目的:建立同位素稀释液相色谱串联质谱法（ID-LC/MS/MS）测定人血浆甲氧基去甲肾上腺素的候选参考方法，并对方法性能进行评价。采用该方法对室间质量评价计划样品进行定值，初步评价血浆甲氧基去甲肾上腺素的检测现状。方法:采用甲氧基去甲肾上腺素同位素标准溶液为内标，重量法进行取样，标准曲线法进行定量；采用蛋白沉淀结合弱阳离子固相萃取进行前处理，采用超高液相色谱耦联三重四极杆质谱仪进行液质联用分析。根据相关EP文件对方法的特异性、基质效应、检测限、定量限、精密度、正确度和不确定度等性能指标进行了评价。采用该方法对2020年国家卫生健康委临床检验中心甲氧基去甲肾上腺素室间质量评价计划样品进行定值，以该定值结果为靶值，生物学变异最佳可允许总误差标准为评价限，对实验室的检测质量进行评价。结果:方法特异性良好，干扰物和基质效应均不影响检测结果。血浆甲氧基去甲肾上腺素测定的检测限及定量限分别为1.08 pg/g和3.54 pg/g，批内变异系数（ CV）和批总 CV分别为0.43%~1.10%、0.61%~1.42%，相对回收率为98.5%~101.9%，4种血浆样品的相对扩展不确定度分别为3.10%、2.34%、2.16%、1.73%。室间质量评价计划结果显示，实验室测定202013和202014样品的及格率分别为80%和85%。 结论:本研究建立了ID-LC/MS/MS测定人血浆甲氧基去甲肾上腺素的候选参考方法，方法准确、精密、简便，有望作为血浆甲氧基去甲肾上腺素测定的参考方法，可应用于室间质量评价计划样本的定值。

目的:建立同位素稀释液相色谱串联质谱（ID-LC-MS/MS）方法检测血清中L-色氨酸及其代谢物。方法:方法学建立及评价。收集2022年11月至2023年1月的华西医院166例健康体检者的血清样本。采用L-色氨酸（Trp）、L-犬尿氨酸（Kyn）和犬尿喹啉酸（KA）的同位素标记物为内标，通过蛋白沉淀处理血清样本，应用LC-MS/MS同时检测Trp、Kyn和KA含量。评价该方法的选择性、特异性、线性、检出限（LOD）、定量限（LOQ）、携带污染、精密度、加标回收率、基质效应和稀释一致性。结果:Trp、Kyn和KA的线性相关系数均>0.999，LOD分别为0.10 μmol/L、0.01 μmol/L和1.00 nmol/L，LOQ分别为0.20 μmol/L、0.04 μmol/L和2.00 nmol/L，批内精密度和批间精密度均<10%，平均加标回收率与相对基质效应均在100%左右，超线性范围的样本最多可稀释16倍。健康体检者血清中Trp、Kyn、KA含量、Kyn/Trp和KA/Kyn比值分别为（59.55±10.92）μmol/L、（1.85±0.43）μmol/L、（39.89±17.93）nmol/L、（31.64±8.19）×10 -3和21.51±6.72。 结论:建立了基于ID-LC-MS/MS定量检测Trp、Kyn和KA的方法，该方法简便快捷、灵敏度高、结果准确可靠，为临床相关研究提供了可靠支撑。

目的:研究1种基于液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）技术的血清17α-羟孕酮（17α-OHP）候选参考测量程序并对其进行评价。方法:2019年12月，取上海市临床检验中心员工体检留存的血清标本，采用正己烷乙酸乙酯混合液（体积比3∶2）提取加入同位素内标的血清样本，C18反向色谱柱分离，正离子电喷雾质谱仪检测，参照美国临床实验室标准化协会（CLSI）C62-A文件对建立的候选参考方法进行校准曲线、检测限与定量限、基质效应、不精密度、正确度、特异性、携带污染、线性范围等基本分析性能验证。结果:17α-OHP的线性范围为0.21~119.67 μg/L。检测限和定量限分别为5.218 ng/L、0.116 μg/L。3种不同比例50∶50、80∶20、20∶80）的血清与溶液混合物的相对基质效应分别为-0.02%、-0.40%、-0.90%。批内变异系数（ CV）在0.164、14.81、81.63 μg/L浓度处分别为1.73%~2.11%、0.98%~1.71%、0.47%~0.87%，批间 CV在上述3个浓度点处分别为1.82%、1.03%、0.80%。加标样本平均回收率在0.5、20、100 μg/L处分别为100.4%、101.7%、102.8%；检测中国计量科学研究院标准参考物质GBW09829，结果均在规定的不确定度范围内。无携带污染和特异性干扰。 结论:成功建立了基于同位素稀释LC-MS/MS技术的血清17α-OHP候选参考测量程序。该候选参考测量程序有着良好的精密度和准确度，能用于常规临床检验方法的量值溯源。

