尿液游离DNA（ucfDNA）中除含有来自泌尿系统细胞裂解释放的DNA片段外，血液游离DNA（ccfDNA）经过肾小球的过滤作用也可以进入尿液中，且ucfDNA与ccfDNA含有的肿瘤DNA所携带的突变信息具有一致性。因此，ucfDNA作为泌尿系统和非泌尿系统肿瘤分子诊断的生物标志物，是近年来液体活检领域的研究热点。ucfDNA在个体化治疗、早期诊断、疗效的动态监测、预后判断等方面具有潜在的应用价值。但是要实现尿液ucfDNA的临床实际应用，还需要解决ucfDNA的提取和精准检测的问题。

膀胱癌是泌尿系统常见的癌症，目前的诊治方法尚不令人满意。尿液中的游离DNA能够提供关于癌症的全面而重要的信息，因为它携带了来自细胞的遗传信息，这些信息直接流入尿液并从循环中运输。膀胱癌患者的尿游离DNA中携带有肿瘤疾病信息，提示其具有检测、监测以及预测膀胱癌患者的能力。尿游离DNA分析弥补了当前检测技术的不足并加强了诊断和检测能力，在转化为临床实践方面具有非常广阔的前景。本文就尿游离DNA在膀胱癌临床诊治中的应用研究作一综述。

胎盘滋养层细胞具有凋亡细胞和胚胎的双重特性，其释放的游离DNA(cell free DNA，cfDNA)存在于孕妇的外周血中，其过程也受到母体因素的影响。妊娠相关的疾病包括子痫前期、妊娠期糖尿病、先兆早产、巨大儿、胎儿生长受限等对产妇生命或妊娠结局造成了严重的威胁，早期筛查和及时干预对降低这类风险具有重要意义。本文就通过产妇外周血cfDNA筛查妊娠相关疾病的研究进展作一综述。

目的:研究游离DNA单分子标签检测（cell-free DNA barcode-enabled single-molecule test, cfBEST）技术用于苯丙酮尿症（phenylketonuria, PKU）无创产前诊断的适用性和可行性。方法:研究对象为2019年7月至9月郑州大学第一附属医院进行产前诊断的4例诊断为 PAH基因热点突变的苯丙酮尿症家系。采用cfBEST技术进行检测，设计巢式聚合酶链反应引物，计算孕妇血浆游离DNA突变频率和胎儿基因型，并将cfBEST技术的检测结果与介入性产前诊断结果比较。对数据采用描述性统计分析。 结果:cfBEST技术检测发现，家系1中c.603T>G和c.842+2T>A位点的突变频率为48.40%（291/601）和9.70%（61/628），胎儿2个位点均为杂合突变型，为PKU患者。家系2中c.1238G>C和c.842+2T>A的突变频率分别为43.70%（786/1 798）和0%（0/1 550），胎儿2个位点均为野生型，非PKU患者，亦非携带者。家系3中，c.1045T>G和c.728G>A的突变频率分别为44.00%（930/2 112）和0%（0/705），胎儿2个位点均为野生型，非PKU患者，亦非携带者。家系4中，c.755G>A和c.728G>A的突变频率分别为45.40%（743/1 637）和4.50%（28/849），胎儿位点分别为野生型和杂合突变型，为携带者。介入性产前诊断结果与cfBEST技术检测结果完全一致。家系1选择引产，其余3个家系选择继续妊娠至足月分娩，其新生儿筛查苯丙氨酸水平均<120 μmol/L，生后1、3、6月龄电话随访，均未见明显异常。结论:cfBEST技术有望应用于PKU PAH基因的无创产前诊断，但需要更大样本量的研究证实。

患者，68岁。因尿频、尿急、肉眼血尿1个月就诊。初诊PSA 72.72 ng/ml，碱性磷酸酶(ALP)114 U/L。前列腺穿刺活检病理：前列腺小细胞神经内分泌癌。患者即刻接受药物去势治疗基础上的依托泊苷联合顺铂化疗，累计化疗6次。后外周血游离DNA(cfDNA)基因检测结果示CDK4基因扩增1.99倍。化疗后加用哌柏西利治疗。治疗后3、6个月骨扫描检查提示骨转移灶数量持续明显减少，浓聚程度减低；ALP和PSA持续下降。治疗后随访1年，PSA 0.05 ng/ml，ALP 59 U/L，盆腔MRI和全身骨显像检查提示病灶稳定。

尿液由泌尿系统直接产生,其中的游离DNA(cfDNA)携带了来源于泌尿系的基因组DNA,并且尿液样本具有非侵入性、数量不受限及获取方便等优点,因此尿cfDNA是诊治泌尿系疾病的一种很有潜力的生物标志物,对尿cfDNA进行液体活检在泌尿系疾病的诊治中具有重要的临床应用价值.本文就尿cfDNA在泌尿系疾病临床诊治中的应用研究作一综述.

