目的:探讨p16和人乳头瘤病毒（HPV）分型联合检测在子宫颈上皮内瘤变（CIN）诊断中的应用价值。方法:选择2019年2月至2020年2月于陕西省宝鸡市中心医院就诊的患者8 346例，年龄25~65岁；其中经阴道镜活组织病理检查确诊存在子宫颈病变共2 882例。按照年龄段分组，分析各年龄段HPV感染情况；以活组织病理检查为金标准，按照病理分级结果，分析p16、HPV分型的检出率及其单项或联合检测对CIN的诊断效能。结果:p16和HPV阳性率最高的年龄段均为31~40岁[分别为47.42%（1 014/2 427）和36.84%（894/2 427）]，其次为41~50岁[分别为30.15%（907/2 942）和28.11%（827/2 942）]，各年龄段间p16和HPV阳性率差异均有统计学意义（均 P<0.05）。病理检查存在子宫颈病变的2 882例患者中，p16阳性2 572例（89.24%），HPV阳性2 169例（75.26%），随着病变进展，p16和HPV阳性率逐渐增高，其中炎症、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ、子宫颈鳞状细胞癌（SCC）p16阳性率分别为11.68%（23/197）、94.85%（1 105/1 165）、93.57%（771/824）、96.76%（538/556）、96.43%（135/140）；HPV阳性率分别为17.77%（35/197）、77.60%（904/1 165）、80.22%（661/824）、80.40%（447/556）、87.14%（122/140），且随着CIN病程进展，HPV感染逐渐以16/18型为主。HPV诊断CIN的灵敏度为75.26%，特异度为81.13%，阳性预测值为67.78%，阴性预测值为86.14%；p16诊断CIN的灵敏度为89.24%，特异度为84.74%，阳性预测值为75.51%，阴性预测值为93.72%；p16诊断效能高于HPV，差异有统计学意义（ P<0.05）；二者联合诊断CIN的灵敏度为94.10%，特异度为91.33%，阳性预测值为85.12%，阴性预测值为96.71%，均高于单项检测，差异均具有统计学意义（均 P<0.05）。 结论:HPV感染的发生以31~40岁女性为主，41~50岁次之，发病有年轻化的趋势。p16诊断CIN效能、优于HPV；p16和HPV联合检测可提高CIN诊断的灵敏度和特异度，降低漏诊率，对CIN的早期诊断和治疗有重要的临床价值。

目的:评估p16/Ki-67双染检测在高危（HR）人乳头瘤病毒（HPV）阳性人群中的分流效果。方法:于2016年4—12月，选取在郑州大学第二附属医院妇科就诊，并进行阴道镜检查且HPV DNA检测结果为HR-HPV感染的女性为调查对象，收集其宫颈脱落细胞标本，并分别进行p16/Ki-67双染检测、HPV16/18检测、LBC检测和活检病理诊断。以活检病理结果为结局指标，计算和比较3种检测分流HR-HPV阳性者的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值。结果:共发现HR-HPV阳性女性295例，年龄为（44.29±11.48）岁，其中p16/Ki-67双染检测、HPV16/18检测和LBC检测的阳性率分别为70.17%（207例）、56.95%（168例）和85.76%（253例）。以CIN2+为疾病终点指标时，3种检测方法中，p16/Ki-67双染检测的灵敏度为90.00%（95 %CI：85.06%~93.43%），高于HPV16/18检测，低于LBC检测；特异度最高，为71.58%（95 %CI:61.81%~79.67%）；阳性预测值最高，为86.96%（95 %CI:81.69%~90.88%）；阴性预测值最高，为77.27%（95 %CI:67.49%~84.78%）。