本研究旨在探讨复方补肾活血颗粒含药血清是否促进小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化，现报道如下。

目的 研究新加苁蓉菟丝子汤对卵巢颗粒细胞线粒体生物合成和线粒体功能的影响.方法 采用雷公藤甲素建立人卵巢颗粒细胞(KGN)损伤模型,将细胞分为对照组、模型组、阳性药调经促孕丸组、新加苁蓉菟丝子汤组、沉默信息调节因子1(Silent mating type information regulator 1,SIRT1)抑制剂组和SIRT1抑制剂+新加苁蓉菟丝子汤组.用雷公藤甲素孵育6 h造成颗粒细胞功能损伤后再予SIRT1抑制剂以及空白或含药血清.干预48 h后采用CCK8法检测细胞活力;流式细胞术检测凋亡率;ELISA试剂盒检测抗苗勒激素(Anti-Müllerian,AMH)、促卵泡生成素(Follicle-stimulating hormone,FSH)和抑制素B(Inhibin B,INHB);生化试剂盒检测三磷酸腺苷(Adenosine triphosphate,ATP)酶;JC-1 法检测线粒体膜电位(Mitochondrial membrane potential,MMP);电子显微镜和荧光显微镜观察细胞线粒体形态结构、数量和活性变化;Western blot 检测 SIRT1、p-SIRT1、过氧化物酶体增殖物激活受体 γ 辅助活化因子 1(Peroxlsomeproliferator-activated receptor-γ coactlvator-1α,PGC-1α)、核呼吸因子1(Nuclear respiratory factor 1,NRF1)和线粒体转录因子(Mitochondrial transcription factor A,TFAM)的蛋白表达;PCR检测SIRT1、PGC-1α、NRF1和TFAM的mRNA表达和线粒体DNA拷贝数(Mitochondrial DNA copy number,mtDNA).结果 中成药调经促孕丸和补肾养血活血复方新加苁蓉菟丝子汤均可提高颗粒细胞活力(P<0.05);降低细胞凋亡率(P<0.05);提高ATP酶活性和MMP(P<0.05);改善线粒体形态结构损伤;增加线粒体数量、活性和mtDNA表达(P<0.01),上调SIRT1、PGC-1α、NRF1和TFAM的蛋白和mRNA表达(P<0.05).结论 新加苁蓉菟丝子汤对雷公藤甲素所致卵巢颗粒细胞损伤具有保护作用,其机制可能是通过调控SIRT1/PGC-1α信号通路促进新生线粒体生物合成以改善线粒体功能障碍.

目的 基于Wnt/β-catenin信号通路探讨复方补肾活血颗粒含药血清对人骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨、成脂分化的影响.方法 取骨质疏松症患者骨髓,体外培养BMSCs,将细胞分为空白组和含药血清低、中、高剂量组(2%、5%、8%),CCK-8法检测细胞活力,碱性磷酸酶染色、茜素红染色观察成骨分化潜能,油红O染色观察成脂分化潜能,RT-PCR检测成骨分化相关基因Runt相关转录因子2(RUNX2)、Osterix(Osx)和成脂分化相关基因CCAAT/增强子结合蛋白α(C/EBPα)、过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)γ mRNA表达,Western blot检测RUNX2、Osx、C/EBPα、PPARγ、低密度脂蛋白受体相关蛋白(LRP)5及β-连环蛋白(β-catenin)蛋白表达.结果 与空白组比较,含药血清各剂量组细胞活力显著升高,其中以含药血清中剂量组效果最佳;含药血清各剂量组可促进BMSCs早期钙化和钙沉积形成,抑制脂滴形成;含药血清各剂量组BMSCs RUNX2、Osx mRNA和蛋白表达升高,C/EBPα、PPARγ mRNA和蛋白表达降低,LRP5和β-catenin蛋白表达明显升高,其中含药血清高剂量组差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01,P<0.001).结论 复方补肾活血颗粒含药血清对BMSCs成骨分化相关因子表达有明显促进作用,并可抑制BMSCs成脂分化,其机制与激活Wnt/β-catenin信号通路,进而调节成骨-成脂平衡有关.

目的 观察复方补肾活血颗粒对绝经后非老年骨质疏松症患者视觉模拟评分(Visual Analog Scale,VAS)和骨密度(Bone Mineral Density,BMD)的影响.方法 研究对象选自2015年6月-2015年12月在本院诊治的肾虚血瘀证绝经后非老年骨质疏松症患者60例,将患者按照随机函数随机分为两组(对照组和治疗组),每组30例.两组均给予一般治疗,对照组予仙灵骨葆胶囊治疗,治疗组予复方补肾活血颗粒.两组观察时限均为6个月,治疗前后需按照研究方案定期计算中医证候积分,BMD和VAS等指标.结果 临床观察表明,复方补肾活血颗粒治疗组中医证候有效率为90％,对照组为60％,与对照组相比,疗效明显优于对照组(P＜0.01).治疗组中医证候积分为7.96±3.86分,对照组为10.16 ±3.85分,两组比较具有统计学差异.治疗后治疗组BMD和VAS分别为2.24±0.55 g/cm2、1.96±1.47分,对照组为2.50±0.41 g/cm2、2.86±1.79分,治疗组改善情况优于对照组.结论 复方补肾活血颗粒能显著改善绝经后非老年骨质疏松症患者中医临床症状、BMD和VAS,未见不良事件的发生,复方补肾活血颗粒治疗绝经后非老年骨质疏松症是安全有效的.

