目的:探讨氧化铜纳米酶对糖尿病小鼠全层皮肤缺损创面修复的作用及其机制。方法:(1)采用氯化铜与L-抗坏血酸反应的方法合成氧化铜纳米酶。采用透射电子显微镜观察氧化铜纳米酶大小和形貌，动态光散射粒度分析仪和纳米粒度电位仪分别分析其水合粒径和表面电位。(2)采用过氧化氢检测试剂盒、超氧阴离子检测试剂盒、3，3′，5，5′-四甲基联苯胺显色剂分别测定150 ng/mL氧化铜纳米酶的过氧化氢、超氧阴离子、羟自由基清除能力，计算过氧化氢、超氧阴离子、羟自由基清除比例(样本数均为3)。(3)将小鼠成纤维细胞系3T3细胞采用随机数字表法(分组方法下同)分为空白对照组、单纯过氧化氢组和过氧化氢＋氧化铜组，每组3孔。将终质量浓度25 ng/mL的氧化铜纳米酶加入过氧化氢＋氧化铜组细胞中预处理30 min。然后，在单纯过氧化氢组和过氧化氢＋氧化铜组细胞中各加入终物质的量浓度250 μmol/L过氧化氢，空白对照组常规培养。培养24 h后，采用2′，7′-二氯二氢荧光素二乙酸酯荧光探针检测细胞内活性氧水平(以绿色荧光强度表示)，细胞计数试剂盒8法检测并计算细胞存活率。(4)取10只6～8周龄雄性BALB/c小鼠(性别、鼠龄下同)，分为磷酸盐缓冲液(PBS)组与氧化铜组，每组5只。氧化铜组小鼠经尾静脉注射200 ng/mL的氧化铜纳米酶800 ng/kg，PBS组小鼠注射等体积的PBS。2组小鼠均每天注射1次，连续注射7 d。于第8天，取每组5只小鼠，采血行血细胞与血清生化分析，处死后收集心、肝、脾、肺和肾行苏木精-伊红(HE)染色后组织病理学观察。(5)取20只小鼠分为PBS组与氧化铜组，每组10只。采用链脲佐菌素及高糖高脂饮食法诱导糖尿病，并在其背部制作直径6 mm的全层皮肤缺损创面。伤后即刻，PBS组小鼠创面滴加20 μL PBS，氧化铜组小鼠创面滴加20 μL 200 ng/mL的氧化铜纳米酶，连续处理12 d。每组选定3只小鼠分别于伤后0(即刻)、3、6、9、12 d观察创面愈合情况，并计算创面未愈合面积。伤后6 d，每组取未行创面观察的3只小鼠，处死后酶联免疫吸附测定法测定创面组织中白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-6含量。伤后12 d，处死2组各剩余7只小鼠，行HE染色并观察创面新生上皮长度，行二氢乙锭荧光探针染色观察活性氧水平(以红色荧光强度表示)。对数据行单因素方差分析、重复测量方差分析、独立样本 t检验、Bonferroni检验。 结果:(1)制备的氧化铜纳米酶大小均匀，在干燥状态下平均直径为3.5～4.0 nm，水合粒径约为4.5 nm，表面电位为(-9.8±0.3)mV。综合判定，成功制备了氧化铜纳米酶。(2)氧化铜纳米酶分别处理2 h、10 min、5 min后，过氧化氢、超氧阴离子、羟自由基清除比例分别为(77±5)%、(45±5)%、(84±4)%。(3)培养24 h后，单纯过氧化氢组细胞内活性氧水平急剧增高，细胞形态异常且数量减少；过氧化氢＋氧化铜组细胞内活性氧水平明显降低，细胞形态与空白对照组相比无明显变化。单纯过氧化氢组细胞存活率明显低于空白对照组和过氧化氢＋氧化铜组( P<0.01)，而过氧化氢＋氧化铜组细胞存活率与空白对照组相近。(4)注射7 d后，PBS组和氧化铜组小鼠肝功能指标、肾功能指标、血细胞相关指标均相近；氧化铜组小鼠的心、肝、脾、肺和肾中，均未观察到组织坏死、充血或出血，与PBS组无明显差别。(5)氧化铜组小鼠创面相比PBS组表现出更快的愈合趋势，创面红肿情况较轻。氧化铜组小鼠伤后6、9、12 d创面未愈合面积分别为(28.8±1.9)、(17.6±3.8)、(10.4±1.8)mm 2，明显小于PBS组的(38.0±4.3)、(30.2±3.0)、(24.2±3.0)mm 2( t＝3.706、5.075、5.558， P<0.01)。伤后6 d，氧化铜组小鼠创面IL-1β、TNF-α、IL-6含量均明显低于PBS组( t＝6.115、11.762、11.725， P<0.01)。伤后12 d，氧化铜组小鼠创面新生上皮长度长于PBS组，创面组织活性氧水平明显低于PBS组。 结论:氧化铜纳米酶不仅具有良好的生物相容性，同时具有高效的活性氧清除活性，能够消除糖尿病小鼠全层皮肤缺损创面过量表达的活性氧，降低氧化应激、减轻炎症，促进创面修复。

