目的 研究艾滋病(AIDS)患者血清微小RNA(miR)-210-5p、miR-23a-3p及miR-296-5p的检测意义.方法 选取2020年5月至2023年5月鹤壁市传染病医院收治的100例AIDS患者作为研究对象,设为AIDS组.另选取同期健康志愿者100例设为参考组.比较两组血清miR-210-5p、miR-23a-3p及miR-296-5p水平.根据AIDS患者预后将AIDS组分为预后不良组、预后良好组,比较两组血清miR-210-5p、miR-23a-3p、miR-296-5p水平.采用多因素Logistic回归分析AIDS患者预后不良的影响因素.结果 AIDS组血清miR-210-5p、miR-23a-3p水平均高于参考组,miR-296-5p水平低于参考组,差异具有统计学意义(P＜0.05).预后不良组血清miR-210-5p、miR-23a-3p水平均高于预后良好组,miR-296-5p水平低于预后良好组,差异具有统计学意义(P＜0.05).多因素Logistic回归分析结果显示,miR-210-5p、miR-23a-3p水平升高及miR-296-5p水平降低均是AIDS患者预后不良的危险因素(P＜0.05).结论 AIDS患者血清miR-210-5p、miR-23a-3p水平异常升高,miR-296-5p水平异常降低,其均对AIDS患者的预后具有一定的评估作用.

目的:探讨微小RNA-92a-3p （micro RNA-92a-3p, miR-92a-3p）靶向调控PTEN对神经母细胞瘤（neuroblastoma，NB）细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法:采用miR-92a-3p mimics及其抑制基因（inhibitor）分别转染至SH-SY5Y细胞，根据实验需要分为miR-92a-3p过表达组、NC过表达组、miR-92a-3p抑制组、NC抑制组，采用实时荧光定量聚合酶链反应（real time fluorescent quantitative polymerase chain reaction，qRT-PCR）检测转染后细胞内miR-92a-3p的表达水平；采用CCK-8检测实验、细胞克隆形成实验、细胞划痕实验、细胞侵袭实验检测miR-92a-3p对细胞增殖、侵袭和迁移能力的变化；采用基因软件预测miR-92a-3p的靶基因并用双荧光素酶报告体系进行验证；最后采用qRT-PCR和蛋白质印迹法检测过表达miR-92a-3p和抑制miR-92a-3p后对PTEN/PI3K/AKT信号通路相关分子的表达情况。结果:qRT-PCR结果显示miR-92a-3p过表达组的表达含量（65.73±20.07）比miR-92a-3p抑制组的表达含量（0.33±0.02）显著增高，且差异有统计学意义（ t=5.64， P=0.005）。CCK-8检测实验显示，miR-92a-3p过表达组能促进SH-SY5Y细胞的增殖活性（ P均<0.001 ），miR- 92a-3p抑制组则能有效抑制SH-SY5Y细胞的增殖活性（ P=0.031， P=0.012， P<0.001， P<0.001）。细胞克隆形成实验结果显示，miR-92a-3p过表达组的细胞克隆数为（210±19）个，高于NC过表达组的细胞克隆数（144±5）个，组间比较差异有统计学意义（ P=0.005）；miR-92a-3p抑制组的细胞克隆数为（83±6）个，低于NC抑制组的细胞克隆数（137±13）个，组间比较差异有统计学意义（ P＝0.003）。细胞划痕实验及细胞侵袭实验结果显示，miR-92a-3p过表达组细胞迁移愈合率为（90.37±0.67）%，高于miR-92a-3p抑制组（41.03±0.56）%，组间比较差异有统计学意义（ P<0.001）；miR-92a-3p过表达组细胞穿膜数量为（106.80±9.28）个，高于miR-92a-3p抑制组（33.40±7.56）个，组间比较差异有统计学意义（ P<0.001）。qRT-PCR和蛋白质印迹法结果显示，与NC过表达组相比，miR-92a-3p过表达组PTEN的mRNA表达量（0.43±0.02）和蛋白水平明显降低，而PI3K mRNA表达量（2.00±0.10）、AKT mRNA表达量（1.41±0.19）和各自蛋白水平明显升高，且差异均有统计学意义（ P<0.001、 P< 0.001和 P=0.028）；miRNA-92a-3p抑制组可逆转上述作用，且差异均有统计学意义（ P＝0.043、 P= 0.046和 P<0.001）。 结论:PTEN基因是miR-92a-3p的靶基因，miR-92a-3p可能通过促进NB细胞增殖、促进NB细胞侵袭、促进NB细胞迁移和抑制PTEN mRNA表达引发PTEN蛋白水平的降低。