以CIN3+为疾病终点指标时，p16/Ki-67双染检测的灵敏度为92.90%（95 %CI:87.74%~95.99%），低于LBC检测，高于HPV16/18检测；特异度为55.00%（95 %CI: 46.74%~63.00%），低于HPV16/18检测，高于LBC检测；阳性预测值为69.57%（95 %CI:62.99%~75.43%），低于HPV16/18检测，高于LBC检测；阴性预测值为87.50%（95 %CI:78.99%~92.87%），高于HPV16/18检测，低于LBC检测。 结论:p16/Ki-67双染检测技术作为HPV阳性妇女分流措施的效果优于HPV16/18检测和LBC检测方法。

目的:探讨肺癌患者人乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV）感染对机体免疫功能的影响及与预后的关系。方法:选取我院肺癌HPV阳性患者68例作为阳性组，另选取同期HPV阴性的肺癌患者48例作为阴性组。对比两组临床资料、机体免疫功能指标，分析机体免疫功能指标与肺癌患者HPV感染关系，并对比两组生存率。结果:阳性组中，高分化程度占比（90.91%）、有吸烟史占比（69.70%）均高于阴性组（68.75%、43.75%）（ P<0.05）；阳性组外周血CD3 +、CD4 +、CD4 +/CD8 +水平低于阴性组，CD8 +水平高于阴性组（ P<0.05）；机体免疫功能指标CD3 +、CD4 +、CD8 +、CD4 +/CD8 +为肺癌患者HPV感染的影响因素（ P<0.05）；阳性组生存率高于阴性组（ P<0.05）。 结论:肺癌患者感染HPV可导致机体免疫功能降低，且与患者预后密切相关。

目的:评价核酸分型定量法HPV检测（BMRT-HPV）用于子宫颈癌筛查的临床价值。方法:采用巢式抽样法，在2016年9月—2018年1月中国子宫颈癌筛查多中心研究（CHIMUST）项目5个筛查点的8 856例妇女中，选取其中医生取样或自取样标本中任一检测方法HPV阳性或HPV阴性但细胞学结果≥低级别鳞状上皮内病变（LSIL）者共1 495例行BMRT-HPV检测，同时按照1∶2比例抽取年龄和参加筛查时间相匹配的HPV与细胞学结果均为阴性的2 990例为对照。CHIMUST项目中对任一HPV阳性妇女回叫行阴道镜下子宫颈病灶四象限定点活检+随机活检+子宫颈管搔刮术方案子宫颈活检，以医生取样标本的基于实时PCR技术的Cobas 4800 HPV检测（Cobas-HPV）、基于第2代基因测序技术的HPV分型检测（SEQ-HPV）为对照，以子宫颈活检病理诊断为“金标准”，分析BMRT-HPV检测的高危型HPV（HR-HPV）亚型与Cobas-HPV、SEQ-HPV检测的一致性，并比较3种HPV检测方法对子宫颈上皮内瘤变（CIN）Ⅱ及以上级别病变（CIN Ⅱ +）、CIN Ⅲ及以上级别病变（CIN Ⅲ +）的筛查效率。 结果:（1）BMRT-HPV检测方法分别与Cobas-HPV、SEQ-HPV检测方法比较，检测HR-HPV亚型整体的一致性分别为94.8%、94.4%，Kappa值分别为0.827、0.814。（2）BMRT-HPV、Cobas-HPV、SEQ-HPV 3种方法对CINⅡ +筛查的敏感度分别为92.62%、94.26%、93.44%，两两比较，差异均无统计学意义（ P>0.05）；特异度分别为84.67%、83.25%、82.76%，BMRT-HPV检测对CINⅡ +筛查的特异度显著高于Cobas-HPV、SEQ-HPV检测（ P<0.01）。