目的:探讨铜绿假单胞菌注射液（pseudommonas aeruginosa in jection,PAI）治疗机器人甲状腺癌颈部淋巴结清扫术后乳糜漏的安全性和有效性。方法:回顾性分析2021年1月至2023年8月解放军第九六〇医院甲状腺乳腺外科机器人甲状腺手术的1 262例，28例术后发生乳糜漏。根据是否使用PAI分为对照组和注射组，对照组15例，男4例，女11例，年龄（46.20±9.02）岁，采用低脂饮食、负压吸引、加压包扎等治疗方法；注射组13例，男7例，女6例，年龄（41.00±8.87）岁，除采用低脂饮食、负压吸引、加压包扎的治疗方法外，注射PAI。统计分析两组淋巴结清扫（lymph node dissection, LND）数量、总引流量、引流量峰值、住院天数及注射组使用PAI后24 h内引流量下降率、注射后体温、注射次数、注射后拔管时间等指标。采用独立样本 t检验、Mann-Whitney U检验、 χ2检验或Fisher’s精确检验进行组间比较。 结果:两组年龄、性别、甲状腺切除范围、最高日引流量、总引流量差异均无统计学意义（ P>0.05）。注射组和对照组的LND数量为（49.15±23.05 vs. 30.80±11.76）枚（ P=0.012），住院时间为（11.77±4.64 vs. 16.40±6.42）d（ P=0.041），差异均有统计学意义。注射组使用PAI后，引流液较前一天下降69.56%±20.82%；12例注射1次PAI后顺利拔管，1例注射2次后顺利拔管；注射后平均拔管时间为（3.85±1.28）d；76.9%（10/13）患者使用PAI后48 h之内出现发热症状，注射后体温（38.05±0.89）℃，对症处理后体温恢复正常，除发热外无其他不良反应。 结论:PAI治疗机器人甲状腺癌颈部LND术后乳糜漏安全有效，可有效减少颈部引流量，缩短住院天数。

目的:分析肝豆状核变性患儿低铜饮食管理现状，为个体化低铜饮食指导提供参考和帮助。方法:采用问卷调查法与半结构式访谈法。问卷调查时采用便利抽样法，选取2021年8月—2022年10月于中国医学科学院北京协和医院儿科门诊及病房治疗的113名肝豆状核变性患儿的家长为研究对象，并采用自行设计的《肝豆状核变性患儿低铜饮食现状调查问卷》对其进行调查。半结构式访谈部分采用目的抽样法，募集符合入选标准的研究对象，信息达到饱和时不再纳入，最终纳入16名访谈对象。结果:问卷调查结果显示，肝豆状核变性患儿家长低铜饮食知识问卷部分，正确率最低的条目分别是"根据食物中含铜量决定该食物是否可以食用，如100 g食物中若含铜量超0.5 mg则禁止食用"和"以下豆类食物中（豆腐、腐竹、豆腐干、油豆腐），哪个含铜量最高"。113例患儿中，由家长完全管理低铜饮食的有55例，53例患儿与家长共同管理低铜饮食，自我管理低铜饮食的患儿4例。64例患儿目前遵循低铜饮食原则，只吃含铜量低的几大类食物；32例患儿在确保每日食物中总含铜量不超标的情况下，保证饮食多元化。半结构式访谈提炼的主题包括：患儿家长对低铜饮食的认知不足、家长对患儿在外就餐的担忧、家长对如何兼顾低铜饮食和营养均衡存在疑惑、希望医护人员在低铜饮食指导方面提供一定帮助。结论:肝豆状核变性患儿低铜饮食管理情况不佳；患儿家长缺乏低铜饮食相关知识且存在较多困惑，亟须医务人员提供更具体、丰富、操作性强的低铜饮食指导。

