遗传毒性物质亚硝胺类杂质是近年来化学药品质量控制重点关注和检验指标之一.对比分析中国、欧盟、美国等药品监管机构对亚硝胺杂质的监管策略,分析各药品监管部门的监管机构的亚硝胺杂质检验技术研究与应用进展,提出应加强亚硝胺杂质来源的监管科学研究、完善基于风险评估的监管策略、强化监管机构间监管策略和标准的协调、加快检验技术开发和利用好抽样检验监管手段保障药品供应链安全,为做好我国化学药品质量控制提供参考.

鉴于在血管紧张素Ⅱ受体拮抗药、组胺2受体拮抗药、抗微生物药和抗糖尿病药等药品中陆续发现亚硝胺类杂质,全球药品监管机构明显加大了对该类杂质的监管力度.各国药品监管机构陆续颁布了相应的指南性文件,制定了风险评估方法,提出了药品中亚硝胺类杂质的控制策略.我国也陆续出台了一系列与国际接轨的指南性文件,对亚硝胺类杂质进行控制.但实际工作中,对于化学药品中亚硝胺类杂质的产生途径、风险评估和控制策略等尚存难点.文章主要介绍了化学药品中亚硝胺类杂质形成的亚硝化途径和可能原因,及该类杂质分析方法的总体要求,同时总结了各国药品监管机构提出的药品中亚硝胺类杂质的风险评估及控制策略,为亚硝胺类杂质的进一步研究和控制提供参考.

亚硝胺类化合物由于其结构上存在N-N=O键,容易发生异构化现象.本研究在采用HPLC法对4-(甲基亚硝胺基)-1-(3-吡啶基)-1-丁酮(NNK)进行分析时,观察到双色谱峰现象.并采用PFP色谱柱对NNK及其异构体进行有效分离,采用LC/MS二级质谱扫描确认了色谱图中2个色谱峰的分子、离子以及碎片离子均相同.同时采用NMR法对一级和二级核磁信号进行结构归属,进一步确证NNK中的杂质峰均属于同分异构体.此外,通过变温试验,采用NMR法测定了NNK的异构化比例范围;通过HPLC的变温试验,确证了 NMR的结果.本研究通过多角度试验方法验证NNK存在互变异构体的现象,有利于NNK含量的准确分析,同时为该类异构化遗传毒性杂质的检测提供了理论依据.

目的:为完善亚硝胺杂质的科学监管及制药企业建立亚硝胺杂质的控制策略提供参考.方法:通过梳理中国、美国和欧盟关于亚硝胺杂质的监管及控制要求,进一步探讨亚硝胺杂质的来源、质量控制及风险评估.结果与结论:自2018年在沙坦类等药物中检出不可接受水平的亚硝胺杂质以来,国内外监管机构相继开展了化学药物中亚硝胺杂质的调查并发布相关控制措施以降低风险.亚硝胺杂质属于ICH M7(R1)中提及的"关注队列"物质,可以通过多种途径引入到化学药物或药物自身降解产生,实现对亚硝胺杂质的有效控制,对于保证药品的安全及质量可控至关重要.

目的 建立高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)同时测定注射用盐酸头孢甲肟中 7 种N-亚硝胺类基因毒性杂质(N-亚硝基二甲胺、N-亚硝基二乙胺、N-亚硝基二乙醇胺、N-亚硝基-N-甲基苯胺、N-亚硝基-N-乙基苯胺、N-亚硝基二异丙胺、N-亚硝基二正丁胺).方法 色谱柱为ACE EXCEL 3 C18-AR(3 μm,100 mm×4.6 mm),流动相为 0.1%甲酸甲醇溶液(A)-0.1%甲酸(B),梯度洗脱,流速 0.6 mL·min-1,采用 APCI 离子源,以正离子、多重反应监测(MRM)模式进行检测.结果 7种N-亚硝胺类基因毒性杂质在 1～20 ng·mL-1 与峰面积线性关系良好.回收率在78.9%～89.6%,RSD均小于6.1%.检测限低于1.5 ng?g-1.样品中各杂质均未检出.结论 该方法灵敏度高、专属性强,可用于注射用盐酸头孢甲肟中7种N-亚硝胺类基因毒性杂质的质量控制.