目的:联合使用同位素稀释液相色谱串联质谱及酶学参考方法研制冰冻人血清尿素、肌酐国家二级标准物质，作为量值溯源的载体。方法:参照JJF1343-2012《标准物质定值的通用原则及统计学原理》和JJF 1006-1994《一级标准物质技术规范》的要求对候选物质进行均匀性、稳定性、互换性评价；联合广东省中医院、北京航天总医院、深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司、迈克生物股份有限公司、北京利德曼生化股份有限公司、浙江美康生物科技股份有限公司的6家参考实验室采用国际检验医学溯源联合委员会推荐的同位素稀释液相色谱串联质谱法及酶学参考方法共同对标准物质进行定值，计算不确定度。结果:所研制标准物质均匀性的方差分析结果为 P>0.05，稳定性评价 t值小于 t（0.05）查表时的 t值，互换性评价结果位于4个常规检测系统测量值95%置信区间内，最终定值结果为尿素：14.7 mmol/L，扩展不确定度0.3 mmol/L（ k=2），肌酐：313.9 μmol/L，扩展不确定度14.5 μmol/L（ k=2）。 结论:成功研制的冰冻人血清尿素、肌酐二级标准物质标示值可靠，均匀性、稳定性较好，不同检测系统间具有良好互换性。

目的:探讨闭合性眼外伤患者玻璃体和视网膜的氧化三甲胺(TMAO)表达与继发性眼底出血的相关性。方法:前瞻性随机对照研究。纳入2020年1月至2021年7月郑州市第二人民医院闭合性眼外伤108例(108眼)，患者分成两组，其中继发性眼底出血者45例为出血组，无继发性出血者63例为无出血组；同期特发性黄斑孔者50例(50眼)作为对照组。采用稳定同位素稀释液相色谱-串联质谱法检测玻璃体和视网膜的TMAO表达量。结果:出血组玻璃体和视网膜的TMAO表达量均高于无出血组( t＝8.12，7.19；均 P<0.001)，无出血组高于对照组( t＝8.55，5.64；均 P<0.001)。根据眼外伤评分系统(OTS)将患者评分为1~5级。等级越低病情越严重，TMAO表达量也越高。出血组术后视力(BCVA)≥1.0者玻璃体和视网膜TMAO表达量明显低于视力<1.0者( t＝3.96，3.30；均 P<0.01)。 结论:闭合性眼外伤患者玻璃体和视网膜的TMAO表达量升高可能与继发眼底出血的风险增加、病情严重程度以及术后视力低下有关。

目的:建立同位素稀释超高效液相色谱串联质谱(ID-UPLC-MSMS)同时测定血清中5种脂溶性维生素的方法，以满足临床检测多种脂溶性维生素的需要。方法:选取2019年4月至2019年8月间上海市第十人民医院的血清样本并通过萃取法提取脂溶性维生素，采用ID-UPLC-MSMS进行检测，参照美国临床和实验室标准协会(CLSI)的相关文件，对该方法进行性能验证。结果:提出并成功验证了ID-UPLC-MSMS快速检测血清中多种脂溶性维生素的方法，该方法的检测线性范围分别为维生素A(VA)：25～2 500 μg/L，25-羟基维生素D 2[25(OH)D 2]: 2～200 μg/L, 25-羟基维生素D 3[25(OH)D 3]：2～200 μg/L，维生素E(VE)：0.25～50 mg/L，维生素K1(VK1)：0.1～20 μg/L。5种分析物的批内和批间精密度标准偏差均在±15%以内，25(OH)D 2和25(OH)D 3标准品测试结果的正确度为96.44%～102.37%。 结论:采用ID-UPLC-MSMS法同时测定5种脂溶性维生素，方法学性能满意，结果准确可靠，适合临床样本分析。

目的:应用两种互通性评价方案评价16种17-羟孕酮制备物的互通性。方法:互通性研究，收集2018年2月至2019年6月之间北京医院检验科的新鲜人血清共52份。根据美国临床和实验室间标准化研究所文件（CLSI）EP14-A3和国际临床化学和检验医学联合会（IFCC）互通性评价工作组报告，以血清17-羟孕酮同位素稀释液相色谱串联质谱法（ID-LC/MS/MS）为比对方法，3种临床常规分析系统（1种放射免疫法，2种LC/MS分析法）为待评方法，一同测定52个人血清样本和16种制备物的17-羟孕酮浓度，评价制备物质的互通性。结果:综合两种互通性评价结果，所有正确度验证材料和国家甾体激素标准物质在LC/MS分析系统中都显示出良好的互通性，6/9的EQA材料在三种常规分析系统中都显示出互通性。其中所有材料在偏倚差值法中所有材料的LC/MS分析系统中都显示出良好的互通性。结论:两种互通性评价结果有所差异，使用新鲜冰冻人血清作为血清17-羟孕酮的质评材料均能满足互通性要求。