目的 探究宣肺解毒方对多重耐药铜绿假单胞菌肺炎的机理研究.方法 除空白组外,其余组采用气管插管的方法建立MDR-PA(9×108 CFU/mL,0.5 mL)肺炎大鼠模型,造模成功后随机分为模型组、宣肺解毒方低剂量组、宣肺解毒方中剂量组、宣肺解毒方高剂量组以及亚胺培南西司他丁组,每组 12 只;以上除空白组与模型组外,剩余给药组统称为干预治疗组.造模1d后,宣肺解毒方低、中、高剂量组分别给予相应剂量的宣肺解毒方(Xuanfei Jiedu Formula,XFJDF)灌胃,亚胺培南西司他丁组给予亚胺培南西司他丁(imipenem,IPM)腹腔注射,空白组和模型组给予生理盐水灌胃,每天 2 次,持续 7d.观察大鼠的一般状态、体重变化、肺湿重/肺干重(W/D),采用苏木素-伊红(HE)染色法于光镜下观察大鼠肺组织病理学改变,采用酶免疫吸附测定法检测大鼠血清中IL-1β、TNF-α、TGF-β、IL-6炎症因子水平,采用比色法检测大鼠血清中GSH含量与MPO活性,采用TBA法检测大鼠血清中MDA含量,试剂盒法检测总抗氧化能力T-AOC;采用免疫组化法对肺组织中TLR4、Myd88、NF-κBp65 蛋白进行定位与半定量观察,采用qPCR和Western Blot技术检测大鼠肺组织中TLR4、Myd88、NF-κBp65 mRNA和蛋白表达水平.结果 与空白组比,模型组大鼠反应迟缓,呼吸频率加快、呼吸杂音增多且出现不同程度寒颤,饮食饮水减少,体重下降;肺W/D(P＜0.01)显著升高,肺组织的肺泡腔以及肺支气管周围存有大量炎性细胞浸润,部分肺泡壁出现断裂融合形成气腔并伴有炎性渗出,肺间质增厚,局部可见肺纤维形成等;血清中IL-1β、TNF-α、TGF-β、IL-6水平明显升高(P＜0.01),MDA含量增加、MPO活性增强、GSH含量与T-AOC能力降低(P＜0.01),肺组织中TLR4、Myd88、NF-κBp65 mRNA和蛋白表达显著升高(P＜0.01).与模型组相比,干预治疗组均不同程度改善上述指标变化(P＜0.05,P＜0.01),以宣肺解毒方高剂量组以及亚胺培南西司他丁组最为显著(P＜0.05,P＜0.01).结论 宣肺解毒方能够显著改善MDR-PA大鼠的一般状态、体重、肺W/D以及肺病理,降低炎症与氧化应激反应,其作用机制可能与宣肺解毒方抑制肺组织中TLR4/Myd88/NF-κB通路表达有关.

