目的:研究大黄丹参对高脂饮食诱导的胰腺纤维化大鼠氧化应激、内质网应激相关因子的影响。方法:将40只雄性清洁级SD大鼠，采用随机数表法均分成对照组、模型组、大黄丹参低、中、高剂量组，每组8只；对照组喂以普通饲料，其余4组均喂以高脂饲料连续10周建立胰腺纤维化模型。造模同时，各组以相应药物灌胃，对照组与模型组生理盐水灌胃，造模结束后取材。光镜、电镜观察胰腺形态学和超微结构变化。生化检测血清过氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)含量。实时荧光定量核酸扩增检测(PCR)及蛋白质印迹法(Western blot)检测胰腺C-Jun氨基酸末端激酶(JNK)、葡萄糖调节蛋白(GRP)及半胱氨酸门冬氨酸特异性蛋白酶-12(Caspase-12)信使RNA(mRNA)及蛋白表达。组间数据比较采用单因素方差分析。结果:模型组胰腺形态学和超微结构均可见内质网肿胀、细胞间隙变窄等病理变化，大黄丹参各剂量组均可不同程度改善以上病理变化。大黄丹参中、高剂量组SOD[(24.71±2.35)、(33.80±3.21) U/ml]、GSH含量[(61.41±5.57)、(101.34±17.32) gGSH/L]含量高于模型组(12.77±3.17、32.05±5.59， P<0.01)，差异有统计学意义，大黄丹参低、中、高剂量组MDA[(7.10±0.61)、(6.13±0.63)、(5.47±0.57) μmol/L]、TG[(0.43±0.08)、(0.38±0.06)、(0.22±0.03) mmol/L]含量低于模型组(8.27±1.12、0.69±0.13， P<0.01)，大黄丹参中、高剂量组TC[(0.58±0.19)、(0.39±0.15) mmol/L]含量低于模型组(1.18±0.44， P<0.05)。大黄丹参中、高剂量组胰腺组织JNK蛋白及mRNA(0.74±0.09、0.69±0.10；0.33±0.04、0.25±0.02)低于模型组(0.99±0.12，1.00±0.00， P<0.05)；大黄丹参中、高剂量组P-JNK蛋白(0.50±0.06、0.52±0.13)低于模型组(1.13±0.11， P<0.01)；大黄丹参中、高剂量组胰腺组织GRP蛋白及mRNA(0.67±0.13、0.38±0.14；0.51±0.02、0.26±0.02)低于模型组(1.09±0.18、1.00±0.00， P<0.05)，大黄丹参中、高剂量组胰腺组织Caspase-12 mRNA(0.68±0.08、0.36±0.06)低于模型组(1.00±0.00， P<0.01)；大黄丹参高剂量组Caspase-12蛋白(0.41±0.10)低于模型组(0.95±0.13， P<0.01)，差异均有统计学意义。 结论:大黄丹参可通过降低氧化应激，维持内质网应激稳态来抑制胰腺纤维化。

目的:探讨华蟾素对非酒精性脂肪肝脂质代谢紊乱的影响。方法:制备脂性肝原代细胞模型，以华蟾素低、中、高剂量干预24 h后，检测甘油三酯(TG)含量，实时荧光定量核酸扩增检测系统(q-PCR)检测脂肪酸氧化蛋白(PPARα、Cpt1a) mRNA表达水平，蛋白质印迹法(Western blot)检测去乙酰化酶6(SIRT6)，过氧化物酶增殖活化受体α(PPARα)，肉毒碱棕榈酰基转移酶1a(Cpt1a)的蛋白表达水平。采用随机数表法，将野生型小鼠高脂模型分为空白对照组、高脂组、高脂加华蟾素低、中、高剂量组，通过分子对接及相关脂质合成蛋白检测出SIRT6-PPARα的激活状态；最后通过SIRT6小鼠肝脏原代细胞观察华蟾素给药后TG变化。组间比较采用 t检验。 结果:华蟾素高剂量组TG含量低于模型组(0.40±0.06比0.67±0.07， t＝6.274， P<0.05)。华蟾素对小鼠肝原代细胞基因mRNA表达的影响：高剂量组PPARα表达高于模型组(0.85±0.15比0.29±0.04， t＝7.178， P<0.05)；高剂量组Cpt1a表达高于模型组(0.84±0.06比0.62±0.12， t＝3.357， P<0.05)。高剂量组肝脏TG含量低于模型组(0.66±0.15比1.51±0.09， t＝12.15， P<0.05)，差异均有统计学意义。在SIRT6敲除小鼠肝脏原代细胞中，模型组TG含量高于空白对照2，差异有统计学意义(0.66±0.08比0.35±0.09， t＝6.31， P<0.05)，高剂量组与模型组比较，差异无统计学意义(0.60±0.07比0.66±0.08， t＝1.38， P>0.05)。 结论:华蟾素可在一定程度上通过激活SIRT6-PPARα信号通路促进脂肪酸氧化水平，改善代谢，减轻脂肪性肝病小鼠的脂质沉积。

