目的 采用一测多评(QAMS)法同时检测松龄血脉康胶囊中莽草酸、儿茶素、槲皮素、山柰酚、异鼠李素、3'-羟基葛根素、葛根素、3'-甲氧基葛根素、大豆苷和染料木素含量,建立加权优劣解距离(TOPSIS)与灰色关联度(GRA)融合模型对 15 批样品进行质量评价.方法 采用高效液相色谱(HPLC)法,以山柰酚为内参物,计算各成分相对校正因子及含量,与外标法实测值对比验证QAMS法可行性;采用化学计量学对含量结果进行分析,挖掘松龄血脉康胶囊质量差异标志物.以各成分VIP值为权重,通过加权TOPSIS与GRA融合模型对样品质量进行差异性分析.结果 一测多评法与外标法结果无显著差异;15 批样品聚为 3 类,葛根素、3'-羟基葛根素、槲皮素、3'-甲氧基葛根素和莽草酸为松龄血脉康胶囊的质量差异标志物;加权TOPSIS与GRA融合模型分析结果显示,不同时期生产的松龄血脉康胶囊存在一定质量差异.结论 一测多评、加权TOPSIS与GRA融合模型可用于松龄血脉康胶囊的质量综合评价.

目的:建立葛根超高效液相色谱指纹图谱分析方法。方法:色谱柱为Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18(2.1 mm×100 mm，1.8 μm)；流动相为乙腈(A)-0.1%甲酸(B)，梯度洗脱，流速0.3 ml/min；检测波长250 nm；柱温30 ℃；进样量2 μl，采用中药指纹图谱相似度评价系统进行相似度评价。并使用SPSS软件进行聚类分析、主成分分析与偏最小二乘法分析，判断不同产地葛根成分差异。结果:以葛根素为参照峰，标定了22个共有峰，指认了其中6个峰分别为3'-羟基葛根素、葛根素、3'-甲氧基葛根素、葛根素芹菜糖苷、大豆苷、大豆苷元色谱峰。25批样品中，24批样品相似度均在0.990以上，表明样品一致性良好。经聚类分析、主成分分析与偏最小二乘法分析，25批葛根药材可聚集为4~5类，并发现了3'-羟基葛根素等差异成分。基于层次分析法和多指标正交试验对葛根药材的提取工艺进行了优化，最佳提取工艺为：加入50%乙醇40 ml回流提取40 min。结论:超高效液相色谱指纹图谱适用于葛根药材的质量评价。

目的 建立评价半夏及其炮制品硫熏前后品质的超高效液相色谱-四极杆-飞行时间高分辨质谱(UPLC-Q-TOF-MS)法.方法 色谱柱为Waters HSS T3柱(100 mm × 2.1 mm,1.7 μm),流动相为甲醇-乙腈(1∶1,V/V)-0.1％甲酸溶液(梯度洗脱),在正、负离子监测模式下采集半夏及其炮制品硫熏前后的化合物数据,与在Chemspider,mzCloud,Metaboanalyst数据库及相关文献中检索到的化合物进行比对.应用Sciex OS软件对采集到的硫熏样品数据进行分析,找到含硫化合物的特征性中性丢失或特征性碎片离子,判定半夏及其炮制品硫熏后的含硫产物.结合偏最小二乘判别分析(PLS-DA)法对半夏及其炮制品进行分类.结果 半夏及其炮制品中共检出254种化合物,主要为氨基酸、核苷及其衍生物、有机酸等小分子化合物,以及皂苷、生物碱、木质素衍生物等天然产物.半夏炮制品(姜半夏、法半夏、清半夏)硫熏后均可检出31种含硫化合物,其中6-姜辣素仅在姜半夏中检出,大豆苷和甘草酸仅在法半夏中检出.在不同程度硫熏半夏中,含硫量变化趋势基本符合严重硫熏、超限度＞稍熏、略超限度＞未熏的变化趋势.结论 建立的UPLC-Q-TOF-MS法可快速、全面地分析对半夏及其炮制品中的化学成分.硫熏会影响半夏及其炮制品的品质,在半夏加工过程中应合理、规范使用硫熏技术,避免过度硫熏对半夏药材质量的影响.

