目的:探讨孪蛋白DNA复制抑制因子(GMNN)基因不同表达水平在胰腺癌患者的临床意义和预后价值。方法:利用癌症基因组图谱(TCGA)数据库下载胰腺癌转录组数据和临床信息，运用生物信息学方法分析GMNN基因在胰腺癌组织中表达差异及临床病理特征相关性，使用R语言进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。采用Cox回归分析胰腺癌患者生存预后影响因素，使用R包单样本基因集富集分析(ssGSEA)方法探索胰腺癌关键基因表达水平与免疫细胞浸润相关性。分别采用Wilcoxon秩检验或 χ2检验分析两组或多组间差异。 结果:GMNN基因mRNA水平在不同病理分级胰腺癌患者之间有差异，GMNN高表达与胰腺癌病理分级，糖尿病病史，总生存(OS)之间存在显著相关性( P<0.05)。GO和KEGG通路富集分析发现，相关差异基因主要影响细胞化学突触传递调节，细胞膜电位调节等信号通路。生存分析发现，低GMNN表达水平组OS显著长于高表达组[2.901(1.810，3.518)比1.416(1.153，1.717)，风险比( HR)＝2.229，95%置信区间( CI)：1.451～3.425， P<0.01]，多因素Cox回归分析显示，肿瘤残余情况和GMNN表达水平[ HR＝2.075(1.286～3.348)， P<0.01]是影响胰腺癌患者OS的独立风险因素。免疫浸润分析发现，GMNN与抗原递呈细胞，树突状细胞细胞等多种免疫细胞浸润水平之间有密切相关性。 结论:GMNN高表达患者在胰腺癌预后中OS更差，是影响胰腺癌OS的独立风险因素，其表达水平与免疫细胞浸润明显相关。

目的:建立小鼠长期酒精注射中毒模型，探讨长期酒精摄入对小鼠小脑皮层苔藓纤维-颗粒细胞感觉信息突触传递的影响机制。方法:20只6～8周龄的健康雄性ICR小鼠按照随机数字表法分为生理盐水组(对照组)和酒精摄入组(酒精组)，每组10只。酒精摄入组每日腹腔注射浓度为20%的酒精，对照组则注射同等剂量的生理盐水，注射周期均为28 d。注射结束后，在小脑的Crus Ⅱ区清除头皮及肌肉组织，去除颅骨，剥离硬脑膜，利用气体喷射装置在同侧触须垫30 mm处给予吹风刺激，寻找最大反应部位后，在小鼠脑表面灌流NMDA受体阻断剂[D-(-)-2-amino-5-phosphono-valerate，D-APV]、代谢性谷氨酸受体1阻断剂(JNJ16259685)及N-甲基-D-天冬氨酸(N-Methyl-D-aspartic acid，NMDA)，每种药物灌流20 min，两种药物之间用人工脑脊液充分灌流直到波形恢复，期间通过膜片钳技术，记录小鼠小脑颗粒层电位波形的变化特点。采用Clampfit 10.3软件和SPSS 22.0软件对所有实验数据进行统计分析。结果:给予吹风刺激后酒精组小鼠颗粒层场电位反应的潜伏期(11.8±0.7)ms较对照组(10.1±0.2)ms显著延长( t＝-8.041， P<0.05)，N1的振幅(1.2±0.1)mV明显小于对照组(0.6±0.1)mV( t＝-12.728， P<0.05)。与对照组比较，酒精组小鼠颗粒层场电位反应抑制性成分P1波形上升时间[(4.4±0.2)ms，(3.2±0.2)ms]、持续时间[(12.1±0.5)ms，(10.3±0.2)ms]、消退时间[(7.8±0.2)ms, (6.9±0.2)ms]、波形下面积[(7.3±0.2)ms，(4.3±0.2)ms]均显著升高( t＝16.100，-11.840，-11.673，-35.576，均 P<0.05)。而两组小鼠刺激结束反应波形Roff波的振幅、波形半宽值、波形上升时间和衰减时间均差异无统计学意义( t＝-1.909，-0.910，-0.789，1.462；均 P>0.05)。