3种HPV检测方法对CIN Ⅲ +筛查的敏感度均达到100.00%，BMRT-HPV检测对CIN Ⅲ +筛查的特异度也显著高于Cobas-HPV、SEQ-HPV检测（分别为83.40%、81.95%、81.50%， P<0.01）。检出1例CINⅡ +或CIN Ⅲ +所需要行阴道镜下子宫颈活检病理检查的患者数，BMRT-HPV检测显著少于Cobas-HPV和SEQ-HPV检测（ P<0.01）。Cobas-HPV、SEQ-HPV、BMRT-HPV检测初筛阳性者分别以HPV 16和（或）18型（HPV 16/18型）阳性联合细胞学结果≥未明确诊断意义的不典型鳞状上皮细胞（ASCUS；即为方案一、二、三）进行二次分流，3种筛查方案对CIN Ⅱ +、CIN Ⅲ +筛查的敏感度分别比较均无显著差异（ P>0.05），但方案三（即BMRT-HPV初筛阳性者）筛查CIN Ⅱ +、CIN Ⅲ +的特异度显著高于方案一（即Cobas-HPV初筛阳性者）和方案二（即SEQ-HPV初筛阳性者； P<0.05），而且阴道镜转诊率方案三也显著低于方案一、二（ P<0.05）。 结论:BMRT-HPV检测筛查子宫颈癌具有与Cobas-HPV、SEQ-HPV检测相似的敏感度，但特异度更高，可作为子宫颈癌的初筛方法，值得临床推广使用。

目的:探讨人乳头瘤病毒（HPV）16亚型感染的子宫颈鳞状细胞癌患者下生殖道菌群的分布及特征。方法:前瞻性横断面研究。选取2019年8月至2020年6月就诊于中国医学科学院肿瘤医院的6例HPV16单一型别阳性子宫颈鳞状细胞癌患者（子宫颈癌组），选取同期体检人群中液基薄层细胞学检查未见异常且HPV阴性6名健康女性为健康对照组。患者抗肿瘤治疗前、健康对照者体检时用无菌棉拭子采集子宫颈后穹窿处分泌物，采用高通量测序技术扩增细菌16S rRNA基因V1-V2高变区，分析菌群分布及特征。结果:子宫颈癌组和健康对照组年龄分别为（51±8）岁、（48±3）岁，差异无统计学意义（ t=0.63， P=0.540），两组均有孕产史，无吸烟史。α多样性分析结果显示，与健康对照组比较，子宫颈癌组sobs指数（ t=3.25， P=0.009）及chao指数（ t=2.91， P=0.016）均高，差异均有统计学意义；子宫颈癌组shannon指数高（ t=2.07， P=0.065），simpson指数低（ t=1.74， P=0.113），但差异均无统计学意义。采用基于bray-curtis距离的主坐标分析（PCoA）进行数据降维分析显示，子宫颈癌组与健康对照组间β多样性差异具有统计学意义（ R2=0.154， P=0.018）。门水平上，与健康对照组相比，子宫颈癌组厚壁菌门占比低（30.21%比68.28%），拟杆菌门占比略低（6.87%比8.11%），而放线菌门（26.91%比14.42%）及变形菌门（27.33%比0.67%）占比高。属水平上，与健康对照组相比，子宫颈癌组乳杆菌属及棒状菌属占比低，失去优势菌群，而红球菌属、克雷伯菌属、气球菌属等占比明显高，且子宫颈癌组菌群种类较健康对照组多。线性判别分析（LDA）显示，属水平上，红球菌属（LDA=5.04）、克雷伯菌属（LDA=4.71）、肠杆菌属（LDA=4.29）、罗尔斯通菌属（LDA=4.28）、苍白杆菌属（LDA=4.23）、韦荣球菌属（LDA=4.14）为子宫颈癌组特征菌群；门水平上，健康对照组厚壁菌门（LDA=5.23）可为标志性物种；种水平上，子宫颈癌组红球菌（ P=0.025）、罗尔斯通菌（ P=0.045）、韦荣氏球菌（ P=0.044）、卡氏伯克霍尔德菌（ P=0.045）、假单胞菌（ P=0.043）等均较健康对照组多，差异均有统计学意义。 结论:HPV16单一型别阳性子宫颈鳞状细胞癌患者下生殖道菌群多样性、丰富度较健康女性增加，乳杆菌属丰度下降；红球菌属、克雷伯菌属可作为其标志性下生殖道菌群，但仍需进一步验证。