目的:探讨微小RNA-210激动剂（agomiR-210）对糖尿病肾脏病（DKD）大鼠的肾脏保护作用及其机制。方法:36只5周龄雄性SD大鼠被分为正常对照（NC）组、agomiR-NC对照组、agomiR-210对照组、DKD模型组、DKD+agomiR-NC组和DKD+agomiR-210组，每组6只。采用高脂饮食联合腹腔注射链脲菌素（STZ）法构建糖尿病大鼠模型，持续喂养12周后建立DKD大鼠模型。于持续喂养期的第2周至第4周给予DKD+agomiR-210组大鼠尾静脉注射agomiR-210（20 nmol/kg），每周2次。定期检测空腹血糖、24 h尿白蛋白（Alb）和尿微量白蛋白（MAU）水平。实验第12周末处死大鼠，留取肾脏组织。HE、PAS和Masson染色法评估肾组织病理学改变；实时荧光定量PCR（RT-qPCR）和Western印迹法检测肾组织中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素（IL）-1β和IL-6的mRNA和蛋白表达；免疫组化法检测肾组织中α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、Ⅰ型胶原（Col-Ⅰ）、Ⅳ型胶原（Col-Ⅳ）和纤连蛋白（FN）的分布与表达；Western印迹和免疫组化法检测肾组织中磷酸化（p）-Smad3和p-核因子κB p65（p-NF-κB p65）蛋白的表达。结果:与DKD模型组比较，DKD+agomiR-210组大鼠肾组织病理学改变明显改善，血糖水平、糖原沉积和胶原蓄积均显著降低（均 P<0.05），尿Alb与MAU排泄均明显减少（均 P<0.01）；肾组织TNF-α、IL-1β、IL-6的mRNA和蛋白表达均显著降低，α-SMA、Col-Ⅰ、Col-Ⅳ、FN、p-Smad3和p-NF-κB p65蛋白表达均明显降低（均 P<0.01）。 结论:agomiR-210可减轻大鼠DKD肾脏病理改变和减少尿Alb、MAU排泄，作用机制可能与其抑制Smad3和NF-κB活性有关。

目的:探究孕妇外周血微小 RNA-152(miR-152)、miR-210 与子痫前期(PE)病情程度及妊娠结局的相关性.方法:选取2018 年7 月至2022 年 5 月我院 200 例PE 患者,根据病情严重程度分为轻度组(轻度PE患者,n=114)和重度组(重度PE患者,n=86),另选同期、同年龄段健康孕妇作为对照组(n=100).比较三组血压[收缩压(SBP)、舒张压(DBP)]、24h 尿蛋白定量(24h Upro)、钙离子(Ca+)、外周血miR-152、miR-210 水平,分析外周血miR-152、miR-210 水平与PE病情程度、血压、24h Upro及Ca+相关性.PE患者随访至妊娠结束,比较不同妊娠结局PE 患者临床资料、外周血 miR-152、miR-210 水平,通过Lasso回归和Logistic回归分析预测因素与不良妊娠结局的关联性,通过受试者工作特征曲线(ROC)、临床决策曲线(DCA)评价外周血miR-152、miR-210 对预测PE患者发生不良妊娠结局的价值及临床效用.结果:重度组、轻度组、对照组SBP、DBP、24h Upro、外周血miR-152、miR-210水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);外周血miR-152、miR-210 水平与PE病情程度、血压、24h Up-ro呈正相关(P<0.05),与 Ca+水平呈负相关(P<0.05);发生不良妊娠结局年龄、流产史、病情程度、SBP、DBP、24h Upro、Ca+、外周血miR-152、miR-210 水平与未发生不良妊娠结局患者比较,差异有统计学意义(P<0.05);Lasso回归选出5 个预测变量为病情程度、SBP、24h Upro、外周血 miR-152、miR-210水平;Logistic回归显示,外周血miR-152、miR-210 水平是PE 患者发生不良妊娠结局的独立危险因素(P<0.05);ROC、DCA 结果显示,外周血 miR-152、miR-210 联合预测 PE 患者发生不良妊娠结局具有良好的预测价值和临床效用.结论:外周血miR-152、miR-210 在PE 患者中表达上调,且与病情程度、妊娠结局显著相关,其联合预测患者发生不良妊娠结局具有一定参考价值和临床效用.