肝豆状核变性(HLD)是由于ATP7B基因突变导致细胞内铜转运功能障碍,从而引起铜过度蓄积在各器官而导致的疾病.早期诊断和治疗可以改善HLD患者的预后,减少残疾和早期死亡.目前,治疗方法主要包括低铜饮食、药物治疗和肝移植.但低铜饮食并不能显著减少肠道上皮细胞铜吸收量且过度限制会造成正常组织细胞营养吸收障碍.现有的药物治疗方案经常面临患者依从性差、神经系统症状恶化等问题.肝移植的开展常因供体器官的短缺和终身免疫抑制治疗的需求而受限,而新疗法,如新型药物制剂、细胞治疗、基因治疗给HLD患者带来了新希望.

肝豆状核变性(hepatolenticular degeneration,HLD)又叫威尔逊病(Wilson disease,WD),是一种ATP7B基因突变导致的常染色体隐性遗传病,以铜离子代谢障碍为主要特征,发病年龄较广.由于ATP7B基因突变,ATP7B蛋白功能障碍,进入肝脏的铜离子不能合成铜蓝蛋白,亦不能通过胆汁进行排泄,有毒的铜离子异常沉积在肝脏、肾脏、脑、眼等多个部位,导致组织器官损伤和疾病表现,严重危害患者健康.WD 一经确诊需终身治疗,现有疗法包括低铜饮食、药物治疗、手术治疗等,但均存在对依从性要求高、疗效有限、有不良反应等问题,因此WD患者的医疗需求远未被满足.作为一种遗传性代谢性疾病,从病因入手,采用基因治疗的方式可从根本上纠正ATP7B基因异常状态.根据对载体的理解和已有研究,腺病毒(AdV)、慢病毒(LV)等载体存在表达时间短或插入毒性风险等问题,不适用于WD治疗.近年来,腺相关病毒(AAV)载体由于安全性好、免疫原性低、转导效率高、表达时间长等特点逐渐成为基因治疗的理想载体.本研究通过重点介绍ATP7B基因突变导致的铜代谢障碍疾病,陈述现有治疗方式的利弊,对一些在研的新方法和疾病治愈的可能性进行综合分析,简要总结疾病特点、致病机制、诊疗现状等,并分析目前基因治疗获得的结果与进展,对基因治疗用于WD治疗的必要性、科学性、及其前景进行理性的分析与展望.

目的 探讨低苯丙氨酸饮食对苯丙酮尿症患儿微量元素及血清营养指标水平的影响.方法 选取2006年3月至2022年3月该院收治的40例苯丙酮尿症患儿作为病例组,另选取同期该院各项检查正常的40例儿童作为对照组.病例组在入院后采用低苯丙氨酸饮食治疗,对照组采用正常饮食.比较两组一般资料、喂养行为、体格生长情况、微量元素及血清营养指标水平.结果 病例组呕吐、湿疹、喂养困难占比均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05);病例组干预后单独给孩子做饭、不与大人同时进餐、抢大人食物占比均明显高于干预前,且病例组干预后均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05);病例组干预前后出生身长、出生体质量、6个月后身高、6个月后体质量,以及病例组与对照组出生身长、出生体质量、6个月后身高、6个月后体质量比较,差异均无统计学意义(P＞0.05);病例组干预前钙、铁、锌、铜、镁水平均明显低于干预后,且病例组干预前均明显低于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05);病例组干预前血红蛋白、清蛋白、球蛋白、总蛋白水平均明显低于干预后,且病例组干预前均明显低于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 低苯丙氨酸饮食对苯丙酮尿症患儿微量元素及营养状况均有一定改善作用,可维持患儿正常的体格发育.