目的 建立同时测定氯沙坦钾原料药及其制剂中6种N-亚硝胺类基因毒性杂质含量的方法.方法 采用气相色谱-串联质谱(GC-MS/MS)法测定氯沙坦钾原料药、氯沙坦钾片、氯沙坦钾胶囊、氯沙坦钾氢氯噻嗪片中N-亚硝基二甲胺(NDMA)、N-亚硝基二乙胺(NDEA)、N-亚硝基-N-乙基异丙胺(NEiPA)、N-亚硝基二异丙胺(NDiPA)、N-亚硝基二苯胺(NDPA)、N-亚硝基二丁胺(NDBA)6种N-亚硝胺类基因毒性杂质含量.色谱柱为SHIMADZU SH-L-17Sil MS毛细管柱;采用程序升温;进样口温度为250℃;进样量为1 μL;载气为氦气,流速为1 mL/min.离子源为电子轰击源,离子源温度为250℃;溶剂延迟时间为3.1 min;采集模式为多反应监测模式.结果 NDMA、NDEA、NEiPA、NDiPA、NDPA、NDBA与其相邻色谱峰之间的分离效果均良好,分离度均大于3.8;其线性范围分别为4.9～486.0、4.9～488.5、4.5～451.5、6.8～683.5、5.2～525.0、5.2～520.0 ng/mL(r≥0.999 8),定量限分别为4.86、4.88、4.52、6.84、5.25、5.20 ng/mL,检测限分别为0.97、0.98、0.90、1.37、1.05、1.04 ng/mL,重复性试验的RSD为2.2%～5.6%(n=6),精密度试验的RSD为0.5%～1.4%(n=6),稳定性试验的RSD为1.5%～3.4%(n=5),低、中、高质量浓度回收率溶液的平均加样回收率为83.4%～103.0%(RSD为1.2%～6.3%,n=3).在氯沙坦钾原料药及其制剂中均未检出6种N-亚硝胺类基因毒性杂质.结论 该法分离效果好、准确性高、灵敏、简便,可用于氯沙坦钾原料药及其制剂中6种N-亚硝胺类基因毒性杂质的检测.

基因毒性杂质能够损伤DNA,造成DNA突变,致癌,严重危害人类健康.本文主要针对基因毒性杂质中的N-亚硝胺类化合物,介绍其毒理学研究进展以及食品、水体、烟草、药品等不同基质中检测方法的研究进展,包括毒理学作用机制、前处理方法、定量方法等,旨在为药品基质中N-亚硝胺类化合物的检测研究提供参考.

自"缬沙坦事件"之后,N-亚硝胺类基因毒性杂质引起了业界的广泛关注.本文概述了药物中N-亚硝胺类基因毒性杂质和相关检测方法的研究进展,以及近20年来国内外有关药物中基因毒性杂质监管指南的完善历程.N-亚硝胺类基因毒性杂质作为一类高反应活性的基因毒性杂质,主要来源于药物合成过程中发生的副反应,以及药物在储存或者运输过程中发生的氧化或还原等反应.所有的动物实验表明,N-亚硝胺类具有很强的致癌性.在理论上,所有药物都存在N-亚硝胺类杂质或被N-亚硝胺类杂质污染的风险,由于该类化合物在药物中常以痕量形式存在,在分析检测过程中药物基质干扰大,因此建立便捷、高效的分析方法是非常有必要的.

目的 进一步提高药品应急检验应对能力.方法 采用回顾性研究的方法,对江苏省食品药品监督检验研究院2019年亚硝胺类基因毒性杂质专项应急检验全过程工作进行梳理.结果 总结了专项应急检验中各环节的处置流程、管理特点和难点,提炼处置经验教训.结论 应急检验工作是对检验机构应急响应能力、技术实力的全面考验.需从事前、事中和事后制订系统的应对策略,构建完善的药品应急检验管理体系.

目的 建立超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定奥美沙坦酯中7个基因毒性杂质:N-亚硝基二甲胺、N-亚硝基-4-甲基-4-氨基丁酸、N-亚硝基二乙胺、N-亚硝基乙基异丙基胺、N-亚硝基二异丙胺、N-亚硝基二丙胺、N-亚硝基二丁胺.方法 采用Agilent poroshell PFP(100 mm×2.1 mm,2.7 μm)色谱柱;流动相为0.1％甲酸水溶液(A)-甲醇(B)梯度洗脱;体积流量0.4mL/min,柱温40℃;采用APCI离子源正离子扫描,多反应监测(MRM)模式下,对7个基因毒性杂质同时进行定量检测.结果 各杂质质量浓度在1～100ng/mL内具有良好线性关系,r＞0.995;低、中、高3个浓度的加样回收率(n=3)为83％～117％,RSD值为0.8％～4.1％,平均加样回收率为87％～106％;检测限范围为0.02～0.19 ng/mL,定量限为0.06～0.65ng/mL.4批奥美沙坦酯样品中均未检出杂质.结论 该方法灵敏度高,专属性强,可用于测定奥美沙坦酯原料药中7个亚硝胺类杂质,为奥美沙坦酯的质量控制提供参考.