目的 探究微小RNA(miR)-146a、miR-181a和巨噬细胞移动抑制因子(MIF)在幽门螺杆菌(Hp)相关胃黏膜炎症中的表达及临床意义.方法 选取2020年5月-2023年1月江南大学附属医院收治的208例慢性胃炎患者为研究组,根据是否发生Hp感染分为Hp阳性组142例和Hp阴性组66例,并选取同期210名健康体检者为对照组,采集外周血检测miR-146a、miR-181a和MIF mRNA相对表达量,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-146a、miR-181a和MIF对Hp相关胃黏膜炎症的诊断价值.结果 研究组miR-146a、miR-181a和MIF mRNA相对表达量均高于对照组(P＜0.05),Hp阳性组高于Hp阴性组(P＜0.05);Hp阳性组上述指标mRNA相对表达量与胃痛、反酸、烧心、Hp感染史、饮食习惯、发病部位有关(P＜0.05);ROC曲线结果显示,miR-146a、miR-181a和MIF联合检测诊断Hp相关胃黏膜炎症的临床价值较高,曲线下面积(AUC)、敏感度和特异度分别为0.908、88.70％和75.80％.结论 miR-146a、miR-181a和MIF在慢性胃炎及Hp相关胃黏膜炎症中呈现高表达,其在Hp相关胃黏膜炎症中高表达与多种因素有关,三者联合检测对Hp相关胃黏膜炎症的诊断价值较高.

目的 探讨外周血微小RNA(miR)-210水平对慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者继发肺动脉高压(PAH)的预测价值.方法 选取2019年1月至2020年12月于湖南省长沙市第三医院进行治疗的COPD患者100例作为COPD组,其中43例患者继发PAH(PAH亚组)、57例患者肺动脉压正常(非PAH亚组).另选取同期本院体检健康者42人作为对照组.比较3组间miR-210水平及COPD亚组间血气分析、肺功能等临床资料.应用Pearson相关性分析方法分析外周血miR-210水平与肺动脉收缩压的相关性;应用受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-210对COPD继发PAH的预测价值.结果 COPD组血清miR-210水平低于对照组[(13±5)比(30±6)],差异有统计学意义(t=15.890,P＜0.001).PAH亚组miR-210、动脉血氧分压、第1秒用力呼气容积、第1秒用力呼气容积与用力肺活量比值低于非PAH亚组,差异均有统计学意义(均P＜0.05).Pearson相关性分析结果显示PAH亚组患者外周血miR-210水平与肺动脉收缩压呈负相关(P＜0.05)a ROC曲线分析结果显示,外周血miR-210水平预测COPD继发PAH的曲线下面积为0.881,特异度和敏感度分别为76.2％和86.2％,约登指数为0.61,预测的截断值为7.5.结论 外周血miR-210表达水平对COPD患者继发PAH有预测价值.