目的 探讨多孩生育环境下学龄前儿童饮食行为问题及其影响因素,为学龄前儿童养成良好的饮食习惯提供依据.方法 采取分层随机整群抽样方法,于2022年4-6月抽取铜陵市11所幼儿园2 647名学龄前儿童监护人,采用父母教养方式问卷、儿童饮食行为问题筛查评估问卷(IMFeD)、父母喂养风格量表(CFSQ)和自制问卷进行调查.采用多元线性回归分析学龄前儿童饮食行为的影响因素.结果 学龄前儿童饮食行为问题发生率为71.4％,以食欲缺乏发生率最高(55.6％).单孩家庭学龄前儿童发生食欲缺乏、挑食、不良进餐、不恰当期望的饮食行为问题检出率(60.6％,41.0％,32.0％,19.5％)均高于多孩家庭(51.7％,36.4％,27.2％,16.6％)(x2值分别为 20.05,5.95,7.16,3.92,P值均＜0.05).多孩家庭中,年龄差在5-＜10岁组的学龄前儿童发生害怕进食(2.3％)、潜在疾病状态(0.6％)的饮食行为问题检出率最低(x2 值分别为11.54,8.51,P值均＜0.05).多孩中,"大孩"的挑食、不良进餐习惯检出率(42.0％,32.5％)高于"二孩及三孩"(34.6％,25.6％)(x2值分别为6.15,6.38,P值均＜0.05).多元线性回归分析结果显示,家庭多孩(β=-1.40)、民主型教养方式(β=-0.07)、喂养反应总分越高(β=-0.33)均与学龄前儿童饮食行为问题发生呈负相关;母亲学历越低[高中和初中(β=0.87),小学及以下(β=3.69)]、日均视屏时间越长(β=0.10)、喂养要求总分越高(β=0.64)、溺爱型(β=0.21)、放任型(β=0.27)、不一致型(β=0.14)教养方式均与学龄前儿童饮食行为问题发生呈正相关(P值均＜0.05).结论 学龄前儿童饮食行为问题检出率较高;应重点关注单孩和多孩中的"大孩",同时考虑喂养风格和教养方式的适宜性,促进学龄前儿童良好饮食行为习惯的养成.

目的:观察肝豆扶木汤对 Wilson 病步态障碍痰瘀互结证的临床疗效.方法:将入组的 80 例Wilson病步态障碍痰瘀互结证患者采用随机数字表法分为对照组和治疗组,每组40 例.对照组在常规低铜饮食和保肝治疗的基础上予以二巯丙磺酸钠注射液排铜治疗;治疗组在对照组治疗方法的基础上联合肝豆扶木汤治疗.以8d为1 个疗程,共治疗3 个疗程,比较两组治疗前、2 个疗程末及3 个疗程末的改良Young量表评分、步态障碍测试结果[包括"起立—行走"时间(TUG)和Tinetti量表评分]、24 h尿铜含量.结果:治疗后对照组和治疗组的改良Young量表评分、"起立—行走"时间均低于治疗前,且治疗组的降低幅度大于对照组(P<0.05,P<0.01);Tinetti量表评分、24 h尿铜含量均较治疗前上升,且治疗组的上升幅度大于对照组(P<0.05,P<0.01).结论:肝豆扶木汤可以增加Wilson病步态障碍痰瘀互结证患者的铜排泄量,有效改善其步态障碍症状,减少起步时间,提高步行能力,从而延缓病程,提升独立生活水平,值得在临床中推广使用.

目的 探讨学龄前孤独症谱系(ASD)障碍儿童饮食行为与微量元素水平,并对两者的关系进行初步探究.方法 选取2021年12月至2022年6月深圳市龙岗妇幼保健院收治的孤独症谱系障碍儿童93例(病例组),选择同期健康儿童137 名(对照组)进行儿童饮食行为的问卷调查,对其中自愿参与抽血的人群使用电感耦合等离子体-质谱法检测钙、锌、镁、铁、钙、铅含量.比较两组儿童一般人口学特征、饮食行为各维度得分情况、饮食行为问题发生率和血微量元素及钙水平.结果 病例组挑食项和不良进食习惯项得分均高于对照组,而外因性进食项和主动进食能力项得分均低于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05);病例组饮食行为发生率在挑食项高于对照组,而在外因性进食项低于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05);病例组血钙含量高于对照组,而血铜含量低于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05);外因性进食项得分与铅含量呈显著负相关,食物响应项与钙水平含量呈显著正相关(P均<0.05).结论 学龄前ASD儿童饮食行为问题及微量元素缺乏问题均较严重,主要存在的饮食问题有挑食、食物响应、不良进食习惯和过饱响应,应给予学龄前ASD儿童饮食行为和微量元素更多关注和干预.