尿液游离DNA（ucfDNA）中除含有来自泌尿系统细胞裂解释放的DNA片段外，血液游离DNA（ccfDNA）经过肾小球的过滤作用也可以进入尿液中，且ucfDNA与ccfDNA含有的肿瘤DNA所携带的突变信息具有一致性。因此，ucfDNA作为泌尿系统和非泌尿系统肿瘤分子诊断的生物标志物，是近年来液体活检领域的研究热点。ucfDNA在个体化治疗、早期诊断、疗效的动态监测、预后判断等方面具有潜在的应用价值。但是要实现尿液ucfDNA的临床实际应用，还需要解决ucfDNA的提取和精准检测的问题。

膀胱癌是泌尿系统常见的癌症，目前的诊治方法尚不令人满意。尿液中的游离DNA能够提供关于癌症的全面而重要的信息，因为它携带了来自细胞的遗传信息，这些信息直接流入尿液并从循环中运输。膀胱癌患者的尿游离DNA中携带有肿瘤疾病信息，提示其具有检测、监测以及预测膀胱癌患者的能力。尿游离DNA分析弥补了当前检测技术的不足并加强了诊断和检测能力，在转化为临床实践方面具有非常广阔的前景。本文就尿游离DNA在膀胱癌临床诊治中的应用研究作一综述。

尿液由泌尿系统直接产生,其中的游离DNA(cfDNA)携带了来源于泌尿系的基因组DNA,并且尿液样本具有非侵入性、数量不受限及获取方便等优点,因此尿cfDNA是诊治泌尿系疾病的一种很有潜力的生物标志物,对尿cfDNA进行液体活检在泌尿系疾病的诊治中具有重要的临床应用价值.本文就尿cfDNA在泌尿系疾病临床诊治中的应用研究作一综述.

目的 探讨结核分枝杆菌(MTB)游离DNA(cfDNA)检测技术在肺外结核诊断中的应用价值.方法 选取2021年7月至2022年12月该院收治的高度疑似肺外结核患者266例作为研究对象,根据临床诊断结果,分为肺外结核组117例和非结核组149例.所有患者均采集脑脊液、胸腔积液、尿液及血液标本,并同时进行MTB cfDNA检测、结核分枝杆菌及利福平耐药快速检测(GeneXpert MTB/RIF)、涂片抗酸染色及血液标本结核感染T细胞γ干扰素释放试验(TB-IGRA).通过分析4种检测方法的效能指标评估MTB cfDNA检测技术在肺外结核病诊断中的临床价值.结果 MTB cfDNA检测法对脑脊液、胸腔积液、尿液中 MTB的检出率均显著高于涂片抗酸染色(χ2=5.714、9.289、9.226,P=0.017、0.002、0.002).虽然MTB cfDNA检测法对脑脊液、尿液中 MTB的检出率高于GeneXpert MTB/RIF,但差异无统计学意义(χ2=0.143,P=0.705;χ2=0.648,P=0.421);MTB cfDNA检测法对胸腔积液中 MTB的检出率显著高于GeneXpert MTB/RIF(χ2=4.222,P=0.040).在肺外结核组,MTB cfDNA检测法的 MTB检出率为26.50%(31/117),显著高于GeneXpert MTB/RIF[15.38%(18/117)]和涂片抗酸染色[3.42%(4/117)],差异均有统计学意义(χ2=4.362,P=0.037;χ2=24.492,P<0.05);而TB-IGRA的 MTB检出率为72.65%(85/117),显著高于 MTB cfDNA检测(χ2=49.850,P<0.001).MTB cfDNA检测法的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为26.50%、100.00%、100.00%、63.40%,其灵敏度显著高于GeneXpert MTB/RIF(15.38%)和涂片抗酸染色(3.42%),但低于TB-IGRA(72.65%),差异均有统计学意义(P<0.05).结论 MTB cfDNA检测在肺外结核诊断中具有较高的灵敏度及特异度,故MTB cfDNA检测在肺外结核诊断中具有较好的应用前景.