目的 探讨上皮性卵巢癌(EOC)组织中微小RNA-515-5p(miR-515-5p)、硫酸软骨素蛋白聚糖4(CSPG4)的表达及临床意义.方法 选取84例EOC患者,采用RT-qPCR法检测癌组织与癌旁组织中miR-515-5p、CSPG4 mRNA表达.采用Pearson相关系数分析EOC组织中miR-515-5p与CSPG4 mRNA表达的相关性.根据EOC组织中miR-515-5p、CSPG4 mRNA表达均值分为高、低表达者,采用Kaplan-Meier法绘制不同miR-515-5p、CSPG4 mRNA表达EOC患者的生存曲线.结果 与癌旁组织相比,卵巢癌组织中miR-515-5p表达低,CSPG4 mRNA表达高(P均<0.05).经TargetScan数据库预测miR-515-5p与CSPG4的3'-非翻译区210～216处存在结合位点,Pearson相关系数分析显示,EOC组织中miR-515-5p与CSPG4 mRNA表达呈负相关(r=-0.710,P<0.05).不同分化程度、国际妇产科联盟(FIGO)分期、淋巴结转移EOC组织中miR-515-5p、CSPG4 mRNA表达比较,差异均有统计学意义(P均<0.05).随访3年,84例EOC患者3年累积生存率为57.14%(48/84).K-M生存曲线分析显示,miR-515-5p高表达者累积生存率高于低表达者,CSPG4 mRNA高表达者累积生存率低于低表达者(P均<0.05).结论 EOC组织中miR-515-5p低表达和CSPG4 mRNA高表达,二者表达与分化程度、FIGO分期、淋巴结转移和预后有关;检测二者表达有助于判断EOC患者病情和预后评估.

目的 探究黑色素瘤中微小RNA-210 (miR-210)的表达情况及干扰人黑色素瘤细胞A375中miR-210的表达对细胞转移能力及金属基质蛋白酶(MMP)表达的影响.方法 收集西安交通大学第一附属医院病理科2016年3月1日至2017年5月31日的37例皮肤恶性黑色素瘤组织,17例交界痣组织及30例正常皮肤组织,荧光定量链式聚合酶反应(qPCR)检测组织中miR-210的表达情况.体外培养A375细胞,慢病毒转染空白载体及小干扰RNA(siRNA)介导的干扰miR-210载体于A375细胞中,分别作为对照组及干扰组细胞,qPCR检测两组细胞miR-210、MMP-2及MMP-9 mRNA表达水平,Western blot实验检测两组细胞MMP-2、MMP-9蛋白表达水平, Transwell侵袭实验检测两组细胞侵袭能力,Transwell迁移实验检测两组细胞迁移能力.结果 与交界痣及正常皮肤组织相比,黑色素瘤组织miR-210表达显著增高[(0.165±0.060)vs(0.076±0.033)及(0.048±0.046)],差异均具有统计学意义(P<0.05);与对照组细胞相比,干扰组细胞miR-210 [(0.153±0.037) vs (0.372±0.041)]、MMP-2 mRNA [(0.175±0.053)vs(0.424±0.038)]及MMP-9 mRNA[(0.323±0.068)vs(0.610±0.102)]表达水平显著下调,差异均具有统计学意义(P<0.05);与对照组细胞相比,干扰组细胞MMP-2[(0.114±0.016)vs(0.356±0.047)]及MMP-9[(0.263± 0.030)vs(0.571±0.084)]蛋白表达水平显著下调,差异均具有统计学意义(P<0.05);与对照组细胞相比,干扰组细胞侵袭细胞数显著减少[(36.9±8.7)个vs(72.3±10.5)个],干扰组细胞迁移细胞数也显著减少[(45.3±9.4)个vs(78.3±12.6)个],差异均具有统计学意义(P<0.05).结论 恶性黑色素瘤中miR-210存在高表达,体外干扰A375细胞miR-210的表达可介导MMP分子表达下调,进而抑制细胞转移能力,是潜在的分子靶向治疗位点.

