目的 采用一测多评法同时测定木香顺气丸中的橙皮苷、厚朴酚、新橙皮苷、柚皮苷、芸香柚皮苷、和厚朴酚、去氢木香内酯、苍术素、木香烃内酯、甘草苷等成分.方法 色谱柱为SVEATM A585V3 C18 Opal(250 mm ×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈-甲醇-0.1％磷酸溶液,梯度洗脱,流速1.0mL·min-1,苍术素的测定波长为336 nm、其余均为220 nm.以橙皮苷为参照物,计算其他9种组分的相对校正因子并测得含量.结果 10组分在各自试验浓度范围内的线性关系良好(r≥0.9994),平均加样回收率为97.2％～102.5％(n=6),RSD为1.10％～2.00％;与外标法比较,一测多评法的结果一致.结论 所用方法简单、准确,适用于木香顺气丸的质量控制.

目的:建立疏肝止痛片指纹图谱和多成分含量测定方法.方法:基于HPLC法建立疏肝止痛片指纹图谱,并进行相似度评价、聚类分析(CA)及正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA).同法测定疏肝止痛片中柴胡皂苷a、柴胡皂苷d、延胡索乙素、芍药苷、橙皮苷、木香烃内酯、去氢木香内酯、甘草苷及甘草酸铵9个成分的含量.结果:建立的疏肝止痛片HPLC指纹图谱标定了 32个共有峰,指认9个成分,15批样品的相似度＞0.960.CA和OPLS-DA将疏肝止痛片样品分为2类,且OPLS-DA筛选出12个对疏肝止痛片质量差异影响较大的成分.建立的9个成分含量测定方法稳定可靠,绝大部分样品未出现离散数据(平均值的70％～130％以外),表明15批疏肝止痛片质量较稳定.结论:HPLC指纹图谱结合多成分含量测定的方法快速、简便,重复性好,可用于疏肝止痛片的质量控制和评价.

目的 探究五味沙棘散对卵清蛋白(ovalbumin,OVA)诱导的过敏性哮喘大鼠的保护作用及机制.方法 SD大鼠随机分为对照组、模型组、地塞米松(0.5 mg/kg)组和五味沙棘散(0.5、2.0 g/kg)组,建立OVA诱导的大鼠早期支气管哮喘模型,苏木素-伊红(HE)和Masson染色观察支气管病理情况及纤维化程度;免疫组化检测支气管间隙连接蛋白43(connexin 43,Cx43)的表达和分布;ELISA检测血清中免疫球蛋白E(immunoglobulin E,IgE)和白细胞介素-13(interleukin-13,IL-13)水平;亚甲基蓝法和WSP-1 荧光探针法测定血清中硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)水平.建立CdCl2 诱导的支气管上皮BEAS-2B细胞损伤模型,MTT法检测细胞活性;Hoechest 33342 染色法观察细胞核形态变化;MitoSOX染色检测细胞线粒体活性氧(mitochondrial reactive oxygen species,mtROS)水平;Western blotting检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cystein-asparate protease-3,Caspase-3)、核因子红细胞系 2 相关因子(nuclear factor erythroid 2-related factor,Nrf2)和Kelch样ECH关联蛋白 1(Kelch like ECH associated protein 1,Keap1)蛋白表达.结果 五味沙棘散能够减少支气管黏膜上皮细胞脱落和黏液分泌(P＜0.001),降低胶原纤维的沉积和Cx43 的表达及分布(P＜0.05、0.01、0.001),降低血清中IgE、IL-13水平(P＜0.05),升高血清中H2S水平(P＜0.05、0.01).五味沙棘散含药血清呈剂量相关性地抑制CdCl2 诱导的BEAS-2B细胞凋亡及mtROS水平(P＜0.01、0.001),上调Caspase-3和Nrf2 蛋白表达(P＜0.05、0.01),下调Keap1 蛋白表达(P＜0.01).结论 五味沙棘散对OVA诱导的哮喘大鼠和CdCl2 诱导的支气管上皮细胞凋亡均具有保护作用,其机制可能与调控Nrf2/Keap1 信号通路有关.

去氢木香内酯是从菊科云木香属植物木香Aucklandia lappa Decne.的根部提取的一种倍半萜内酯类化合物,是木香的主要活性成分之一,有抗菌、消炎、抗病毒、抗溃疡、抗糖尿病和抗肿瘤等药理活性.近年,去氢木香内酯在抗肿瘤领域引起了广泛关注.研究发现,去氢木香内酯能抑制肿瘤细胞的增殖和迁移能力,对肺癌、宫颈癌等癌症有抑制作用.其抗肿瘤机制主要包括抑制肿瘤细胞增殖、抑制肿瘤细胞侵袭和迁移、诱导肿瘤细胞凋亡和逆转肿瘤细胞多药耐药.本文对近年来去氢木香内酯的抗肿瘤作用机制进行了详细综述,旨在为该类药物在临床肿瘤治疗中提供新的理论支持、新的思路以及参考.

