目的 探讨梁晓春教授治疗糖尿病微血管病变用药经验.方法 采用回顾性真实世界研究方法,以北京协和医院信息系统电子病历为载体,采集梁晓春教授2021年1月至2022年12月门诊治疗糖尿病微血管病变患者的临床信息,构建数据库并将其录入中医传承计算平台(V3.5),运用关联规则、聚类分析等方法分析病案处方的用药频次、性味归经、常用药物组合,总结梁晓春教授治疗糖尿病微血管病变的治则治法和用药规律.结果 共整理梁晓春教授治疗糖尿病微血管病变的验方301则,中药211味.使用次数最多的药物为桑白皮、菟丝子、鸭跖草、女贞子、鬼箭羽、倒扣草等.性味多甘寒,归经多属于肝、脾、肾经.用药关联分析得出最核心的药物组合为:菟丝子-女贞子、菟丝子-倒扣草、菟丝子-鸭跖草、菟丝子-桑白皮、女贞子-倒扣草、倒扣草-土茯苓、女贞子-桑白皮、女贞子-鸭跖草.聚类分析得出4个核心处方为:女贞子-菟丝子-桑白皮-鸭跖草-鬼箭羽-倒扣草、鸭跖草-桑白皮-葛根-丹参-菟丝子-女贞子、女贞子-鸭跖草-菟丝子-桑白皮-川芎-鸡血藤、桑白皮-菟丝子-荷叶-鸭跖草-女贞子-川芎.结论 梁晓春教授治疗糖尿病微血管病变以活血化瘀、祛痰泄浊、补虚扶正为主要治疗原则.

目的:探讨鬼箭羽对糖尿病肾病小鼠肾脏形态结构及功能的影响.方法:10只7周龄db/m小鼠为空白组;60只db/db小鼠随机分为模型组,鬼箭羽低、中、高剂量[1.5、3.0、6.0 g/(kg·d)]组和厄贝沙坦[20 mg/(kg·d)]组,每组12只;空白组和模型组灌胃生理盐水,余4组分别灌胃相应药物,连续给药12周.实验期间观察小鼠一般状态,给药前后检测空腹血糖、24 h尿量和饮水量.末次给药后检测尿白蛋白/肌酐(UACR)、血肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN);处死小鼠,称重双肾,计算肾脏指数(KI);取左肾组织,HE、PAS、Masson染色,观察组织学表现;分离右肾皮质,透射电镜下观察超微结构.结果:与模型组比较,鬼箭羽高剂量组及厄贝沙坦组小鼠KI、空腹血糖、SCr、BUN、UACR均降低(P均＜0.05),系膜基质百分比及胶原面积百分比降低(P＜0.05),肾脏病理损害减轻,肾脏基底膜厚度减少(P＜0.05),足突融合改善.结论:高剂量鬼箭羽可有效降低糖尿病肾病小鼠的血糖,修复肾脏功能及结构,对糖尿病肾病有较好的治疗作用.

肝纤维化是各种慢性肝损伤的病理过程,若不及时治疗,最终可能导致肝硬化或肝癌.Janus激酶/信号转导及转录激活蛋白(JAK/STAT)信号通路与肝纤维化的发生发展密切相关.本文基于JAK/STAT信号通路总结了中药活性成分及复方改善肝纤维化的研究进展,发现活血化瘀类(如鬼箭羽醇、紫杉醇等成分及二十五味松石丸、肝复康等复方)、清热解毒类(如桦木酸、杠板归总黄酮等成分及片仔癀、克癀胶囊等复方)、疏肝行气类(如秦皮素、葫芦素B等成分及柴胡疏肝散、小柴胡汤等复方)中药活性成分和复方均可通过抑制JAK/STAT信号通路活性,降低炎症反应,抑制肝星状细胞增殖等,发挥改善肝纤维化的作用.