目的 基于网络药理学和分子对接技术筛选补肾活血方防治糖尿病性视网膜病变的质量评价指标,同时建立活性成分的超高效液相色谱-三重四极杆质谱(UHPLC-QqQ-MS/MS)含量测定方法.方法 利用网络药理学筛选补肾活血方防治糖尿病性视网膜病变的关键化合物和靶点.基于分子对接技术验证化合物和靶点的相关性,确定补肾活血方的活性成分作为质量评价指标.建立补肾活血方活性成分的UHPLC-QqQ-MS/MS含量测定方法.采用ZORBAX SB-C18(2.1 mm×50 mm,1.8 μm)色谱柱,甲醇(A)-0.1%甲酸水溶液(B)作为流动相,在多反应监测模式下进行梯度洗脱.流速:0.3 mL·min-1;进样量:1 μL.结果 网络药理学及分子对接筛选出了 5 个核心靶点及 12 个活性成分(毛蕊花糖苷,松果菊苷,异类叶升麻苷,丹参酮ⅡA,隐丹参酮,二氢丹参酮I,人参皂苷Re、Rd和Rb1,葛根素,大豆苷,鹰嘴豆牙素A),其亲和力良好(结合能≤-5.0 kcal·mol-1).含量测定结果表明,各成分在线性范围内相关性良好(r＞0.999 5),平均加样回收率在 97.57%～101.48%.8 批样品中 12个成分含量分别为 0.027 9%～0.050 6%、0.006 4%～0.022 0%、0.017 1%～0.041 5%、0.009 2%～0.015 4%、0.012 6%～0.020 5%、0.004 4%～0.007 6%、0.334%～0.643%、0.238%～0.530%、0.353%～0.693%、3.411%～6.048%、1.023%～1.352%和 0.000 8%～0.001 8%.结论 基于网络药理学、分子对接和UHPLC-QqQ-MS/MS技术,建立了快速筛选并测定补肾活血方中 12 个活性成分的方法,为全面评价其质量及有效性提供了参考.

目的 考察炮制、配伍对栀子豉汤有效成分的影响.方法 取生品、炒制品、焦制品及三者与淡豆豉的配伍适量,HPLC法同时测定京尼平龙胆双糖苷、栀子苷、染料木苷、西红花苷Ⅰ、西红花苷Ⅱ、大豆苷元、染料木素的含量,计算溶出率.结果 7 种成分在各自范围内线性关系良好(r＞0.999 4),平均加样回收率 95.22%～104.94%,RSD≤3.36%.炮制后,生品中栀子苷、西红花苷Ⅰ、西红花苷Ⅱ含量降低;配伍后,生品、炮制品水提物中环烯醚萜苷类、二萜色素类成分溶出率降低;乙醇提取时有利于环烯醚萜苷类成分溶出,提取溶剂对西红花苷类成分溶出的影响更大.结论 该方法简便、重复性好,可为栀子豉汤质量标准建立提供理论依据.

目的 对畅脉乐胶囊(Ⅰ)质量进行评价.方法 分析采用 Thermo Scientific AccucoreTM XL C18 色谱柱(4.6 mm×250 mm,4 μm);流动相甲醇-乙腈-0.5%磷酸,梯度洗脱;体积流量1 mL/min;柱温35℃;检测波长230、280 nm,测定天麻素、丹参素、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-龙胆双糖苷、3′-羟基葛根素、葛根素、3′-甲氧基葛根素、葛根素芹菜糖苷、芍药苷、大豆苷、迷迭香酸、紫草酸、异槲皮苷、芒柄花苷、大豆苷元、丹酚酸B、毛蕊异黄酮的含量,建立HPLC指纹图谱,测定相似度.结果 16 种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.999 0),平均加样回收率 87.4%～103.9%,RSD 0.54%～3.10%.在 230 nm处,10 批样品指纹图谱相似度为 0.954～0.999,而在280 nm处其差异较明显.3′-羟基葛根素、葛根素、3′-甲氧基葛根素、葛根素芹菜苷、大豆苷、大豆苷元是主要差异成分,芍药苷、异槲皮苷含量在各批样品中稳定.结论 该方法简便、准确、可靠,可用于畅脉乐胶囊(Ⅰ)的质量控制.

目的 建立HPLC法同时测定脑脉泰胶囊中 3′-羟基葛根素、2-羟基红花黄色素A、葛根素、葛根素芹菜糖苷、3′-甲氧基葛根素、大豆苷、二苯乙烯苷、木犀草苷、染料木苷、木犀草素、丹酚酸B、迷迭香酸的含量.方法 分析采用Kromasil C18 色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相乙腈-水(含 1.0 g/L 磷酸),梯度洗脱;体积流量0.8 mL/min;柱温 30℃;检测波长 280 nm.再进行聚类分析、主成分分析.结果 12 种成分在各自范围内线性关系良好(r＞0.999 0),平均加样回收率 97.07%～98.30%,RSD 0.86%～1.82%.10 批样品聚为 4 类,4 种主成分累积方差贡献率达 86.262%.结论 该方法简便稳定,可靠准确,可为脑脉泰胶囊的质量控制提供科学依据.