目的:建立川木香标准汤剂的质量控制方法.方法:采用Waters CORTECS T3 超高效液相色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速为 0.35 mL·min-1,柱温为 40℃,检测波长在 0～21 min为325 nm、21～37 min为 225 nm,进样体积为 1 μL.采用超高效液相色谱法建立 14 批川木香标准汤剂的指纹图谱,确定指纹图谱共有峰,采用对照品对共有峰进行确证;通过相似度计算和化学计量学方法对不同产地川木香制备的标准汤剂进行分析,并对其中木香烃内酯、去氢木香内酯、绿原酸和 4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸进行定量分析.结果:川木香标准汤剂指纹图谱共标记 14 个共有峰,指认了木香烃内酯、去氢木香内酯、绿原酸和 4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸 4 个成分;相似度评价、聚类分析和主成分分析均将 14 批川木香标准汤剂分成 2 类,正交偏最小二乘法-判别分析从 14 个共有峰中筛选出 7 个差异性标志物;含量测定结果显示,来自四川阿坝的川木香制备的标准汤剂中木香烃内酯和去氢木香内酯的总质量分数最高、绿原酸和 4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸的总质量分数最低,而其余 3 个产地川木香差异不大.结论:该方法分析时间短、准确度高、专属性好,能够为川木香标准汤剂及其相关制剂质量标准的制定提供参考.

目的 研究达立通颗粒主要活性成分在正常和功能性消化不良(FD)模型大鼠胃肠道组织中的分布差异.方法 采用夹尾刺激结合不规律饮食双因素干预方法建立FD模型.12只大鼠(对照、模型各6只)用于FD模型验证,进行胃、小肠排空实验,HE染色后进行胃肠组织病理学观察;36只大鼠(对照、模型各18只)用于胃肠道组织差异分布研究,禁食不禁水18 h,按22.4 g·kg-1剂量(8倍临床等效剂量)ig给予达立通颗粒1次,于给药后1、3、6h收集各组大鼠的胃、十二指肠、空肠、回肠和结肠.应用超高效液相色谱-串联四级杆/线性离子阱质谱(UPLC-QTRAP-MS/MS)法检测各组织牡荆素-4"-O-葡糖苷、原阿片碱、黄连碱、小檗碱、甜橙黄酮、川陈皮素、桔皮素、去甲基川陈皮素、木香烃内酯、去氢木香内酯、原儿茶酸、伞形花内酯、木犀草苷、橙皮苷、木犀草素、柚皮素、橙皮素、白杨素含量,采用ACQUITY HPLCTM HSS T3(50 mm×2.1 mm,1.8 μm)色谱柱,柱温为40 ℃,0.1％甲酸水-乙腈为流动相,梯度洗脱,体积流量为0.3 mL·min-1,进样量为2μL.结果 与对照组比较,模型组大鼠体质量显著降低(P＜0.001),胃、小肠排空率显著降低(P＜0.001),十二指肠肠黏膜的紧密连接被破坏,但未出现胃肠组织的器质性病变,符合FD的病理特征.建立的UPLC-QTRAP-MS/MS方法中,各化合物线性关系良好,R2R≥0.990 0.对建立的检测方法进行专属性、精密度与准确度、提取回收率、稳定性和基质效应等方面的考察,均符合要求.各成分在对照和模型组大鼠胃肠道组织中浓度差异明显,且在各组织中达到最高浓度的时间点差异较大,模型组出现达峰时间延后的现象;与对照组比较,模型组大鼠胃组织中化合物的暴露水平降低,可能与FD引起胃肠道蠕动减慢有关.橙皮苷、橙皮素、柚皮素、原儿茶酸、去氢木香内酯、川陈皮素、去甲基川陈皮素、小檗碱和桔皮素在胃、十二指肠、空肠、回肠和结肠中暴露水平较高,且在对照组和模型组中各时间点下的浓度差异较显著.结论 经方法学验证,所建立的UPLC-QTRAP-MS/MS法灵敏、专属性强、准确性高,适用于大鼠胃肠道组织中达立通颗粒主要活性成分的胃肠组织分布研究.达立通颗粒主要活性成分在正常和FD模型大鼠胃肠组织分布具有显著性差异.

目的:探讨不同炮制方法对木香及川木香挥发油成分的影响.方法:采用切制、清炒、麸炒、纸煨方法炮制木香与川木香,测定不同炮制品的挥发油含量,应用气相色谱质谱联用技术检测各样品成分组成.结果:经炮制后,药材中挥发油含量减少,且随辅料的加入,油量变更少.鉴定出化合物木香生品38 种、清炒品36 种、麸炒品34 种、纸煨品34 种;川木香生品32 种、清炒品35 种、麸炒品35 种、纸煨品34 种.木香经过炮制后,水芹烯、桧烯、石竹烯等一些芳香成分含量降低,去氢木香内酯、石竹素、香叶基丙酮等药效成分含量逐渐升高.川木香成分变化与木香相似,但芳香成分更少.木香与川木香的相同成分有去氢木香内酯、单紫杉烯、榄香烯、木香醇、α-木香醇;经正交偏最小二乘法判别分析得木香与川木香的含量差异物质有二氢去氢木香内酯、mokkolactone、α-木香醇、γ-木香醇、α-bergamotenol、萘、单紫杉烯、α-selinene、2-isoprope-nyl-4a,8-dimethyl-1,2,3,4,4a,5,6,7-octahydronaphthalene、(3Z,3a R,7a S)-3-ethylidene-1,2,3a,4,5,6,7,7a-octa-hydroindene、榄香烯.结论:木香与川木香挥发油中约60%的化学成分基本相同;与生品相比,炮制后二者挥发油的化学成分均有变化,但二者成分的差异减少.其中纸煨法对木香及川木香的化学成分影响最大,辛香气味化合物的减少与一些药效成分的增多可能是纸煨品实肠止泻的物质基础.

