目的 探讨黄芪甲苷(astragaloside,AST)对多囊卵巢综合征(PCOS)小鼠性激素水平及卵巢衰老的影响.方法 30只雌性C57BL/6小鼠随机分为:正常对照组、模型组、AST组,每组10只.小鼠连续21 d颈背部皮下注射脱氢表雄酮(70 mg/kg)联合腹腔注射D-半乳糖(200 mg/kg)制备PCOS模型;黄芪甲苷干预组在造模成功后每天1次黄芪甲苷(50 mg/kg)灌胃给药,连续4周.给药最后10 d通过阴道涂片观察各组小鼠动情周期;给药结束后计算卵巢指数,HE染色观察卵巢组织病理学变化,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH)、雌二醇(estradiol,E2)、睾酮(testos-terone,T)和促黄体生成素(luteinizing hormone,LH)水平.免疫组织化学法检测各组小鼠卵巢组织衰老标志物β半乳糖苷酶l(GLB1)、P16、磷酸化P65(p-P65)表达水平,免疫印迹法检测各组小鼠卵巢组织GLB1、P16、p-P65及P65蛋白表达水平.结果 与对照组比较,模型组小鼠动情周期紊乱,卵巢指数增加(P＜0.05),卵巢呈多囊样改变,血清中T和LH含量显著增加(P＜0.05),E2和FSH含量显著降低(P＜0.05),卵巢组织GLB1、P16、p-P65蛋白水平显著上调(P＜0.05).与模型组比较,AST组小鼠动情周期恢复,卵巢指数降低(P＜0.05),卵巢多囊样明显减少,血清中T和LH含量显著减少(P＜0.05),E2和FSH含量显著增加(P＜0.05),卵巢组织中GLB1、P16和p-P65蛋白水平显著降低(P＜0.05),P65表达水平未见明显变化.结论 黄芪甲苷能有效平衡PCOS小鼠的性激素水平,缓解卵巢组织衰老,其机制可能与抑制NF-κB信号通路有关.

目的 原核表达并纯化麻疹病毒(measles virus,MV)核蛋白(N),免疫家兔后制备兔抗MV N抗血清,并鉴定其特异性.方法 以MV-S191疫苗株基因组为模板,PCR扩增N基因3个片段,构建重组表达质粒pGEX-MV-N1、pGEX-MV-N2和pGEX-MV-N3,分别转化至E.coli BL21(DE3)中诱导表达N-末端带有GST标签的融合蛋白GST-MV-N1、GST-MV-N2和GST-MV-N3,纯化后,分别与等体积弗氏完全佐剂(初次免疫)、弗氏不完全佐剂(加强免疫)混合,乳化均匀后各免疫1只雌性家兔,共免疫6次,采集全血,分离血清获得兔抗MV N抗血清,Western blot法及间接免疫荧光试验(indirect immunofluorescence assay,IFA)鉴定其特异性.结果 重组表达质粒 pGEX-MV-N1、pGEX-MV-N2 和pGEX-MV-N3经双酶切、PCR及测序鉴定证明构建正确;表达的GST-MV-N1和GST-MV-N3融合蛋白相对分子质量分别约42 000和39 000,主要以包涵体形式存在,纯度分别为96％和85％,而上清和沉淀中均未见GST-MV-N2融合蛋白的表达;兔抗MVN3抗血清能特异性识别MV-S191感染细胞后表达的N蛋白,且特异性高于兔抗MV-N1抗血清.结论 成功制备了兔抗MV N抗血清,为重组MV疫苗的研发以及MV结构蛋白抗体的制备提供了技术支持.

