目的:探讨温压装药爆炸模拟气体对大鼠神经行为及海马神经发生的影响。方法:选取48只8~10周龄SPF级雄性SD大鼠，按照随机数字表法分为对照组、5 min暴露组、10 min暴露组和15 min暴露组，每组12只。吸入染毒后28 d，以高架十字迷宫评估大鼠焦虑样行为，双向主动回避实验评估学习、记忆功能；免疫荧光染色法检测海马齿状回神经干细胞(neural stem cells，NSCs)标志分子神经上皮细胞蛋白(SOX2)、成熟神经元标志分子神经元核抗原(neuronal nuclei，NeuN)的阳性表达情况；Western blot检测海马组织SOX2、NeuN蛋白表达量。采用GraphPad prism 8. 0进行数据分析与制图，重复测量设计资料的比较采用重复测量方差分析，其他数据多组间比较采用单因素方差分析，两两比较采用Tukey法。利用Image J工具对海马神经细胞进行计数。结果:(1)高架十字迷宫实验结果显示，4组大鼠进入开臂次数百分比、开臂停留时间百分比均差异有统计学意义( F＝22.31，5.43，均 P<0.05)。5 min、10 min、15 min暴露组大鼠进入开臂次数百分比[(28.85±1.47)%，(15.04±4.69)%，(12.66±2.89)%]、开臂停留时间百分比[(12.12±2.64)%，(12.16±1.11)%，(8.73±3.52)%]均低于对照组[(65.40±1.86)%，(42.92±3.12)%](均 P<0.05)，各暴露组两两比较均差异无统计学意义(均 P>0.05)。(2)重复测量方差分析结果显示，主动回避获得期各组大鼠主动回避次数的分组与时间的交互作用、组别主效应与时间主效应均显著( F＝4.21，16.64，56.46，均 P<0.05)。4组大鼠第4天与第1天主动回避次数的差值差异有统计学意义( F＝68.63， P<0.05)。主动回避记忆再现期结果显示，4组大鼠主动回避次数、主动回避反应时间均差异有统计学意义( F＝8.17，8.28，均 P<0.05)。10 min、15 min暴露组主动回避次数[(2.50±0.26)次，(2.33±0.06)次]低于对照组[(8.33±3.72)次](均 P<0.05)，主动回避反应时间[(6.25±0.40)s]、[(6.61±1.63)s]高于对照组[(3.69±1.41)s](均 P<0.05)。10 min、15 min暴露组主动回避次数显著低于5 min暴露组(均 P<0.05)。(3)免疫荧光染色结果显示，4组大鼠SOX2阳性细胞数差异有统计学意义( F＝5.33， P<0.05)。15 min暴露组SOX2阳性细胞[(4.33±1.12)个]低于对照组[(7.67±1.52)个]( P<0.05)。4组大鼠NeuN阳性细胞数差异有统计学意义( F＝11.06， P<0.05)；10 min、15 min暴露组NeuN阳性细胞[(105.67±8.50)个，(88.33±9.50)个]低于对照组[(127.00±6.56)个]( P<0.05)。暴露组两两比较显示，15 min暴露组NeuN阳性细胞低于5 min暴露组[(110.67±8.32)个]( P<0.05)。(4)Western blot结果显示，4组大鼠海马组织SOX2、NeuN蛋白相对表达量差异有统计学意义( F＝11.560，7.035，均 P<0.05)。15 min暴露组SOX2、NeuN蛋白相对表达量低于对照组(均 P<0.05)。15 min暴露组SOX2蛋白相对表达量低于5 min暴露组( P<0.05)。 结论:温压装药爆炸模拟气体急性暴露可导致大鼠焦虑样行为、学习与记忆功能缺陷，并显著降低海马齿状回神经干细胞与成熟神经元标志分子SOX2与NeuN的表达水平。

目的 观察葡萄籽原花青素(GSPE)对放射性脑损伤大鼠学习能力及生长相关蛋白(GAP)-43的表达.方法 62只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、低、高剂量GSPE组.用直线加速器进行脑部照射22 Gy制作放射性脑损伤模型.HE染色观察海马区神经细胞组织形态变化;免疫组织化学法及RT-PCR法检测再生相关因子GAP-43的表达;穿梭箱评测大鼠学习能力.结果 与模型组比较,GSPE组海马区神经细胞结构损伤减轻;GAP-43表达水平显著增高,差异有统计学意义(P<0.05);穿梭箱评测显示GSPE组动物主动回避反应率明显升高,被动回避潜伏期明显缩短,差异有统计学意义(P<0.05);上述变化在高剂量GSPE组最为显著.结论 GSPE对放射性脑损伤大鼠学习能力障碍有较好的防治作用,与增强GAP-43的表达有关.