目的 结合GEO数据库利用网络药理学、分子对接技术及动物实验探究鬼箭羽治疗糖尿病肾病(DKD)的潜在作用机制.方法 通过TCMSP、PubChem及Swiss Target Prediction数据库获取鬼箭羽的活性成分和作用靶点.利用GEO数据库找出与DKD相关基因芯片,使用R语言分析筛选出差异表达基因,结合GeneCards、DisGeNet、OMIM以及TTD疾病数据库整合获取DKD的治疗靶点.利用Venny2.1.0平台将药物与DKD相关的靶基因取交,利用STRING平台构建蛋白-蛋白互作网络图,并利用Cytoscape3.8.2软件进行核心靶点的拓扑属性分析以及"药物-成分-靶点-疾病"网络图构建;利用David平台进行KEGG与GO分析.利用Autodock vina V1.2.0软件对核心靶点及主要药效成分进行分子对接,并通过db小鼠动物实验进一步加以验证.结果 符合条件的基因芯片为GSE96804、GSE30528和GSE30529,共包含60例患病和45例正常样本数据,R语言分析得到111个差异基因.网络药理学分析显示鬼箭羽相关靶基因共226种,DKD相关靶基因共4252种,二者取交得到鬼箭羽治疗DKD的潜在靶基因共161种;PPI网络图中筛选出关键核心靶基因为SRC、EGFR、AKT1等,"药物-成分-靶点-疾病"网络图得到鬼箭羽的主要核心活性成分为槲皮素、山奈酚、香叶木素、柚皮素.GO和KEGG富集分析显示,鬼箭羽治疗DKD的生物过程与外源刺激的反应、蛋白质磷酸化等有关,可能主要通过调节EGFR酪氨酸激酶抑制剂耐药通路发挥作用.分子对接结果显示鬼箭羽的主要核心活性成分与关键核心靶点具有良好的结合活性.体内动物实验结果证明鬼箭羽能够改善肾脏组织的病理学变化,且显著抑制了SRC、EGFR、AKT1的表达(P<0.05),延缓DKD的进一步恶化.结论 鬼箭羽可能是通过槲皮素、山奈酚、香叶木素、柚皮素等多种活性成分调控SRC、EGFR、AKT1等基因表达,从而影响EGFR酪氨酸激酶抑制剂耐药信号通路治疗DKD.

目的:基于高效液相色谱法和体外实验探究红景天-鬼箭羽药对(下称"天羽"药对)抗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的配伍规律及作用机制.方法:通过高效液相色谱法测定"天羽"药对的单煎液以及不同配伍比例的合煎液(2∶1,1∶1,1∶2)中红景天苷的含量.通过体外实验CCK-8、PCR和Western Blot法检测肿瘤坏死因子α诱导的人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(human fibroblast-like synoviocyte rheumatoid arthritis,HFLS-RA)增殖、mRNA及蛋白表达.结果:"天羽"药对不同配伍比例(2∶1,1∶1,1∶2)的合煎液中红景天苷的含量均高于红景天单煎液,且配伍比例为1∶1时红景天苷的含量最高.CCK-8实验结果表明,"天羽"药对可对HFLS-RA细胞的增殖起到抑制作用.PCR和Western blot实验结果表明,"天羽"药对可显著降低HFLS-RA细胞中p-PI3K、p-AKT、MMP1、MMP3和MMP9 mRNA和蛋白的表达,增加TIMP1 mRNA和蛋白表达.结论:"天羽"药对可有效抑制HFLS-RA细胞增殖,其最佳的配伍比例为1∶1,作用机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路,进而调节MMPs/TIMPs平衡有关.

黄芪、鬼箭羽是杨晓晖教授治疗糖尿病周围神经病变(DPN)的常用对药.本文通过对古代中医文献及现代药理研究的梳理,探讨黄芪、鬼箭羽对药治疗DPN的配伍特点和临床应用,认为二者具有气血同调、表里同治、寒温同用的功效,契合DPN"麻是气虚,木是痰湿死血""微型癥瘕"的病机特点,是杨晓晖教授"三同理论"防治糖尿病并发症的具体体现,临床效果显著,值得进一步探索研究.

目的 观察益肾通络方(熟地黄、黄芪、山萸肉、丹参、大黄、鬼箭羽、血竭)对db/db小鼠足细胞及小鼠肾足细胞MPC-5 焦亡的影响,探讨其抑制糖尿病肾脏疾病足细胞焦亡改善足细胞损伤的可能作用机制.方法 ①体内实验.以db/db小鼠(模型组及各给药组)及同窝对照db/m小鼠(对照组)为研究对象.db/db小鼠按体质量随机分为 5 组,除模型组外,其余 4 组分别按照每日1.0、2.5、5.0 g/kg剂量给予益肾通络方及 10 mg/kg缬沙坦灌胃,模型组及对照组给予等量蒸馏水.治疗8 周后,透射电子显微镜观察小鼠肾脏组织中足细胞数量与形态变化情况;对肾脏组织进行TUNEL染色,同时利用免疫荧光技术标记足细胞标志蛋白Wilms瘤基因 1(WT-1);酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测小鼠血清白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)水平;利用实时荧光定量PCR、Western blotting检测小鼠肾脏组织中NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、胱天蛋白酶-1(CASP1)、焦孔素D(GSDMD)mRNA及蛋白表达和激活情况.②体外实验.以糖基化终末期产物(AGEs)诱导的小鼠肾足细胞 MPC-5 为研究对象,利用 CCK-8 法及乳酸脱氢酶(LDH)释放检测技术,评价细胞成活率及细胞膜完整性;利用Q-PCR、Western blotting检测MPC-5细胞中NLRP3、CASP1、GSDMD的mRNA及蛋白表达和激活情况.结果 ①体内实验.与对照组相比,模型组小鼠肾脏足细胞足突出现融合,基底膜明显增厚,肾脏组织TUNEL染色阳性细胞比例增加,WT-1 阳性表达率下降,血清中IL-1β、IL-18 含量增加,NLRP3、CASP1、GSDMD、IL-1β及IL-18 mRNA表达上调,NLRP3 蛋白表达上调,CASP1、GSDMD被激活(均P＜0.05);与模型组相比,益肾通络方不同剂量干预后,肾脏组织的足细胞损伤情况缓解,肾脏组织TUNEL阳性细胞明显减少,血清中 IL-1β、IL-18 含量下降,NLRP3、CASP1、GSDMD mRNA 表达下调,NLRP3 蛋白表达下调,CASP1、GSDMD通路蛋白激活被抑制(均P＜0.05).②体外实验.与对照组相比,模型组MPC-5细胞活性下降,LDH释放增加,NLRP3、CASP1、GSDMD、IL-1β及IL-18 mRNA表达上调,NLRP3蛋白表达上调,CASP1、GSDMD被激活(均P＜0.05);给予益肾通络方作用后,足细胞损伤情况改善,LDH 释放率下降,NLRP3、CASP1、GSDMD mRNA 表达下调,NLRP3 蛋白表达下调,CASP1、GSDMD通路蛋白激活被抑制(均P＜0.05).结论 益肾通络方可能通过抑制NLRP3/CASP1/GSDMD信号通路的激活,减少足细胞焦亡的发生,进而发挥改善糖尿病肾脏疾病小鼠足细胞损伤的作用.