目的:分析尿液的脂阿拉伯甘露聚糖（LAM）抗原检测方法对肺结核患者的诊断价值，为尿液LAM抗原试剂盒在中国地区的推广提供依据。方法:2023年3—5月，前瞻性收集首都医科大学附属北京胸科医院诊治肺部疾病患者228例［男134例，女94例，年龄20~82（44.8±16.7）岁］，其中肺结核患者143例，非结核病患者85例。收集所有患者的痰标本和尿液，进行传统病原学检测和尿液LAM抗原检测，分析各检测阳性组合的筛查结果，并通过卡方检验等统计学方法对结果进行进一步分析。结果:尿液LAM试剂盒的检测敏感度为46.2%（95% CI：37.9%~54.7%），检测特异度为96.5%（95% CI：89.3%~99.1%），总体符合率为64.9%。联合应用尿液LAM抗原检测和结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测（Xpert）两种方法检测阳性样本的检出率（60.8%，87/143）高于单独应用Xpert检测阳性样本的检出率（49.7%，71/143），差异有统计学意义（ P<0.05）。风险因素分析结果表明，尿液LAM抗原检测结果阴性的风险随着细菌载量的降低而增加。 结论:尿液LAM抗原检测方法特异度高，与传统病原学联用可有效提高检出率。尿液LAM抗原检测法仍具有受细菌载量影响和区分非结核分枝杆菌样本能力不强等局限性，需进一步试验验证。

目的:评估6种结核分枝杆菌检测方法对不典型肾结核的早期诊断价值，为临床诊断提供参考。方法:收集河北省胸科医院泌尿外科2015年10月至2020年12月诊治的不典型肾结核患者46例(结核组)、非结核肾病患者53例(对照组)，分别采用结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)、结核菌素试验(PPD试验)、涂片抗酸杆菌染色镜检(AFB镜检法)、BACTEC MGIT960液体培养(简称液体培养法)、结核分枝杆菌脱氧核糖核酸实时荧光定量PCR(TB-DNA FQ-PCR)、利福平耐药实时荧光定量核酸扩增技术（GeneXpert MTB/RIF），以结核菌培养及病理结果为金标准，比较不同检测方法在不典型肾结核临床诊断中的价值。结果:T-SPOT.TB灵敏度(95.65%)高于PPD试验(73.91%)，差异有统计学意义(McNemar检验： P=0.002)；GeneXpert MTB/RIF的灵敏度为84.78%，高于AFB镜检法(4.35%)、液体培养法(28.26%)和TB-DNA FQ-PCR(58.70%)，差异有统计学意义(McNemar检验： P均<0.001)，GeneXpert MTB/RIF与三者的特异性无统计学差异(McNemar检验： P=1.000、0.500和0.250)。 结论:T-SPOT.TB与GeneXpert MTB/RIF在不典型肾结核的筛查和病原学诊断中有较高的灵敏度和应用价值，推荐应用。