循环游离 DNA(circulating free DNA,cfDNA)是在外周血中发现的游离于细胞外的 DNA[1].1977 年,Leon 等[2]用放射免疫测定法发现肿瘤患者血清中 cfDNA 含量水平明显高于健康人群,现已证实它广泛存在于人体血液、尿液、脑脊液、胸腹水、卵泡液、唾液等各类体液中[3-4].cfDNA 是核小体凋亡 DNA 在细胞内循环核酸酶的作用下天然断裂形成的平均长度为 180 ～ 200 bp 的小片段[5],作为分子标志物具有获取简单、无创、信息量大等得天独厚的优点,在无创产前检测(non-invasive prenatal testing,NIPT)、肿瘤诊断及监测、器官移植监测、糖尿病、自身免疫性疾病等领域均具有大量的研究[6-7].目前 cfDNA 的检测方法主要有PCR 和二代测序(next-generation sequencing,NGS),其原理和优缺点各不相同,需结合研究目的及分析前变量来选择合适的方法.

肝移植是根治性治疗终末期肝病的唯一手段.肝移植术后患者必须接受长期的免疫抑制治疗,并适时调整免疫抑制剂方案以维持移植物功能稳定.病理穿刺是诊断排斥的金标准,但因价格昂贵,具有创伤性等缺点应用较少,因此需要另一种方法代替病理穿刺.供体来源细胞游离DNA(donor-derivedcell-freeDNA,ddcfDNA)是一种来源于移植器官细胞的游离胞外DNA.肝移植术后,ddcfDNA可在受体血液、尿液中检测到,研究发现ddcfDNA含量在肝移植患者发生急性排斥反应时甚至经活组织检查诊断数周前已发生实质性增高,表明其作为一种非侵入性、早期诊断移植物损伤的生物标记物具有一定的临床应用价值.本文探讨关于ddcfDNA在肝移植相关领域的研究现状及进展.

器官移植是治疗终末期器官疾病的唯一治愈手段.器官移植术后患者需要接受长期的免疫抑制治疗并适时调整免疫抑制剂方案以维持移植物功能稳定.供体来源细胞游离DNA(donor-derived cell-free DNA,ddcfDNA)是一种来源于移植器官细胞的游离胞外DNA.器官移植术后,ddcfDNA可在受体血液、尿液中检测到.研究发现ddcfDNA含量在器官移植术后患者发生急性排斥反应时甚至经活组织检查诊断数周前已发生实质性增高,表明其作为一种非侵入性、早期诊断移植物损伤的生物标记物具有较高的临床应用价值.本文将结合已有的相关研究对ddcfDNA在移植物监测中的应用进展作一综述.

循环游离DNA(cell-free D)NA,CF-DNA)可由正常细胞和肿瘤细胞释放,其中肿瘤细胞来源的游离DNA又叫做循环肿瘤DNA(circulating-tumor DNA,CT-DNA),以细胞外游离形式存在于血液、尿液等体液中.在前列腺癌(PCa)患者中,CF-DNA的浓度明显高于健康对照组,而且存在与原位肿瘤相似或完全相同的基因突变、超甲基化、基因不稳定性等变化特征,对肿瘤的早期诊断、术后检测以及对靶向药物的疗效评估都有着潜在作用,是新兴的肿瘤标志物研究热点.本综述简要阐述CF-DNA的生物学特性、检测以及作为肿瘤标志物的新进展.

结核病是由结核分枝杆菌引起的慢性感染性疾病,在全球范围内尤其是发展中国家仍处于高发状态.现有的临床诊断技术中,传统显微镜检查阳性率低,细菌培养时效性差,影像学表现特异度较低,虽然免疫学和分子生物学技术在诊断灵敏度和检测速度等方面与经典方法相比有了很大改进,但仍存在成本高、结果难以规范化等诸多问题,延缓了世界卫生组织“结束结核病战略”的进展.为弥补液标本采集和应用的不足,解决当前诊断技术中存在的各种问题,血液、尿液等非痰液标本中结核分枝杆菌游离DNA(cfDNA)的检测应运而生,为实现肺结核的准确快速诊断和肺外结核的有效检出开辟了途径.本文针对cfDNA检测在结核病诊断中的研究进展及临床应用价值作如下综述.

器官移植术后移植物排斥反应与损伤的监测一直未能得到很好的解决.细胞游离DNA(cfDNA)是一种可以在血液、尿液等体液中检测到的片段化、降解DNA.移植术后发生排斥反应时体液中cfDNA特异性升高,甚至在穿刺活检病理确诊排斥反应前数周,该指标已显著升高.有研究表明,供者来源细胞游离DNA(dd-cfDNA)水平与移植物损伤的严重程度和敏感度成正比,可能会成为移植术后检测移植物损伤或急性排斥反应的无创性动态指标.本文对cfDNA在器官移植监测中的研究进展作一综述.