当酒精组小鼠脑表面灌流JNJ16259685时，给予的5个吹风刺激诱发场电位的振幅较给药前均差异无统计学意义( P>0.05)。酒精组小鼠脑表面灌流D-APV后，吹风刺激诱发的场电位P1的振幅[(42.3±1.5)mV]较给药前[(101.1±0.9)mV]及洗脱后[(100.1±2.2)mV]均显著降低( t＝106.762，-69.605；均 P<0.05)，P1的波形下面积[(42.6±1.3)%]较给药前[(100.6±1.6)%]与洗脱后[(97.6±2.2)%]也显著减小( t＝88.862，-67.791；均 P<0.05)，且N2/N1比值(0.3±0.1)较给药前(0.4±0.1)与洗脱后(0.3±0.1)也明显降低( t＝2.242，2.121；均 P<0.05)。对照组小鼠脑表面灌流NMDA后，P1的振幅[(110.7±3.2)mV]较给药前[(100.1±0.9)mV]与洗脱后[(102.0±1.7)mV]显著增加( t＝-10.173，7.669，均 P<0.05)，P1的波形下面积[(127.9±3.5)%]较给药前[(100.0±3.1)%]与洗脱后[(115.0±5.3)%]显著升高( t＝-18.698，6.447，均 P<0.05)，而且N2/N1比值(0.5±0.1)较给药前(0.3±0.1)与洗脱后(0.3±0.1)也明显增高( t＝-5.669，5.669，均 P<0.05)。对照组小鼠脑表面灌流NMDA受体阻断剂D-APV后，面部吹风刺激诱发的场电位与给药前及洗脱后差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:长期酒精摄入显著压制MF-GC兴奋性谷氨酸能突触传递，增强小脑皮层GABAA受体介导的抑制性反应，抑制性成分的增强依赖于NMDA受体，但不依赖于1型代谢性谷氨酸受体。

目的:探讨海马CA1区γ-氨基丁酸（GABA）能神经元NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（ NLRP3）基因敲除对小鼠创伤性颅脑损伤（TBI）后认知障碍的改善作用。 方法:将48只清洁级健康雄性NLRP3 flox/flox小鼠按随机数字表法分为假手术+对照病毒组（SV组）、假手术+GABA能神经元 NLRP3基因特异性敲除组（SG组）、TBI+对照病毒组（TV组）及TBI+GABA能神经元 NLRP3基因特异性敲除组（TG组），每组12只。其中，TV组、TG组小鼠采用自由落体法构建TBI模型，SV组、SG组小鼠仅行头皮剪开及开骨窗等外科操作、不予打击，SG组、TG组小鼠于TBI造模前21 d于海马CA1区注射腺病毒制备GABA能神经元 NLRP3基因特异性敲除模型，SV组、TV组小鼠仅于海马CA1区注射空载病毒作为对照。TBI造模后第30、31天应用新物体识别实验评价各组小鼠的认知功能，第32~36天应用Morris水迷宫实验评估各组小鼠的学习及记忆功能，第31天应用在体电生理记录小鼠在新物体识别实验中探索新物体时海马CA1区场电位。上述实验结束后，处死小鼠并取材，采用免疫荧光染色检测各组小鼠海马CA1区微管相关蛋白2（MAP2）、谷氨酸脱羧酶67（GAD67）、突触后密度蛋白95（PSD95）的荧光强度，以及焦亡相关炎性因子白细胞介素-18（IL-18）/GAD67双阳性神经元占总GAD67阳性神经元的百分比。 结果:与SV组、SG组比较，TV组、TG组小鼠的新物体识别指数明显下降，水迷宫实验中实验阶段的穿越平台次数明显下降、训练阶段第3、4天的逃避潜伏期明显上升，海马CA1区θ、γ振荡功率在探索新物体时明显下降，海马CA1区MAP2、GAD67、PSD95的荧光强度明显减弱，IL-18/GAD67双阳性神经元百分比明显上升，差异均有统计学意义（ P<0.05）。