目的:探讨早发性白内障与年龄相关性白内障患者房水中代谢物及代谢通路的差异。方法:代谢组学研究。收集2020年8月至2022年9月就诊于天津医科大学眼科医院的16例（17只眼）白内障患者。其中早发性白内障8例（8只眼），年龄相关性白内障8例（9只眼）。收集患者年龄、性别、术前裸眼视力、眼压、晶状体功能失调指数和眼轴长度等一般临床资料，并于白内障摘除术中留取房水和前囊膜组织标本，采用液相色谱-串联质谱法非靶向检测房水中的代谢物，进一步使用主成分分析、差异分析、聚类分析、相关性分析筛选差异代谢物，并根据代谢物的变化倍数（FC）对差异代谢物进行排名。使用受试者工作特征（ROC）曲线分析和代谢富集分析来筛选两组间的差异通路，并鉴定早发性白内障的生物标志物。前囊膜组织行免疫组织化学染色。采用比色法检测丙酮酸含量验证代谢组学分析结果。结果:8例早发性白内障患者中男性7例，女性1例，年龄（37.50±4.90）岁；8例年龄相关性白内障患者中男性7例，女性1例，年龄（73.44±5.22）岁；基线资料除年龄外差异均无统计学意义（ P>0.05）。差异分析共鉴别出347种差异代谢物，其中10种经ROC曲线分析确定为潜在的早发性白内障生物标志物（均 P<0.05），其中阳离子（POS）模式5种，分别是丙氧卡因（log 2FC=7.26）、2-甲基-2，3，4，5-四氢-1，5-苯并氧氮杂卓-4-酮（log 2FC=6.35）、 l-焦谷氨酸（log 2FC=-1.72）、亮氨酰脯氨酸（log 2FC=-0.77）和胆碱（log 2FC=-0.56），阴离子（NEG）模式5种，分别是N-苯乙酰谷氨酰胺（log 2FC=-1.84）、丙酮酸（log 2FC=1.07）、抗坏血酸（log 2FC=0.92）、假尿嘧啶核苷（log 2FC=-0.68）和棕榈酸（log 2FC=-0.51）。代谢富集分析共富集到72条差异通路（POS模式32条，NEG模式40条），其中谷胱甘肽代谢及半胱氨酸和蛋氨酸代谢、糖酵解或糖异生、丙酮酸代谢、三羧酸循环两组间的差异有统计学意义（ P<0.05）。验证结果显示早发性白内障患者房水中乳酸脱氢酶减少，丙酮酸升高（ P<0.05）。 结论:丙酮酸等10种代谢物可能是潜在的早发性白内障生物标志物；谷胱甘肽代谢、半胱氨酸和蛋氨酸代谢、糖酵解或糖异生、丙酮酸代谢和三羧酸循环代谢通路在早发性白内障患者中明显失调。

目的 探讨健脾化痰方对多囊卵巢综合征合并胰岛素抵抗(PCOS-IR)大鼠脂代谢及叉头盒转录因子-1(FOXO1)/丙酮酸脱氢酶激酶 4(PDK4)信号通路的影响.方法 40 只雌性SD大鼠随机分为空白对照组 10只和造模组 30 只.采用高脂饮食(8 周)联合来曲唑(第 4～8 周加入)建立PCOS-IR大鼠模型.完成造模后,将造模组大鼠随机分为模型对照组、健脾化痰方组、二甲双胍组,药物干预 4 周.观察各组一般情况,测定中医证候评分,计算体重变化;采用苏木素-伊红(HE)染色观察卵巢组织病理学改变;血液生化仪测定空腹血糖(FBG)和血脂四项;酶联免疫吸附(ELISA)法测定性激素如卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成素(LH)、睾酮(T)、雌激素(E2)、胰岛素(FINS)水平;蛋白免疫印迹(Western Blot)法及实时荧光定量PCR法测定卵巢FOXO1、PDK4 表达的变化.结果 与空白对照组相比,模型对照组出现脾虚痰湿症状,体重明显增加,血清LH、T、LH/FSH升高,E2、FSH降低,卵巢多囊性改变明显,糖脂代谢调控失常(P＜0.01).与模型对照组相比,健脾化痰方组与二甲双胍组大鼠体重增速放缓,卵泡发育情况见好,血清LH、T、LH/FSH、FBG、FINS、HOMA-IR、TC、TG、LDL-C降低,E2、FSH升高,卵巢FOXO1、PDK4 mRNA及蛋白表达下调(P＜0.05,P＜0.01);可升高血清HDL-C含量,但是组间差别无统计学意义(P＞0.05).结论 健脾化痰方能有效调节性激素分泌,改善PCOS-IR大鼠卵巢生殖功能,调节糖脂代谢,其机制可能是通过抑制FOXO1/PDK4 通路发挥作用.

