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白果仁35%乙醇-水洗脱部位多糖及多肽的含量测定
编辑人员丨2024/8/10
目的 对白果仁止咳有效部位35%乙醇-水洗脱部位中多糖及多肽的含量进行测定,为白果仁的综合开发和质量控制提供科学依据.方法 采用苯酚-硫酸法、双缩脲法,建立标准曲线,并进行精密度、稳定性、重复性、加样回收率的考察.结果 白果仁35%乙醇-水洗脱部位中多糖和多肽均在浓度范围内有良好的线性关系,方法学验证RSD值均小于2%,加样回收率分别为97.96%、97.94%,多糖含量为13.99%,多肽含量为31.41%.结论 本研究建立的白果仁35%乙醇-水洗脱部位多糖和多肽含量测定方法简单可行,稳定性和重现性好.
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编辑人员丨2024/8/10
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玉女煎体外抗炎最佳活性部位筛选及其物质基础研究
编辑人员丨2024/3/2
目的 筛选玉女煎复方体外抗炎的最佳活性部位,并对其成分进行分析,探讨其物质基础.方法 玉女煎复方采用水提取,提取物浓缩后经D101大孔树脂进行粗分,分为水洗脱、30%乙醇-水洗脱、60%乙醇-水洗脱及95%乙醇-水洗脱4个洗脱部位.采用脂多糖诱导小鼠巨噬细胞炎症模型评价玉女煎水提液及各洗脱部位的抗炎活性,使用MTT法和Griess法检测细胞活力和一氧化氮生成量.随后对筛选出的最佳活性部位的抗炎活性进行验证.采用ELISA法检测IL-1β、TNF-α、IL-6水平,用显微暗场成像法观察细胞形态,用免疫荧光实验检测细胞内NF-κB p65表达.最后通过中压色谱分离凝胶柱分离结合活性追踪的方法对最佳活性部位成分进行分离,用核磁共振仪进行鉴定.结果 玉女煎水提液、水洗脱部位、30%乙醇-水洗脱部位及60%乙醇-水洗脱部位均有抗炎活性,其中水洗脱部位和30%乙醇-水洗部位抗炎活性弱于水提液,60%乙醇-水洗脱部位抗炎活性最强,95%乙醇-水洗脱部位无抗炎活性.60%乙醇-水洗脱部位对脂多糖诱导的细胞形态改变、NF-κB p65表达及入核增加的抑制作用最强,从该部位分离出了sonnerphenolic B、(+)-nyasol、broussonin A、2,4-二甲基苯甲酸和2,4-二羟基苯甲酸5个化合物,其中3个归属知母.结论 60%乙醇-水洗脱部位为玉女煎抗炎的最佳活性部位,知母可能是其抗炎活性的主要贡献者.
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编辑人员丨2024/3/2
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太子参抗心肌细胞缺氧/复氧损伤的活性部位筛选及作用机制研究
编辑人员丨2023/8/6
目的:筛选太子参抗心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的活性部位,并探讨其作用机制.方法:太子参药材水提物经D101大孔吸附树脂柱以水-乙醇梯度洗脱,得水洗脱部位(Fr.A)、30%乙醇洗脱部位(Fr.B)、50%乙醇洗脱部位(Fr.C)、95%乙醇洗脱部位(Fr.D).采用化学缺氧法以连二亚硫酸钠复制大鼠H9c2心肌细胞H/R损伤模型,采用MTS法检测经太子参各部位低、中、高剂量(Fr.A、Fr.B、Fr.C低、中、高剂量均分别为750、1500、3000 mg/L,Fr.D低、中、高剂量分别为5、10、20 mg/L)预处理后的细胞存活率,筛选活性最强部位.分别采用微板法、硫代巴比妥酸比色法、WST-1法测定经太子参活性最强部位低、中、高剂量预处理后细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性以及细胞内丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性,采用流式细胞术检测细胞凋亡率,采用蛋白质印迹法检测细胞胱天蛋白酶3(Caspase-3)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达水平.结果:经4个部位预处理后,Fr.A高剂量组,Fr.B高剂量组,Fr.C各剂量组的细胞存活率均较模型组显著升高(P<0.05或P<0.01),且以Fr.C的活性最强.经Fr.C预处理后,各剂量组细胞培养液中LDH活性,中、高剂量组细胞内MDA含量、细胞凋亡率及Caspase-3和Bax蛋白的表达量均较模型组显著下降(P<0.05或P<0.01);高剂量组细胞内SOD活性以及中、高剂量组细胞Bcl-2蛋白的表达量均较模型组显著升高(P<0.05).结论:太子参Fr.A、Fr.B、Fr.C部位均具有抗心肌细胞H/R损伤的作用,其中以Fr.C的活性最强;Fr.C抗心肌细胞H/R损伤作用可能与其改善细胞的氧化应激状态,提高细胞清除氧自由基的能力,降低细胞脂质过氧化程度,抑制细胞凋亡,上调Bcl-2蛋白表达以及下调Caspase-3、Bax蛋白表达有关.
