目的 探究原发性肾病综合征儿童血清Apelin-13、FOXO1表达水平及其临床意义.方法 选取2019年1月至2022年12月在本院收治的183例原发性肾病综合征儿童作为研究组.另选取同时期在本院体检的185名体检健康的儿童作为对照组,苏木精-伊红(ELISA)法检测血清Apelin-13、FOX-O1水平;采用Pearson法分析Apelin-13、FOXO1水平与血脂指标的关系;使用受试者工作特征(ROC)曲线分析Apelin-13、FOXO1对原发性肾病综合征的诊断价值;多因素Logistic回归分析影响原发性肾病综合征发生的危险因素.结果 与对照组比较,研究组患儿血清Apelin-13水平降低,甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白(apo)B、FOXO1水平升高(P＜0.05);与研究组治疗前比较,治疗后血清Apelin-13水平升高,TG、TC、LDL-C、apoB、FOXO1水平降低(P＜0.05);Pearson相关性分析表明,原发性肾病综合征患儿血清Apelin-13与TG、TC、LDL-C、apoB均呈负相关,FOXO1与TG、TC、LDL-C、apoB均呈正相关(P＜0.05);ROC曲线分析表明,Apelin-13、FOXO1诊断原发性肾病综合征发生的曲线下面积(AUC)为0.795、0.734,二者联合诊断的AUC为0.920;多因素Logistic回归分析显示,Apelin-13与FOX-O1是影响原发性肾病综合征发生的危险因素.结论 原发性肾病综合征儿童血清Apelin-13呈低表达、FOXO1呈高表达,二者与血脂水平有关,并且对原发性肾病综合征具有一定的诊断价值.

目的:探讨卵泡液中叉头框转录因子O亚族1（Forkhead box transcription factor O1，FoxO1）mRNA、天冬氨酸蛋白水解酶-3（Caspase-3）mRNA、生长分化因子-9（growth differentiation factor-9，GDF-9）水平与优质胚胎数的相关性及其预测不孕患者体外受精-胚胎移植（ in vitro fertilization-embryo transfer，IVF-ET）临床妊娠的效能。 方法:选取2017年2月至2020年1月期间驻马店市中心医院收治的468例接受IVF-ET治疗的不孕患者进行病例对照研究，根据是否妊娠分为妊娠组（ n=248）、未妊娠组（ n=220），比较两组一般资料、取卵日性激素水平、卵泡液 FoxO1 mRNA、 Caspase-3 mRNA、GDF-9水平。采用Pearson分析卵泡液 FoxO1 mRNA、 Caspase-3 mRNA、GDF-9之间及其与优质胚胎数的相关性，采用logistic回归方程分析IVF-ET临床妊娠的相关因素并以受试者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲线分析卵泡液 FoxO1 mRNA、 Caspase-3 mRNA、GDF-9预测临床妊娠的效能。 结果:妊娠组优质胚胎数多于未妊娠组［（2.59±0.68）枚比（1.78±0.62）枚， P<0.001］，基础卵泡刺激素（follicle-stimulating hormone，FSH）水平、基础黄体生成素（luteinizing hormone，LH）水平低于未妊娠组［（7.16±0.29）U/L比（6.21±0.34）U/L，（8.72±1.24）U/L比（10.65±1.01）U/L，均 P<0.001］，取卵日雌二醇高于未妊娠组［（848.18±50.68）ng/L比（605.35±46.79）ng/L， P<0.001］。妊娠组 FoxO1 mRNA、GDF-9水平高于未妊娠组， Caspase-3 mRNA水平低于未妊娠组（均 P<0.001）； FoxO1 mRNA与 Caspase-3 mRNA呈负相关，与GDF-9呈正相关（均 P<0.001）； Caspase-3 mRNA与GDF-9呈负相关（均 P<0.001）； FoxO1 mRNA、GDF-9与优质胚胎数呈正相关， Caspase-3 mRNA与优质胚胎数呈负相关（均 P<0.001）。多元线性回归分析显示，在排除混杂因素后， FoxO1 mRNA、 Caspase-3 mRNA、GDF-9水平与优质胚胎数相关（均 P<0.001）。以IVF-ET临床妊娠为因变量，纳入优质胚胎数、基础FSH、基础LH、取卵日雌二醇、 FoxO1 mRNA、 Caspase-3 mRNA、GDF-9为自变量进行logistic回归方程分析，结果显示优质胚胎数、基础FSH、基础LH、取卵日雌二醇、 FoxO1 mRNA、 Caspase-3、GDF-9均与临床妊娠结局显著相关（均 P<0.001）。 FoxO1 mRNA、 Caspase-3 mRNA、GDF-9水平联合预测IVF-ET临床妊娠的曲线下面积（area under curve，AUC）值为0.891，大于 FoxO1 mRNA指标单独检测（AUC=0.796， P=0.012）。 结论:FoxO1 mRNA、 Caspase-3 mRNA、GDF-9水平与胚胎发育及性激素水平有关，且 FoxO1 mRNA、GDF-9水平升高， Caspase-3 mRNA水平降低有利于临床妊娠，三者联合检测可为评价IVF-ET临床妊娠提供参考。