对亚洲兰茂牛肝菌 Lanmaoa asiatica("见手青")的化学成分和生物活性进行研究.采用多种柱色谱技术以及重结晶等方式对其 95%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取物进行分离纯化,共得到17 个单体化合物.根据波谱数据及文献比对鉴定了化合物的结构,其中 9 个为甾体类化合物:citreoanthrasteroid(1)、1(10→6)abeo-麦角甾-5,7,9,22-四烯-11β-甲氧基-3α-醇(2)、3β,5α,9α-trihydroxy-6β-methoxyergosta-7,22-dien(3)、过氧化麦角甾醇(4)、9(11)-去氢过氧化麦角甾醇(5)、3β-羟基-(22E,24R)-麦角甾-5,8(9),22-烯-7-酮(6)、(24S)-麦角甾-7-烯-3β-醇(7)、22E,24R-麦角甾-7,22-二烯-3β-醇(8)和麦角甾醇(9);其余化合物分别为:腺嘌呤核苷(10)、5′-deoxy-5′-methylamino-adenosine(11)、5′-deoxy-5′-methylamino-9-(α-L-lyxofuranosyl)adenine(12)、(R)-4-methylpiperidin-2-one(13)、尿嘧啶核苷(14)、尿嘧啶(15)、烟酰胺(16)和 1(2)-linolyl-2(1)-palmityl-glycero-O-4′-(N,N,N-trimethyl)homoserine(17).其中化合物 1-3的核磁信号全归属为首次报道,化合物 13为新天然产物,化合物1-17 均为该种首次分离.利用MTT法测定化合物对肿瘤细胞的细胞毒活性,结果显示甾体类化合物 1、3-6 和 9 对人乳腺癌细胞(MCF-7)、小鼠小胶质细胞(BV2)和人肺癌细胞(A549)均有较强的细胞毒活性.化合物 10 对BV2 细胞呈现出中等强度的细胞毒活性,其IC50 值为 48.34 μmol/L.本研究对亚洲兰茂牛肝菌的化学成分进行了较为系统的研究,对亚洲兰茂牛肝菌的进一步开发利用具有重要意义.

目的 采用QuEChERs前处理结合气相色谱-串联质谱技术,建立四种不同果蔬基质(普通型、高色素型、高脂肪型及高糖型)中33种有机磷类农药残留量快速检测方法,为不同水果、蔬菜中多种有机磷农药同时检测和食品安全风险评估提供技术支持.方法 样品经乙腈及柠檬酸钠-柠檬酸氢二钠缓冲液同时提取,乙二胺-N-丙基硅烷(PSA)、十八烷基硅烷键合硅胶(C18)及石墨化炭黑(GCB)三种吸附剂净化,氮吹浓缩后用丙酮复溶,采用气相色谱-串联质谱仪在多反应离子监测(MRM)模式下进行检测,内标法定量.结果 四种不同果蔬基质中33种有机磷类农药在50～500μg/L的浓度范围内相关系数均大于0.995 0,方法检出限为1.50～5.04 μg/kg,定量限为5.01～16.78 μg/kg;在添加0.040～0.200mg/kg水平范围内,农药的平均回收率为71.4％～119.1％,相对标准偏差均低于12％.结论 该方法简单快速、准确度高、精密度好,适用于不同果蔬基质中33种有机磷类农药残留的快速检测和定量分析.