目的:探讨多环芳烃（PAHs）暴露对高危型人乳头瘤病毒（HR-HPV）感染转归的影响。方法:采用前瞻性队列研究方法，以课题组于2014年在山西省建立的自然队列人群中经病理学确诊的564名低度宫颈上皮内瘤变患者为研究对象。在收集人口学特征、HPV感染相关因素等基线资料的基础上，采用高效液相色谱法检测尿液中的1-羟基芘浓度以界定PAHs的暴露水平。于基线和24个月随访时应用导流杂交技术进行HPV分型检测，并以此确定HR-HPV的转归情况（持续感染、阳转阴、阴转阳和持续阴性）。结果:564名研究对象中共有483名完成了随访，随访率为85.6%（483/564），其中，持续感染率为52.4%（75/143）、同型持续感染率为35.1%（51/143）、阳转阴率为47.6%（68/143）、阴转阳率为19.7%（67/340）、持续阴性率为80.3%（273/340）。PAHs高暴露组HR-HPV持续感染率（a RR=3.22，95% CI：1.85~5.62）和阴转阳率（a RR=2.84，95% CI：1.64~4.94）均高于低暴露组，而HR-HPV持续阴性率则低于低暴露组（a RR=0.55，95% CI：0.43~0.70）。经限制性立方样条模型分析显示，PAHs暴露对HR-HPV持续感染和同型持续感染的影响呈上升型线性剂量-反应关系（ P>0.01），而对阴转阳和持续阴性的影响分别呈上升和下降型非线性剂量-反应关系（ P<0.01）。 结论:PAHs高暴露可促进HR-HPV持续感染和同型持续感染的发生，积极预防和控制PAHs的暴露对于阻止HR-HPV感染的发生和持续感染具有重要意义。

目的:探索宫颈不同疾病状态的年转归概率。方法:从PubMed、Embase和中国生物医学文献数据库检索和筛选宫颈癌自然史相关队列研究，检索时限为建库起至2020年5月。采用纽卡斯尔-渥太华量表（NOS）对纳入文献的质量进行评价；计算高危型人乳头瘤病毒（hrHPV）阳性、阴性和宫颈上皮内瘤样变1级（CIN1）人群宫颈不同疾病状态的年转归概率（95% CI）；采用随机效应模型对其进行荟萃分析；采用Egger′s检验评价发表偏倚；采用敏感性分析评估合并参数值的稳健程度；采用荟萃回归探索年转归概率异质性的来源。 结果:共纳入文献37篇，涉及hrHPV阴性、hrHPV阳性和CIN1人群的文献分别为12、20和15篇，NOS评分为（7.05 ±1.20）分。hrHPV阳性进展为CIN1、宫颈上皮内瘤变2级（CIN2）和宫颈上皮内瘤变3级及以上（CIN3+）的年转归概率（95% CI）分别为0.022 2（0.014 3，0.031 0）、0.017 0（0.012 0，0.022 0）和0.016 2（0.012 6，0.019 8）。hrHPV阴性人群进展为CIN1、CIN2、CIN3+的年转归概率（95% CI）分别为0.002 7（0.000 9，0.004 6）、0.000 7（0.000 3，0.001 1）和0.000 6（0.000 3，0.000 9）。CIN1患者逆转为正常、维持CIN1状态和进展为宫颈上皮内瘤变2级及以上（CIN2+）的年转归概率（95% CI）分别为0.578 1（0.369 9，0.786 3）、0.400 1（0.167 4，0.632 9）、0.056 9（0.034 9，0.078 9）。Egger′s检验显示：hrHPV阳性进展为CIN2和CIN3+，hrHPV阴性进展为CIN2，以及CIN1进展为CIN2+的年转归概率存在发表偏倚， t值分别为5.50、2.36、2.80和4.12（ P值均<0.05）。