目的:比较甲型肝炎病毒(hepatitis A virus，HAV)四种核酸检测方法。方法:采用A、B、C实时荧光定量RT-PCR(RT-qPCR)及D微滴芯片数字RT-PCR(RT-dPCR)分别对HAV质粒标准品、梯度稀释的HAV疫苗进行灵敏度检测；对相关病毒核酸进行特异性检测；用A、B、C方法对40份人工污染HAV牡蛎、市售牡蛎及血清标本、HAV疫苗标本进行检测，比较检出率；比较A、D方法对低浓度HAV人工污染牡蛎的回收率。结果:A、B方法对质粒标准品均可检测至10拷贝/μL；检测梯度稀释的HAV疫苗，A、B、C方法的斜率、R 2值、扩增效率(-3.446～-3.297、0.991～0.998、95.07%～101.051%)均在可接受范围；40份不同来源的标本，A、B、C方法的阳性检出率分别是50%(20/40)、47.5%(19/40)、55%(22/40)，差异无统计学意义( χ2＝0.467， P＝0.792)；A、D方法对梯度稀释疫苗检测灵敏度无明显差别，对低浓度HAV人工污染牡蛎检测，D方法回收率高于A方法，但差异无统计学意义(F＝0.294，P＝0.642)。 结论:A、B、C方法无明显差异，较方便快捷；在检测低浓度HAV污染的食品时，D方法略有优势，但检测成本稍高，选取检测方法可根据实际情况选择。

虽然目前诊断新型冠状病毒(SARS-CoV-2)感染的金标准，即实时荧光定量PCR技术已被广泛应用于人群筛查并且检测限可低至1拷贝/μl，但最新的病毒动力学模型表明，相较于灵敏度而言，高频率检测和快速诊断才是减少病毒传播的关键。因此，研究人员正努力探索基于CRISPR-Cas技术的病毒RNA检测新策略。其中，Cas13a蛋白可与CRISPR RNA(crRNA)形成复合物并在crRNA的引导下靶向结合目的RNA序列，激活核酸酶活性，非特异地切割附近的任意单链RNA。利用这一特性，将带有荧光淬灭基团的RNA探针加入体系，可检测靶RNA序列。在此原理上，本研究开发了一种突破性方法，无需前期预扩增即可直接从鼻拭子RNA中检测SARS-CoV-2。通过设计针对病毒N基因和E基因的不同区域的多个crRNA，等浓度组合加入反应体系，使单次反应可以激活更多的Cas13a蛋白，检测灵敏度提高的同时也减少了基因突变导致检测脱靶的可能性，整个检测过程均在样品中直接进行，无需额外操作。此外，该新型检测平台还可以将反应速率和产生的荧光信号转化为病毒载量，样本定性的同时进行RNA定量。为了提高检测的简单性和便携性，本研究还设计了一个小型设备包括低成本的激光照明和光收集元件，可以通过手机摄像头读取CRISPR-Cas13a检测产生的荧光信号，灵敏度达到100拷贝/μl的同时能够在5 min内准确诊断出一组从新型冠状病毒肺炎患者样本中预提取的RNA。本研究开发的方法有可能为现场SARS-CoV-2筛查提供一种快速、准确、便携和低成本的选择。