目的 寻找胆腑郁热型慢性鼻-鼻窦炎(CRS)患者尿液中内源性小分子代谢标志物,为明确其发病机制及治疗提供一定依据.方法 选择2019年4月—2021年10月在黑龙江中医药大学附属第一医院耳鼻喉科门诊就诊的20例胆腑郁热型CRS患者作为CRS组,选择同期就诊的20例鼻中隔偏曲患者作为对照组,采用液相色谱-质谱(UPLC-MS/MS)方法分析2组患者尿液代谢物的差异,并对潜在代谢标志物进行鉴定和分析.结果 与对照组比较,CRS组患者尿液中N-乙酰组胺、咪唑丙酸、去甲肾上腺素、香草扁桃酸、N-乙酰鸟氨酸、L-脯氨酸、2-氨基苯甲酸、氧戊二酸、甲基琥珀酸、4-吡哆酸、2-哌啶酮含量均明显上升(P均＜0.05),核黄素、四氢新蝶呤含量均明显下降(P均＜0.05).差异代谢物主要涉及精氨酸合成、酪氨酸代谢、核黄素代谢、D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代谢、维生素B6代谢、丁酸代谢、柠檬酸循环(TCA循环)、丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸的代谢、精氨酸和脯氨酸代谢等代谢通路.结论 胆腑郁热型CRS患者与鼻中隔偏曲患者的尿液代谢图谱存在差异,进一步揭示了其发病机制,为CRS中医证候研究提供了一定物质基础.

目的 对碘(I2)氧化法和二氧化锰(MnO2)氧化法两种前处理方法在尿蝶呤谱检测进行方法学评价,提高尿蝶呤谱在高苯丙氨酸血症(HPA)诊断及分型准确率.方法 分别用I2氧化法和MnO2氧化法处理65例尿液样本,通过定量分析尿液中新蝶呤(N)和生物蝶呤(B)含量、比较两种方法的最低检测限、精密度和回收率,以及分析两种方法在HPA的诊断符合率.结果 I2氧化法和MnO2氧化法处理苯丙酮尿症(PKU)、四氢生物蝶呤缺乏症(BH4D)和正常儿童尿液样本,诊断符合率均达100％.I2氧化法检测的N和B浓度均高于MnO2氧化法,差异有统计学意义(P＜0.05).两种方法N的检测限[I2氧化法:(0.000 63± 0.000 27)μg/L;MnO2 氧化法:(0.000 76±0.000 32)μg/L];B 的检测限[I2 氧化法:(0.000 84±0.000 35)μg/L;MnO2氧化法:(0.000 81±0.000 33)μg/L],I2氧化法优于MnO2氧化法.两种方法的批内精密度(CV)均较好(I2氧化法和MnO2氧化法N:2.54％、3.51％,B:2.43％、3.26％);批间CV I2氧化法优于MnO2氧化法(I2氧化法和MnO2氧化法N:2.26％、6.25％,B:2.75％、7.32％).低浓度标准品回收试验,I2氧化法的N回收率较差(I2氧化法和MnO2氧化法N:128.19％、85.7％;B:93.49％、87.55％);中、高浓度标准品回收试验N和B的回收率均良好(中、高浓度回收率分别是I2氧化法N:109.90％、99.59％,B:97.57％、103.29％;MnO2 氧化法 N:94.71％、98.41％,B:95.43％、100.5％).两种方法在 0.01～2.00 μg/L 范围内均有良好线性.结论 I2氧化法和MnO2氧化法能有效鉴别PKU和BH4D,两者能满足临床检测需求;I2氧化法优于MnO2氧化法.

目的 研究沉香Aquilariae Lignum Resinatum的2-(2-苯乙基)色酮类成分及其胃黏膜上皮细胞保护活性.方法 采用硅胶和ODS等多种色谱技术对沉香中2-(2-苯乙基)色酮进行分离纯化,结合波谱数据及其理化性质对化合物进行结构鉴定;采用牛磺胆酸诱导人胃黏膜上皮细胞GES-1损伤模型对分离得到的单体化合物进行胃黏膜保护活性筛选.结果从沉香醋酸乙酯萃取部位中分离得到5个化合物,分别鉴定为(5R,6S,7S)-5,6,7-三羟基-2-苯乙基-5,6,7,8-四氢-4H-色烯-4-酮(1)、(6S,7S,8S)-6,7,8-三羟基-2-(3-羟基-4-甲氧基)-5,6,7,8-四氢-4H-色烯-4-酮(2)、oxidoagarochromone C(3)、rel-(1aR,2R,3R,7βR)-1a,2,3,7β-tetrahydro-2,3-dihydroxy-5-[2-(4-methoxyphenyl)ethyl]-7H-oxireno[f][1]benzopyran-7-one(4)、沉香色酮J(5).化合物3～5在20μmol/L浓度时,相对模型组细胞存活率分别提高(27.17±4.38)％、(16.02±2.95)％和(14.84±2.86)％.结论 化合物1为新化合物,命名为四氢色酮N,通过计算电子圆二色谱(electronic circular dichroism,ECD)确定了其绝对构型.化合物3～5能显著改善牛磺胆酸诱导的人胃黏膜上皮细胞GES-1损伤,表现出一定的胃黏膜上皮细胞保护活性.