游离DNA已成为新兴的、非侵入性的重要临床样本类型,游离DNA甲基化具有组织特异性,可以反映来源细胞的DNA甲基化状态,在临床疾病诊疗中可能成为重要的潜在标志物.该文旨在综述近年常用的游离DNA甲基化检测技术,以及游离DNA甲基化在神经退行性疾病、精神性疾病、心血管疾病、糖尿病和出生缺陷等非肿瘤疾病中的应用研究进展.

目的 探讨结核分枝杆菌(MTB)游离DNA(cfDNA)检测技术在肺外结核诊断中的应用价值.方法 选取2021年7月至2022年12月该院收治的高度疑似肺外结核患者266例作为研究对象,根据临床诊断结果,分为肺外结核组117例和非结核组149例.所有患者均采集脑脊液、胸腔积液、尿液及血液标本,并同时进行MTB cfDNA检测、结核分枝杆菌及利福平耐药快速检测(GeneXpert MTB/RIF)、涂片抗酸染色及血液标本结核感染T细胞γ干扰素释放试验(TB-IGRA).通过分析4种检测方法的效能指标评估MTB cfDNA检测技术在肺外结核病诊断中的临床价值.结果 MTB cfDNA检测法对脑脊液、胸腔积液、尿液中 MTB的检出率均显著高于涂片抗酸染色(χ2=5.714、9.289、9.226,P=0.017、0.002、0.002).虽然MTB cfDNA检测法对脑脊液、尿液中 MTB的检出率高于GeneXpert MTB/RIF,但差异无统计学意义(χ2=0.143,P=0.705;χ2=0.648,P=0.421);MTB cfDNA检测法对胸腔积液中 MTB的检出率显著高于GeneXpert MTB/RIF(χ2=4.222,P=0.040).在肺外结核组,MTB cfDNA检测法的 MTB检出率为26.50%(31/117),显著高于GeneXpert MTB/RIF[15.38%(18/117)]和涂片抗酸染色[3.42%(4/117)],差异均有统计学意义(χ2=4.362,P=0.037;χ2=24.492,P<0.05);而TB-IGRA的 MTB检出率为72.65%(85/117),显著高于 MTB cfDNA检测(χ2=49.850,P<0.001).MTB cfDNA检测法的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为26.50%、100.00%、100.00%、63.40%,其灵敏度显著高于GeneXpert MTB/RIF(15.38%)和涂片抗酸染色(3.42%),但低于TB-IGRA(72.65%),差异均有统计学意义(P<0.05).结论 MTB cfDNA检测在肺外结核诊断中具有较高的灵敏度及特异度,故MTB cfDNA检测在肺外结核诊断中具有较好的应用前景.

循环游离 DNA(circulating free DNA,cfDNA)是在外周血中发现的游离于细胞外的 DNA[1].1977 年,Leon 等[2]用放射免疫测定法发现肿瘤患者血清中 cfDNA 含量水平明显高于健康人群,现已证实它广泛存在于人体血液、尿液、脑脊液、胸腹水、卵泡液、唾液等各类体液中[3-4].cfDNA 是核小体凋亡 DNA 在细胞内循环核酸酶的作用下天然断裂形成的平均长度为 180 ～ 200 bp 的小片段[5],作为分子标志物具有获取简单、无创、信息量大等得天独厚的优点,在无创产前检测(non-invasive prenatal testing,NIPT)、肿瘤诊断及监测、器官移植监测、糖尿病、自身免疫性疾病等领域均具有大量的研究[6-7].目前 cfDNA 的检测方法主要有PCR 和二代测序(next-generation sequencing,NGS),其原理和优缺点各不相同,需结合研究目的及分析前变量来选择合适的方法.

肝移植是根治性治疗终末期肝病的唯一手段.肝移植术后患者必须接受长期的免疫抑制治疗,并适时调整免疫抑制剂方案以维持移植物功能稳定.病理穿刺是诊断排斥的金标准,但因价格昂贵,具有创伤性等缺点应用较少,因此需要另一种方法代替病理穿刺.供体来源细胞游离DNA(donor-derivedcell-freeDNA,ddcfDNA)是一种来源于移植器官细胞的游离胞外DNA.肝移植术后,ddcfDNA可在受体血液、尿液中检测到,研究发现ddcfDNA含量在肝移植患者发生急性排斥反应时甚至经活组织检查诊断数周前已发生实质性增高,表明其作为一种非侵入性、早期诊断移植物损伤的生物标记物具有一定的临床应用价值.本文探讨关于ddcfDNA在肝移植相关领域的研究现状及进展.