目的 探究微小RNA-210(miR-210)在乳腺癌组织中的表达及临床意义,并探究其在体外对人三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖及转移能力的影响.方法 收集湖南省肿瘤医院病理科2013年12月至2015年9月乳腺癌组织及相应癌旁组织标本各82例,荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测组织及细胞中miR-210的表达水平,分析miR-210与患者临床资料及预后的关系.三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231转染含miR-210全长的载体作为实验组,转染空白载体作为对照组,CCK-8实验检测两组细胞增殖能力,Transwell侵袭及迁移实验检测两组细胞转移及侵袭能力.结果 qRT-PCR结果显示乳腺癌组织中miR-210的表达水平为0.198±0.014,显著高于癌旁组织的0.084±0.009,差异具有统计学意义(t=8.141,P<0.001);三阴性乳腺癌组织miR-210表达水平为0.254±0.026,显著高于非三阴性乳腺癌组织0.167±0.015,差异具有统计学意义(t=3.175,P=0.003).miR-210高表达、低表达两组患者TNM分期、分子分型差异有统计学意义(χ2=7.859,P=0.005;χ2=7.053,P=0.008);而miR-210高表达的患者4年生存率显著低于低表达患者(49.37％:76.80％),差异具有统计学意义(χ2=4.743,P=0.024).qRT-PCR结果显示,实验组细胞miR-210的表达水平为0.517±0.038,显著高于对照组细胞的0.284±0.022,差异具有统计学意义(t=9.280,P<0.001).CCK-8实验结果显示实验组细胞48、72及96 h时增殖能力显著高于对照组细胞(3.771±0.452:3.206±0.314;7.662±0.619:6.736±0.552;15.477±1.425:11.592±1.243),差异具有统计学意义(t=2.296,P=0.025;t=2.496,P=0.019;t=4.594,P=0.001).Transwell侵袭实验结果显示实验组细胞下室面细胞数为(107.8±13.0)个,显著高于对照组细胞的(74.4±10.9)个,差异具有统计学意义(t=3.732,P=0.001);迁移实验结果显示实验组细胞下室面细胞数为(136.5±18.5)个,显著高于对照组细胞的(87.4±15.7)个,差异具有统计学意义(t=4.256,P<0.001).结论 miR-210在乳腺癌组织中高表达,且与患者病情进展、肿瘤恶性程度及预后密切相关,体外miR-210可促进三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞的恶性行为,是潜在的分子标志物及靶向治疗位点.

目的：探讨玉屏风散对支气管哮喘（哮喘）小鼠5种与 Th 细胞相关的微小 RNA（miRNA）表达调节的影响。方法40只 Balb ／c 小鼠按随机数字表法随机分为正常对照组、哮喘模型组、玉屏风散治疗组和地塞米松治疗组，每组10只。用卵清蛋白（OVA）诱导激发系统性呼吸道炎性反应模型，分别予玉屏风散和地塞米松治疗。ELISA 法测定肺组织匀浆中白细胞介素（IL）-13和 IL-17水平以及肺组织 HE 染色观察病理变化。取小鼠脾组织，采用实时定量 PCR 法检测各组 miR-146a、miR-146b、miR-210、miR-126和 miR-21 a 的表达变化。结果玉屏风散治疗组 IL-13水平[（6．382±1．690）μg／L]和 IL-17水平[（24．212±1．250）μg／L]低于哮喘模型组[（20．154±7．960）μg／L、（50．312±5．770）μg／L]，差异均有统计学意义（t ＝3．785，P ＝0．005；t ＝9．891， P ＝0．000）。地塞米松治疗组 IL-13水平[（9．366±3．460）μg／L]和 IL-17水平[（29．132±4．960）μg／L]也低于哮喘模型组，差异均有统计学意义（t ＝2．779，P ＝0．024；t ＝6.225，P ＝0．000）。玉屏风散治疗组 miR-210表达（2．052±0．871）高于哮喘模型组（4．034±1．379）（3．95倍，t ＝2．718，P ＝0．026）。玉屏风散和地塞米松治疗组 miR-126表达（分别为4．920±0．924、3．862±1．510）均高于哮喘模型组（6．024±0．447），差异具有统计学意义（分别为2．15倍，t ＝2．405，P ＝0．043和4．48倍，t ＝－3．069，P ＝0．015）。结论Th2和 Th17细胞均参与哮喘的发病机制，且能被玉屏风散所抑制。玉屏风散通过对 miR-210和 miR-126表达的影响，调节 Th 细胞而治疗哮喘。