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编辑人员丨2023/8/6
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对叶百部抗肺炎支原体活性部位的血清药物化学研究
编辑人员丨2023/8/6
目的:应用血清药物化学理论分析检测对叶百部抗肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,MP)活性部位的体内成分.方法:利用D101大孔树脂进行梯度洗脱,不同洗脱部位进行抗MP实验,测定其最小抑菌浓度值.采用超高效液相色谱与飞行时间质谱联用(UPLC-Q-TOF-MS/MS)及MetaboLynx数据处理技术分析鉴定抗MP活性部位的血中移行成分.分析采用Acquity UPLC BEH C18色谱柱,流动相为0.1%甲酸水溶液(A)-0.1%甲酸乙腈(B),梯度洗脱,流速为0.40 mL·min-1,柱温为45℃.结果:比较大孔树脂富集各洗脱部位最小抑菌浓度,水洗脱部位为29.41 mg· mL-,20%乙醇洗脱部位为15.62mg·mL-,50%乙醇洗脱部位为10.42 mg· mL-1,90%乙醇洗脱部位为7.81 mg·mL-1.检测并鉴定了90%乙醇洗脱部位灌胃大鼠血中移行成分54个,包括14个原型成分和40个代谢产物.结论:对叶百部经大孔树脂富集90%乙醇洗脱部位抗MP活性最强,为抗MP活性部位.金刚大碱、百部新碱、对叶百部碱、新对叶百部碱、异对叶百部碱、N-氧-对叶百部碱、对叶百部碱J以及对叶百部碱H等成分可能为对叶百部抗MP的部分物质基础.
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编辑人员丨2023/8/6
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小檗皮总生物碱提取物的大孔树脂纯化工艺与质量标准考察
编辑人员丨2023/8/6
目的:优选小檗皮总生物碱提取物的大孔树脂纯化工艺,并建立其质量标准,为该有效部位的制剂开发提供参考.方法:采用酸性染料比色法考察小檗皮总生物碱提取物的纯化T艺,考察的工艺参数包括上样液质量浓度、上样速度、树脂柱径高比、水洗用量、洗脱剂体积分数及用量、洗脱流速等.采用HPLC测定小檗皮总生物碱提取物中4种生物碱类成分(木兰花碱、盐酸药根碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱)的含量,流动相乙腈-0.1%磷酸水溶液梯度洗脱,检测波长270 nm,确定最佳纯化工艺.按2015年版《中国药典》的要求进行小檗皮总生物碱纯化物的薄层色谱鉴别、含量测定、特征图谱等质量标准研究.结果:小檗皮总生物碱提取物的最佳纯化条件为采用HPD100型大孔树脂10 g,树脂柱径高比1:8,上样液质量浓度11 g·L-1,上样液体积50 mL,上样流速1 mL· min-1,加4 BV水洗脱(1 BV =15 mL),加30%乙醇9 BV洗脱;纯化后小檗皮总生物碱的转移率>80%,纯度>65%.建立了小檗皮总生物碱纯化物的质量标准,特征图谱中共有峰有19个,整体相似度均> 0.99.结论:优选的纯化工艺稳定可行,建立的质量标准可靠,适用于小檗皮总生物碱提取物的纯化及质量控制.