通过分析仝小林院士"态靶因果"辨治方略的理论内涵,基于桥本甲状腺的中医临床实践与现代医学累计成果,探索将"态靶因果"理论运用于桥本甲状腺炎的诊疗过程中以提高临床疗效.根据病程的发展阶段赋予桥本甲状腺炎新的命名,提出桥本甲状腺炎郁滞态→火毒态→虚损态的态势演变,并强调共态-痰瘀滞络态贯穿疾病始终.郁滞态可分为气郁痰阻证、痰结血瘀证;火毒态可分为肝火亢盛证、气阴两虚证;虚损态为脾肾阳虚证,据此初步确立治法方药.提出治疗共态的病靶方-芪箭消瘿方,枚举不同症靶的核心药物及标靶药-夏枯草、麻黄、黄芪、穿山龙、鬼箭羽、白芍等.强调审查因态,未病先防,已病防治,同时关注进展为甲状腺乳头状癌的可能性,及早治疗阻断传变.

目的:基于网络药理学方法分析阐释参麻益智方的配伍规律及其治疗血管性痴呆(VaD)的合理性.方法:对参麻益智方中4味中药人参、鬼箭羽、天麻、川芎、全方及不同配伍的预测靶点进行京都基因和基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析,构建"成分-靶点"网络等,发现每味中药及全方可能参与的信号通路.通过STRING网站构建参麻益智方靶点和VaD发病共同靶点的蛋白-蛋白互作(PPI)网络,并进行KEGG信号通路富集分析,发现参麻益智方治疗VaD的关键干预靶点及可能的作用机制.结果:参麻益智方的预测靶点共291个.KEGG信号通路富集分析发现每味中药及全方都参与代谢及血管功能调节.人参及天麻的共同作用靶点93个,人参及川芎的共同作用靶点91个,天麻和川芎可协助君药人参改善机体血管功能.参麻益智方靶点和VaD发病的共同靶点主要包括白细胞介素6、肿瘤坏死因子、载脂蛋白E、半胱氨酸蛋白酶3及脑源性神经营养因子等.KEGG信号通路富集分析显示参麻益智方治疗VaD的主要调控部位在血管,与改善脑内血管炎症有关.结论:参麻益智方配伍严谨、合理,其治疗VaD可能与改善脑血管内皮细胞炎症有关.

目的 探讨鬼箭羽醇提物对四氯化碳(CCl4)致小鼠肝纤维化的作用与机制.方法 80只C57BL/6♂小鼠随机分成8组:正常组、CCl4组、鬼箭羽醇提物早期治疗组(EAE)和后期治疗组(EAL),治疗组再分别分为低、中、高剂量组(EAE-L/M/H,EAL-L/M/H),每组10只.腹腔注射CCl4制备肝纤维化模型,共30 d,EAE和EAL分别于前15 d和后15 d灌胃不同剂量EA.处死后,HE和Masson染色观察肝组织与胶原纤维变化,ELISA检测血清(ALT)、(AST)、(TNF-α)变化,免疫组化和 Western blot检测 α-SMA、Colla-genⅠ的表达.结果 与正常组相比,EA 各组的肝指数、ALT、AST、TNF-α及α-SMA、CollagenⅠ的表达呈剂量依赖性的低于模型组(P<0.05或P<0.01);EAE和EAL各组肝组织形态与胶原纤维变化也明显呈剂量依赖性优于模型组;且EAE组在HE染色、Masson染色及α-SMA、CollagenⅠ的表达方面,效果明显优于EAL组(P<0.05).结论 EA呈剂量依赖性阻止CCl4所诱导的小鼠肝纤维化,且早期治疗效果明显,其机制可能与抑制TNF-α的生成,进而影响α-SMA、CollagenⅠ的表达有关.