与TV组比较，TG组小鼠的新物体识别指数明显上升，水迷宫实验中实验阶段的穿越平台次数明显上升、训练阶段第3、4天的逃避潜伏期明显下降，海马CA1区θ、γ振荡功率在探索新物体时明显上升，海马CA1区MAP2、GAD67、PSD95的荧光强度明显增强，IL-18/GAD67双阳性神经元百分比明显下降，差异均有统计学意义（ P<0.05）。 结论:海马CA1区GABA能神经元 NLRP3基因敲除能够改善小鼠TBI后的认知障碍，其机制可能与抑制GABA能神经元焦亡相关。

目的:探讨急性睡眠片段化(sleep fragmentation，SF)对老年大鼠认知功能的影响及海马Homer1a和突触可塑性的关系。方法:取108只22~24月龄SPF级雄性SD大鼠，按照随机数字表法分为对照组(Control组)、非睡眠片段化组(NSF组)和睡眠片段化组(SF组)，每组36只大鼠。采用睡眠剥夺杆法建立睡眠片段化模型。采用Morris水迷宫实验、新物体识别实验评估大鼠学习记忆功能；采用Western blot法检测海马组织Homer1a蛋白表达水平，免疫组化染色观察CA1区Homer1a表达分布；采用Golgi染色观察海马CA1区树突棘密度，离体电生理膜片钳实验检测海马CA3-CA1场兴奋性突触后电位(field excitatory postsynaptic potential，fEPSP)斜率变化。采用SPSS 22.0和GraphPad Prism 9.3软件分析数据和制图，多组间比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用Tukey-Kramer检验。结果:(1)在行为学实验中，3组大鼠穿越原平台次数、目标象限停留时间、1 h和24 h新物体识别指数均差异有统计学意义( F＝13.63，11.34，21.26，16.22，均 P<0.01)。SF组大鼠穿越原平台次数[(2.00±1.27)次]低于Control组[(5.67±2.16)次]和NSF组[(6.50±2.35)次](均 P<0.05)，SF组的目标象限停留时间[(9.02±4.84)s]短于Control组[(24.73±7.37)s]和NSF组[(27.81±8.37)s](均 P<0.05)。SF组在1 h和24 h两个时间点的新物体识别指数均低于Control组和NSF组(均 P<0.05)。(2)在Western blot检测中，SF组大鼠海马Homer1a蛋白表达(0.91±0.13)高于Control组(0.70±0.05)和NSF组(0.74±0.04)(均 P<0.05)。(3)在免疫组化染色中，SF组大鼠海马CA1区Homer1a蛋白的光密度值高于Control组和NSF组( P<0.05)。(4)在Golgi染色中，SF组大鼠海马CA1区树突棘密度低于Control组和NSF组( P<0.05)。(5)离体电生理实验显示：SF组海马CA3-CA1区fEPSP斜率均低于Control组和NSF组(均 P<0.05)。 结论:老年大鼠急性SF干预会引起认知功能损害，这可能与海马Homer1a过表达从而抑制海马突触可塑性相关。