目的 优化基于ASTM F2131-02标准试验的重组人骨形态发生蛋白-2(recombinant human bone morphogenetic protein-2,rhBMP-2)体外生物活性的检测方法,并进行验证.方法 在美国试验材料学会(American Society for Testing Material,ASTM)建立方法的基础上,对检测细胞株(W-20-17及C2C12细胞)、rhBMP-2稀释方式(2及3倍系列稀释)、细胞培养时间(24、36、48、72h)、细胞冷冻温度(-20及-80 ℃)进行优化,并验证优化方法的特异性、中间精密性、线性及耐用性.应用优化方法检测不同厂家来源rhBMP-2的比活性.结果 确定采用C2C12细胞作为检测细胞;最佳rhBMP-2稀释方式为2倍系列稀释;最佳细胞培养时间为48 h;最佳细胞冷冻温度为-80 ℃.rhBMP-2样品中加入杂蛋白(牛血清白蛋白)时,C2C12细胞可特异性响应其中的rhBMP-2诱导作用;2名实验员于2个时间点共12次检测结果的CV为11.7％;rhBMP-2样品的理论效价在70％～142％范围内与实测效价呈良好的线性关系,拟合直线回归方程为:y=0.983 1 x-0.010 3,R2为0.996 4;采用4、11、21代次C2C12细胞检测rhBMP-2比活性的CV为5.2％.采用优化方法重复2次测定不同厂家来源rhBMP-2样品比活性的CV为1.3％～7.5％.结论 优化的方法具有良好的特异性、中间精密性、线性及耐用性,可用于rhBMP-2体外生物活性的检测,为其研究、生产和应用提供了可靠的分析方法.

目的:系统评价点阵CO2激光联合其他非手术方式治疗痤疮瘢痕的有效性。方法:系统检索PubMed、Embase、Cochrane Library、中国知网及万方数据库中关于点阵CO2激光和点阵CO2激光联合其他非手术方式治疗痤疮瘢痕有效性的随机对照试验(RCT)，检索时限均为建库至2023年6月。由2名研究者独立筛选文献、提取资料并评价纳入研究的偏倚风险，采用Stata 16.0软件进行网状荟萃分析。结果:共纳入65项RCT，包括5 282例患者。网状荟萃分析结果显示，在主要评价指标临床效果评分方面，与单用点阵CO2激光相比，点阵CO2激光联合其他非手术治疗方式明显提高了痤疮瘢痕的临床效果评分(P<0.05)，其中点阵CO2激光联合硅酮凝胶提高痤疮瘢痕临床效果评分最显著(MD＝0.59，95%CI：0.47～0.71，P<0.05)；在次要评价指标痤疮瘢痕权重(ECCA)评分方面，与单用点阵CO2激光相比，点阵CO2激光联合表皮生长因子凝胶(MD＝-0.30，95%CI：-0.45～-0.14，P<0.05)、点阵CO2激光联合重组碱性成纤维细胞生长因子(MD＝-0.21，95%CI：-0.39～-0.03，P<0.05)和点阵CO2激光联合微针(MD＝-0.22，95%CI：-0.38～-0.05，P<0.05)明显降低了痤疮瘢痕的ECCA评分；在次要评价指标皮肤含水量方面，与单用点阵CO2激光相比，点阵CO2激光联合表皮生长因子凝胶显著提高了痤疮瘢痕的皮肤含水量(MD＝0.24，95%CI：0.07～0.40，P<0.05)。结论:当前证据显示，点阵CO2激光联合硅酮凝胶是改善痤疮瘢痕最有效的联合治疗方式；同时，点阵CO2激光联合表皮生长因子凝胶在增加皮肤含水量方面具有显著优势。

目的 研究2015-2022年北京市某三甲医院临床分离的主要病原菌及其耐药趋势,为临床治疗提供有效依据.方法 回顾分析医院近8年临床分离病原菌类别及耐药情况,采用VITEK-2 Compact仪器对细菌进行鉴定及药敏试验.参照美国临床和实验室标准化协会推荐的方法,采用WHONET 5.6软件对细菌耐药结果进行统计.结果 2015年1月至2022年12月临床分离菌株共15612株,其中革兰阳性菌占20.50％,革兰阴性菌占79.50％.排名前10位的病原菌分别为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、奇异变形杆菌、粪肠球菌、屎肠球菌、嗜麦芽寡养单胞菌和无乳链球菌.耐碳青霉烯类肠杆菌检出率由14.02％上升至33.56％,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检出率由40.68％下降至10.09％.常见病原菌整体耐药率较高,肺炎克雷伯菌及金黄色葡萄球菌耐药率上升明显.结论 2015-2022年该医院临床分离常见病原菌耐药形势严峻,应加强院内感染防控并持续进行耐药性监测,指导临床合理用药.