目的:观察大鼠海马齿状回(DG)区的多巴胺(DA)水平在大鼠主动回避条件反射建立及消退过程中的变化,探讨D1受体在大鼠主动回避学习中的作用及其机制.方法:24只SD雄性成年大鼠随机分为非训练组、训练组、对照组和SC H组,每组6只.训练组大鼠每天进行穿梭箱训练,非训练组大鼠只放进穿梭箱而不进行训练,测定2组大鼠DG区细胞外液中DA水平.对照组和SCH组大鼠每天进行穿梭箱训练前向DG区注射生理盐水或SCH-23390,训练后测定2组大鼠DG区细胞外液中谷氨酸(Glu)水平和场兴奋性突触后电位(fEPSP)幅值.利用穿梭箱的行为学分析系统记录各组大鼠主动回避反应率,采用脑部微量透析法和高效液相色谱法测定各组大鼠DG区DA和Glu水平,采用电生理学记录法观察各组大鼠DG区fEPSP幅值.结果:训练组大鼠DG区DA水平在条件反射的建立过程中逐渐升高,且在消退过程中逐渐降低;与第1天比较,第5天大鼠DG区DA水平明显升高(P<0.05),非训练组大鼠DG区各个时间点DA水平比较差异无统计学意义(P>0.05).对照组大鼠训练第5天达到主动回避条件反射建立标准(主动回避反应率>65％),第7天达到消退标准(主动回避反应率<35％).与第1天比较,第5天大鼠DG区Glu水平和fEPSP幅值均明显升高(P<0.05);SCH组大鼠在整个训练过程中均未达到条件反射建立标准,且DG区Glu水平和fEPSP幅值在训练过程中未出现明显变化(P>0.05);与对照组比较,训练第5天时SCH组大鼠DG区Glu水平和fEPSP幅值均明显降低(P<0.05).结论:大鼠海马DG区DA可通过激活D1受体促进主动回避学习,其作用可能与增加DG局部Glu水平和突触传递效应有关.

目的 探讨茶多酚联合原花青素对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠回避记忆能力影响及机制.方法 将60只Wistar雌性大鼠随机分为假手术组、模型组、茶多酚组、原花青素组、茶多酚+原花青素组及维生素E(VE)组,采用去卵巢合并腹腔注射D-半乳糖(100 mg/kg)制备AD大鼠模型.穿梭箱实验检测大鼠回避记忆能力,透射电镜观察细胞核及线粒体超微结构,Western blot检测海马组织中Bax、Bcl-2、Drp1及Opa1蛋白表达.结果 与假手术组比较,模型组大鼠回避潜伏时间延长,主动回避反应率和总回避反应率降低(P＜0.05);与模型组比较,茶多酚组、原花青素组、茶多酚+原花青素组及VE组大鼠回避潜伏时间明显缩短,主动回避反应率和总回避反应率升高(P＜0.05);与茶多酚组、原花青素组比较,茶多酚+原花青素组大鼠回避潜伏时间缩短,主动回避反应率升高(P＜0.05).与假手术组比较,模型组大鼠海马组织中Bax、Drp1蛋白表达明显上调,Bcl-2、Opa1蛋白表达下调,Bcl-2/Bax降低(P＜0.05);与模型组比较,茶多酚组、原花青素组、茶多酚+原花青素组及VE组大鼠海马组织中Bax、Drp1蛋白表达明显下调,Opa1蛋白表达上调,Bcl-2/Bax升高(P＜0.05);与茶多酚组比较,茶多酚+原花青素组大鼠海马组织中Bax蛋白表达明显下调(P＜0.05).结论 茶多酚和原花青素单独及联合干预均可通过调节线粒体分裂融合蛋白和线粒体凋亡途径而影响细胞凋亡,这可能是改善AD模型大鼠回避记忆的机制之一,联合干预效果更为显著.