目的:借助全转录组测序(RNA-seq)技术对右眼形觉剥夺模型大鼠视皮层差异表达基因进行筛选和生物学功能分析。方法:将18只14日龄SD幼鼠按照随机数字表法随机分为空白对照组和单眼形觉剥夺组，每组9只。其中单眼形觉剥夺组幼鼠采用右眼眼睑缝合方法制作单眼形觉剥夺模型，连续14 d。分别于造模前和造模后14 d记录各组大鼠右眼图形视觉诱发电位P 100波的潜伏期和振幅。分别提取各组大鼠双侧视皮质组织，通过RNA-seq技术，筛选出弱视相关发病基因，利用基因本体论(GO)富集分析对上述基因进行生物学功能描述，并进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析。 结果:与空白对照组相比，单眼形觉剥夺组P 100波潜伏期明显延长，振幅明显下降(均 P<0.05)，表明造模成功。共筛选出左侧视皮质差异表达基因40个，右侧视皮质差异表达基因63个，其中9个基因重叠。GO富集分析表明，差异表达基因主要参与转录DNA模板化、谷氨酸分泌、RNA聚合酶Ⅱ启动子的转录调控、蛋白磷酸化等生物学过程，参与DNA结合、ATP结合、蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶活性、钙离子结合、锌离子结合、磷脂酶A 2活性、核酸绑定等分子功能，参与细胞内、内质网的膜等细胞组分。其中， Grm2、 Pla2g2a基因的异常表达可能与视功能损伤改变过程密切相关， Grm2基因主要参与谷氨酸突触、长时程增强(LTP)、长时程抑制(LTD)等视觉信号通路过程， Pla2g2a基因主要参与α-亚麻酸代谢通路和花生四烯酸代谢通路。 结论:单眼形觉剥夺大鼠视觉发育敏感期内存在双侧视皮质基因的异常表达，导致视觉信号传导功能异常。基于特定响应基因调控的代谢通路改变可能是弱视发病的重要的分子生物学机制之一。

目的:评价右美托咪定对小鼠大脑初级体感皮层快放电抑制性中间神经元兴奋性的影响。方法:出生15～21 d健康C57BL/6小鼠11只，雌雄不拘，制备含有初级体感皮层的新鲜脑片，采用人工脑脊液孵育，应用膜片钳技术分别在第四层快放电中间神经元和兴奋性神经元上建立全细胞记录模式。于加入右美托咪定(10 μmol/L)前和加入后5 min时记录快放电抑制性中间神经元的膜电位和动作电位阈刺激强度及兴奋性神经元自发抑制性突触后电流。结果:与加入右美托咪定前比较，加入右美托咪定后5 min时大脑初级体感皮层快放电抑制性中间神经元膜电位、阈刺激强度和兴奋性神经元自发抑制性突触后电流的频率和波幅差异均无统计学意义( P>0.05)。 结论:右美托咪定镇痛的机制可能与大脑初级体感皮层快放电抑制性中间神经元的兴奋性无关。

目的:探讨双侧声刺激对小鼠下丘单个神经元兴奋性的影响及其潜在的神经回路。方法:给予对侧和同侧声刺激，记录左侧下丘单个神经元特征频率（CF）和最低阈值（MT）。对侧刺激即为右侧单耳声刺激，同侧即为左侧单耳声刺激。设置声刺激频率为CF-对侧，声音幅度为MT-对侧以上10 dB或20 dB，活体全细胞膜片钳技术记录小鼠下丘单个神经元分别对同侧耳、对侧耳声刺激的单侧反应、以及双侧声音同时刺激下的整合反应，比较兴奋性突触后电位（EPSP）的变化。结果:共记录到95个双耳兴奋性神经元，在双耳声刺激下可产生抑制、易化和无整合3种不同效应，其比例分别为37.9%（36/95）、21.1%（20/95）和41.0%（39/95）。在抑制组中，单耳对侧-EPSP和双侧-EPSP波幅分别为（12.37±7.3）mV和（6.54±5.1）mV，差异有统计学意义（ P<0.05）；与对侧-EPSP比较，双侧-EPSP波幅降低21.4%~89.8%，平均降低49.1%。在易化组中，单耳对侧-EPSP和双侧-EPSP波幅分别为（7.32±4.3）mV和（11.77±6.3）mV，差异有统计学意义（ P<0.05）；与对侧-EPSP比较，双侧-EPSP波幅增高20.8%~179%，平均增高56.8%。在无整合组中，对侧-EPSP与双侧-EPSP的波幅差异无统计学意义（ P>0.05）。 结论:双耳整合可能发生在上橄榄核复合体，双侧下丘间的相互作用可能参与了下丘神经元双耳特性的形成。