目的:建立用同位素稀释液相色谱串联质谱（ID-LC/MS/MS）测定人血浆中血管紧张素Ⅱ的候选参考方法，并对方法性能进行评价。方法:以［ 13C 6- 15N］-血管紧张素Ⅱ为内标，重量法准确称取血浆及一定量内标混合，同时加入酶抑制剂，经硫酸锌溶液蛋白沉淀、反相固相萃取板处理，用液相色谱串联质谱分析，质谱选择多反应离子监测模式检测血管紧张素Ⅱ及内标的特定离子碎片。按照ISO15193要求对所建方法进行线性、灵敏度、精密度、回收率等性能评估及不确定度的评价。 结果:血管紧张素Ⅱ在10~1 000 pg/g范围内线性良好（ r=0.999 5），检测下限7.68 pg/g，加标回收率范围为97.14%~102.85%，批内不精密度≤3.21%，批间不精密度≤2.96%，总不精密度≤3.67%。 结论:用同位素稀释液相色谱串联质谱建立了血浆血管紧张素Ⅱ的检测方法，该方法准确可靠，有望成为血浆中血管紧张素Ⅱ测定的参考方法。

目的:建立同位素稀释液相色谱-串联质谱法（ID-LC/MS/MS）测定血清中皮质醇浓度的候选参考方法。方法:方法学建立。将样本与皮质醇内标混匀后加入碳酸钠溶液碱化处理，正己烷/乙酸乙酯进行液液萃取，流动相采用甲醇水溶液等度洗脱，质谱采用电喷雾电离源正离子模式（ESI +）及多反应监测（MRM）分析方法，标准溶液及内标的配制、样本与内标的混合均采用重量法进行控制，括号法计算皮质醇浓度。参照美国临床实验室标准化协会C62-A、C50-A及国内专家共识文件《液相色谱-质谱临床应用建议》《液相色谱串联质谱临床检测方法的开发与验证》等对方法正确度、精密度、特异性、线性、检测限和定量下限等性能进行系统评价。数据经Excel2019进行处理，最小二乘法进行线性回归分析。 结果:方法准确精密，测定有证标准物质ERM-DA192、ERM-DA193以及2021—2023年RELA样本的相对偏倚均<2%，加标回收率98.2%~101.1%，批内及批间不精密度均<2%，检测结果不受其他结构类似物干扰，在25~1 600 nmol/L范围内呈现出良好线性，方法检测限和定量下限分别为0.5和1.0 nmol/L。经溯源后的皮质醇测定试剂盒（化学发光免疫分析法）与该候选参考方法同时测定46例临床血清样本的相关性良好。结论:建立了一种灵敏、准确且操作简便的血清皮质醇浓度测定候选参考方法，可为临床常规测定方法的量值溯源及正确度评价提供参考。

目的:建立基于同位素稀释液相色谱串联质谱法（ID-LC-MS/MS）同时测定人全血中4种免疫抑制剂环孢素A、他克莫司、西罗莫司和依维莫司的候选参考方法。方法:分别采用环孢素A、他克莫司、西罗莫司和依维莫司同位素标记物为内标，重量法取样，标准曲线法进行定量；采用蛋白沉淀和固相萃取对制备的全血样本进行前处理，超高液相色谱-三重四级杆质谱检测。对方法的特异性、基质效应、检测限、定量限、批内变异系数（ CV）、实验室内 CV、加标回收率和不确定度等指标进行评价。 结果:方法选择性和特异性良好，结构类似物和基质效应均不影响检测结果。环孢素A、他克莫司、西罗莫司和依维莫司的检测限及定量限满足临床需求，批内 CV为 1.4%~1.8%、1.7%~2.8%、1.3%~3.7%和2.3%~3.2%，实验室内 CV为1.8%~2.9%、1.7%~3.8%、2.6%~4.7%和3.5%~4.6%，加标回收率分别为97.9%~100.3%、98.4%~103.1%、99.4%~102.0%和98.3%~99.4%。4个浓度质控品相对扩展不确定度分别为4.2%~4.4%、1.5%~2.4%、4.4%~4.9%和2.2%~2.7%。 结论:本研究建立了ID-LC-MS/MS测定全血中环孢素A、他克莫司、西罗莫司和依维莫司4种免疫抑制剂的方法，方法准确、精密、快速，有望成为候选参考方法。