目的 探讨法舒地尔对大鼠实验性蛛网膜下腔出血(SAH)早期脑损伤的行为能力及海马区神经细胞凋亡的影响.方法 雄性成年健康SD大鼠随机分为假手术(sham)组、蛛网膜下腔出血(SAH)组、药物(Fasudil)组,每组各8只.颈内动脉刺破法建立大鼠SAH模型,各组干预后72 h穿梭箱实验测试大鼠行为能力,麻醉处死,海马区组织进行HE染色观察细胞形态,TUNEL染色观察凋亡细胞数量.结果 对比sham组,SAH组逃避反应时间(ERT)延长,主动回避反应率(AARR)降低,海马区HE染色正常神经细胞较少,TUNEL染色表达细胞增多,差异均有统计学意义(均P<0.05).对比SAH组,Fa-sudil组ERT缩短,AARR升高,海马区HE染色正常神经细胞较多,TUNEL染色表达细胞减少,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 SAH后大鼠行为能力较差,海马区神经细胞凋亡明显.法舒地尔可减轻早期脑损伤,减少神经细胞的凋亡,改善大鼠的行为能力.

目的 探讨白藜芦醇联合大豆异黄酮干预对衰老模型大鼠回避记忆能力及海马组织神经元特异性核蛋白(neuron-specific nuclear protein,NeuN)阳性细胞数、葡萄糖转运蛋白(glucose transporter,GLUT)1及GLUT3基因和蛋白表达的影响.方法 60只SD雌性大鼠按体重随机分为6组:假手术组、衰老模型组、80 mg/kg白藜芦醇组、160 mg/kg大豆异黄酮组、80 mg/kg白藜芦醇+160 mg/kg大豆异黄酮组、0.8 mg/kg戊酸雌二醇阳性对照组.采用去卵巢合并腹腔注射100 mg/kg D-半乳糖制备衰老模型.干预组灌胃给予受试物,每天1次,持续12周.穿梭箱实验检测大鼠主、被动回避能力,免疫荧光染色检测NeuN阳性细胞数,实时荧光定量PCR和免疫印迹法分别检测海马GLUT1、GLUT3基因及蛋白水平.结果 与假手术组相比,模型组大鼠回避潜伏时间延长,主动回避反应率及总回避反应率降低,NeuN阳性细胞数减少,GLUT1和GLUT3基因及蛋白表达水平下调(P＜0.05).与模型组相比,3个干预组大鼠回避潜伏时间明显缩短(P＜0.01),主动回避反应率和总回避反应率升高,NeuN阳性细胞数显著增加,GLUT1和GLUT3基因及蛋白表达水平明显上调(P＜0.05或P＜0.01).与大豆异黄酮单独干预组相比,联合组主动回避反应率升高(P＜0.05).与白藜芦醇单独干预组相比,联合干预组回避潜伏时间缩短,主动回避反应率提高,NeuN阳性细胞数明显增加,GLUT3基因和蛋白表达水平增加(P＜0.05).联合干预组与戊酸雌二醇阳性对照组相比,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 白藜芦醇和大豆异黄酮单独及联合干预均可改善衰老大鼠模型学习记忆能力,其机制可能与上调海马GLUT1和GLUT3基因及蛋白表达、促进葡萄糖跨膜转运从而减少神经元丢失有关.

目的 评价右美托咪定对体外循环后围术期神经认知障碍老龄大鼠HPA轴和海马BDNF-ERK-CREB信号通路的影响.方法 选择老龄健康雄性Sprangue Dwaley大鼠120只,18～20月龄,体重400～550 g.采用随机数字表法将其分为4组(n=30):对照组(C组)、体外循环组(T组)、体外循环+右美托咪定组(D组)、体外循环+生理盐水组(NS组).C组大鼠不做任何处理,T组大鼠仅建立体外循环模型,D组大鼠腹腔注射50μg/kg右美托咪定后进行体外循环手术,NS组大鼠腹腔注射等剂量的生理盐水后进行体外循环手术.采用Morris水迷宫检测大鼠空间学习和记忆能力,采用穿梭箱实验检测大鼠学习条件反射能力,采用旷场实验检测大鼠在新异环境中的适应能力和认知能力,采用ELISA法测定大鼠血浆中CRH、ACTH和CORT浓度;采用蛋白印迹法测定大鼠海马内BDNF、ERK及CREB的表达,采用免疫组化法测定海马BDNF、ERK及CREB的阳性神经元计数.结果 与C组比较,T组、D组、NS组大鼠术后各时点逃避潜伏期延长,穿越原平台次数减少,主动回避反应次数减少,主动及被动回避反应潜伏期延长,直立次数减少,中央格停留时间延长,血浆中CRH、ACTH和CORT浓度升高,海马BDNF、ERK及CREB蛋白的表达和阳性神经元计数降低(P<0.05);与T组、NS组相比较,D组大鼠术后各时点逃避潜伏期缩短,穿越原平台次数增加,主动回避反应次数增加,主动及被动回避反应潜伏期缩短,直立次数增多,中央格停留时间缩短,血浆中CRH、ACTH和CORT浓度降低,海马BDNF、ERK及CREB蛋白的表达和阳性神经元计数升高(P<0.05).结论 右美托咪定可改善体外循环手术老龄大鼠围术期神经认知障碍,其机制可能与抑制HPA轴、激活海马BDNF-ERK-CREB信号通路有关.