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编辑人员丨2023/8/6
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消肿止痛液消肿、促溃疡面愈合、镇痛的有效部位筛选
编辑人员丨2023/8/6
目的:筛选消肿止痛液具有消肿、促溃疡面愈合、镇痛的有效部位,为其二次开发为软膏剂提供参考.方法:采用D101大孔树脂分离得到消肿止痛液的水洗脱部位和20%、40%、60%、95%乙醇洗脱部位.将120只SD大鼠随机分为正常组(n=8)和造模组(n=112);正常组大鼠不作处理,造模组大鼠采用肛周皮肤注射75%冰醋酸致肛周溃疡复制大鼠痔疮模型;将96只成模大鼠随机分为模型组[空白软膏基质0.51 g/(kg· d)],阳性组[马应龙麝香痔疮膏0.51 g/(kg·d)],消肿止痛液及其水洗脱部位和20%、40%、60%乙醇洗脱部位的高、低剂量组[按生药计给药剂量均分别为8.34、Z78 g/(kg·d),均制成含药软膏],每组8只;肛周涂抹给药,每天给药2次,连续给药7d;观察给药第3、7天大鼠肛周局部症状以及给药第7天大鼠肛周局部黏膜组织病理形态并分别进行评分,考察各洗脱部位的消肿、促溃疡面愈合作用.分别取120只ICR小鼠随机分为模型组[空白软膏基质1.03 g/(kg·d)]、阳性组[马应龙麝香痔疮膏1.03 g/(kg·d)]和消肿止痛液及其各洗脱部位的高、低剂量组[按生药计均分别为16.65、5.55 g/(kg·d),均制成含药软膏],每组10只;经皮给药,每天给药2次,连续给药3d;末次给药30 min后,分别通过醋酸扭体实验检测小鼠的扭体潜伏时间、15rmin扭体次数以及热板致痛实验检测小鼠的痛阈值,考察各洗脱部位的全身和局部镇痛作用.结果:在消肿、促溃疡面愈合考察实验中,与正常组比较,模型组大鼠在给药第3、7天肛周局部症状评分以及在给药第7天肛周局部黏膜组织病理评分均显著升高(P<0.01);与模型组比较,阳性组和40%乙醇洗脱部位高、低剂量组大鼠上述评分均显著降低(P<0.05或P<0.01),20%乙醇洗脱部位高剂量组大鼠在给药第3、7天以及60%乙醇洗脱部位组大鼠在给药第7天肛周局部症状评分显著降低(P<0.05).在镇痛考察实验中,与模型组比较,阳性组和40%乙醇洗脱部位高、低剂量组以及60%乙醇洗脱部位高剂量组小鼠的扭体潜伏时间显著缩短、15 rmin扭体次数均显著减少(P<0.05或P<0.01),20%乙醇洗脱部位高剂量组小鼠扭体潜伏时间显著缩短(P<0.05);阳性组、40%乙醇洗脱部位高、低剂量组小鼠给药后痛阈值显著升高(P<0.05或P<0.01).结论:消肿止痛液40%乙醇洗脱部位具有较好的消肿、促溃疡面愈合和镇痛作用.
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编辑人员丨2023/8/6
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芍苓汤改善豚鼠银屑病皮损活性成分初探
编辑人员丨2023/8/6
目的:探究芍苓汤改善豚鼠银屑病皮损的药效作用物质基础.方法:将芍苓汤复方按照极性分为乙酸乙酯部位(Ⅰ)、水洗脱部位(Ⅱ)、50%乙醇部位(Ⅲ)、95%醇洗脱部位(Ⅳ)考察其对盐酸普萘洛尔诱导豚鼠银屑病样模型的改善作用,以Baker评分量化药效结果;对芍苓汤不同部位成分进行分析,考察药效-成分相关性.结果:与正常组比较,模型组Baker评分显著增加(P<0.01).芍苓汤和甲氨蝶呤均能改善豚鼠耳部病变,Baker评分显著降低(P<0.01),Baker评分抑制率分别为47.7%、42.2%、60.0%和61.3%.成分分析结果显示,部位Ⅰ主要含有落新妇苷、芍药苷及其异构体,部位Ⅲ主要含芍药苷.部位Ⅱ和Ⅳ在当前色谱条件下无可检测成分.结论:芍苓汤的主要活性成分为芍药苷、落新妇苷及其异构体,水洗脱部位具活性,其成分有待进一步研究.