目的 研究高寒植物长鞭红景天Rhodiola fastigiata干燥全株的脂肪族类化学成分和抗疟活性.方法 采用反复硅胶柱色谱以及RP-18、MCI、Sephadex LH-20等多种色谱手段进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定化合物的结构.通过SYBR Green I法,对分离得到的化合物进行抗疟活性筛选.结果 从长鞭红景天干燥全株95％乙醇提取物中分离鉴定了 15个脂肪族类化合物,分别鉴定为10α-葫芦-7,24二烯醇(1)、β-香树脂醇乙酸酯(2)、豆甾烷-3-酮(3)、豆甾-4-烯-3-酮(4)、β-谷甾醇(5)、schleicheol 1(6)、豆甾-4,6,8(14),22-四烯-3-酮(7)、(22E,24R)-5α,8α-epidioxyergosta-6,22-dien-3β-ol(8)、豆甾-4-烯-6β-醇-3-酮(9)、3β-羟基豆甾-5-烯-7-酮(10)、6a-羟基豆甾-4-烯-3-酮(11)、豆甾烷-3,6-二醇(12)、正二十二烷醇(13)、二十四烷醇(14)、去氢木香内酯(15).结论 化合物1为新化合物,命名为表葫芦二烯醇;化合物2、13和14为首次从该植物中分离得到,化合物3、4、6～12和15为首次从红景天属中分离得到;化合物15对恶性疟原虫3D7株具有一定抗疟活性.

目的:采用HPLC测定催汤丸中木香烃内酯、药根碱、巴马汀、去氢木香烃内酯、盐酸小檗碱、诃子次酸、诃子鞣酸及柯里拉京的含量,为其质量标准建立提供依据.方法:采用月旭C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱;以乙腈-0.01%甲酸铵溶液为流动相,梯度洗脱;流速为 1.0 mL/min;检测波长为 230 nm;柱温为 35℃.结果:上述 8个成分分别在 2.3～230 μg/mL、0.64～64 μg/mL、1.08～108 μg/mL、0.72～72 μg/mL、1.25～125 μg/mL、0.77～77 μg/mL、0.83～83 μg/mL 0.99～99 μg/mL的浓度范围内与峰面积的线性关系良好,r≥0.9990,含量水平较高的依次是木香烃内酯、诃子次酸、巴马汀和药根碱.结论:该研究建立的多成分测定方法有助于催汤丸质量评价.

目的 对海风藤Piperis kadsurae藤茎的化学成分进行研究,并对分离的化合物进行初步的神经保护活性筛选.方法 运用硅胶、ODS、和Sephadex LH-20等柱色谱以及反相制备型HPLC等各种现代色谱分离技术进行系统的分离纯化,利用波谱学方法确定化合物结构.同时采用MTT和RTCA法,以白藜芦醇作为阳性对照,对化合物进行体外神经保护活性实验.结果 从海风藤藤茎的二氯甲烷和醋酸乙酯提取物中分离得到22个化合物,分别鉴定为puberulin(1)、(-)-acuminatin(2)、dihydrocarinatin(3)、海风藤酮(4)、山蒟素C(5)、3-羟基苯甲酸苄酯(6)、2-羟基苯甲酸苄酯(7)、cherrevenol D(8)、trans-2,3-diacetoxy-l-[(benzoyloxy)methyl]-cyclohexa-4,6-diene(9)、(3R,4R)-4-O-acetyl-5-(benzoyloxymethyl)cyclohexa-1,5-diene-3,4-diol(10)、(-)-sootepoxide chlorohydrin A(11)、香草醛(12)、细辛醛(13)、β-细辛醚(14)、α-细辛醚(15)、胡椒内酰胺D(16)、焦谷氨酸甲酯(17)、三羟基异黄酮(18)、去氢木香内酯(19)、木香内酯(20)、spathulenol(21)、β-谷甾醇(22).化合物2、4、19、21对体外神经保护的半数效应浓度(median effective concentration,ECs0)分别为11.1、27.3、32.9、29.3 μmol/L.结论 化合物3、6～8、19～20为首次从胡椒属植物中分离得到,化合物15、21为首次从海风藤中分离得到.其中化合物4的13C-NMR波谱数据为首次报道.化合物2、4、19、21对Aβ25-35诱导PC-12细胞损伤具有显著保护作用.