背景:中药复方柔肝化纤颗粒已证明能显著改善慢性肝炎、肝硬化患者的临床症状,但其能否多途径、多靶点、多环节改善肝脏微循环尚不明确.目的:构建肝纤维化大鼠模型,观察中药复方柔肝化纤颗粒全方及不同拆方组合对模型大鼠肝脏微循环障碍失衡的影响及差异.方法:采用CCl4复合因素造模方法复制肝纤维化大鼠模型,在第4周造模结束后将建模成功的大鼠随机为6组:模型组、大黄蟅虫丸组,柔肝化纤颗粒组1:柔肝化纤颗粒全方灌胃;柔肝化纤颗粒组2:予补肾养肝方灌胃;柔肝化纤颗粒组3:予益气健脾方灌胃;柔肝化纤颗粒组4:予化痰解毒方与活血化瘀、软坚散结方灌胃;同时设正常对照组进行对比,各组分别按0.1 mL/kg灌胃给予相应的药液,1次/d,共给药12周.结果与结论:①光学显微镜下观察,模型组肝间质出现广泛纤维组织增生,将正常肝小叶分割成大小不等的肝细胞团(即假小叶形成),说明肝纤维化模型大鼠造模成功;②与正常对照组比较,各组大鼠血清一氧化氮及内皮素1水平明显偏高,且肝硬化程度越高,一氧化氮及内皮素1水平增高越明显(P<0.01),而肝动脉始增时间、肝静脉始增时间的缩短越明显(P<0.05或P<0.01);③与模型组比较,各用药组血清一氧化氮及内皮素1水平均有不同程度的降低(P<0.01),各用药组肝动脉始增时间、肝静脉始增时间均有不同程度的延长(P<0.01);④与黄蟅虫丸组相比,柔肝化纤全方组的一氧化氮及内皮素1水平均显著降低(P<0.05或P<0.01),肝静脉始增时间较黄蟅虫丸组延长(P<0.01);⑤结果说明,实验成功复制了肝纤维化模型大鼠,采用中药复方柔肝化纤颗粒全方干预治疗后,能够调节模型大鼠肝脏微血管的流速,促进肝脏微循环的血流灌注量,有助于延缓肝纤维化的进展,其机制可能主要通过降低血清一氧化氮及内皮素1水平有关.

动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是动脉血管硬化性疾病中最常见的一种类型,其主要病理改变为动脉管壁增厚、变硬、管腔狭窄,引起相应组织、脏器的供血、供氧不足.现代研究已证实心、脑血管的粥样硬化构成了众多心脑血管疾病的发病基础[1],严重威胁了人类的生命健康,日益引起人们的重视.

目的:观察去卵巢骨质疏松症大鼠模型股骨和肾组织中IHH mRNA和蛋白活性变化,探究中药防治骨质疏松症的分子生物学机制.方法:采用切除雌性SD大鼠双侧卵巢的方式建立骨质疏松症模型,运用补肾中药复方、活血中药复方对模型大鼠进行干预12周,用骨疏康颗粒作为阳性对照药物.RT-PCR检测各组股骨和肾组织IHH mRNA相对表达量;ELISA法检测各组股骨和肾组织IHH蛋白含量.结果:与正常组比较,模型组股骨和肾组织IHH mRNA和蛋白表达量显著减少(P<0.01);与模型组比较,各用药组股骨和肾组织IHH mRNA和蛋白表达均显著增加(P<0.01),且补肾组显著高于活血组(P<0.01).结论:骨质疏松症的发生机制可能与Hedgehog信号传导通路中IHH含量降低有关;补肾、活血中药复方可以激活IHH信号传导通路,促进骨形成,抑制骨吸收,起到防止骨质疏松症的作用,且补肾中药复方优于活血中药复方.