目的 探究弥散加权成像(DWI)联合血清Wnt1诱导分泌蛋白1(WISP1)、叉头框转录因子O亚族3a(FOXO3a)对膀胱癌(BC)术前淋巴结(LN)转移的诊断价值.方法 回顾性分析2020年3月至2022年3月本院收治的185例疑似BC患者的临床资料,将其中经病理诊断确诊为BC的104例患者设为BC组,并将其中68例LN转移患者作为LN组,36例无LN转移患者作为无LN组.选择同期在本院体检的98例健康志愿者设为对照组.采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测BC患者血清中WISP1、FOXO3a表达水平;采用Pearson法分析BC患者血清中WISP1与FOXO3a的相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析DWI联合血清WISP1、FOXO3a对BC术前LN转移的诊断价值.结果 与对照组比较,BC患者血清中的WISP1表达水平显著升高,FOXO3a表达水平显著降低,差异均有统计学意义(均P＜0.001);与无LN组比较,LN组患者血清中的WISP1表达水平显著升高,FOXO3a表达水平显著降低(均P＜0.001);相关性分析结果显示,BC患者的血清WISP1、FOXO3a表达水平呈负相关(r=-0.346,P＜0.001);与无LN组比较,LN组患者的ADC值显著降低(P＜0.05);DWI联合血清WISP1、FOXO3a诊断BC术前LN转移的灵敏度高于DWI、血清WISP1、FOXO3a单独诊断(均P＜0.05).结论 BC术前LN转移患者血清中WISP1的表达水平显著升高,FOXO3a表达水平显著降低,DWI联合血清WISP1、FOXO3a诊断可以提高BC术前LN转移的诊断效能.

目的:分析慈苓化浊方对痛风大鼠滑膜组织中环氧化酶-2(COX-2)、热休克蛋白 70(HSP70)表达的影响.方法:选取 50 只 SPF级 SD大鼠,10 只大鼠作为对照组,另外 40 只建立痛风模型,将 30 只建模成功的大鼠分为模型组、药物对照组、慈苓化浊方组,每组 10 只.观察各组大鼠组织病理学、关节肿胀度、COX-2、HSP70 表达、炎症因子、磷脂酰肌醇 3-激酶(PI3 K)/蛋白激酶B(AKT)/叉头框转录因子 O 亚族 1(FoxO1)通路相关因子及其 mRNA表达量.结果:与对照组相比,模型组、药物对照组、慈苓化浊方组关节肿胀度、COX-2、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、PI3 K mRNA、AKT mRNA、FoxO1 mRNA表达量升高,HSP70 mRNA、Caspase-3 mRNA表达量降低(均P<0.05).与模型组相比,药物对照组、慈苓化浊方组关节肿胀度、COX-2、TNF-α、IL-1β、IL-6、PI3 K mRNA、AKT mRNA、FoxO1 mRNA表达量降低,HSP70 mRNA、Caspase-3 mRNA表达量升高(均P<0.05).与药物对照组相比,慈苓化浊方组关节肿胀度、COX-2、TNF-α、IL-1β、IL-6、PI3 K mRNA、AKT mRNA、FoxO1 mRNA表达量降低,HSP70 mRNA、Caspase-3 mRNA表达量升高(均P<0.05).结论:采用慈苓化浊方干预痛风大鼠,可降低大鼠关节肿胀程度,降低滑膜组织COX-2、HSP70 表达,抑制炎症反应,其作用机制可能与抑制PI3 K/AKT/FoxO1 通路有关.