敏感性分析显示：剔除任一项研究后，hrHPV阳性人群进展为CIN1、CIN2和CIN3+的年转归概率范围分别为0.016 6~0.024 7、0.014 9~0.018 9和0.013 6~0.017 7；在hrHPV阴性人群中分别为0.002 4~0.003 5、0.000 6~0.000 9和0.000 5~0.000 7；CIN1逆转为正常、维持CIN1和进展为CIN2+的年转归概率范围分别为0.531 8~0.631 2、0.321 9~0.443 3和0.052 0~0.061 0。荟萃回归分析显示：地区、人群来源、人群细胞学诊断结果、随访时间和NOS评分等均与年转归概率异质性无关（均 P>0.05）。 结论:hrHPV阳性人群宫颈不同疾病状态的年转归概率高，CIN1人群只需密切观察随访。

目的:探讨p16/Ki-67蛋白免疫组织化学双染技术在人乳头瘤病毒（human papilloma virus，HPV）阳性口咽部鳞状细胞癌（oropharyngeal squamous cell carcinoma，OPSCC）诊断中的应用价值，提高HPV检测阳性准确率的最优指数。方法:选取上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔病理科自2014年5月至2020年5月诊断为OPSCC的患者153例，其中男性130例，女性23例，年龄（58.6±10.0）岁。选择HPV RNA原位杂交法为金标准判断其HPV状态。对所有患者行p16免疫组织化学法、p16/Ki-67蛋白双染法检测及预后分析，并以p16/Ki-67双阳性指数20%、40%、60%为阈值，分别与HPV RNA原位杂交法比较灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值及预测患者预后的能力。结果:153例OPSCC患者中HPV阴性114例，HPV阳性39例，OPSCC患者的HPV感染率为25.5%（39/153）。单一的p16阳性患者仅58.1%（36/62）为HPV阳性，且无法区分患者5年总体生存率。p16/Ki-67双阳性指数为40%时，HPV诊断能力最高（灵敏度=86.8%，特异度=94.8%，阳性预测值=84.6%，阴性预测值=95.6%，曲线下面积=0.897），且p16/Ki-67双阳性指数<40%与≥40%的患者5年生存率差异有统计学意义（ P=0.012）。 结论:与p16单染相比，p16/Ki-67蛋白双染法可提高HPV阳性诊断准确率，且以双阳性指数40%为阈值判断HPV状态时对HPV阳性OPSCC的诊断最准确。相对于单一的p16染色，p16/Ki-67蛋白免疫组织化学双染技术可以更好地检测HPV。

目的:探讨红细胞叶酸对高危型人乳头瘤病毒（HR-HPV）感染转归的影响。方法:从课题组于2014年在山西省建立的已婚女性自然人群队列中，选择经病理学确诊的低度宫颈上皮内瘤变（CINⅠ）患者564名为研究对象。采用前瞻性队列研究的方法，在基线收集研究对象一般人口学特征、HPV感染相关因素的同时，利用化学发光免疫分析法进行红细胞叶酸水平的测定，依此将研究对象分为不同水平暴露组并在第24个月对其进行随访。应用导流杂交技术对研究对象基线及随访结束时的宫颈脱落细胞进行HPV感染状况检测，依据其变化情况判定HR-HPV持续感染、由阳转阴、由阴转阳和持续阴性4种不同结局，探讨红细胞叶酸对HR-HPV感染转归的影响。采用SPSS 22.0软件进行资料分析。结果:483名女性完成了24个月的随访观察，随访率为85.64%（483/564），HR-HPV持续感染率为52.45%（75/143），由阳转阴率为47.55%（68/143），由阴转阳率为19.71%（67/340），持续阴性率为80.29%（273/340）。