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编辑人员丨2023/8/6
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鬼箭羽体外抗病毒有效部位研究
编辑人员丨2023/8/6
目的:探索鬼箭羽不同提取方法对不同病毒的体外抑制作用,并确定最佳分离纯化效果的大孔树脂型号.方法:分别用蒸馏水、95%乙醇、乙酸乙酯提取鬼箭羽,收集浓缩液.采用细胞体外病毒感染模型,进行不同病毒体外抗病毒作用评价,通过显微镜下观察细胞病变效应,判断不同提取方法对不同病毒的抑制作用;通过大孔树脂吸附法进行纯化分离,确定最佳大孔树脂型号.结果:经过初步筛选鬼箭羽水提醇沉后的上清液对RSV的抑制作用最强,TI值为34.91;HPD-100树脂对鬼箭羽的分离纯化效果最佳,水洗脱部位TI值为52.000.结论:确定其最敏感菌株为呼吸道合胞病毒,并确定其水提醇沉上清液部分的效果最佳,经HPD-100吸附后水洗脱液的抗病毒效果有了明显提高.
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编辑人员丨2023/8/6
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HPD100与D101大孔吸附树脂纯化禾本科芦笋总黄酮与总酚酸研究
编辑人员丨2023/8/5
目的:将HPD100与D101大孔吸附树脂纯化禾本科芦笋总黄酮与总酚酸,优选总黄酮与总酚酸纯化工艺.方法:测定静态吸附率、解吸率、静态吸附曲线来评价HPD100大孔吸附树脂与D101大孔树脂对芦笋中总黄酮与总酚酸的静态吸附性能;然后对径高比、洗脱溶剂、水洗体积、洗脱剂量等考察获取动态纯化工艺.结果:总黄酮与总酚酸在HPD100大孔树脂上静态吸附量为分别为38.23 mg·g-1与22.40 mg·g-1,解吸率大小分别为68.95%与79.05%.动态优选的结果为浓度1∶0.25,上样量4 BV,径高比1∶4,静置4h,9 BV水洗,50 ml 90%乙醇洗脱,总黄酮与总酚酸纯度分别达34.90%与20.07%.总黄酮与总酚酸在D101大孔树脂上静态吸附量为分别为40.05 mg·g-1与32 mg·g-1,解吸率大小分别为62.78%与71.74%.动态优选的结果为浓度1∶0.25,上样量3 BV,径高比1∶5,静置4h,7 BV水洗,60 ml 90%乙醇洗脱,总黄酮与总酚酸纯度分别达34.10%与17.27%.结论:HPD100与D101大孔吸附树脂可以用于禾本科芦笋中总黄酮与总酚酸有效部位的纯化.
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编辑人员丨2023/8/5
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大孔树脂纯化淫羊藿中朝藿定与淫羊藿苷工艺研究
编辑人员丨2023/8/5
目的 考察大孔树脂纯化淫羊藿中朝藿定与淫羊藿苷的最佳工艺条件,并且对最佳工艺富集部位进行初步表征.方法 以朝藿定A1、A、B、C及淫羊藿苷为检测指标,采用静态吸附实验对5种大孔树脂进行筛选,通过动态吸附实验考察上柱液质量浓度、最大上样量、上样体积流量、水洗体积、除杂乙醇及洗脱乙醇体积分数、除杂乙醇及洗脱乙醇体积、径高比来优选最佳工艺条件,最后以UPLC-Q-TOF/MS、HPLC、紫外分光光度法对最佳工艺富集部位进行表征.结果 确定最佳大孔树脂型号为AB-8,柱径高比为1:7,以生药0.5 g/mL的淫羊藿上柱液上样6 BV,以6 BV/h的体积流量进行动态吸附,以5 BV水和5 BV 20%乙醇除杂,以6 BV 50%乙醇洗脱,除杂及洗脱体积流量均为6 BV/h.纯化后总黄酮质量分数为63.29%,朝藿定A1、A、B、C及淫羊藿苷总量为40.48%,朝藿定A1、A、B、C及淫羊藿苷质量分数分别为1.63%、2.52%、16.36%、5.51%、14.46%.结论 经验证实验,AB-8型大孔树脂纯化淫羊藿中朝藿定与淫羊藿苷的工艺稳定、合理、可行.经化学表征,富集部位主要为黄酮类成分,且黄酮类成分中以朝藿定与淫羊藿苷为主,表明最佳纯化工艺可以用于此类成分的纯化富集.
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编辑人员丨2023/8/5