目的 探索多烯磷脂酰胆碱对棕榈酸诱导肝细胞脂毒性的保护作用,及其作用机制.方法 用0.4 mmol.L-1棕榈酸滤液持续刺激对数生长期HepG2细胞24 h,同时加入0、0.5、1.0、2.0 mg·mL-1多烯磷脂酰胆碱溶液,分别设为模型组和低、中、高剂量实验组.另取不做任何处理的细胞为对照组.用噻唑蓝法检测细胞存活率,用酶联免疫吸附试验法检测细胞中三酰甘油(TG)含量,用探针法检测细胞线粒体功能,用蛋白质印迹法检测细胞蛋白激酶B(AKT)和叉头框转录因子O亚族1(FoxO1)蛋白的表达水平.结果 中、高剂量实验组和模型组、对照组的细胞存活率分别为(74.31±8.69)％、(78.13±9.34)％、(63.67±7.40)％和(82.47±12.30)％,细胞中 TG 含量分别为(11.45±3.06)、(8.34±2.05)、(17.63±5.12)和(5.12±1.32)mg·g-1 protein,线粒体活性氧生成量分别为(0.47±0.06)、(0.39±0.05)、(0.62±0.09)和(0.31±0.05)U·mg-1 protein,FoxO1 蛋白相对表达水平分别为 0.27±0.05、0.22±0.03、0.41±0.08 和 0.07±0.02,磷酸化 AKT/AKT 比值分别 为 0.23±0.07、0.34±0.06、0.09±0.01和0.38±0.05.中、高剂量实验组的上述指标与模型组比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 多烯磷脂酰胆碱可减轻棕榈酸诱导的肝细胞脂毒性,提高肝细胞存活率及线粒体功能,其作用机制可能与调控AKT/FoxO1信号通路活性有关.

[目的]探究黄芪多糖通过作用于磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)-蛋白激酶B(AKT)-叉头框转录因子O亚族 1(FOXO1)信号通路及相关炎症因子对糖尿病性肌少症大鼠肌肉萎缩的改善及治疗作用.[方法]一次性链脲佐菌素腹腔注射构造糖尿病动物模型,随机分为模型组、黄芪多糖组和二甲双胍组,另设置无干预正常组,分组给药 3 个月,实验结束后进行腓肠肌苏木精-伊红(HE)染色;蛋白质免疫印迹法(Western Blot)测定磷酸化蛋白激酶B(P-AKT)/AKT及FOXO1 蛋白含量;实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测白细胞介素(IL-6)、抑癌基因TP53、热休克转录因子 1(HSF1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平;检测血清生化指标三酰甘油(TG).[结果]与模型组相比,黄芪多糖组腓肠肌肌细胞明显改善,细胞体积变大、间隙变窄,炎性渗出显著减轻;另外,黄芪多糖组的糖尿病保护因子P-AKT/AKT、FOXO1 蛋白含量明显上升;炎性因子IL-6、TP53、HSF1 及MMP-9 含量明显下降.在血脂方面,西药二甲双胍组TG下降更加明显.[结论]黄芪多糖可能通过PI3K-AKT-FOXO1 信号通路,降低IL-6、TP53 炎性因子水平,影响HSF1和MMP-9的活性,从而改善糖尿病性肌少症大鼠的肌肉萎缩.

旨在探讨左归降糖清肝方对2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)合并非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)糖脂代谢的影响及作用机制.以MKR小鼠(T2DM小鼠)为研究对象,采用高脂饮食诱导NAFLD,建立T2DM合并NAFLD模型,随机将40只小鼠分为模型组,二甲双胍组(0.067 g·kg-1),左归降糖清肝方高、低剂量组(29.64、14.82 g·kg-1),每组10只,以同龄FVB小鼠作为正常组.除正常组和模型组外,其他各组连续灌胃给药4周后采集血清和肝组织标本,检测空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、空腹胰岛素(fasting lisulin,FINS)水平;采用GPO-PAP单试剂微板法检测总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白(low-density lipoprotein,LDL)水平;酶联免疫吸附测定法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测极低密度脂蛋白(very low-density lipoprotein,VLDL)水平;赖式微板法检测丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)水平;通过苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色和油红O染色观察肝脏病理学形态变化;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肝脏中叉头框转录因子O亚族1(forkhead box transcription factor O1,FoxO1)、微粒体甘油三酯转移蛋白(microsomal triglyceride transfer protein,MTP)和载脂蛋白B(apolipoproteins B,APOB)的基因和蛋白表达情况.结果显示,高剂量左归降糖清肝方能显著降低T2DM合并NAFLD小鼠的FBG、FINS水平(P<0.05,P<0.01),改善葡萄糖耐受和胰岛素抵抗(P<0.05,P<0.01);并能缓解高脂饮食导致的肝脏损伤,表现在改善T2DM合并NAFLD小鼠肝脏脂肪变性程度,显著降低血清中TC、TG、LDL、VLDL、ALT及AST水平(P<0.05,P<0.01);同时研究发现,高剂量左归降糖清肝方干预后肝脏中FoxO1、MTP和APOB的基因和蛋白表达显著下调(P<0.05,P<0.01).上述研究表明,左归降糖清肝方能有效改善T2DM合并NAFLD的糖脂代谢,其机制可能与调控FoxO1/MTP/APOB信号通路密切相关.