目的:探讨老年人晚发性抑郁症(LOD)预后与lncRNA表达水平和应对方式的关系。方法:病例对照研究。实时荧光定量核酸扩增检测系统(qPCR)检测LOD 92例患者和80例对照组外周血差异表达lncRNA，并进行汉密顿抑郁量表(HAMD)、特质应对方式问卷(TCSQ)评估。结果:与对照组比较，老年人LOD TCONS_00019174(7.55比4.36)、ENST00000566208(6.48比3.26)、ENST00000517573(8.33比5.32)、NONHSAT142707(6.78比3.26)的表达水平更低( Z＝5.09、5.87、4.35、6.44，均 P<0.05或0.01)；与低表达组比较，lncRNA高表达组的焦虑/躯体化[(3.83±1.40)比(6.39±2.35)]、日夜变化[(0.22±0.42)比(0.83±0.94)]、迟滞[(5.74±0.96)比(6.48±1.28)]、绝望感[(2.78±0.67)比(4.52±1.56)]、HAMD[(20.39±1.75)比(26.83±4.88)]分数更低( t＝－4.50、－2.84、－2.22、－4.90、－5.96，均 P<0.05)。TCONS_00019174的ΔCT值与焦虑/躯体化、日夜变化、迟滞、睡眠障碍、绝望感、HAMD减分率呈负相关( r＝－0.40~－0.66，均 P<0.05或0.01)；ENST00000566208的ΔCT值与焦虑/躯体化、睡眠障碍、绝望感、HAMD减分率呈负相关( r＝－0.47~－0.62，均 P<0.01)；ENST00000517573、NONHSAT034045、NONHSAT142707的ΔCT值与迟滞、睡眠障碍、绝望感、HAMD减分率呈负相关( r＝－0.39~－0.76，均 P<0.05)；积极应对方式与HAMD总分及焦虑/躯体化、迟滞、睡眠障碍、绝望感因子减分率呈正相关( r＝0.38~0.55，均 P<0.05)；消极应对方式与HAMD总分及焦虑/躯体化、睡眠障碍、绝望感因子减分率呈负相关( r＝－0.39~－0.67，均 P<0.05)。TCONS_00019174、ENST00000566208、NONHSAT034045、NONHSAT142707、积极应对和消极应对方式进入HAMD总减分率的回归方程，对HAMD总减分率有显著预测作用( t＝－8.713、－3.584、－3.864、－2.257、5.675、－2.357，均 P<0.05)，可HAMD解释总减分率方差变异32.4%。 结论:TCONS_00019174、ENST00000566208、NONHSAT034045、NONHSAT142707、积极应对方式、消极应对方式是老年人LOD预后的预测因子。

目的:探讨病理组织中的病原学检查对结核病的诊断价值。方法:选择2016年5月至2019年5月深圳市第三人民医院收治的190例疑似或确诊为结核病患者的病理标本，将190份标本按照病理形态分为4组：组1为坏死性肉芽肿组(109份)，组2为非坏死性肉芽肿组(20份)，组3为普通炎症组(45份)，组4为非结核病变组(16份)。比较各种病原学检测方法在4组病理标本中检出结核分枝杆菌( Mycobacterium tuberculosis，MTB)的阳性率，同时比较不同抗结核治疗时间对病原学检查结果的影响。统计学方法采用 χ2检验或Fisher确切概率法。 结果:在组1、组2、组3和组4患者的组织病理标本中抗酸染色的阳性率分别为17.4%(19/109)、5.0%(1/20)、4.4%(2/45)、0(0/16)，MTB培养的阳性率分别为32.0%(32/100)、4/19、4.8%(2/42)、0(0/16)，结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测体系( Mycobacterium tuberculosis/rifampin resistance real-time quantitative nucleic acid amplification detection system, Xpert MTB/RIF)检测的MTB阳性率分别为74.3%(81/109)、15.0%(3/20)、13.3%(6/45)、0(0/16)，荧光定量聚合酶链反应(fluorescent quantitative polymerase chain reaction，FQ-PCR)检测的MTB阳性率分别为63.0%(58/92)、0(0/15)、2.6%(1/38)、0(0/10)，实时荧光核酸恒温扩增检测(simultaneous amplification and testing, SAT)的MTB阳性率分别为32.4%(24/74)、0(0/10)、0(0/15)、0(0/10)，各种病原学方法检测4组标本中的MTB阳性率差异均有统计学意义(均 P<0.05)。Xpert MTB/RIF检测组1标本中MTB的阳性率高于抗酸染色、MTB培养和SAT，差异均有统计学意义( χ2＝71.016、37.162、35.679，均 P<0.01)，但与FQ-PCR比较差异无统计学意义( χ2＝2.517， P＝0.112)，联合病原学检查MTB的阳性率为85.3%(93/109)，高于Xpert MTB/RIF的74.3%(81/109)，差异有统计学意义( χ2＝4.100， P＝0.043)。各种病原学检查抗结核治疗时间≤1个月与>1个月的组1病理标本MTB阳性率分别为：抗酸染色为14.3%(7/49)比20.0%(12/60)( χ2＝0.612, P＝0.434)，MTB培养为48.9%(22/45)比18.2%(10/55)( χ2＝10.721， P＝0.001)，Xpert MTB/RIF为69.4%(34/49)比78.3%(47/60)( χ2＝1.131， P＝0.287)，FQ-PCR为55.0%(22/40)比69.2%(36/52)( χ2＝1.965， P＝0.161)，SAT为43.3%(13/30)比25.0%(11/44)( χ2＝2.736， P＝0.098)。 结论:MTB病原学检查结果与典型的结核病病理形态学存在一致性。病理组织的各种病原学检查方法中以Xpert MTB/RIF检出率最高，且不受早期抗结核治疗时间的影响，而联合病原学检查能提高检出率，可在标本量足够时采用。