选择30只SPF级雄性SD大鼠,随机分为对照组、15 min暴露组和30 min暴露组,每组10只.染毒24 h后,采用多功能行为学分析系统对大鼠进行行为学检测,测试完毕麻醉大鼠并采集脑组织检测神经递质水平,包括内源性一氧化碳(CO)、一氧化氮(NO)、谷氨酸(Glu)、乙酰胆碱酯酶(AChE)和多巴胺(DA);同时进行脑组织病理学检测.结果显示,30 min暴露组染毒结束后有1只大鼠死亡.与对照组相比,15 min暴露组和30 min暴露组在主动回避实验中条件反射建立率显著降低(P＜0.05);15 min暴露组和30 min暴露组建立条件反射标准所需训练次数显著高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);30 min暴露组条件反射消退成功率显著高于对照组(P＜0.01).与对照组相比,暴露组大鼠血清生化指标差异无统计学意义(P＞0.05).各暴露组CO、NO含量明显升高,差异有统计学意义(P＜0.01).暴露组脑组织呈炎性细胞浸润、水肿等病理改变.提示温压装药爆炸气体可造成大鼠学习记忆功能、神经递质以及脑组织不同程度的病理变化,受损程度可能与暴露时间相关.

目的 探讨茶多酚(Tea polyphenols,TP)改善衰老2型糖尿病(Type 2 diabetes mellitus,T2DM)雄鼠条件性学习记忆的机制.方法 40只8周龄Sprague Dawley(SD)雄性大鼠随机分为正常对照组(Control,CN)和造模组.采用高糖高脂饲料喂养合并腹腔注射D-半乳糖和链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)的方法建立衰老T2DM雄鼠模型.将成模的雄鼠根据血糖值随机分为衰老T2DM组(Model)、300 mg/kg TP组及3 mg/kg罗格列酮组(Rosiglitazone,RSG).连续干预8周后,穿梭箱实验检测雄鼠条件性学习记忆能力,Nissl染色计数海马锥体细胞层和齿状回颗粒细胞层阳性细胞数,Western Blot检测雄鼠海马组织突触素(Synaptophysin,SYN),突触后密度蛋白-95(Postsynaptic density protein-95,PSD-95),磷酸化 c-AMP 反应元件结合蛋白质(Phosphorylated cylic AMP response element binding protein,p-CREB)和脑源性神经营养因子(Brain-derived neurotrophic factor,BDNF)蛋白表达.One-way ANOVA法分析总体差异,方差齐者组间两两比较以LSD法进行分析,方差不齐者以Dunnett法进行分析,检验水准α=0.05.结果 各组雄鼠血糖值、回避潜伏时间、主动回避反应率、总回避反应率、CA1区Nissl染色阳性细胞数、PSD95、SYN、p-CREB和BDNF 蛋白表达量总体差异均有统计学意义(F=174.727,P＜0.001;F=24.963,P＜0.001;F=6.664,P=0.001;F=8.601,P＜0.001;F=4.142,P=0.048;F=10.034,P＜0.001;F=4.590,P=0.013;F=12.590,P＜0.001;F=6.272,P=0.004).其中与CN组相比,Model组雄鼠空腹血糖值(Fasting blood-glucose,FBG)明显升高,回避潜伏时间明显延长,主动回避反应率和总回避反应率明显降低;海马CA1区Nissl染色阳性细胞数减少;海马组织PSD95、SYN、p-CREB和BDNF的表达水平明显减少(P＜0.01).与Model组相比,300 mg/kg TP干预组雄鼠FBG明显降低,回避潜伏时间明显缩短,主动回避反应率和总回避反应率明显升高(P＜0.01),PSD95、SYN、p-CREB和BDNF的表达水平上调(P＜0.05);3 mg/kg RSG组雄鼠FBG明显降低(P＜0.01),主动回避反应率升高(P＜0.05).与3 mg/kg RSG组相比,300 mg/kg TP组雄鼠回避潜伏时间缩短、总回避反应率升高以及PSD95的表达水平增高均更明显(P＜0.05).结论 300 mg/kg TP可改善衰老T2DM模型雄鼠的条件性学习记忆能力,其作用可能与改善海马神经细胞形态、抑制细胞数量的减少、增加SYN、PSD95、p-CREB和BDNF的表达有关.