目的 探讨 miR-486-5p/叉头框转录因子 O 亚族 1(forkhead box transcription factor O subfamily 1,FOXO1)轴对深二度烧伤创面修复过程中角质形成细胞的增殖和迁移的调节机制.方法 小鼠建立深二度烧伤模型,随机分为 NC mimic+Vector 组、FOXO1 组、miR-486-5p mimic 组和 miR-486-5p mimic+FOXO1 组.采用miR-486-5p mimic和(或)FOXO1 处理伤面,观察伤面愈合情况.在烧伤后分别于不同时间点[止血(0 d)、炎症(1d)和增殖(7d 和 14 d)]采用原位杂交技术和实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(reverse transcription quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)法检测伤面边缘组织中 miR-486-5p 表达部位和水平,免疫荧光染色法检测 FOXO1 表达.通过荧光素酶报告分析 FOXO1 与 miR-486-5p 结合关系.构建 miR-486-5p 过表达或敲低人永生化角质形成细胞(human HaCaTKeratinocytes,HaCaT)模型,通过 EdU 法和划痕试验考察细胞的增殖和迁移情况,Western blot法分析细胞中 FOXO1 蛋白表达.结果 miR-486-5p在小鼠深二度烧伤伤面愈合过程中显著上调.体内模型显示,miR-486-5p通过抑制 FOXO1 表达促进伤面愈合.在 HaCaT细胞中,miR-486-5p 过表达增加了细胞的增殖和迁移,抑制miR-486-5p则具有相反的效果.FOXO1 是角质形成细胞中miR-486-5p的直接靶标.FOXO1 过表达导致 HaCaT细胞的 EdU 阳性细胞的百分比和伤面愈合降低,并且逆转了 miR-486-5p 对EdU阳性细胞和伤面愈合的诱导作用.结论 miR-486-5p 是深二度烧伤创面修复的关键调节剂,通过抑制FOXO1 表达促进角质形成细胞的增殖和迁移.

自身免疫病(autoimmune disease,AID)是一类免疫应答异常激活,自身免疫耐受失衡的异质性疾病.具体发病机制尚未完全明确,由于淋巴细胞功能异常导致多种细胞因子、自身抗体以及自身反应性T细胞的产生,进一步损伤组织、脏器[1].目前,绝大多数AID治疗仍以糖皮质激素和免疫抑制剂等药物为主,往往具有较多不良反应,且难以根治,容易复发.因此,对于其发病机制的深入探讨进而为疾病的早期干预与治疗提供新的思路依然是十分必要的.叉头框蛋白O3a(forkhead box protein O3a,FOXO3a)作为叉头框蛋白家族O亚家族中最重要一员,与细胞增殖、凋亡、自噬、氧化应激以及衰老等在内的生命过程密切相关[2].FOXO3a转录因子最初作为长寿基因编码蛋白与肿瘤抑制因子被广泛研究,2004年一项发表在《免疫》杂志研究表明FOXO3a蛋白表达缺陷的小鼠,可出现T细胞的持续增殖与存活,进而诱发自发性自身免疫的现象,随后越来越多的研究表明其在AID发生发展中发挥重要作用[3-8].

叉头框转录因子(FOX)家族O类亚群成员之一FOXO1在许多细胞类型中表达,参与了许多病理和生理过程,包括细胞增殖、凋亡、自噬、代谢、炎症反应、细胞因子的表达、免疫分化和氧化应激抵抗等.这些过程会引起许多临床现象,如致癌作用、糖尿病、心血管疾病、宿主反应等.多囊卵巢综合征(PCOS)是育龄期妇女最常见的内分泌紊乱疾病,发生机制仍不明确.FOXO1可能参与了PCOS的胰岛素抵抗、低度炎症反应等病理生理.研究FOXO1在PCOS的发生及其并发症中的作用,有利于为PCOS的治疗策略提供新的思路.