红细胞叶酸低水平组发生持续感染（a RR=2.50，95% CI：1.55~4.02）及由阴转阳（a RR=4.55，95% CI：2.52~8.23）的风险高于高水平组，特别是同型持续感染的发生风险（a RR=2.72，95% CI：1.51~4.90）较高。随着红细胞叶酸水平的降低，HR-HPV持续感染（趋势检验 χ2=20.62， P<0.001）、由阴转阳（趋势检验 χ2=31.76， P<0.001）和同型持续感染（趋势检验 χ2=20.09， P<0.001）的发生风险呈升高趋势，在异型持续感染中未见类似结果。 结论:红细胞叶酸低水平可增加HR-HPV持续感染和由阴转阳的风险，特别是HR-HPV感染女性，发生同型持续感染的危险性更大。

目的:研究不同检测标志物在宫颈腺癌组织学类型中的诊断价值，及其对患者预后的预测价值。方法:纳入2005—2010年中国医学科学院肿瘤医院宫颈腺癌患者54例，根据2018年国际宫颈腺癌分类标准将宫颈腺癌分为人乳头瘤病毒(HPV)相关性腺癌(HPVA)和非HPV相关性腺癌(NHPVA)。采用全组织切片聚合酶链反应(WTS－PCR)检测宫颈腺癌组织中的高危型人乳头瘤病毒(HR－HPV)DNA，E6/E7 mRNA原位杂交(ISH)技术检测HR－HPV E6/E7 mRNA。随机选取15例WTS－PCR检测阳性的组织样本进行激光显微切割聚合酶链反应(LCM－PCR)，验证WTS－PCR和E6/E7 mRNA ISH两种检测方法的准确性。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析标志物鉴别HPVA和NHPVA的效能。对宫颈腺癌患者预后影响因素进行单因素分析和多因素Cox比例风险模型回归分析。结果:54例宫颈腺癌患者中，30例为HPVA，24例为NHPVA。HPVA患者的HR－HPV DNA阳性率为96.7%(29/30)，HR－HPV E6/E7 mRNA阳性率为63.3%(19/30)；NHPVA患者的HR－HPV DNA阳性率为33.3%(8/24)，HR－HPV E6/E7 mRNA阳性率为0(0/24)，差异均有统计学意义(均 P<0.001)。LCM－PCR检测结果显示，5例患者腺上皮病变区域HR－HPV DNA阳性，余均阴性，与E6/E7 mRNA ISH检测结果一致性强( Kappa＝0.842， P＝0.001)。ROC曲线分析显示，HR－HPV DNA、HR－HPV E6/E7 mRNA和p16表达鉴别HPVA和NHPVA的AUC分别为0.817、0.817和0.692，灵敏度分别为96.7%、63.3%和80.0%，特异度分别为66.7%、100.0%和58.3%。HR－HPV DNA鉴别HPVA和NHPVA的AUC高于p16表达( P＝0.044)。HR－HPV DNA(WTS－PCR检测)阳性与阴性患者的生存率差异无统计学意义( P＝0.156)，而HR－HPV E6/E7 mRNA阳性与阴性患者、p16表达阳性与阴性患者的生存率差异均有统计学意义(均 P<0.05)。多因素Cox回归分析显示，国际妇产科联盟分期( HR＝19.875，95% CI：1.526~258.833)和宫旁受累( HR＝14.032，95% CI：1.281~153.761)是宫颈腺癌患者预后的独立影响因素。 结论:HPV E6/E7 mRNA更能反映宫颈腺癌组织中HPV的感染情况。HR－HPV E6/E7 mRNA与HR－HPV DNA(WTS－PCR检测)鉴别HPVA和NHPVA的效能相近，HR－HPV DNA的灵敏度较高，而HR－HPV E6/E7 mRNA的特异性较高，HR－HPV DNA鉴别HPVA和NHPVA的效能优于p16表达。HR－HPV E6/E7 mRNA和p16表达阳性宫颈腺癌患者的生存率均优于阴性患者。