393-tau水平升高.t-tau、NRGN和REST的水平增加与认知功能和生活能力的下降相关.多奈哌齐治疗可使轻中度AD患者血浆中t-tau、P-T181-tau和P-S396-tau的表达水平降低.