目的 以核转录因子-κB/上皮间充质转化(NF-κB/EMT)信号通路为基础,探讨和胃降逆含药血清对胃腺癌AGS细胞增殖和凋亡的影响及作用机制.方法 制备不同药物剂量(3,6,12 g/kg)的和胃降逆含药血清,作为含药血清低、中、高剂量组,不含药物的血清作为空白对照组.采用不同药物剂量的和胃降逆含药血清分别干预AGS细胞24,48,72 h后,用CCK-8法观察细胞增殖;DAPI染色法检测细胞凋亡;划痕试验观察细胞迁移;实时定量聚合酶链反应法(RT-qPCR)检测NF-κB、EMT标志物相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)mRNA水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞内NF-κB、E-cadherin、Vimentin相关信号通路蛋白的表达.结果 同一时间点,与空白对照组比较,和胃降逆含药血清组细胞活力降低(P＜0.01);同一含药血清剂量组48,72 h与24 h比较细胞活力降低(P＜0.05).干预48 h,与空白对照组比较,不同剂量含药血清组AGS细胞凋亡率剂量依赖性增加(P＜0.05).与空白对照组比较,和胃降逆含药血清组划痕愈合速度均减慢,迁移率降低(P＜0.05);干预24 h,与空白对照组比较,高剂量组细胞迁移降低(P＜0.01),干预48 h,中、高剂量组细胞迁移率降低(P＜0.01).与空白对照组比较,和胃降逆含药血清组AGS细胞中NF-κB、Vimentin的mRNA水平剂量依赖性下调(P＜0.05),E-cadherin的mRNA水平剂量依赖性上调(P＜0.01).与空白对照组比较,和胃降逆含药血清组AGS细胞中NF-κB、Vimentin的蛋白表达剂量依赖性下调,E-cadherin的蛋白表达剂量依赖性上调(P＜0.05).结论 和胃降逆胶囊可能通过抑制NF-κB活化、调控下游EMT相关蛋白的表达介导胃腺癌细胞AGS的迁移和侵袭,进而抑制AGS细胞增殖并促进其凋亡.

目的:优选菟丝子酒炙炮制工艺,为规范酒菟丝子炮制工艺提供参考.方法:基于L9(34)正交试验设计,以饮片外观性状、金丝桃苷含量、总黄酮含量、醇溶性浸出物含量为指标,以加酒量(A)、闷润时间(B)、炒制温度(C)、炒制时间(D)为考察因素,采用层次分析法(AHP)结合熵权法的组合赋权方式计算综合评分,利用逼近理想解排序(TOPSIS)模型筛选出酒菟丝子炮制的最佳工艺参数并进行工艺验证.结果:筛选出最优炮制工艺为生药材加10％黄酒,闷润6 h,炒炙温度为300 ℃,炒炙10 min.结论:运用正交试验设计-组合赋权TOPSIS法优选菟丝子酒炙工艺,结果简便、准确、可行.

目的 评价皮下持续葡萄糖监测(SCGM)在ICU患者血糖控制中的益处,以期为ICU患者血糖管理开拓新的思路.方法 计算机检索PubMed、Cochrane Library、Embase、Web of Science、万方、维普、中国知网、中国生物医学文献服务系统(SinoMed)数据库从建库至2024年4月28日的SCGM ICU患者血糖控制的相关随机对照试验(RCT),两名研究员独立筛选文献、提取资料并使用Cochrane风险评估工具评价纳入研究的偏倚风险,应用Review Manager5.4软件进行meta分析,Stata16.0软件进行发表偏倚和敏感性分析.结果 纳入18篇文献,其中17篇文献质量评价为中等纳入最终研究,1篇文献质量评价较低被剔除分析.共1 799例研究对象,包括入住ICU的肿瘤和心脏手术后、脓毒血症、口腔间隙感染、急性胰腺炎、颅脑损伤等患者,其中糖尿病患者占8.5％.试验组(SCGM)和对照组(床旁血糖仪毛细血管血糖监测或血气分析仪动脉血糖监测)患者低血糖发生率(RR=0.35,95％CI:0.25～0.47,P＜0.001)、平均血糖(SMD=-0.13,95％CI:-0.25～-0.00,P=0.040)、葡萄糖在目标范围内的时间占比(SMD=0.29,95％CI:0.10～0.49,P=0.003)比较差异有统计学意义;胰岛素用量亚组分析结果显示,在强化胰岛素治疗组中两组胰岛素用量比较,差异无统计学意义(SMD=-0.44,95％CI:-1.05～0.17,P=0.160),但在非强化胰岛素治疗组中,两组胰岛素用量比较,差异有统计学意义(SMD=-2.01,95％CI:-2.29～1.72,P＜0.001).结论 与床旁血糖仪毛细血管血糖测定或血气分析仪动脉血糖测定比较,在ICU患者中应用SCGM可以降低患者的低血糖发生率、平均血糖和胰岛素用量,并提高患者葡萄糖在目标范围内的时间占比.