目的 探讨中医辨证施治慢性肾脏疾病(chronic kidney disease,CKD)的有效性和安全性.方法 采用自身前后对照前瞻性研究纳入CKD2-4期患者40例,常规西医治疗基础上,第1阶段口服以通腑泄浊为主的中成药“尿毒清颗粒”治疗6个月,第2阶段序贯口服根据中医辨证施治以补肾活血为主的“肾痿复方”治疗6个月,两阶段之间不设置洗脱期.两阶段治疗前及治疗后2月、4月、6月观察患者临床症状、肌酐、尿素氮、肾小球滤过率、尿蛋白、尿红细胞等变化.经两阶段治疗后,对未达终点指标的患者进行统计分析.结果 两阶段治疗临床有效率观察,第2阶段治疗有效率(90％)高于第1阶段(40％).两阶段之间肾功能疗效比较发现,第1阶段治疗后较治疗前肌酐升高(P＜0.05)、肾小球滤过率降低(P＜0.05),第2阶段治疗后较该阶段治疗前肌酐明显降低(P＜0.001)、肾小球滤过率升高(P ＜0.001),第2阶段降低血肌酐、升高肾小球滤过率的作用优于第1阶段(P＜0.001).两阶段整体治疗后与治疗前相比,患者尿素氮、肌酐降低(P＜0.05),肾小球滤过率升高(P＜0.05),24h尿蛋白、尿红细胞无明显变化(P＞0.05).结论 中医辨证施治慢性肾脏疾病可降低血肌酐、尿素氮,改善肾小球滤过率,延缓CKD进展,疗效优于中成药尿毒清颗粒.

目的:观察补肾活血中药复方新加归肾丸对体外培养大鼠卵巢颗粒细胞增殖的影响.方法:体外培养大鼠卵巢颗粒细胞,分为空白组,模型组,中药低、中、高剂量组共五组,空白组用1％胎牛血清培养基培养,其余四组滴加雷帕霉素,20 min后中药各组加入不同浓度的中药水提醇沉液.分别在培养24、48、72 h后采用流式细胞仪检测细胞周期各时相的变化,并计算细胞增殖指数(PI);免疫印迹法检测磷酸化-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)、细胞周期蛋白D2(Cyclin D2)的表达水平.结果:用药24、48、72 h这3个时段,中药各组S期细胞比率、PI均高于模型组(P<0.05),其中中药中剂量组最为明显(P<0.05).用药24、48、72 h这3个时段,中药各个剂量组p-mTOR、Cyclin D2表达水平均高于模型组(P<0.05).中药各个剂量中以中药中剂量组效果最明显(P<0.05).结论:补肾活血中药复方新加归肾丸能通过激活mTOR信号通路活性,上调Cyclin D2蛋白表达,促使颗粒细胞由G1期向S期转化,加速卵巢颗粒细胞周期进程,促进颗粒细胞增殖来实现改善卵泡发育.

目的:观察复方补肾健脾活血颗粒对脾肾两虚夹瘀证2型糖尿病性骨质疏松患者疗效及对疼痛视觉模拟评分(VisualAnalogScale,VAS)、骨密度(Bone Mineral Density,BMD)、血清超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、骨钙素(Bone gla protein,BGP)、抗酒石酸酸性磷酸酶-5b(Tartrate-resistant acid phosphatase-5b,TRACP-5b)、血糖及生活质量的影响.方法:研究对象选自2019年4月-2019年10月在本院诊治的脾肾两虚夹瘀证2型糖尿病性骨质疏松症患者72例,将患者按照随机函数随机分为对照组和治疗组,每组36例.两组均给予一般治疗,对照组在一般治疗基础上加用阿仑膦酸钠维D3片(Ⅱ)治疗,每周一次,每次70 mg;治疗组在对照组基础上加用复方补肾健脾活血颗粒,每天1袋,分两次口服.两组观察时限均为24 w,治疗前后计算中医证候积分、检测VAS、BMD、氧化应激指标(SOD、MDA)、骨代谢指标(BGP、TRACP-5b)、空腹血糖(Fasting plasma glucose,FPG)、餐后2h血糖(2 hours postprandialblood sugar,2 hPG)、糖化血红蛋白(Hemoglobin A1c,HbA1c)及生活质量总积分等指标.结果:临床观察表明,复方补肾健脾活血颗粒治疗组中医证候有效率为88.9％,对照组为75.0％,治疗组疗效明显优于对照组(P＜0.05).治疗组治疗后中医证候积分为(7.81±1.67)分,明显低于对照组治疗后为(9.61±2.64)分(P＜0.01).与治疗前比较,两组治疗后BMD增加、SOD活力、BGP含量明显升高,血清MDA含量、TRACP-5b、VAS积分显著降低(P＜0.01);与对照组比较,治疗组治疗后BMD、SOD、MDA、BGP、TRACP-5b各指标和VAS积分改善情况优于对照组(P＜0.05或P＜0.01).与治疗前比较,两组治疗后血清FPG、2 hPG、HbA1c含量显著降低(P＜0.01);两组治疗后血清FPG、2hPG、HbA1c无显著差异(P＞0.05).与治疗前比较,两组治疗后生活质量总积分均显著升高(P＜0.01);与对照组比较,治疗组治疗后生活质量总积分显著升高(P＜0.01).结论:复方补肾健脾活血颗粒治疗脾肾两虚夹瘀证2型糖尿病性骨质疏松患者疗效显著,能有效缓解疼痛症状,增加骨密度,抗氧化应激,改善骨代谢水平,提高患者的生活质量.