目的:探讨米诺环素对七氟烷麻醉诱导老龄小鼠认知障碍的改善作用及其机制。方法:清洁级C57BL/6小鼠75只按照随机数字表法分为对照组(Con组)、七氟烷组(Sev组)、七氟烷+米诺环素组(Sev+Min组)，每组25只。Sev组小鼠给予连续3 d，每天2 h的3%七氟烷麻醉；Sev+Min组小鼠先腹腔注射米诺环素(50 mg/kg)，然后进行3%七氟烷麻醉，连续3 d，每天2 h；Con组小鼠腹腔注射50 mg/kg的生理盐水，1次/d，连续3 d。Morris水迷宫实验检测小鼠记忆功能。免疫组化观察小鼠BrdU标记的新生神经细胞。利用电生理技术检测小鼠离体脑片海马齿状回(dentate gyrus，DG)区的场兴奋性突触后电位(field excitatory postsynaptic potential，fEPSP)斜率变化。采用SPSS 21.0软件进行重复测量方差分析和SNK检验。结果:定位航行实验显示，组别×时间交互作用明显( F＝15.65， P<0.01)。空间探索结果显示，首次麻醉后第6天，与Con组比较，Sev组小鼠的逃避潜伏期明显增加( q＝4.35， P<0.05)，目标象限百分比( q＝6.15， P<0.05)和进入原平台总次数( q＝6.45， P<0.05)明显减少。与Sev组相比，Sev+Min组逃避潜伏期明显减少( q＝3.01， P<0.05)，目标象限百分比( q＝3.21， P<0.05)和进入原平台总次数( q＝3.48， P<0.05)明显增加。免疫组化结果显示，与Con组[(355.87±62.58)个]比较，Sev组小鼠BrdU阳性细胞数明显减少[(227.45±43.25)个， q＝8.67， P<0.01]。与Sev组相比，Sev+Min组小鼠BrdU阳性细胞数[(338.73±47.27)个]增加，差异有统计学意义( q＝8.68， P<0.01)。电生理结果显示，与Con组[(214.38±43.42)%]比较，Sev组小鼠的fEPSP斜率明显降低[(126.83±25.67)%， q＝6.18， P<0.01)]。与Sev组相比，Sev+Min组的fEPSP斜率明显升高[(178.49±32.67)%， q＝3.64， P<0.05]。 结论:七氟烷麻醉可导致老龄小鼠短期记忆功能损害，其机制与抑制神经细胞增殖和突触可塑性有关，而米诺环素可以缓解由七氟烷麻醉引起的认知损伤。

目的:探讨C57BL/6J野生型小鼠在不同发育阶段大脑初级视皮质双眼区（primary visual cortex binocular zone，V1B区）Ⅳ层锥体神经元的微小突触后电流发育性变化。方法:实验研究。选择出生后第14天（睁眼前后）、28天（关键期高峰段）、35天（关键期结束）和130天（完全成年期）的无特定病原体级健康雄性C57BL/6J小鼠16只，按日龄分为4个组，分别为P14组、P28组、P35组和P130组。采用全细胞膜片钳技术，记录各组小鼠大脑V1B区Ⅳ层锥体神经元微小兴奋性突触后电流（mEPSC）和微小抑制性突触后电流（mIPSC）的频率和振幅，分析其差异和变化。结果:小鼠大脑V1B区Ⅳ层锥体神经元的mEPSC频率4个组间比较，差异有统计学意义（ F=9.46， P<0.001），其中P35组高于P28组［P28和P35组分别为（8.72±1.34）和（13.28±4.05）Hz， t=3.39， P=0.012］，P130组低于P35组［P35和P130组分别为（13.28±4.05）和（5.82±1.98）Hz， t=5.21， P<0.001］；mEPSC振幅4个组间比较，差异无统计学意义（ F=2.84， P=0.055）。