目的 运用代谢组学方法分析淫羊藿95％乙醇洗脱部位(E95EE)对正常大鼠尿液中内源性物质代谢的影响,通过寻找相关代谢途径及潜在作用靶点,探究其标志物表达的差异是否会随体液循环分布影响机体的不同系统,从而产生潜在的保护或毒性作用.方法 SD大鼠随机分为正常对照组和E95EE给药组,各10只,E95EE组ig给予E95EE 17.1 g·L-1,1/d,连续20 d.正常对照组以等量生理盐水代替,于末次给药后用代谢笼收集大鼠12 h尿液,处理后进行UPLC-TOF/MS分析.结果 鉴定出9个差异性的内源性代谢产物,即3-sn-磷脂酸、l-1磷脂酰乙醇胺、草酰乙酸、甲酰-N-乙酰-5-甲氧基犬尿素烯胺、N-乙酰-5-羟色胺、5,10-甲酰四氢叶酸、N-亚氨代甲基l-l-谷氨酸盐、1-酰基甘油酮3-磷酸盐和亚硫酸;6条主要代谢通路,即柠檬酸的乙酰辅酶A生物合成、组氨酸代谢、甘油三酯代谢、色氨酸代谢、维生素A代谢、糖酵解与糖异生;推测E95EE可能通过降低3-sn-磷脂酸和草酰乙酸水平,上调N-亚氨代甲基l-l-谷氨酸盐的表达,从而对神经、心血管系统发挥保护作用;可能通过降低5,10-甲酰四氢叶酸和l-1磷脂酰乙醇胺水平,增加肿瘤发生的风险.结论 E95EE对正常大鼠神经系统、心脑血管系统、免疫系统及肿瘤相关疾病存在药效与毒性并存的干预作用,其作用机制与甘油三酯代谢、维生素A代谢和色氨酸和组氨酸代谢等通路有关.

目的 研究长柱金花茶Camellia nitidissima var.longistyla叶的化学成分.方法采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20、制备液相等多种手段进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构.结果 从长柱金花茶叶95％乙醇提取物中分离得到16个化合物,分别鉴定为山柰酚(1)、3,5,6,7,4’-五羟基二氢黄酮(2)、6-羟基山柰酚(3)、(-)-表阿福豆素(4)、(-)-表儿茶素(5)、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(6)、α-菠菜甾醇(7)、β-胡萝卜苷(8)、5,7,3’,4’-四甲氧基黄酮(9)、7,3’,4’-三甲氧基-5-羟基黄酮(10)、5,7,3’,4’,5’-五甲氧基黄酮(11)、3-O-乙酰齐墩果酸(12)、正三十四烷醇(13)、β-香树脂醇(14)、α-菠菜甾醇-3-O-β-D-吡喃半乳糖苷(15)、芦丁(16).结论 所有化合物均为首次从该植物中分离得到,其中化合物2、3、9～11为首次从该属植物中分离得到.

目的:研究博落回叶的化学成分.方法:采用硅胶柱色谱以及制备液相色谱法进行分离纯化,并根据波谱数据鉴定化合物结构.结果:从博落回新鲜叶的乙醇提取物中分离纯化得到14个生物碱,分别鉴定为:原阿片碱(1)、别隐品碱(2)、血根碱(3)、白屈菜红碱(4)、去甲基白屈菜红碱(5)、去氢紫堇碱(6)、N-甲基四氢黄连碱(7)、黄柏碱(8)、6-甲氧基去甲基血根碱(9)、6-氰基二氢血根碱(10)、6-氰基二氢白屈菜红碱(11)、6-丙酮基二氢血根碱(12)、二氢血根碱(13)、二氢白屈菜红碱(14).结论:其中化合物5～9为首次在博落回属植物中分离得到.