目的:分析急性病毒性肝炎患者血脂、血糖、蛋白、尿酸变化特点及其与预后的关联。方法:纳入徐州医科大学附属徐州市立医院2020年1月至2023年1月收治的100例急性病毒性肝炎患者为试验组，选取同期60例健康体检者为对照组，比较试验组与对照组入院时血脂、血糖、蛋白、尿酸、凝血酶原活动度（PTA）差异。试验组治疗8周后，根据预后，将其分为预后良好组、预后不良组，比较2组患者上述指标差异，总结上述指标与患者肝功能及预后的关联。结果:试验组谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）和总胆红素（TBIL）；甘油三酯（TG）、空腹血糖（FPG）；总蛋白（TP）、尿酸均高于对照组，总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、前白蛋白（PA）、白蛋白（ALB）均低于对照组（P<0.05）。治疗后试验组100例患者中，71例达到治愈标准，21例预后不良。预后良好组ALT、AST、TBIL和TG、FPG、TP、尿酸均低于对照组，TC、HDL-C、LDL-C、ALB、PA、PTA高于对照组（P<0.05）。结论:部分急性病毒性肝炎患者预后不理想，与入院时血脂、血糖、蛋白、尿酸水平显著异常有关，且上述指标异常的加剧往往伴随着肝功能显著损伤。

目的:研究袖状胃切除术（SG）对肥胖伴2型糖尿病（T2DM）大鼠的作用及可能机制。方法:选取60只大鼠随机均分为正常对照组（A组，n=15只）、单纯肥胖组（B组, n=15只）、肥胖伴2型糖尿病组（C组, n=15只）及袖状胃切除术组（D组, n=15只），分别进行相应造模及干预8周。采用SPSS 22.0统计学软件进行数据分析。大鼠空腹血糖（FBG）、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）、葡萄糖耐量试验（OGTT）曲线下面积（AUC）、脂代谢指标[总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）]、炎症指标[C反应蛋白（CRP）、白细胞介素6（IL-6）]、血清淀粉酶（AMY）水平及胰腺组织中葡萄糖调节蛋白78（GRP78）和半胱氨酸蛋白水解酶-12（Caspase-12）蛋白表达等实验数据均采用（）表示，多组间比较采用One-Way ANOVA分析，LSD检验行组间两两比较。P<0.05为差异有统计学意义。结果:仅D组术后3只大鼠死亡，其余均建模成功。术前，B、C、D组大鼠体重较A组明显升高（P<0.05），C、D组FBG水平及OGTTAUC值明显高于A、B组（P<0.05）；术后2~8周，B组大鼠体重高于A组（P<0.05），D组体重及FBG水平低于C组（P<0.05）；术后8周时，D组大鼠OGTT AUC值及HOME-IR指数明显低于C组（P<0.05）。D组TG水平及CRP、IL -6、AMY水平明显低于C组（均P<0.05）。相比A组，B、C组大鼠胰岛细胞形态不规则且排列紊乱，细胞边界模糊不清，胰岛间质中有空泡出现，可见炎症浸润就脂质沉积出现，C组病理改变较B组加重；D组大鼠上述病理改变较C组减轻。D组大鼠GRP78、Caspase-12蛋白表达明显低于C组（P<0.05）。结论:SG手术能够降低肥胖伴T2DM模型大鼠的体重及血糖水平，改善糖脂代谢，降低胰岛素抵抗，减轻胰腺损伤，可能与抑制GRP78/Caspase-12通路活化相关。