小鼠大脑V1B区Ⅳ层锥体神经元的mIPSC频率4个组间比较，差异有统计学意义（ F=8.14， P<0.001），其中P130组高于 P14组［P14组和P130组分别为（5.22±1.33）和（12.03±3.94）Hz， t=4.678， P<0.001］；锥体神经元mIPSC振幅4个组间比较，差异有统计学意义（ F=7.06， P=0.001），其中P35组高于P28组［P28组和P35组分别为（20.07±3.56）和（28.47±5.98）pA， t=3.66， P=0.006］，P130组低于P35组［P35组和P130组分别为（28.47±5.98）和（20.32±3.55）pA， t=3.33， P=0.014］。 结论:小鼠大脑V1B区锥体神经元兴奋性突触发育在发育期呈旺盛增长状态，随着日龄增加而逐渐减弱，抑制性突触发育随着小鼠日龄增加逐渐增强，且两者均在关键期迅速发育。

[目的](反,反)-8,10-十二碳二烯-1-醇[(8E,10E)-dodecadien-1-ol,E8,E10-12∶OH]是苹果蠹蛾Cydia pomonella的主要性信息素成分,对梨小食心虫Grapholita molesta性诱剂具有引诱增效作用.本研究旨在测定E8,E10-12∶OH对梨小食心虫性诱剂的增效能力,确定主要结合E8,E10-12∶OH的信息素结合蛋白(pheromone binding proteins,PBPs)和普通气味结合蛋白(general odorant binding proteins,GOBPs).[方法]利用触角电位(electroantennogram,EAG)仪测定梨小食心虫雄成虫对 0.002,0.02,0.2,2,20,200 和 2 000 μg E8,E10-12∶OH 激发的 EAG 反应;利用田间诱集试验测定E8,E10-12∶OH对梨小食心虫性诱剂的增效能力;利用荧光竞争结合实验测定梨小食心虫信息素结合蛋白GmolPBP1,GmolPBP2和GmolPBP3及普通气味结合蛋白GmolGOBP1,GmolGOBP2和GmolGOBP3与E8,E10-12∶OH的抑制常数Ki;利用分子动力学模拟的方法预测GmolGOBP2结合E8,E10-12∶OH的关键氨基酸;利用定点突变和荧光竞争结合实验验证GmolGOBP2结合E8,E10-12∶OH的关键氨基酸残基及弱相互作用力.[结果]梨小食心虫雄成虫对E8,E10-12∶OH表现出EAG反应,雄成虫对2 000 μg E8,E10-12∶OH的EAG反应值最高[(0.57±0.14)mV].在梨小食心虫性诱剂中添加200 μg E8,E10-12∶OH时,增效效果最佳,增效倍数达 2.46 倍.GmolGOBP2 结合 E8,E10-12:OH 的能力最强[Ki=(1.92±0.05)μmol/L],是结合E8,E10-12∶OH的主要OBP.分子动力学模拟表明GmolGOBP2的Phe18,Ile100,Glu104,Val117和Phe124结合 E8,E10-12∶OH 的自由能最低,分别为-1.18,-1.33,-3.34,-1.19 和-1.58 kj/kg,预测是GmolGOBP2结合E8,E10-12∶OH的重要位点,将以上5个残基定点突变为丙氨酸Ala后,突变体蛋白E104A和F124A失去了结合E8,E10-12∶OH的能力,表明Glu104和Phe124是GmolGOBP2结合E8,E10-12∶OH的关键氨基酸.[结论]E8,E10-12∶OH是开发梨小食心虫高效性诱剂的理想增效剂,GmolGOBP2在梨小食心虫识别种间性信息素E8,E10-12∶OH的过程中发挥着重要作用,Glu104和Phe124是GmolGOBP2结合E8,E10-12∶OH的关键氨基酸残基.