目的:对我国已批准上市的5种新型冠状病毒（2019-nCoV）核酸快速检测试剂进行多中心临床评价。方法:2020年11月在浙江大学医学院附属第一医院、华中科技大学同济医学院附属同济医院和中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所3家机构选取共计57份确诊2019-nCoV感染者及15份非感染者的咽拭子样本，对获批上市的5种2019-nCoV核酸快速检测试剂进行检测，分析阳性符合率、阴性符合率、总符合率，并分析阳性强度与阳性符合率的关系，检测时间和复检率情况。结果:5种试剂盒阳性符合率为92.59%（50/54）、83.64%（46/55）、98.25%（56/57）、94.44%（51/54）和98.18%（54/55）；阴性符合率为93.33%（14/15）、93.33%（14/15）、86.67%（13/15）、100%（14/14）和93.33%（14/15）；总符合率为92.75%（64/69）、85.71%（60/70）、95.83%（69/72）、94.20%（65/69）和97.14%（68/70）。5种试剂盒对强阳性和中阳性标本的检出率均为100%（90/90、84/84），对循环阈值33以上的弱阳性样本检出率为82.18%（83/101），2种试剂盒的复检率高于10%，分别为15.28%（11/72）和12.50%（9/72）。5种试剂盒从提取到扩增检测所需平均总时长在32.33~65.33 min。结论:5种2019-nCoV核酸快速检测试剂盒性能均较好，可以作为常规核酸检测的补充。

目的:探讨呼吸内镜下黏膜活检术中应用快速现场评价(ROSE)技术在儿童活动性肺结核的诊断价值。方法:回顾性分析2017年6月至2020年1月山东大学齐鲁儿童医院呼吸介入科收治的活动性肺结核40例患儿临床资料。结果:1．在40例患儿中，33例气管支气管结核，7例结核性胸膜炎，其中9例为诊断困难病例。2.气管支气管结核33例，包括24例(72.7%)干酪样坏死物破溃入管腔，9例(27.3%)黏膜肿胀、外压；支气管黏膜活检快速现场细胞学评价(C-ROSE)为肉芽肿、淋间类上皮细胞、淋巴细胞浸润改变；不同部位快速现场微生物学评价(M-ROSE)阳性不一：干酪坏死处阳性6例次(13.6%，6/44例次)，肉芽增生处阳性4例次(12.5%，4/32例次)，充血水肿处阳性2例次(22.2%，2/18例次)，黄白色坏死物处阳性0例次，病变与正常黏膜交界处阳性54例次(81.8%，54/66例次)；黏膜病理均为肉芽肿、渗出、坏死改变，其中22例结核性肉芽肿，5例特征性结核结节，11例抗酸染色阳性。3.结核性胸膜炎7例患儿，胸腔镜下为胸膜黏连严重，胸膜充血、水肿，4例临床诊断困难的病例清理黏连带后见胸膜散在分布干酪样粟粒结节；胸腔镜下活检C-ROSE以坏死、组织细胞为主要表现，见多核巨细胞，但肉芽肿少见；不同部位M-ROSE结果：粟粒样结节处阳性8例次(占80.0%)，黏连带处阳性0例次，充血水肿处阳性2例次(14.3%)；活检病理提示肉芽肿、坏死改变，其中3例特征性结核结节，2例抗酸染色阳性。4.应用下一代测序技术(NGS)和结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术(Xpert MTB/RIF)检测19例患儿标本的病原微生物，其中NGS阳性7例(36.8%)，Xpert MTB/RIF阳性8例(42.1%)，NGS和Xpert MTB/RIF均阳性5例(26.3%)。结论:呼吸内镜联合ROSE技术在儿童活动性肺结核病早期诊断方面具有重要的临床指导意义。