[目的]"三系"法是选育杂交大豆的主要途径,但恢复系中仅有少数大豆恢复基因被克隆,为挖掘更多新恢复基因,从而促进多基因聚合的强恢复系选育,提高杂种F1 的育性稳定性.[方法]以大豆细胞质雄性不育系JLCMS5A和其恢复系JLR2 为材料,采用转录组测序技术分析JLCMS5A和JLR2 花蕾不同时期的转录水平变化,挖掘调控育性恢复和花蕾发育进程的相关基因和通路.进一步对具有恢复基因特征编码PPR(pentatricopeptide repeat)蛋白的差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)进行基因注释、序列差异分析、RT-qPCR验证、系统进化分析及蛋白结构预测,挖掘育性恢复相关基因.[结果]转录组测序鉴定到 17 181 个DEGs,其中有 3 856 个DEGs与发育时期相关,2 808 个DEGs与育性相关.GO(gene ontology)功能注释表明,与育性相关的DEGs主要富集在ADP结合、核酸结合转录因子活性和蛋白激酶活性等功能类别,与发育时期相关的DEGs主要富集在蛋白质异源二聚化活性、DNA复制和DNA结合等功能类别.KEGG(kyoto encyclopedia of genes and genomes)富集分析表明,育性相关DEGs主要参与内质网蛋白质加工、葡萄糖苷酸生物合成和植物激素信号转导等与蛋白质、糖类和信号转导密切相关的代谢通路,发育时期相关DEGs主要参与DNA复制、错配修复、淀粉和蔗糖代谢等与细胞分裂和能量物质降解密切相关的代谢通路.育性恢复候选基因分析发现,JLR2 中的Glyma.09G176400可能在调控大豆细胞质雄性不育育性恢复过程中起到一定作用.[结论]共鉴定到 3 856 个与发育时期相关的DEGs,2 808 个与育性相关的DEGs;鉴定出具有恢复基因特征编码PPR蛋白的DEGs 15 个;挖掘了 1 个育性恢复相关基因Glyma.09G176400.

目的 根据三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)细胞过度表达葡萄糖转运蛋白 1(glucose transporter type 1,Glut1),而人参皂苷Rg3(ginsenoside Rg3,Rg3)的葡萄糖基可与Glut1 底物高度结合的特点,以Rg3 为脂质体膜材,制备包载雷公藤红素(celastrol,Cel)的靶向治疗TNBC的脂质体(Cel/Rg3-LPs),并对其靶向行为及抗TNBC疗效进行考察.方法 采用薄膜分散法制备 Cel/Rg3-LPs 并采用单因素考察法优化处方,对优化处方的 Cel/Rg3-LPs 进行形态、粒径、ζ 电位、体外释放和稳定性的考察;通过Cel/Rg3-LPs在体外鼠源 4T1 细胞的摄取实验、及对BALB/c原位荷 4T1 瘤株小鼠的治疗效果综合评价其靶向性.结果 Cel/Rg3-LPs优化处方为水化温度50℃,Cel为1.5 mg,Rg3为3.0 mg,大豆磷脂为21.0 mg,制备得到的脂质体外观呈圆球形,分布均匀,其粒径和 PDI 分别为(148.4±0.23)nm 和 0.19±0.01,ζ 电位为(-29.70±0.34)mV,Cel在脂质体中包封率为(96.69±0.03)%,载药量为(5.62±0.01)%.Cel/Rg3-LPs在 4T1 细胞中的摄取作用显著增强,且显著抑制 4T1 细胞增殖;原位荷瘤小鼠体内实验表明,Cel/Rg3-LPs能降低肿瘤组织脂质,并明显抑制肿瘤生长,具有良好的肿瘤靶向性,无明显肝肾毒性和组织毒性.结论 利用Rg3 替代胆固醇作为脂质体膜材可使雷公藤红素具有较好的TNBC靶向性,其药效相比胆固醇作为膜材显著增强,值得进一步研究.

中药黄精为百合科、黄精属植物黄精Polygonatum sibiricum Red.、多花黄精Polygonatum cyrtonema Hua或滇黄精Polygonatum kingianum Coll.et Hemsl.的干燥根茎,用药历史悠久,性平、味甘,归脾、肺、肾经,具有养阴润肺、补脾益气、滋肾填精之功效,用于治疗肺虚燥咳、脾胃虚弱、体倦乏力、口干食少、精血不足、内热消渴等.本文对黄精的化学成分及现代药理研究进行综述,并基于其药理活性、药效物质、植物亲缘学、药材配伍、加工炮制和网络药理学等研究,预测分析了其质量标志物(quality markers,Q-marker).初步确定黄苓素、甘草素、β-谷甾醇、薯蓣皂苷元、5,4'-二羟基黄酮、3'-甲氧基大豆苷、新甘草苷和黄精多糖为黄精的质量标志物,为黄精质量控制和临床用药提供参考依据.